Từ đồ thị 4 có thể thấy được hàm lượng asiaticoside tồn tại trong từng phần cây rau má với hàm lượng tương đối cao. Trong đó hàm lượng thu được khi chiết ở phần lá là cao nhất với 27.56mg/g, cao hơn rất nhiều so với phần rễ 10.32mg/g và phần thân 9.81mg/g. Như vậy lá là bộ phận tích lũy nhiều asiaticosde nhất và kết quả này cũng thống nhất với kết quả nghiên cứu của N.A.Zainol [13] và Tae Kim [14]. Điều này có nghĩa là nếu muốn thu hồi asiaticoside với hiệu suất cao ta nên chú ý đến phần lá.
3.3. Đề xuất quy trình chiết asiaticoside
Sau khi tiến hành khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết asiaticoside có trong rau má ở xã Quảng Thọ, huyện Quảng Điền, tỉnh Thừa Thiên Huế để đảm bảo thu hồi asiaticoside với hàm lượng cao chúng tôi xin đề xuất quy trình chiết như sau:
3.3.1. Sơ đồ chiết Rau má Rau má Chiết ở Soxhlet Ethnol:nước= 80:20 810C, 4h Sấy khô 500C– xay nhỏ Tách chất béo bằng n- hexan (3lần, 6h) Lọc qua màng lọc 0.05mm và 0.45µm Xử lý- loại bỏ cuống và rễ
3.3.2.Thuyết minh quy trình
Thu hái nguyên liệu: Theo kết quả thu được khi phân tích hàm lượng asiaticoside trong rau má thì phần lá là phần chứa hàm lượng hoạt chất cao nhất nên khi thu hái nguyên liệu ta chỉ cần thu nhận phần lá để đảm bảo cho hiệu suất thu hồi. Nguyên liệu nên thu hái vào lúc trời mát thường buổi sáng hoặc chiều.
Xử lý nguyên liệu: đây là công đoạn làm sạch và loại bỏ tạp chất chuẩn bị cho các công đoạn tiếp theo.
Sấy khơ- xay nhỏ: ngun liệu khơ và có kích thước nhỏ sẽ tạo điều kiện thẩm thấu dung mơi và hịa tan các hoạt chất asiaticoside tốt hơn. Nhiệt độ sấy thường là 500C trong vịng 10- 12h để ngun liệu khơ dễ xay nhỏ. Nguyên liệu nếu chưa sấy kịp có thể bảo bảo ở điều kiện nhiệt độ 15-200C. Qúa trình xay nhỏ được tiến hành bằng máy xay thích hợp, kích thước sau khi xay qua rây có đường kính 0.5mm.
Tách béo: Chất béo tồn tại trong rau má gây cản trở lớn cho q trình trích ly và gây ảnh hưởng xấu cho dịch chiết cũng như sản phẩm asiaticosside thu hồi do đó cần phải loại bỏ. Chúng ta sử dụng dung môi không phân cực để hịa tan béo sau đó gạn lọc để loại bỏ, quá trình tiến hành như sau: Cân 100g bột rau má cho vào bình tam giác 500ml sau đó cho thêm 300ml n-hexan tiến
hành ngâm- lắc trong 2h sau đó gạn bỏ dung mơi, q trình này lặp lại 3lần để loại béo được triệt để hơn.
Chiết dịch rau má: Ta cân 2g bột rau má cho vào phần thân của bộ soxhlet, cho 250ml dung mơi (ethanol:cồn= 80:20) vào bình cầu của hệ thống rồi tiến hành mở nước làm lạnh, bật bếp để chiết asiaticoside với nhiệt độ sôi của dung môi 810C và thời gian chiết là 4h.
Lọc thô- lọc tinh: nhằm loại bỏ các tạp chất cặn bẩn có thể gây ảnh hương đến chất lượng sản phẩm asiaticoside. Lọc thô nhằm tách các tạp chất lớn hỗ trợ cho quá trình lọc tinh, màng lọc có đường kính lỗ lọc 0.05mm với lọc thơ, 0.45µm với lọc tinh. Dịch chiết thu được có thể đem tiến hành chạy HPLC để định lượng hàm lượng asiaticoside thu được từ quá trình chiết.
Cuối cùng tiến hành cô cạn để thu hồi dung môi hoặc để phục vụ cho quá trình thu nhận asiaticosside khan. Nếu thu nhận dịch chiết ta tiến hành bảo quản trong điều kiện kín và mát để tránh hư hỏng do vi sinh vật hay dung môi bay hơi. Nếu thu nhận asiaticoside ở dạng khan nên bảo quản trong điều kiện khơ và được bao gói để tránh hút ẩm.
PHẦN 5