Nhiệt độ là yếu tố có ảnh hưởng lớn đối với sự hịa tan của hoạt chất vào dung mơi. Đối với đa số các chất khi nhiệt độ tăng thì khả năng hòa tan tăng lên do độ nhớt của dung dịch giảm khả năng khuyếch tán của chất tan tăng tuy nhiên việc tăng nhiệt độ thường có giới hạn, nó tùy thuộc vào tính chất chịu nhiệt của các hoạt chất có trong ngun liệu. Khảo sát nhiệt độ ngồi việc nâng cao hiệu suất chiết cịn góp phần giúp ta lựa chọn được thiết bị thích hợp cho q trình chiết hạn chế sự bay hơi của dung mơi [4].
Theo nghiên cứu của Wan Joo Kim [22] khi khảo sát khả năng chiết của dung môi ethanol, tác giả đã đưa ra kết luận q trình chiết nóng có hiệu quả cao hơn so với quá trình chiết ở nhiệt độ phịng. Nhưng với mong muốn nâng cao hiệu suất thu hồi hoạt chất asiaticoside đồng thời giảm bớt sự bay hơi của dung môi cũng như năng lượng tiêu tốn cho việc đun sôi dung mơi trong q trình chiết chúng tơi tiến hành bố trí các cơng thức khảo sát nhiệt độ thấp hơn nhiệt độ sôi của dung môi theo tỉ lệ ethanol: nước= 80:20 là CT15, CT16, CT!7 được trình bày ở mục 2.2.2 trong thời gian 4h.
Kết quả khảo sát nhiệt độ chiết asiaticoside trong rau má được thể hiện ở các phổ sắc kí sau:
Hình 3.16. Phổ sắc kí của asiaticoside theo cơng thức CT15
Hình 3.18. Phổ sắc kí của asiaticoside theo cơng thức CT17
Sau khi phân tích HPLC chúng tơi thu được phổ sắc kí của các mẫu khảo hàm lượng asiaticosde trong rau má theo nhiệt độ được trình bày ở các hình 3.16-3.18. Kết quả tất cả các mẫu khảo sát đều có mặt của 1 peak có thời gian lưu nằm trong khoảng từ 2.153 -2.29 phút, tương đương với thời gian lưu của peak asiaticoside chuẩn 2.345 phút ở hình 3.1. Điều này chứng tỏ trong tất cả các mẫu đều có asiaticoside với hàm lượng đáng kể.
Đồ thị 3. Hàm lượng asiaticoside khi khảo sát nhiệt độ chiết Theo các kết quả thể hiện ở đồ thị 3 chúng tôi thấy hàm lượng
asiaticoside tách ra từ dịch chiết tăng đồng biến khi nhiệt độ tăng từ 710C- 810C và đạt hàm lượng tối đa là 10.53 mg/g ở nhiệt độ 810C. Điều này có nghĩa là nhiệt độ ảnh hưởng rất lớn đến khả năng thu hồi hoạt chất. Nếu nhiệt độ quá thấp độ nhớt cao, khả năng khuyếch tán của asiaticoside giảm nên hàm lượng thu hồi thấp ở t0=710C hàm lượng asiaticoside thu được chỉ 3.77mg/g thấp hơn rất nhiều khi chiết ở t0= 810C. Vì vậy để đảm bảo cho hiệu suất thu hồi asiaticoside chúng tơi chọn nhiệt độ tối ưu cho quy trình chiết là 810C.