2.5.1.1. Phƣơng pháp lấy mẫu
Tùy theo tính chất của mẫu (bùn hay nƣớc) mà có phƣơng pháp thu thập mẫu thích hợp. Dụng cụ lấy và đựng mẫu đƣợc vô trùng trƣớc khi sử dụng. Mẫu nƣớc thải đƣợc lấy cách bề mặt 10 cm, mẫu nƣớc đƣợc đựng trong các ống nghiệm nút cao su có ghi rõ đặc điểm và địa điểm lấy mẫu. Mẫu đƣợc bảo quản trong tủ lạnh ở 4oC cho đến khi xử lý và phân tích. Các mẫu sử dụng cho phân tích chỉ tiêu ô nhiễm của nƣớc thải đƣợc đánh số từ M1 đến M7.
2.5.1.2. Xác định số lƣợng vi sinh vật trong nƣớc thải
Số hóa bởi trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/
Hút 1 ml mẫu nƣớc thải cho vào ống nghiệm chứa 9 ml nƣớc cất khử trùng, lắc đều. Dịch thu đƣợc đã có độ pha loãng là 10-1. Hút 1 ml dịch đã pha loãng chuyển vào một ống nghiệm sạch đã chứa 9 ml nƣớc cất khử trùng đƣợc độ pha loãng 10-2. Tiếp tục pha loãng cho tới khi đạt độ pha loãng 10-6 hoặc cao hơn. Dịch đã pha loãng ở mỗi nồng độ đƣợc cấy vô trùng và trang đều trên các đĩa Petri đã có sẵn môi trƣờng phân lập thích hợp. Các đĩa đã cấy đƣợc nuôi trong tủ ấm 30oC trong 2 - 4 ngày.
- Xác định vi khuẩn hiếu khí tổng số:
Lấy 0,1 ml dịch pha loãng ở nồng độ cần thiết, nhỏ vào chính giữa các đĩa môi trƣờng MPA. Dùng que gạt trang đều đĩa thạch cho đến khi khô mặt thạch. Các đĩa thạch khi đã gạt khô cho vào tủ ấm ở nhiệt độ là 37o
C. Sau 24 - 48 giờ thì lấy đĩa và đếm số lƣợng khuẩn lạc. Công thức tính số lƣợng CFU/ml: N = m d n n n C n n.10 . . ... 10 . ( 1 2 1 ( 1) Trong đó:
CFU: đơn vị hình thành khuẩn lạc N : số lƣợng CFU/ml
C : tổng số khuẩn lạc đếm đƣợc trên tất cả các đĩa n1: số khuẩn lạc trong đĩa Petri ở tỉ lệ pha loãng lần 1 n2: số khuẩn lạc trong đĩa Petri ở tỉ lệ pha loãng lần 2 nn : số khuẩn lạc trong đĩa Petri ở tỉ lệ pha loãng lần n d : tỉ lệ pha loãng lần 1
m: tỉ lệ pha loãng ban đầu
- Xác định xạ khuẩn tổng số: Đƣợc thực hiện theo phƣơng pháp mô tả của Kiều Hữu Ảnh [1].
Số hóa bởi trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/
- Xác định nấm mốc tổng số: Đƣợc thực hiện theo phƣơng pháp mô tả của Kiều Hữu Ảnh [1].
- Phân lập và tuyển chọn các chủng vi khuẩn: Đƣợc thực hiện theo phƣơng pháp mô tả của Kiều Hữu Ảnh [1].