- Gripper kẹp cốc ủ và đưa tới vị trí 5 của trạm pipet.
- Khối hút S/R di chuyển tới trạm pipet và nhận AssayTip mới di chuyển tiếp tới
vị trí lấy hạt.
- Trong khi khối cảm biến mức chất lỏng làm việc, khối hút hạ thấp xuống dưới
bề mặt thuốc thử và hút 40 µL vi hạt.
- Sau khi hút thuốc thử, đầu hút nâng lên, di chuyển tới vị trí 5 của trạm pipet và
hạ thấp xuống để nhả hạt.
- Sau khi phân phối hạt, đầu hút hạ thấp xuống nữa và hút toàn bộ thể tích hỗn
hợp phản ứng. Đầu hút nâng lên trong khi trả lại hỗn hợp phản ứng về cốc. Như
vậy, dung dịch được trộn và phản ứng trong cốc được gia tốc. Quá trình trộn này chỉ thực hiện một lần.
- Đầu hút dịch chuyển tới vị trí tháo bỏ AssayTip để bỏ tip đi. 4.3.5.7. Ủ lần 2
- Gripper kẹp cốc chứa hỗn hợp phản ứng đã được trộn và đưa trở lại buồng ủ.
- Cốc này được ủ ở 37 °C trong 9 phút.
- Trong thời gian ủ, máy tiếp tục làm việc với các xét nghiệm khác/ các mẫu khác
nếu có.
Trước khi quá trình ủ lần 2 hoàn thành, đầu hút sipper hút dung dịch ProCell vào buồng đo để đảm bảo các điều kiện tối ưu cho quá trình đo lường.
- Đầu hút sipper di chuyển từ vị trí ban đầu tới bình chứa dung dịch ProCell và hạ thấp xuống 2mm dưới mức dung dịch, hút ProCell vào trong buồng đo. Khi đầu hút này hạ xuống, cảm biến mức chất lỏng hoạt động. Đầu hút có thể hạ xuống tới mức cách đáy bình chứa ProCell 1.3mm.
- Đầu hút nâng lên. 4.3.5.9. Quy trình đo
- Gripper kẹp và dịch chuyển cốc sai khi ử lần hai từ buồng ủ tới trạm hút.
- Đầu hút di chuyển tới trạm hút và hạ thấp dần vào trong cốc.
- Khi đầu hút phát hiện có hỗn hợp phản ứng trong cốc, nó hút 150 µL.
- Sau khi hút, đầu hút nâng lên, hút 10 µL không khí và di chuyển tới trạm rửa
đầu hút để làm sạch.
- Gripper kẹp cốc từ trạm hút và đưa tới cửa đổ thải để bỏ cốc đi.
- Đầu hút được nâng lên.
- Đầu hút nâng lên và dịch chuyển tới vị trí ProCell, hạ thấp vào trong bình chứa và hút ProCell theo cách hút/nhả liên tục. Các phức hợp miễn dịch bị bắt vào điện cực làm việc dưới tác động của nam châm. Các mẫu và kháng nguyên không gắn kết bị rửa trôi bằng ProCell.
- Sau khi tách các thành phân không gắn kết, một điện áp được cấp giữa điện cực
làm việc và điện cực đếm. Phản ứng ECL được thực hiện và đo lường bằng ống
nhân quang.
- Đầu hút nâng lên và đi tới vị trí CleanCell và hút 20 µL không khí. Đầu hút sau đó được hạ thấp vào trong bình chứa CleanCell và hút thuốc thử. Quy trình này được lặp lại 8 lần. Như vậy, không khí và dung dịch làm vệ sinh liên tục rửa cho
buồng đo. Trong quá trình rửa, một điện áp được cấp vào giữa các điện cực nhằm
- Đầu hút đi chuyển tới trạm rửa, hút 20 µL không khí và hạ thấp vào trong trạm rửa để được làm sạch.
- Cuối cùng đầu hút nâng lên và đi tới bình chứa ProCell. Đầu hút hạ thấp vào
trong bình và hút 500 µL dung dịch ProCell. Tiếp theo, đầu hút hút 90 µL dung dịch ProCell và đi tới trạm rửa. Tại đây, đầu hút nhả 35 µL để phụt rửa đầu hút và chuẩn bị cho mẫu tiếp theo. Trong quá trình hút ProCell, các điện cực được cấp điện áp ba lần để chuẩn bị cho quá trình đo lường tiếp theo. Mỗi chu trình đo lường sử dụng gần 2ml cho mỗi loại ProCell và CleanCell.
4.3.5.10. Phát hiện tín hiệu và chuyển đổi
Buồng đo được giữ ở 28 °C trong suốt quá trình thực hiện đo lường. Các ống nhân quang phát hiện và chuyển đổi tín hiệu ECL thành tín hiệu điện để từ đó máy tính toán ra kết quả xét nghiệm.
CHƯƠNG 5- ĐÁNH GIÁ HIỆN TRẠNG VỀ MÁY XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH TẠI KHU VỰC PHÍA BẮC
5.1. Một số loại máy xét nghiệm miễn dịch được sử dụng tại Việt Nam
Trong những năm gần đây, máy xét nghiệm miễn dịch được sử dụng nhiều hơn tại các bệnh viện ở Việt Nam. Do tính đặc thù, máy được sử dụng chủ yếu tại các phòng xét nghiệm chuyên sâu. Do nhu cầu chăm sóc sức khỏe của người dân được nâng cao nên số lượng máy cung cấp cho các phòng xét nghiệm tại các bệnh viện cũng tăng lên nhanh chóng. Hiện nay, hầu hêt các bệnh viện tuyến tỉnh, các
bệnh viện đa khoa ở các thành phố lớn đều có máy xét nghiệm miễn dịch. Tùy
thuộc vào quy mô của các bệnh viện mà chủng loại máy xét nghiệm cũng thay đổi theo. Máy xét nghiệm hiện đại có nhiều thông số xét nghiệm hơn, giá thành cao hơn và chi phí xét nghiệm lớn hơn nên thường có ở các bệnh viện trung ương, bệnh viện ở các thành phố lớn.
Dưới đây là một số loại máy xét nghiệm miễn dịch được sử dụng tại các bệnh viện ở khu vực phía bắc
Máy xét nghiệm miễn dịch tự động Cobas 411 – hãng Roche: bệnh viện Phụ sản Hà Nội, bệnh viện Phụ sản Trung ương, bệnh viện Bạch mai (khoa hóa sinh, khoa vi sinh, phòng phám theo yêu cầu), bệnh viện Xây dựng, bệnh viện Giao thông vận tải, bệnh viện Bãi cháy – Quảng Ninh, bệnh viện Đa khoa Việt Trì- Phú Thọ, bệnh viện tỉnh Ninh Bình, phòng khám Điện Biên Phủ - Hải Phòng.
Hệ thống xét nghiệm miễn dịch E170 – Hãng Roche: bệnh viện Bạch Mai (khoa Hóa sinh, phòng khám bệnh theo yêu cầu), bệnh viện Nội tiết
Hình 5.1. Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E170 - Roche
Hệ thống xét nghiệm Elecsys® 2010 – hãng Roche: bệnh viện Phú Thọ, bệnh viện đa khoa Hải Dương, bệnh viện Uông Bí, bệnh viện Bắc Ninh, bệnh viện đa khoa Quảng Ninh, bệnh viện Tân Việt, bệnh viện Hữu Nghị, bệnh viện quân đội 108, phòng khám Family.
Hình 5.2. Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Elecsys 2010
Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E601 – hãng Roche: bệnh viện Bạch Mai (khoa hóa sinh, phòng khám theo yêu cầu), bệnh viện K, bệnh viện Việt Tiệp – Hải Phòng, bệnh viện Medlatec.
Hình 5.3. Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E601
Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Access 2 – hãng Beckman Counter: bệnh viện quân y 354, bệnh viện quân đội 108, bệnh viện quân đội 103, bệnh viện y học cổ truyền, Bệnh viện Đông Đô – Hà Nội, Bệnh viện An Thịnh – Hà Nội, Bệnh viện đa khoa Cẩm Phả
Hình 5.4. Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Access 2
Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tựđộng Immulite 2000 – Hãng Siemen: Bệnh viện Nội Tiết TW, Bệnh viện Xanh Pôn, Viện huyết học và truyền máu TW, Bệnh viện trường Đại học Y Hà Nội, Phòng khám 121 Phủ Doãn Hà Nội, Phòng
khám tư nhân Medlatec
Hình 5.5. Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Immulite 2000
Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tựđộng Immulite – Hãng Siemen: Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội, Bệnh viện Phụ sản TW, Bệnh viện Thanh Nhàn, Bệnh viện
Tràng An, Bệnh viện Bắc Thăng Long, Trung tâm chẩn đoán y khoa Thái Hà,
Phòng khám 125 Thái Thịnh – Hà Nội, Phòng khám 88 dốc Phụ sản – Hà Nội, Phòng khám tư nhân Medlatec
Hình 5.6. Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Immulite
Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tựđộng UniCel DxI800 – hãng Beckman Counter: Bệnh viện Nội tiết TW, Bệnh viện nội tiết Thanh Hóa
Hình 5.7. Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động UniCel DxI800
Tất cả các hệ thống xét nghiệm được sử dụng trên đây đều có những tình
năng chung như công suất làm việc lớn, thời gian thực hiện nhanh, xét nghiệm nhiều thông số như :
− Xét nghiệm tuyến giáp.
− Xét nghiệm trước sinh và sau sinh.
− Xét nghiệm tim mạch.
− Xét nghiệm thiếu máu.
− Chỉ thị ung thư.
− Dịứng.
Hầu hết các hệ thống trên đều rất hiện đại, giá thành lớn, quy trình thực hiện đơn giản vì đều là các hệ thống tự động. Tuy nhiên, vì các hệ thống này đều có cấu trúc và hoạt động rất phức tạp nên yêu cầu các thủ tục chuẩn bị và các vật tư tiêu hao phục vụ cho xét nghiệm rất nghiêm ngặt. Song, tại các phòng xét nghiệm ở hầu hết các bệnh viện, các kỹ thuật viên đều chưa có ý thức cao trong việc tuân thủ các quy định vận hành và bảo dưỡng định kỳ nên các thiết bị này chưa được tận dụng hết hiệu quả vốn có của nó. Ngoài ra, hệ thống còn hay gặp các sự cố trong quá trình vận hành do
5.2. Một số sự cố thường xảy ra với máy xét nghiệm miễn dịch tự động
1. Kết quả xét nghiệm sai
Nguyên nhân có thể có:
− Có bọt trong Procell/cleancell, thuốc thử hay mẫu bệnh phẩm
− Mẫu bệnh phẩm bị đông
− Hóa chất hỏng
− Phần cứng:
Mixer trục trặc ( hỏng, sai vị trí, không đủ tốc độ)
Kim hút sipper bị tắc, đường ống hút của sipper bị bán tắc
Điện cực Reference bị hỏng
Đầu nối ống dây, xi lanh không đủ kín
Hỏng dây pinch valve
2. Kết quả control và bệnh phẩm không ổn định Nguyên nhân có thể có:
• Procell/cleancell dùng quá lâu, bị bay hơi
• Điều kiện bảo quản thuốc thử không phù hợp
• Nhiệt độ thuốc thử không phù hợp
• Không chạy chuẩn máy/ kiểm tra chất lượng theo định kỳ
• Phần cứng:
Hỏng điện cực đo ( 01 năm sử dụng hoặc đo được 50000 mẫu
tùy điều kiện nào đến trước)
Nhiệt độ điện cực đo, ống nhân quang, khay ủ, hóa chất hệ
thống (procell/cleancell) không nằm trong dải yêu cầu
Ống nhân quang hỏng 3.Không thể thực hiện chạy chuẩn hóa chất được Nguyên nhân có thể có:
• Thuốc thử và chất chuẩn không có trên máy
• Mã vạch của thuốc thử/ chất chuẩn hỏng
• Lot của Thuốc thử và chất chuẩn không phù hợp
• Chất chuẩn 1 và 2 không đặt liền nhau
• Phần cứng:
Đầu đọc mã vạch chưa được chỉnh chính xác 4. Máy báo nhiệt độ khay thuốc thử ngoài dải
Nguyên nhân có thể có:
• Thermistor hỏng
• Peltier hỏng
5. Gripper không gắp được cup/tip trong quá trình đo mẫu Nguyên nhân:
• Chỉnh gripper chưa chính xác
• Sai, hỏng sensor xác định vị trí trên khối gripper
• Đứt cầu chì 5v Dc 6. Kim sipper nhỏ giọt Nguyên nhân:
Bán tắc trong đường ống sipper
• Bán tắc hệ thống dung dịch thải
• Dây pinch valve không tốt
7. Màn hình cảm ứng sai vị trí con trỏ Nguyên nhân:
• Màn hình bị bẩn ko không vệ sinh
• Chuẩn màn hình không chính xác
8. S/R probe không hút được bệnh phẩm, thuốc thử Nguyên nhân:
• Chỉnh điện áp LLD ( liquid level detection) chưa chính xác
• S/R probe bẩn gây nhiễu điện
Phần nhiều lỗi trên đây xuất phát từ phía kỹ thuật viên như:
− Thực hiện các thao tác pha hỗn hợp thuốc thử không đúng kỹ thuật
làm cho kết quả xét nghiệm không chính xác.
− Lớp mã vạch trên các bình thuốc thử bị bụi phủ nên máy không nhận
dạng được thuốc thử tới đưa tới các cảnh báo .
− Không thay rotor thuốc thử định kỳ nên các bộ phận truyền động làm
việc không chính xác
− Không sử dụng thuốc thử phù hợp với xét nghiệm cần tiến hành
− Không thay màng lọc định kỳ
− Không tiến hành kiểm tra chất lượng xét nghiệm định kỳ
− Không nghiên cứu kỹ tài liệu hướng dẫn sử dụng dẫn tới việc sắp xếp
trật tự các xét nghiệm không phù hợp gây ra tình trạng xung đột thời gian làm cho máy bị treo tạm thời.
− Nguồn nước cấp cho máy không được xử lý kỹ làm cho hệ thống ống
dẫn bị lắng cặn.
− Các bình thuốc thử không được lưu trữ trong môi trường thích hợp.
− Không vệ sinh máy định kỳ
Một số lỗi do máy:
− Máy bị treo do xung đột dữ liệu. Khi kỹ thuật viên tiến hành đồng thời
nhiều loại xét nghiệm với thời gian thực hiện khác nhau, chương
trình điều khiển của máy bị xung đột dữ liệu dẫn tới quá trình vận
hành máy bị tạm ngừng. Vì vậy, các nhà sản xuất phải liên tục nâng
cấp chương trình phần mềm điều khiển. Đây cũng là một trong
những điểm khác biệt của các hệ thống xét nghiệm miễn dịch giữa
các hãng.
− Máy xét nghiệm có rất nhiều hệ thống truyền động nên cũng hay xảy
ra các sự cố với các động cơ bước.
5.3. Một số khuyến nghị khắc phục tình trạng này
Một vấn đề thường gặp tại các phòng xét nghiệm của các bệnh viện là các kỹ thuật viên thường bỏ qua khâu chuẩn máy và kiểm tra chất lượng máy. Vì vậy, việc nâng cao ý thức sử dụng máy một cách khoa học và có trách nhiệm với kết quả vận hành là việc rất cần thiết. Xét nghiệm miễn dịch đặc biệt quan trọng vì kết quả xét nghiệm có liên quan trực tiếp tới quá trình điều trị của bệnh nhân. Nó liên quan tới vấn đề sức khỏe, tính mạng của người bệnh nên cần tuyệt đối tránh những sai sót do chủ quan. Ngoài ra, hệ thống nước sạch cung cấp cho các bệnh viện cũng cần được nâng cao chất lượng. Tại nhiều bệnh viện, máy xét nghiệm thường xuyên bị lỗi một phần nguyên nhân thường gặp là do hiện tượng nước chưa được xử lý tốt làm ảnh hưởng tới hệ thống ống dẫn của máy, gây tắc nghẽn làm máy vận hành không chính xác hoặc thậm chí không hoạt động.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
Qua quá trình tìm hiểu và nghiên cứu, dưới sự hướng dẫn tận tình của thầy
giáo PGS.TS. Nguyễn Đức Thuận, tôi đã hoàn thành cuốn luận văn với đề tài
“Nghiên cứu máy miễn dịch tự động”. Luận văn này cung cấp cái nhìn tổng quan về
các phương pháp xét nghiệm miễn dịch được ứng dụng trong các hệ thống xét
nghiệm miễn dịch hiện đại cũng như cấu trúc và hoạt động của hệ thống này. Đồng
thời tôi cũng đi sâu vào nghiên cứu hoạt động chi tiết của máy xét nghiệm miễn
dịch tự động Cobas e411, cụ thể hơn khi thực hiện xét nghiệm TSH. Bên cạnh đó,
luận văn cũng đưa ra một số chủng loại máy hiện đang được sử dụng tại một số
bệnh viện khu vực phía bắc và tình hình sử dụng máy tại đây.
Kết quảđạt được
Về mặt lý thuyết:
‐ Tìm hiểu, nghiên cứu về các phương pháp xét nghiệm miễn dịch.
‐ Tìm hiểu, nghiên cứu về cấu trúc và nguyên lý hoạt động của hệ
thống xét nghiệm miễn dịch tự động.
‐ Nghiên cứu về máy xét nghiệm miễn dịch tự động Cobas e411.
Về mặt thực nghiệm:
‐ Xác định được quy trình vận hành chi tiết của máy xét nghiệm miễn dịch tự
động giúp cho nhân viên kỹ thuật có thể xác định được lỗi và khắc phục sự cố nhanh chóng.
‐ Hỗ trợ các kỹ thuật viên vận hành máy có thể tận dụng được triệt để các chức
năng của máy xét nghiệm Cobas e411.
Kiến nghị phát triển của đề tài luận văn trong tương lai.
Cobas e411 bắt đầu được sử dụng nhiều tại một số bệnh viện ở Hà Nội như bệnh viện Bạch mai, bệnh viện Giao thông vận tải, bệnh viện Xanh pôn, Bệnh viện Phụ sản trung ương…. Trong quá trình khai thác sử dụng máy, sự cố thường xảy ra nhất là ở các cơ cấu truyền động. Vì vậy, trong tương lai cần có các nghiên
cứu cải tiến ở bộ phận động cơ bước cũng như các mạch điều khiển để tránh
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Huỳnh Đình Chiến (2008), Giáo trình miễn dịch học, Đại học Huế.
2. Babson Arthur L., Palmieri Thomas, Babson et al. (2004), Vessel agitator