Ảnh hưởng của nồng độ glycerol đến các đặc tính vi nang và tỷ lệ VSV được thể hiện ở bảng 3.4 và hình 3.2.
Bảng 3.4: Đặc tính vi nang bào chế được khi thay đổi nồng độ glycerol
CT 8 9 10 11 12 13 Nồng độ glycerol 0% 5% 10% 15% 20% 25% Số lượng VSV trong 1g hạt (cfu/g) 0,72.109 3,36.109 10,54.109 12,02.109 7,63.109 8,59.109 Hàm ẩm (%) 2,14 2,82 3,10 2,96 3,54 3,27 Kích thước hạt (mm) 1,51 1,53 1,52 1,56 1,54 1,58
Hình 3.2: Đồ thị diễn số lượng VSV trong các mẫu vi nang sau khi thay đổi nồng độ glycerol
Phối hợp glycerol trong công thức bào chế vi nang không làm ảnh hưởng đến kích thước hạt, màu sắc hạt cũng như hàm ẩm. Kích thước hạt vẫn nằm trong khoảng 1,51-1,58mm, hàm ẩm của các mẫu trong khoảng từ 2,14 - 3,54%.
Nhìn vào bảng số liệu 3.4 và đồ thị 3.2 ta thấy khi tăng nồng độ glycerol, số lượng VSV sống sót cũng tăng. Ở CT8 khi không có glycerol, số lượng VSV sống sót là thấp nhất (0,7.109), còn ở CT11 số lượng VSV sống sót cao nhất (12,02.109). Điều này được giải thích như sau:
Trong quá trình tiền đông ở nhiệt độ - 80oC và đông khô ở nhiệt độ -79o
C, tế bào có thể bị vỡ trong quá trình làm lạnh. Nguyên nhân là do sự hình thành các tinh thể nước đá trong tế bào. Để khắc phục nhược điểm này, theo các nghiên cứu của Postgate [34], tác giả đã bổ sung các chất bảo vệ, làm hạn chế ảnh hưởng của quá trình tiền đông và đông khô như glycerol. Glycerol có tác dụng bảo vệ VSV khỏi “cú sốc” khi làm lạnh ở nhiệt độ thấp, bị mất nước thẩm thấu của tế bào chất và khi bị biến tính protein. Glycerol có khả năng xâm nhập vào tế bào chất, tăng cường khả năng bảo vệ, tốt hơn các chất bảo vệ khác như polyethylen glycol, glucose, sucrose…[24], [34]. Khi glycerol thâm nhập vào tế bào chất, làm pha loãng nước trong tế bào chất, dẫn đến tình trạng mất nước thẩm thấu diễn ra từ từ, giảm tình
trạng chết VSV do mất nước thẩm thấu nhanh. Tuy nhiên, khi sử dụng nồng độ glycerol cao hơn 30%, theo nghiên cứu của Postgate làm giảm số lượng sống sót của VSV [34].
Kết quả hình 3.2 cho thấy, hiệu quả bảo vệ VSV ở công thức nồng độ glycerol 15% là tốt nhất. Do đó, nồng độ glycerol 15% được lựa chọn cho khảo sát tiếp theo.