Quy mô bào chế mỗi mẻ 5 - 6g vi nang.
Chuẩn bị 100ml hỗn dịch chứa sinh khối tế bào - Nghiền tinh bột, hấp tiệt khuẩn, sấy khô. - Cân alginat, glycerol, chitosan, calci clorid.
- Ngâm alginat trong 90ml nước cho trương nở hoàn toàn. - Cân glycerol cho vào dung dịch alginat đã trương nở.
- Hấp tiệt khuẩn hỗn hợp alginat và glycerol ở 115oC trong 20 phút. - Để nguội, cho tinh bột đã rây và cân, cắn tế bào trên cho vào bình nón. - Khuấy từ đến để tạo hỗn dịch đồng nhất (trong 1 giờ).
Dung dịch chitosan - calci clorid:
Cân chitosan, hòa tan trong dung dịch có chứa 90ml nước và 0,4 ml acid acetic băng, khuấy đều cho chitosan hòa tan hoàn toàn. Chỉnh pH trong khoảng 5,5 – 6 bằng dung dịch NaOH 0,1M. Bổ sung nước đủ 100,0ml. Lọc, loại cắn bằng giấy lọc. Cân calci clorid, phối hợp vào dung dịch chitosan trên, khuấy đều. Hấp tiệt trùng dung dịch trên ở 115oC trong 20 phút [13].
Thực hiện trong tủ cấy vô trùng, nhỏ giọt hỗn dịch thu được vào dung dịch chitosan - calci clorid qua hệ thống bơm nhu động (đã được tiệt trùng bằng cồn 96o) với đầu kim cỡ 25G. Tốc độ nhỏ khoảng 100 giọt/phút, khuấy nhẹ môi trường để tránh kết dính vi nang.
Ủ khoảng 30 phút.
Gạn, rửa vi nang 2 lần bằng nước muối NaCl 0,9% đã hấp tiệt khuẩn. Cân chính xác 1,00g hạt ướt, đếm số lượng VSV (theo phương pháp ở mục 2.3.8).
Đựng vi nang trong các đĩa petri, đậy kín bằng giấy nhôm.
Tiền đông trong tủ lạnh sâu -80oC cho đông rắn hoàn toàn.
Đông khô trong 24 giờ.