I. Gluxit
2.Xác định hàm lượng đường saccaroza (phương pháp dùng đường kế)
Dụng cụ cần: đường kế, nhiệt kế, cân phân tích, bình định mức dung tích 100ml, cốc thuỷ tinh, đũa thuỷ tinh, phễu thuỷ tinh, giấy lọc, mặt kính.
Thực hiện:
Cân chính xác 26g đường (chính xác tới 0,0001g) cho vào cốc khô, sạch. Cho một ít nước cất và khuấy nhẹ cho đường tan hết. Chuyển toàn bộ dung dịch đường trong cốc vào bình định mức qua phễu. Tráng cốc, phễu và đũa thuỷ tinh 3 – 4 lần bằng nước cất và gộp chung cả vào bình định mức. Thêm nước cất tới vạch mức, đậy nút và lắc kỹ.
Lọc dung dịch đường qua giấy lọc (phải lọc nhanh và đậy phễu lọc bằng mặt kính, tránh nước bay hơi làm thay đổi nồng độ dung dịch đường). Phần dung dịch lọc đầu tiên tráng cốc đổ đi. Cho dung dịch lọc vào ống quan sát 1 của đường kế (đã tráng bằng dung dịch lọc 2 – 3 lần). Khi đổ dung dịch lọc vào ống quan sát, tránh tạo bọt, khó quan sát. Bật đèn ở đường kế, đặt ống quan sát vào rãnh đường kế rồi đậy nắp 3. Để mắt vào thị kính 2. Đọc trị số hàm lượng đường saccaroza trên thước chia trong thị kính (chính
xác tới 0,01). Đo nhiệt độ dung dịch trong ống quan sát (đọc đến 0,10C). Đọc kết quả 5 lần và lấy kết quả trung bình.
Hàm lượng đường saccaroza (X) tính bằng % chất khô theo công thức
X = a t t 100 20 003 , 0 1 100
ở đây: Pt - là hàm lượng đường (trung bình) đọc được ở nhiệt độ t. t - là nhiệt độ dung dịch lúc đo.
a - là độ ẩm của đường.
Xác định 2 lần song song, sai số không vượt quá 0,05%.
Thuỷ phân tinh bột bằng axít HCl loãng, sau đó đo góc quay cực của dung dịch thuỷ phân, tính ra nồng độ dung dịch.
- Dụng cụ, hoá chất:
+ Phân cực kế hoặc đường kế. + Bình định mức 100ml. + ống đong 50 – 100ml. + Nồi cách thuỷ.
+ Phễu lọc và các ống đựng dung dịch, đũa thuỷ tinh. + Hoá chất: HCl 1,125%: 30ml HCl đậm đặc /100ml. ZnSO4 30% : 30g/100ml. K4[Fe(CN)6] 15% : 15g/100ml. Molipdat amonium. - Thực hiện:
Lấy 2 – 3 g tinh bột (nếu là hạt lấy 5g sản phẩm đã nghiền nhỏ), cân bằng cân phân tích, cho vào cốc thuỷ tinh. Chuyển lượng cân vào bình định mức 100ml bằng phễu. Thêm 50ml HCl nồng độ 1,125% (từng ít một tráng lớp tinh bột dính quanh cổ bình).
Lắc đều và đun sôi trong nồi cách thuỷ trong 3 phút. Chú ý mức nước trong bình cách thuỷ phải cao hơn mức dung dịch trong bình. Sau 15 phút lấy bình ra, thêm nước cất đến 80 – 90ml rồi làm nguội bình tới 200C. Làm trong dung dịch và kết tủa protit bằng 4ml dung dịch molipdat amonium hoặc 1ml ZnSO4 30% và dung dịch ferro cyanua 15%. Sau khi lắng protit, cho thêm nước cất tới khắc độ, lắc đều, lọc. Mẻ đầu đổ đi, Phân cực trong ống 200ml.
- Kết quả:
Hàm lượng tinh bột g /100ml trong 5g mẫu tính theo công thức: C = .D .l 3462 , 1 . 100 . 20 Trong đó:
- là góc quay cực đo được. l - là chiều dài ống cực.
[].D20 - là góc quay riêng (tra bảng).
Everse đã chuyển đổi hệ số k cho các loại tinh bột theo các hệ số sau để nhân với kết quả đọc được bằng đường kế (Bảng 5.1).
4.1.4. Xác định hàm lượng gluxit - Chuẩn bị mẫu thử:
Các phương pháp định lượng gluxit bằng phương pháp hoá học đều dựa vào tính chất khử oxy của nhóm aldehyt hay nhóm xeton tự do trong phân tử gluxit, do đó chỉ định
lượng được các OZA. Muốn định lượng holozit, phải thuỷ phân các chất này thành các OZA đơn giản. Các chất khác như protit, lipit, vv...
Bảng 4.1. Chuyển đổi hệ số k cho các loại tinh bột
Loại tinh bột Hệ số k Khoai tây 1,755 Gạo 1,866 Ngô 1,879 Lúa mạch 1,885 Lúa mì 1,898 Sắn 1,780
phải khử trước khi chuẩn độ gluxit, vì nó ảnh hưởng tới định lượng gluxit. Do đó chuẩn
bị mẫu thử có 2 khâu quan trọng: Cách thuỷ phân và cách khử tạp chất.
Cách thuỷ phân:
Thường dùng các axít để thuỷ phân các đường bột không trực tiếp khử ôxy thành đường trực tiếp khử ôxy.
Axít mạnh ảnh hưởng rõ rệt tới một số loại đường nhất là ở nhiệt độ cao. Ví dụ (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
leguloza và phá huỷ đường này thành những dẫn xuất của furfurol. Vì vậy, khi dùng
phương pháp thuỷ phân, cần xác định nồng độ axít, nhiệt độ, thời gian tối ưu để thuỷ phân vừa đủ các loại đường bột không trực tiếp khử oxy thành loại đường trực tiếp khử oxy.
Điều kiện quy định cho phương pháp thuỷ phân:
- Dung dịch đường bột phải pha loãng, nồng độ 4 – 10% tính bằng đường glucoza. - Môi trường thuỷ phân là môi trường axít khoảng 1N, thường pha:
Dung dịch đường bột 4 – 10% 50ml. HCl tinh khiết (d = 1,19) 5ml.
+ Thuỷ phân đường saccaroza ở nồi cách thuỷ 70 – 750C. Dùng đúng 2 phút để đưa nhiệt độ trong dung dịch thuỷ phân lên 68 – 700C. Giữ ở nhiệt độ này 5 phút.
+ Thuỷ phân tinh bột, dextrin ở nồi cách thuỷ sôi trong 3 giờ. - Sau khi thuỷ phân, cần làm lạnh ngay dưới vòi nước chảy.
- Trung hoà lại, trước bằng NaOH 30% (hoặc KOH 30%), sau bằng NaOH 1N rồi NaOH 0, 1N với phenolphtalein làm chỉ thị màu.
Nếu định lượng bằng phương pháp Bertrand hay Feling có thể dùng dịch chiết hơi kiềm, vì nó định lượng ở môi trường kiềm.
Khử tạp chất và định lượng bằng các phương pháp khác nhau. Có thể khử tạp chất bằng một trong các phương pháp sau:
- Khử tạp chất bằng Kẽm ferro cyanua:
Dung dịch ferro cyanua 15%.
Dung dịch gồm: Kali ferro cyanua 15g.
Nước cất vừa đủ 100ml. Dung dịch Kẽm axetat 30%.
Kẽm axetat 30g.
Nước cất vừa đủ 100ml.
+ Dịch thử đã thuỷ phân và trung hoà, cho vào bình định mức 100ml và cả nước rửa. Cho 5ml Kali ferro cyanua 15% lắc đều, để yên 2 – 3 phút. Cho thêm 5ml Kẽm axetat lắc mạnh, cho vừa đủ nước cất 100ml, lọc qua giấy khô. Dịch lọc dùng để định
lượng bằng các phương pháp hoá học và lý học hoặc hoá lý.
- Khử tạp chất bằng Nhôm hydroxyt (Al(OH)3 ):
Hỗn hợp dịch Nhôm hydroxyt gồm:
Dung dịch Nhôm clorua 1% hoặc Nhôm sunfat 1%. NH4OH và đủ để kết tủa.
Để lắng và rửa với nước cất cho tới khi không còn phản ứng chất lượng Cl -
(hoặc SO -2). Giữ một lớp nước cất, với thời gian không được vón thành cục.
Dịch thử đã phân huỷ và trung hoà cho vào bình định mức 100ml với nước rửa. Cho thêm 3 – 5 ml dung treo Al (OH)3 lắc đều. Cho thêm nước cất vừa đủ 100ml. Để yên 10 phút và lọc, ta được dịch lọc theo yêu cầu dùng để định lượng bằng các phương pháp hoá, lý và hoá lý.