sản
PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CHÌ
TRONG THỦY SẢN VÀ SẢN PHẨM THỦY SẢN BẰNG MÁY QUANG PHỔ HẤP THU NGUYÊN TỬ (AAS) 1 Phạm vi áp dụng
Phương pháp này mô tả cách xác định hàm lượng chì (Pb) trong thủy sản và sản phẩm thủy sản bằng máy quang phổ hấp thu nguyên tử (AAS). Giới hạn phát hiện của phương pháp 20ppb.
2 Nguyên tắc
Chì trong thủy sản và sản phẩm thủy sản tồn tại ở dạng vô cơ lẫn hữu cơ. Vì vậy để xác định được ta phải chuyển tất cả về dạng vô cơ bằng acid có nồng độ cao ở nhiệt độ và áp suất cao. Sau đó được xác định bằng máy quang phổ hấp thu nguyên tử (AAS) tại bước sóng 244.8 nm.
3 Thiết bị, dụng cụ 3.1 Thiết bị
Hệ thống máy phổ hấp thu nguyên tử bao gồm: - Bộ phận làm lạnh - Lò graphite - Bộ bơm mẫu tự động - Hệ thống đèn - Máy AAS Máy Multiwave 3000. Cân kỹ thuật có độ chính xác 0.001g. 3.2 Dụng cụ
- Pipetteman 100µl, 1000µl, 5000µl. - Máy xay mẫu.
- Bình định mức 20ml. - Pipette Pasteur.
- Ống Teflon phá mẫu.
4 Hóa chất, thuốc thử 4.1 Hóa chất
- Dung dịch chì chuẩn, Merck (hoặc tương đương).
- Nước cất một lần.
- HNO3 65%, Merck(hoặc tương đương). - H2O2 30%, Merck(hoặc tương đương). - Dung dịch H3PO4 85%.
4.2 Dung dịch, thuốc thử
4.2.1 Dung dịch chì trung gian 10ppm
Hút chính xác 100µl dung dịch chuẩn 1000ppm vào bình định mức 10ml
định mức bằng dung dịch HNO3 1.5%.
Bảo quản trong tủ lạnh nhiệt độ từ 2-80C. Hạn sử dụng 3 tháng. 4.2.2 Dung dịch chì chuẩn làm việc 100ppb
Hút chính xác 100µl dung dịch chuẩn 10ppm vào bình định mức 10ml
định mức bằng dung dịch HNO3 1.5%.
Bảo quản trong tủ lạnh nhiệt độ từ 2-80C. Hạn sử dụng 1 tháng. 4.2.3 Dung dịch HNO3 1.5%
Hút chính xác 23.07ml HNO3 65% cho vào bình định mức 1000ml, định mức bằng nước cất đến vạch. Hạn sử dụng 1 năm, bảo quản ở nhiệt độ phòng.
4.2.4 Dung dịch H3PO4 50 µg/ml
Hút chính xác 58.82µl dung dịch gốc H3PO4 1000 µg/ml vào bình định mức 50ml định mức bằng nước cất đến vạch.
5 Chuẩn bị mẫu
5.1 Chuẩn bị mẫu thử
Đồng nhất tối thiểu 200g mẫu trên máy xay mẫu. Đối với mẫu khô thì cắt hoặc giã nhỏ. Giữ mẫu trong tủ đông -180C cho đến khi phân tích.
Cân 1g ± 0.05g mẫu đã đồng nhất vào ống Teflon. Sau đó thêm 2ml HNO3 65% và 2ml H2O2 30%.
5.2 Chuẩn bị mẫu trắng: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Hút 1ml nước cất vào ống Teflon, rồi thực hiện như mẫu thử. 5.3 Chuẩn bị mẫu kiểm soát
Chì 100ppb: Hút chính xác 1000µl dung dịch chì chuẩn 100ppb và cân 1g ± 0.05g mẫu thủy sản trắng đã được chọn trước vào ống Teflon, sau đó thực hiện như mẫu thử.
5.4 Dựng đường chuẩn
Đường chuẩn được dựng với các nồng độ cadmium khác nhau từ 1ppb đến 20ppb từ chuẩn chì 20ppb với chế độ automix.
6 Điều kiện đo trên máy hấp thu nguyên tử AAS
Element: Pb
Lamp/ Current (mA) Holow cathode lamp / 12mA
Electrodeless discharge lamp/ 360mA Wavelength 283.3nm
Slit Withd 0.7nm Measurement mode peak hight
Signal type atomic absorption - background absorption Intergration time 4 sec
Baseline correction time 2 sec Sample volume 20ml Injection temperature 20oC
Argon gas supply pressure 3.6 bar or 52 psig or 360kPa Argon gas flow rate 300 ml/min
Carrier soluution/ flow rate 3% HCl/ 9-12 ml/min Matrix modifier / Volume H3PO4 / 5ml
Chương trình cài đặt đối với lò graphit
Bảng 4.11. Chương trình cài đặt đối với lò graphit khi phân tích Cd bằng quang phổ hấp thu nguyên tử AAS
Step Temperature (oC) Ramp Time (sec) Hold time (sec) Internal Gas (Argon) Flow (min) Read step 6. Drying 130 10 50 300
7. Pyrolysis 800 5 15 300 8. Cooling 20 1 15 300
9.Atomization 1800 0 5 0 x
10. Clean out 2600 1 5 300
7 Tính toán
Nồng độ của Pb trong mẫu được tính như sau: K = ((CPb-CH20)*V*100)/R*m Trong đó:
CPb : nồng độ của Pb trong mẫu tính từ đường chuẩn (ppb).
CH20: nồng độ của Pb trong nước tính từ đường chuẩn (ppb)
V : thể tích cuối của dung dịch. R : Độ thu hồi của mẫu kiểm soát. m : khối lượng của mẫu.
8. Yêu cầu
Độ hồi qui tuyến tính R2≥99%.
Độ thu hồi của mẫu phải nằm trong khoảng chấp nhận, 75%-125%.