ĐỊNH LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU HỌ CHLOR BẰNG SẮC KÝ KHÍ GHÉP KHỐI PHỔ (GCMS)
1 Phạm vi áp dụng
Phương pháp này được áp dụng để định lượng thuốc trừ sâu họ Chlor trong nền mẫu là nước, nông sản, trong đất hoặc trong một số nền mẫu tương tự bằng GCMS. Giới hạn phát hiện của phương pháp là 3ppb.
Dịch chiết thô thuốc trừ sâu họ Chlor trong mẫu được cho qua cột C18. Chlor được giữu lại trên cột, sử dụng dung môi thích hợp để rửa giải và định lượng bằng GCMS 3 Thiết bị, dụng cụ 3.1 Thiết bị - Bể siêu âm. - Máy li tâm. - Vortex - Cân kỹ thuật có độ chính xác 0.001g - Cân phân tích có độ chính xác 0.0001g - Máy GCMS – QP2010, Shimadzu - Bộ thổi khí nitơ 3.2 Dụng cụ - Phễu thủy tinh
- Đầu côn các loại
- Pipette Pasteur - Bình định mức 10, 20, 50, 100ml. - Cốc thủy tinh 50, 100, 250, 500, 1000ml - Cột SPE C18 (500mg, 3ml) - Vial 1.5ml - Bao PE - Màng lọc đường kính 0.45mm 3.3 Hóa chất - Hexan (GC) - Dichloromethane (GC) - Methanol (GC) - Ethylacetate PA - Nước cất 2 lần
- Chuẩn thuốc trừ sâu: dung dịch 10ppm (dạng hỗn hợp hay từng chất) 4 Chuẩn thuốc trừ sâu họ Chlor
4.1 Dung dịch chuẩn
4.1.1 Dung dịch chuẩn gốc 10(mg/ml) 4.1.2 Dung dịch chuẩn thứ cấp 1mg/ml
Hút chính xác 1ml dung dịch chuẩn gốc cho vào bình định mức 10ml. Thêm hexane đến vạch.
4.1.3 Dung dịch chuẩn thứ cấp 0.1mg/ml
Hút chính xác 1ml dung dịch chuẩn thứ cấp 1mg/ml cho vào bình định mức 10ml. Thêm hexane đến vạch.
4.1.4 Dung dịch chuẩn thứ cấp 0.01mg/ml
Hút chính xác 1ml dung dịch chuẩn thứ cấp 0.1mg/ml cho vào bình định mức 10ml. Thêm hexane đến vạch.
4.1.5 Dung dịch chuẩn 1; 2.5; 5 mg/ml
Hút chính xác 1, 2.5, 5ml dung dịch chuẩn thứ cấp 0.01mg/ml (4.1.4), 1ml nội chuẩn (4.2) cho vào bình định mức 10ml. Thêm hexane đến vạch.
4.1.6 Dung dịch chuẩn 10; 100 mg/ml
Hút chính xác 0.1, 1.0ml dung dịch chuẩn thứ cấp 1mg/ml (4.1.2), 1ml nội chuẩn (4.2) cho vào bình định mức 10ml. Thêm hexane đến vạch.
4.2 Dung dịch nội chuẩn
Dung dịch 1,2,4 – trochlorobenzene ( 0.06mg/ml ) 4.3 Bảo quản
4.3.1 Tất cả các dung dịch chuẩn phải được bảo quản trong ống thủy tinh có nắp đậy kín và đặt trong ngăn lạnh, nhiệt độ khoảng 4o
C
4.3.2 Thời gian sử dụng của dung dịch chuẩn gốc tùy thuộc vào nhà sản xuất
4.3.3 Thời gian sử dụng của dung dịch chuẩn thứ cấp (4.1.3) trong tháng, chuẩn (4.1.4) chỉ dùng trong ngày
4.3.4 Dung dịch chuẩn thứ cấp (4.1.4) và chuẩn làm việc được pha trước khi phân tích.
5 Tiến hành phân tích 5.1 Chuẩn bị mẫu 5.1.1 Mẫu rắn
Cân khoảng 15 – 20g mẫu đã được đồng nhất bằng cách băm hoặc xay nhuyễn, cho vào ống ly tâm dung tích 50ml, thêm vào 20ml MeOH, vortex khoảng 1 phút, siêu âm khoảng 5 phút, ly tâm trong 5 phút ở tốc độ 5500rpm, gạn lấy phần dịch trong cho vào ống ly tâm thứ hai.
Cho tiếp 10ml MeOH vào phần rắn, vortex khoảng 1 phút, siêu âm khoảng 5 phút, ly tâm trong 5 phút ở tốc độ 5500rpm, gạn lấy phần dịch trong cho vào ống ly tâm thứ hai. Pha loãng mẫu với 200ml nước.
Hoạt hóa cột SPE C18 (500mg, 3ml) trên bộ tách chiết pha rắn bằng: 5ml MeOH, 3ml nước, cho mẫu qua cột.
Rửa cột bằng 5ml hỗn hợp nước: methanol = 80:20, hút chân không đến khi khô cột
Rửa giải bằng 5ml hỗn hợp Dichlorobenzene : Hexane = 7:3, thổi khô, định mức bằng 1ml hexane nồng độ nội chuẩn là 60ppb. Lọc dịch qua màng lọc 0.45mm, cho vào vial (lọ có nắp đậy) thể tích 1.5ml (vial có nắp dùng cho tiêm tự động) (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
5.1.2 Mẫu nước
Lấy 200ml nước* cho qua cột SPE C18 (500mg, 3ml) đã được hoạt hóa và thực hiện tương tự như mục 5.1.1.
* Lưu ý: Lọc nếu mẫu có nhiều cặn hoặc các chất lơ lững. Rữa lại giấy lọc bằng 5ml MeOH.
5.2 Điều kiện đo
5.2.1 Điều kiện đo trên sắc ký khí - Cột sắc ký: cột
MDN-5S 30m x 0.25mm x 0.25mm hoặc Zebron-MultiResidue 30m x 0.25mm x 0.25mm
- Chương trình nhiệt
· Chạy trên NCI source: thuốc trừ sâu họ Chlor: chạy theo chế độ NCI Bảng 4.7. Chương trình nhiệt chạy trên NCI source khi phân tích thuốc trừ sau họ Chlor
Nhiệt độ (oC) Thời gian (phút)
50 2 10 1 180 1 3 1 250 2 10 1 290 10
Injection Temp: 250oC Injection mode: Splitless Sampling time: 1 phút Thể tích bơm: 1ml Tốc độ dòng: 1.20ml/ phút Pressure: 55.3 kPa Tốc độ khí mnag chung: 38ml/phút Tốc độ dòng Purge 3.0ml/ phút Tỉ lệ Split: -1
· Chạy trên EI source
Bảng 4.8. Chương trình nhiệt chạy trên EI source khi phân tích thuốc trừ sâu họ Chlor
Nhiệt độ (oC) Thời gian (phút)
50 1 180 1 15 1 200 1 220 1 240 1 10 1 300 10 Injection Temp: 250oC Injection mode: Splitless Sampling time: 1 phút Thể tích bơm: 1ml Tốc độ dòng: 0.75ml/ phút Pressure: 32.7 kPa Tốc độ khí mnag chung: 38ml/phút Tốc độ dòng Purge: 3.0ml/ phút Tỉ lệ Split: -1
5.2.2 Điều kiện của đầu dò MS · Chạy trên NCI source
Ionization mode: SEI (phosphor), NCI (chlor)
Interface Temp: 250oC Ion source: 200oC · Chạy trên EI Source
Ionization mode: EI (phosphore, chlor) Detector Voltage: 1.12 kV, Absolute Interface Temp: 250oC
Ion source: 200oC
Nội chuẩn 1, 2, 4 – Triclorobenzene 60 ppb pha trong hexane 6 Tính kết quả
Hàm lượng thuốc trừ sâu trong mẫu Đối với mẫu lỏng:
C (mg/l) = ÷÷ ø ö çç è æ m dm o V V C *
Đối với mẫu rắn hoặc sệt
C (mg/kg) = ÷÷ ø ö çç è æ m dm o a V C * Trong đó:
C: nồng độ thuốc trừ sâu trong mẫu, tính theo mg/l (mẫu nước) và mg/kg (mẫu rắn hoặc sệt).
Co: nồng độ thuốc trừ sâu tính từ đường chuẩn mg/l Vdm: thể tích định mức (ml)
Vm: thể tích mẫu phân tích (ml) a: khối lượng mẫu phân tích (g)