phẩm thủy sản
PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CADMIUM TRONG THỦY SẢN VÀ SẢN PHẨM THỦY SẢN BẰNG MÁY QUANG PHỔ HẤP THU NGUYÊN TỬ (AAS) 1 Phạm vi áp dụng
Phương pháp này mô tả cách xác định hàm lượng cadmium (Cd) trong thủy sản và sản phẩm thủy sản bằng máy phổ hấp thu nguyên tử (AAS). Giới hạn phát hiện của phương pháp là 5ppb.
2 Nguyên tắc
Cadmium trong thủy sản và sản phẩm thủy sản tồn tại ở dạng vô cơ lẫn hữu cơ. Vì vậy để xác định được ta phải chuyển tất cả về dạng vô cơ bằng acid có nồng độ cao ở nhiệt độ và áp suất cao. Sau đó được xác định bằng máy quang phổ hấp thu nguyên tử (AAS) tại bước sóng 228.8 nm.
3 Thiết bị, dụng cụ 3.1 Thiết bị
Hệ thống máy quang phổ hấp thu nguyên tử bao gồm: - Bộ phận làm lạnh - Lò graphite - Bộ bơm mẫu tự động - Hệ thống đèn - Máy AAS Máy Multiwave 3000. Cân kỹ thuật có độ chính xác 0.001g. 3.2 Dụng cụ - Pipetteman 100µl, 1000µl, 5000µl. - Máy xay mẫu.
- Bình định mức 20ml. - Pipette Pasteur.
- Ống Teflon phá mẫu.
4.1 Hóa chất:
- Dung dịch Cd chuẩn. Merck (hoặc tương đương).
- Nước cất một lần.
- HNO3 65%, Merck (hoặc tương đương). - H2O2 30%, Merck (hoặc tương đương). - Dung dịch H3PO4 85%.
4.2 Dung dịch, thuốc thử:
4.2.1 Dung dịch chuẩn trung gian Cd 10ppm:
Hút chính xác 100µl dung dịch chuẩn 1000ppm vào bình định mức 10ml
định mức bằng dung dịch HNO3 1.5%.
Bảo quản trong tủ lạnh nhiệt độ từ 2-80C. Hạn sử dụng 3 tháng. 4.2.2 Dung dịch chuẩn làm việc Cd 100ppb:
Hút chính xác 100µl dung dịch chuẩn 10ppm vào bình định mức 10ml
định mức bằng dung dịch HNO3 1.5%.
Bảo quản trong tủ lạnh nhiệt độ từ 2-80C. Hạn sử dụng 1 tháng. 4.2.3 Dung dịch HNO3 1.5%:
Hút chính xác 23.07ml HNO3 65% cho vào bình định mức 1000ml, định mức bằng nước cất đến vạch. Hạn sử dụng 1 năm, bảo quản ở nhiệt độ phòng.
4.2.4 Dung dịch H3PO4 50 µg/ml:
Hút chính xác 58.82µl dung dịch gốc H3PO4 1000µg/ml (85%) vào bình định mức 50ml định mức bằng nước cất đến vạch.
5 Chuẩn bị mẫu 5.1 Chuẩn bị mẫu thử:
Đồng nhất tối thiểu 200g mẫu trên máy xay mẫu. Đối với mẫu khô thì cắt hoặc giã nhỏ. Giữ mẫu trong tủ đông -180C cho đến khi phân tích.
Cân 1g ± 0.05g mẫu đã đồng nhất vào ống Teflon. Sau đó thêm 2ml HNO3 65% và 2ml H2O2 30%.
5.2 Chuẩn bị mẫu trắng:
Hút 1ml nước cất vào ống Teflon, rồi thực hiện như mẫu thử. 5.3 Chuẩn bị mẫu kiểm soát:
Hút chính xác 250µl dung dịch cadmium chuẩn 100ppb cho vào 1g ± 0.05g mẫu thủy sản trắng đã được cho trước vào ống Teflon, sau đó thực hiện như mẫu thử.
5.3.2 Dựng đường chuẩn: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Đường chuẩn được dựng với các nồng độ cadmium khác nhau từ 0.25ppb đến 3ppb từ chuẩn cadmium 5ppb với chế độ automix.
6 Điều kiện đo trên máy quang phổ hấp thu nguyên tử AAS
Element: Cd
Lamp/ Current (mA) Holow cathode lamp / 4mA
Electrodeless discharge lamp/ 170mA Wavelength 228.8nm
Slit Withd 0.7nm Measurement mode peak hight
Signal type atomic absorption - background absorption Intergration time 5 sec
Baseline correction time 2 sec Sample volume 10ml Injection temperature 20oC
Argon gas supply pressure 3.6 bar or 52 psig or 360kPa Argon gas flow rate 300 ml/min
Chương trình cài đặt đối với lò graphit theo bảng sau:
Bảng 4.10. Chương trình cài đặt đối với lò graphit khi phân tích Cd bằng quang phổ hấp thu nguyên tử AAS
7 Tính toán
Nồng độ của Cd trong mẫu được tính như sau: K = ((CCd-CH20)*V*100)/R*m Step Temperature (oC) Ramp Time (sec) Hold time (sec) Internal Gas (Argon) Flow (min) Read step 1. Drying 130 10 50 300 2. Pyrolysis 700 10 30 300 3. Cooling 20 1 15 300 4.Atomization 1500 0 5 0 x 5. Clean out 2600 1 5 300
Trong đó:
CCd : nồng độ của Cd trong mẫu tính từ đường chuẩn (ppb).
CH20: nồng độ của Cd trong nước tính từ đường chuẩn (ppb)
V : thể tích cuối của dung dịch. R : Độ thu hồi của mẫu kiểm soát. m : khối lượng của mẫu.
8. Yêu cầu
Độ hồi qui tuyến tính R2≥99%.
Độ thu hồi của mẫu phải nằm trong khoảng chấp nhận 75%-125%.