phẩm thủy sản
PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG THỦY NGÂN TRONG THỦY SẢN VÀ SẢN PHẨM THỦY SẢN BẰNG MÁY QUANG PHỔ HẤP THU NGUYÊN TỬ (AAS) 1. Phạm vi áp dụng
Phương pháp này mô tả cách xác định hàm lượng thủy ngân (Hg) trong thủy sản và sản phẩm thủy sản bằng máy quang phổ hấp thu nguyên tử (AAS). Giới hạn phát hiện của phương pháp 10ppb.
2. Nguyên tắc
Thủy ngân trong thủy sản và sản phẩm thủy sản tồn tại ở dạng vô cơ lẫn hữu cơ. Vì vậy để xác định được ta phải chuyển tất cả về dạng vô cơ bằng acid có nồng độ cao ở nhiệt độ và áp suất cao. Thủy ngân được khử bằng NaBH4 trong bộ hóa hơi. Sau đó được xác định bằng máy phổ hấp thu nguyên tử (AAS) tại bước sóng 253.7nm.
3. Thiết bị, dụng cụ 3.1 Thiết bị
Hệ thống máy phổ hấp thu nguyên tử bao gồm: - Bộ phận làm lạnh
- Bộ hóa hơi thủy ngân - Bộ bơm mẫu tự động - Hệ thống đèn - Máy AAS Máy Multiwave 3000. Cân kỹ thuật có độ chính xác 0.001g. 3.2 Dụng cụ - Pipetteman 100µl, 1000µl, 5000µl. - Máy xay mẫu.
- Bình định mức 10ml. - Pipette Pasteur.
- Ống Teflon phá mẫu.
4 Hóa chất 4.1 Hóa chất
- Dung dịch Hg chuẩn, Merck (hoặc tương đương)
- Nước cất một lần.
- HNO3 1.5%, Merck (hoặc tương đương) - H2O2 30%, Merck (hoặc tương đương) - Dung dịch NaBH4 3% + NaOH 5%. 4.2 Dung dịch, thuốc thử
Hút chính xác 100µl dung dịch chuẩn 1000ppm vào bình định mức 10ml
định mức bằng dung dịch HNO3 1.5%.
Bảo quản trong tủ lạnh nhiệt độ từ 2-80C. Hạn sử dụng 3 tháng. 4.2.2 Dung dịch chuẩn làm việc Hg 100ppb
Hút chính xác 100µl dung dịch chuẩn 10ppm vào bình định mức 10ml
định mức bằng dung dịch HNO3 1.5%
Bảo quản trong tủ lạnh nhiệt độ từ 2-80C. Hạn sử dụng 1 tháng. 4.2.3 Dung dịch HNO3 1.5%
Hút chính xác 23.07ml HNO3 65% cho vào bình định mức 1000ml, định mức bằng nước cất đến vạch. Hạn sử dụng trong 1 năm, bảo quản ở nhiệt độ phòng.
4.2.4 Dung dịch NaBH4 3% + NaOH 5%
Cân chính xác 0.3g NaBH4 và 0.5g NaOH vào bình định mức 100ml định mức bằng nước cất đến vạch. Pha trước khi chạy máy.
5 Chuấn bị mẫu
5.1 Chuẩn bị mẫu thử
Đồng nhất tối thiểu 200g mẫu trên máy xay mẫu. Đối với mẫu khô thì cắt hoặc giã nhỏ. Giử mẫu trong tủ đông -180C cho đến khi phân tích.
Cân 1g ± 0.05g mẫu đã đồng nhất vào ống Teflon để phá mẫu. Sau đó thêm 2ml HNO3 65% và 2ml H2O2 30%.
5.2 Chuẩn bị mẫu trắng
Hút 1ml nước cất vào ống Teflon, rồi thực hiện như mẫu thử. 5.3 Chuẩn bị mẫu kiểm soát
Cân 1g ± 0.05g mẫu thủy sản trắng đã được chọn trước vào ống Teflon, hút chính xác 500µl dung dịch thủy ngân chuẩn 100ppb (Hg 50ppb) sau đó thực hiện như mẫu thử.
5.4 Dựng đường chuẩn (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Pha từ dung dịch chuẩn làm việc Hg 100ppb pha loãng vào bình định mức 20ml. Pha theo bảng sau:
Bảng 4.9. Thể tích và nồng độ tương ứng khi thêm Hg vào mẫu trắng để dựng đường chuẩn
Thể tích(µl) Nồng độ (ppb)
400 2
1000 5
2000 10
4000 20
6 Điều kiện đo trên máy hấp thu nguyên tử AAS
Element: Hg
Lamp/ Current (mA) Holow cathode lamp / 6mA
Electrodeless discharge lamp/ 210mA
Wavelength 253.7nm
Slit Withd 0.7nm
Measurement mode peak hight
Signal type atomic absorption Intergration time 20 sec
Baseline correction time 2 sec
Data processing, smoothing 19 pionts or 0.5 sec Cell temperature 100oC
Sample volume 500ml
Argon gas supply pressure 3.6 bar or 52 psig or 360kPa Argon gas flow rate 70-85 ml/min
Carrier soluution/ flow rate 3% HCl/ 9-12 ml/min Reductant solution/ flow rate 0.02% NaBH4 in 0.005%
NaOH solution/ 5-7ml/min 7 Tính toán
Nồng độ của Hg trong mẫu được tính như sau: K = ((CHg-CH20)*V*100)/R*m Trong đó:
CHg : nồng độ của Hg trong mẫu tính từ đường chuẩn (ppb).
CH20: nồng độ của Hg trong nước tính từ đường chuẩn (ppb)
V : thể tích cuối của dung dịch. R : Độ thu hồi của mẫu kiểm soát. m : khối lượng của mẫu.
8 Yêu cầu
Độ thu hồi của mẫu phải nằm trong khoảng chấp nhận, 75%-125%.