2. Mục ựắch của ựề tài
2.5.6. Phương pháp xét nghiệm phân
2.5.6.1. Phương pháp xác ựịnh tỷ lệ nhiễm cầu trùng
Tất các các mẫu phân ựều ựược xét nghiệm bằng phương pháp phù nổi với dung dịch nước muối bão hòa, tìm Oocyst dưới kắnh hiển vi.
Mục ựắch: tìm noãn nang cầu trùng
Nguyên lý: lợi dụng tỷ trọng của dung dịch nước muối bão hoà lớn hơn tỷ trọng của noãn nang cầu trùng, làm noãn nang nổi lên bề mặt của dung dịch. Phương pháp này có ựộ chắnh xác tương ựối cao.
+ để pha dung dịch NaCl bão hòa, lấy 1 lắt nước sôi cho vào ựó 380g NaCl khuấy ựều, hoặc ựun sôi nước cho từ từ muối vào khuấy ựều cho ựến khi muối không tan ựược nữa thì dừng lại, ựể nguội lọc qua vải lọc hoặc bông ựể loại bỏ cặn.
+ Lấy 1-3g phân cần xét nghiệm cho vào cốc sạch, ựổ nước muối bão hòa vào, dùng ựũa thủy tinh khuấy cho phân tan (lượng nước muối nhiều hơn lượng phân 10-20 lần), sau ựó lọc qua lưới thép bỏ cặn. Lấy dung dịch vừa lọc ựược cho vào ống nhỏ, ựể yên tĩnh trong 20-30 phút. Dùng vòng thép vớt màng mỏng trên bề mặt, cho lên phiến kắnh quan sát dưới kắnh hiển vi, hoặc có thể ựổ dung dịch vừa lọc vào ống nghiệm ựầy ựến tận miệng, ựậy phiến kắnh lên trên sao cho tiếp xúc với dung dịch. để khoảng 20-30 phút, sau ựó lấy phiến kắnh ra soi trên kắnh hiển vi ựể tìm Oocyst cầu trùng.
2.5.6.2. Phương pháp xác ựịnh cường ựộ nhiễm cầu trùng
Phương pháp này dùng ựể xác ựịnh số lượng nang trứng cầu trùng trong 1g phân bằng buồng ựếm Mc. Master.
-Cân 3g phân cho vào lọ thủy tinh. -Cho nước muối bão hòa tới vạch 45ml. -Lắc và trộn ựều cho phân tan hết. -Lọc qua lưới lọc.
-Trộn ựều và hút dung dịch trên cho lên 2 buồng ựếm.
- đếm số noãn nang trong 2 buồng ựếm theo nguyên tắc ựếm 2 cạnh.
Cách tắnh:
+ Thể tắch mỗi buồng ựếm là 0,15ml.
+ Gọi số trứng ựếm ựược là: A
+ Tổng số trứng trong 45ml là: 45xA/0,15
Phương pháp này còn dùng ựể xác ựịnh cường ựộ nhiễm noãn nang cầu trùng
đếm Oocyst cầu trùng trong 1g phân bằng buồng ựếm Mc. Master và quy ựịnh theo các cường ựộ: nhẹ, trung bình, nặng và rất nặng. Cụ thể như sau:
Ớ <5000 Oocyst/1g phân: cường ựộ nhiễm nhẹ (+).
Ớ >5000 - 10000 Oocyst/1g phân: cường ựộ nhiễm trung bình (++). Ớ >10000 - 15000 Oocyst/1g phân: cường ựộ nhiễm nặng (+++). Ớ >15000 Oocyst/1g phân: cường ựộ nhiễm rất nặng (++++).