Nguyên lý: Sử dụng thanh giấy chứa các nồng độ kháng sinh nhằm xác định nồng độ ức chế tối thiểu sự phát triển của vi khuẩn
Tiến hành
- Để đĩa thạch và băng giấy chứa các nồng độ kháng sinh ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.
- Lấy 4 hoặc 5 khuẩn lạc vào môi trường nước muối 0.9% và ủ ấm 350C trong 2-8h để đạt độ đục 0.5 Mc Farland
- Lắc đều bằng máy vortex, so độ đục chuẩn tương đương 0.5 Mc Farland (1.5 x 108 CFU/ml).
Bước 2: Ria huyền dịch và đặt băng giấy
- Nhúng tăm bông vào ống đựng huyền dịch, ép nhẹ lên thành ống rồi ria toàn bộ lên mặt thạch.
- Dùng panh đặt băng giấy E-test lên mặt thạch
- Đặt băng giấy lên trên mặt thạch với nồng độ kháng sinh cao nhất ở gần cạnh của đĩa petri. Đối với đĩa có đường kính 90mm, có thể đặt 1 hoặc 2 băng giấy
- Loại bỏ các bóng khí của băng giấy trên mặt thạch bằng cách dùng panh ấn nhẹ nhàng lên băng giấy.
- Không thay đổi vị trí của băng giấy E-test sau khi đã đặt trên mặt thạch. Nếu đặt ngược băng giấy có thể dùng panh lật nhẹ nhàng và đặt lại.
Bước 3: Ủ ấm
- Lật ngược đĩa thạch và ủ ấm 16-20h ở 350C (không chồng quá 5 đĩa trong tủ ấm)
Bước 4: Đọc và diễn giải kết quả
- Mở nắp và đọc đĩa nơi có nguồn sáng.
- Giá trị MIC được đọc dựa vào điểm tiếp xúc giữa vòng ức chế vi khuẩn (hình elip) với điểm tiếp xúc thấp nhất của băng giấy E-test trên mặt thạch.
+ Nhận định kết quả MIC bằng E-test Penicillin với S. suis theo tiêu chuẩn của viện nghiên cứu tiêu chuẩn hóa lâm sàng và xét nghiệm Hoa Kỳ (CLSI)
+ Nhạy cảm: MIC ≤ 0,12 µg/ml + Trung gian: MIC = 0,23-2 µg/ml + Đề kháng: MIC ≥ 4 µg/ml