- Chiết MeOH, cất loại dung môi d−ới ấp suất giảm Loại muối bằng cách chạy qua cột Dianion vớ
6.Hợp chất SH6: batyl alcohol (batilol)
- Cấu trúc hóa học: HO OH O CH2(CH2)16CH3 1 2 3 1' 18' - Tinh thể màu trắng: mp 70-71oC - Công thức phân tử: C21H44O3, M = 344 - Phổ khối l−ợng: m/z 345,1 [M+H]+ 7. Hợp chất SH7: chimyl alcohol - Cấu trúc hóa học: OH CH2(CH2)14CH3 HO O 1 2 3 1' 16' - Tinh thể màu trắng: mp 64-65oC - Công thức phân tử: C19H40O3, M=316 - Phổ khối l−ợng: m/z: 317,1 [M+H]+ 8. Hợp chất SH8: 1-heptadecanol - Cấu trúc hóa học: HO 14 CH3 1 16 17 - Tinh thể màu trắng: mp 59,5-60.0oC - Công thức phân tử: C17H36O, M=256 - Phổ khối l−ợng: m/z 279,0 [M+Na]+, 255,0 [M-H]-, 237,0 [M-H2O-H]-
Kết quả nghiên cứu đánh giá hoạt tính cho thấy, chỉ có hai hợp chất là SH2 và
SH4 thể hiện hoạt tính kháng NF-κB. Điều này cho thấy sự phù hợp so với các tài liệu đã công bố vì SH2 là một hợp chất ceramit còn SH4 là một 9,11-secosterol, hai lớp chất thể hiện rất nhiều hoạt tính quý, cần đ−ợc quan tâm nghiên cứu để phát triển thành các chế phẩm thuốc có giá trị cao, phục vụ công tác chăm sóc sức khỏe cộng đồng. Hợp chất
SH1 cũng là một 9,11-secosterol tuy nhiên nó lại ở dạng dẫn xuất glycosit, và một điều thú vị là đây là dẫn xuất glycosit đầu tiên của các hợp chất 9,11-secosteroit đ−ợc phân lập từ thiên nhiên. Hợp chất này không thể hiện hoạt tính kháng NF-κB có thể là do sự ảnh h−ởng của đơn vị đ−ờng fucose trong phân tử.
Ngoài ra có 4 hợp chất thể hiện hoạt tính gây độc tế bào. Trong đó hợp chất SH1
chỉ có hoạt tính gây độc tế bào đối với dòng KB với IC50 = 4,43 àg/ml, SH2 và SH4 thể hiện hoạt tính trên cả 3 dòng tế bào thử nghiệm, SH3 thể hiện hoạt tính trên 2 dòng tế bào là KB và Hep-G2 với giá trị IC50 = 3,77 và 4,72 àg/ml. Một điều đáng chú ý là hợp chất SH2 là một hợp chất mới, thể hiện hoạt tính gây độc tế bào trên cả 3 dòng tế bào thử nghiệm và đ−ợc phân lập với hàm l−ợng t−ơng đối cao từ loài san hô mềm Cladiella
sp. Điều này gợi mở cho các nghiên cứu tiếp theo của hợp chất này theo định h−ớng hoạt tính gây độc tế bào nhằm phát triển các loại d−ợc liệu mới có tác dụng phòng và điều trị bệnh ung th−.
Từ các kết quả nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học loài san hô mềm
Cladiella sp, chúng tôi đã biên soạn và đăng tải 01 công trình trên tạp chí chuyên ngành quốc tế đó là:
Chau Van Minh, Phan Van Kiem, and Nguyen Xuan Cuong, New 9,11-secosterol glycoside and ceramide from a soft coral
Cladiella sp. living in Vietnamese sea. ASEAN Journal on Science and Technology for Development, 2007, 24(3), 275-283.
Ch−ơng IV. Nghiên cứu hoá học theo định h−ớng hoạt tính
sinh học của một số loài da gai.
IV.1. nghiên cứu hóa học theo định h−ớng hoạt tính sinh học loài hải sâm holothuria scabra (holothuridae)
- Tên Việt Nam: hải sâm trắng - Tên khoa học: Holothuria scabra - Thời gian thu mẫu: tháng 2 năm 2006 và tháng 8 năm 2007
- Địa điểm thu mẫu: Cát Bà, Hải Phòng
- Ng−ời định loài: TS. Đỗ Công Thung và các cộng sự, Viện Tài nguyên và Môi tr−ờng Biển, VAST
Phân lập và tinh chế các hợp chất:
Mẫu Holothuria scabra (10kg khô) đ−ợc rửa sạch nhiều lần để loại muối vô cơ, sau đó thái nhỏ và chiết siêu âm bằng metanol. Quá trình phân lập các hợp chất đ−ợc trình bày cụ thể ở sơ đồ d−ới đây, kết hợp giữa các ph−ơng pháp sắc ký cột Silicagen pha th−ờng, pha đảo YMC và sắc ký lớp mỏng TLC. Từ 200 gam dịch cô metanol, đem chiết phân bố bằng hexan và n−ớc với tỷ lệ 1/1 thu đ−ợc 80 gam dịch chiết. T−ơng tự lần l−ợt chiết với cloroform, butanol và n−ớc theo tỷ lệ 1/1 về thể tích thu đ−ợc 70 gam dịch chiết cloroform và 30 gam dịch chiết butanol, phần cặn n−ớc còn lại là 20 gam. Phần dịch chiết CHCl3 đ−ợc tẩm vào 90 gam Silicagel, sau đó đ−a lên cột và chạy sắc ký với hỗn hợp dung môi n-gexan/axeton có gradient độ phân cực tăng dần từ 0% đến 100% axeton, thu đ−ợc 6 phân đoạn khác nhau. Phân đoạn số 3 tiếp tục đ−ợc chạy sắc ký cột Silicagel pha th−ờng với hệ dung môi n-hexan/axeton 4:1 thu đ−ợc 2 chất sạch HS-7 (15 mg) và HS-8 (12 mg) đều có dạng tinh thể hình kim, màu trắng. Nhóm 7 cũng đ−ợc chạy sắc ký cột pha th−ờng với hệ n-hexan/axeton 10:1 thu đ−ợc các tinh thể hình kim màu trắng HS-3 với l−ợng 10 mg. Từ nhóm 5 sau khi tiến hành sắc ký cột pha th−ờng bằng hệ dung môi CHCl3/MeOH 2,3:1 thu đ−ợc l−ợng lớn hai chất bột màu trắng, kí hiệu là HS-1 và HS-2. Nhóm 4 cũng đ−ợc tiến hành sắc ký nh− nhóm 5, thu đ−ợc chất
HS-6 ở dạng bột màu trắng. Bằng các ph−ơng pháp t−ơng tự, các hợp chất HS-3 và HS- 9 đ−ợc phân lập từ cặn butanol, HS-4 và HS-5 từ cặn n−ớc (sơ đồ IV.1).