. Khụng ho về đờm
2.5. THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIấN CỨU
2.5.1. Thời gian nghiờn cứu:
Từ thỏng 2- 2014 đến thỏng 8-2014.
2.5.2. Địa điểm nghiờn cứu:
Khoa Miễn dịch Dị Ứng, Bệnh viện Nhi Trung Ương.
2.6. PHƯƠNG PHÁP NGHIấN CỨU2.6.1. Thiết kế nghiờn cứu 2.6.1. Thiết kế nghiờn cứu
- Phương phỏp nghiờn cứu tiến cứu mụ tả
- Cỏc chỉ tiờu nghiờn cứu được thu thập theo một mẫu bệnh ỏn thống nhất
2.6.2. Cỡ mẫu nghiờn cứu
- Chọn mẫu thuận tiện, lấy tất cả trẻ trong cơn hen cấp dưới 5 tuổi đủ tiờu chuẩn đều được mời tham gia nghiờn cứu.
2.6.3. Qui trỡnh nghiờn cứu
Cỏc trẻ và gia đỡnh đồng ý tham gia nghiờn cứu sẽ tham gia vào quy trỡnh:
+ Cỏc trẻ và gia đỡnh được hỏi bệnh, hỏi tiền sử, khỏm lõm sàng để đỏnh giỏ mức độ nặng của cơn hen cấp.
+ Xột nghiệm
• Xột nghiệm tỡm RSV trong dịch tỵ hầu
Cỏc trẻ được lấy dịch tỵ hầu tỡm RSV trong 3 ngày đầu của cơn hen cấp. Quỏ trỡnh xột nghiệm được thực hiện tại khoa Vi sinh Bệnh viện Nhi Trung Ương theo phương phỏp phản ứng chuỗi men (PCR).
• Cỏc bệnh nhõn được lấy 2 ống mỏu, mỗi ống 3ml ngay thời điểm trẻ nhập viện để làm xột nghiệm:
+ Ống 1: Định lượng cụng thức mỏu, tế bào TCD3, TCD4, TCD8
+ Ống 2: Được quay ly tõm, lưu trữ để gửi sang viện quõn y 103 làm xột nghiệm cytokine.
Tiờu chớ đỏnh giỏ xột nghiệm:
Cụng thức mỏu:
+ Số lượng bạch cầu:
• Tăng số lượng bạch cầu khi số lượng bạch cầu mỏu > 10G/L.
• Tăng số lượng bạch cầu đa nhõn trung tớnh khi số lượng bạch cầu đa nhõn trung tớnh > 5G/L.
• Tăng số lượng bạch cầu ỏi toan khớ bạch cầu ỏi toan > 5%
Giỏ trị tế bào lympho T:
• < 2100 tế bào/ ml: Thấp • 2100- 6200 tế bào/ml: Bỡnh thường • > 6200 tế bào: Cao TCD4: • < 13 00 tế bào/ ml: Thấp • 1300- 4300 tế bào/ml: Bỡnh thường • > 4300 tế bào: Cao TCD8: • < 5 00 tế bào/ ml: Thấp • 500- 2000 tế bào/ml: Bỡnh thường • > 2000 tế bào: Cao Tỷ số • < 1,2: Thấp • 1,2- 1,5: Bỡnh thường • > 1,5: Cao
Giỏ trị cỏc cytokine: So với nhúm chứng
Định lượng cỏc cytokine: IL-2; TNF- α; IFN-γ; IL-12; IL-4; IL-5; IL- 8; IL-10 IL-13 trong mỏu.
2.6.4. Cỏc chỉ tiờu nghiờn cứu
• Đặc điểm lõm sàng của nhúm nghiờn cứu
- Giới. - Tuổi.
- Tiền sử dị ứng bản thõn: viờm mũi dị ứng, chàm,mày đay và bệnh dị ứng khỏc.
- Mức độ nặng của cơn hen cấp
• Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm RSV
- Tỷ lệ nhiễm RSV theo lứa tuổi
- Tỷ lệ nhiễm RSV theo độ nặng của cơn hen cấp
• Biến đổi tế bào và cỏc cytokine của trẻ nhiễm RSV - Biến đổi trong cụng thức bạch cầu
- Biến đổi cỏc tế bào CD3, CD4, CD8
- Giỏ trị cỏc cytokine ở trẻ bỡnh thường và trẻ HPQ
- So sỏnh giỏ trị cỏc cytokine ở trẻ HPQ nhiễm RSV và trẻ HPQ khụng nhiễm RSV
2.6.5. Vấn đề y đức
Bệnh nhõn và gia đỡnh bệnh nhõn được giải thớch trước, tự nguyện tham gia vào nghiờn cứu. Trong những trường hợp bệnh nhõn nặng hay đỏp ứng kộm với điều trị, cỏc biện phỏp cấp cứu tớch cực được ưu tiờn, đặt quyền lợi, tớnh mạng bệnh nhõn lờn trờn mọi vấn đề của nghiờn cứu
Nghiờn cứu nhằm mục đớch mang lại sự thuận tiện trong điều trị cho người bệnh
Mọi thụng tin trong nghiờn cứu đều được bảo mật
2.7. PHÂN TÍCH VÀ XỬ Lí SỐ LIỆU
Số liệu thu thập được quản lý và xử lý theo phương phỏp thống kờ y học, trờn phần mềm SPSS 16.0 với cỏc thuật toỏn:
- Tớnh số trung bỡnh và độ lệch chuẩn ( X ± SD) - So sỏnh 2 trung bỡnh bằng test t_Student. - So sỏnh 2 tỷ lệ bằng kiểm định χ2.
- Đỏnh giỏ mối liờn quan giữa hai biến số bằng phõn tớch đơn biến, sử dụng tỉ xuất chờnh với khoảng tin cậy 95% ( OR,95%CI).
Chương 3
KẾT QUẢ NGHIấN CỨU
Trong thời gian nghiờn cứu từ thỏng 2 đến thỏng 8 năm 2014, cú 42 trẻ hen phế quản dưới 5 tuổi và 30 trẻ khỏe mạnh dưới 5 tuổi đủ tiờu chuẩn được mời tham gia nghiờn cứu.
3.1. ĐẶC ĐIỂM CHUNG CỦANHểM NGHIấN CỨU3.1.1. Phõn bố bệnh nhõn hen phế quản theo tuổi 3.1.1. Phõn bố bệnh nhõn hen phế quản theo tuổi
Biểu đồ 3.1: Phõn bố bệnh nhõn theo tuổi
Nhận xột: Bệnh nhõn trong nhúm nghiờn cứu cú tuổi trung bỡnh là 2,4 ± 1,8 tuổi, trong đú tuổi nhỏ nhất là 13 thỏng, tuổi lớn nhất là 48 thỏng. Tỷ lệ trẻ HPQ dưới 2 tuổi là 42,86%.
3.1.2. Phõn bố bệnh nhõn hen phế quản theo giới
Biểu đồ 3.2: Phõn bố bệnh nhõn theo giới tớnh
Nhận xột: Hen phế quản gặp ở trẻ nam nhiều hơn trẻ nữ, với tỷ lệ nam là 69,28% và nữ là 35,72% . Tỷ lệ giữa nam/nữ là: 1,8/1.
3.1.3. Tiền sử mắc cỏc bệnh dị ứng của trẻ HPQ
Biểu đồ 3.3. Tiền sử cỏc bệnh dị ứng ở trẻ hen phế quản
Nhận xột: Trẻ HPQ cú tiền sử mắc cỏc bệnh dị ứng khỏ cao, trong đú viờm mũi dị ứng là cao nhất, chiếm tỷ lệ 67,12%. Ngoài ra trẻ cú thể cú cỏc bệnh dị ứng khỏc như mề đay, dị ứng thức ăn, dị ứng thời tiết, viờm kết mạc dị ứng, chàm, dị ứng thuốc.
3.1.4. Cỏc yếu tố nghi ngờ gõy khởi phỏt cơn hen cấp
Bảng 3.1. Cỏc yếu tố nghi ngờ khởi phỏt cơn hen cấp
Yếu tố nghi ngờ Số lượng %
Nhiễm virus đường hụ hấp 32 76,19
Tiếp xỳc dị nguyờn 19 45,23
Hoạt động gắng sức 24 24,57
Khúi thuốc 10 23,81
Thay đổi thời tiết 38 90,47
Nhận xột: Kết quả nghiờn cứu cho thấy trẻ nghi ngờ xuất hiện triệu chứng hen khi thay đổi thời tiết là 90,47%; 76,19% trẻ nghi ngờ xuất hiện triệu chứng hen khi nhiễm virus; 45,23% trẻ xuất hiện triệu chứng hen khi tiếp xỳc dị nguyờn; 24,57% trẻ xuất hiện triệu chứng hen khi hoạt động gắng sức; và 23,81% trẻ sống trong gia đỡnh cú người hỳt thuốc lỏ.
3.1.5. Phõn bố tuổi xuất hiện khũ khố lần đầu tiờn
Bảng 3.2. Tuổi xuất hiện đợt khũ khố lần đầu tiờn
Tuổi Số lượng Tỷ lệ %
<1 tuổi 6 14,29
1-2 tuổi 29 69,05
>2 tuổi 7 16,66
Cộng 42 100
Nhận xột: Tuổi xuất hiện khũ khố lần đầu tiờn chủ yếu gặp ở trẻ từ 1 - 2 tuổi, chiếm tỷ lệ 69%. Hơn 80% trẻ xuất hiện khũ khố trước 2 tuổi.
3.1.6. Tuổi chẩn đoỏn xỏc định hen phế quản
Bảng 3.3. Tuổi chẩn đoỏn xỏc định hen phế quản
<1 tuổi 3 7,14
1 - 2 tuổi 14 33,33
≥ 2 tuổi 25 59,52
Cộng 42 100
Nhận xột: Mặc dự cỏc trẻ xuất hiện dấu hiệu khũ khố từ rất sớm nhưng cỏc trẻ thường được chẩn đoỏn xỏc định hen sau 2 tuổi, với tỷ lệ 59,52%.
3.1.7. Phõn bố bậc hen của trẻ Bảng 3.4. Phõn bố bậc hen Bảng 3.4. Phõn bố bậc hen Bậc hen Số lượng % Bậc 1 5 11,90 Bậc 2 31 73,81 Bậc 3 6 14,29
Nhận xột: Trẻ HPQ nhập viện chủ yếu là hen bậc 2, chiếm tỷ lệ 73,81%. Chỳng tụi khụng gặp trẻ nào hen bậc 4.
3.1.8. Đặc điểm cơn hen cấp
Biểu đồ 3.4. Đặc điểm cơn hen cấp
Nhận xột: Nhúm bệnh nhi nhập viện vỡ cơn hen cấp nặng là 7 bệnh nhõn, chiếm tỷ lệ 16,66%. Nhúm bệnh nhi cú cơn hen cấp mức độ trung bỡnh là 32 bệnh nhõn chiếm tỷ lệ 76,19%. Nhúm bệnh nhi cú cơn hen cấp nhẹ là 3 bệnh nhõn chiếm tỷ lệ 7,14% .
3.2. TỶ LỆ NHIỄM VIRUS HỢP BÀO Hễ HẤP TRONG CƠN HEN CẤP 3.2.1. Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm virus hợp bào hụ hấp trong cơn hen cấp 3.2.1. Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm virus hợp bào hụ hấp trong cơn hen cấp
Biểu đồ 3.5: Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm RSV trong cơn hen cấp
Nhận xột: Trong 42 bệnh nhi được chỉ định làm xột nghiệm RSV trong dịch tỵ hầu cú 14 trẻ cho kết quả dương tớnh, chiếm tỷ lệ 33,3%.
3.2. 2.Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm RSV trong cơn hen cấp theo lứa tuổi
Bảng 3.5. Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm RSV trong cơn hen cấp theo lứa tuổi
Tuổi RSV < 2 Tuổi 2 – 5 Tuổi Tổng p Dương tớnh 9 (50%) 5 (20,8%) 14 p<0,05 Âm tớnh 9 (50%) 19 (79,2%) 28 Tổng 18 24 42
Nhận xột: Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm RSV trong cơn hen cấp ở trẻ dưới 2 tuổi là 50%, ở trẻ từ 2- 5 tuổi là 20,8%. Sự khỏc biệt cú ý nghĩa thống kờ với p< 0,05.
3.2.3.Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm RSV theo độ nặng nhẹ của cơn hen cấp
Bảng 3.6. Tỷ lệ trẻ HPQ nhiễm RSV theo độ nặng nhẹ của cơn hen cấp
Độ nặng RSV Nhẹ Vừa Nặng Tổng p Dương tớnh 0 10 (31,25%) 4 ( 57,14 %) 14 OR=3 Âm tớnh 3(100%) 22(68,75%) 3 (42,85%) 28 p<0,05 3 32 7 42
Nhận xột: Tỷ lệ nhiễm RSV ở trẻ cú cơn hen cấp nặng là cao nhất, chiếm 57,14% trẻ cú cơn hen nặng. Ở trẻ cú cơn hen cấp mức độ trung bỡnh, 31,25% cú nhiễm RSV. Trẻ cú cơn hen cấp nặng cú nguy cơ nhiễm RSV cao gấp 3 lần trẻ cú cơn hen cấp mức độ trung bỡnh, sự khỏc biệt cú ý nghĩa thống kờ với p <0,05.
3.3. TèM HIỂU SỰ THAY ĐỔI VỀ TẾ BÀO VÀ MỘT SỐ CYTOKINEỞ TRẺ HEN PHẾ QUẢN Cể NHIỄM VIRUS HỢP BÀO Hễ HẤP Ở TRẺ HEN PHẾ QUẢN Cể NHIỄM VIRUS HỢP BÀO Hễ HẤP
Bảng 3.7. Biến đổi bạch cầu trong cơn hen cấp
Bạch cầu Bỡnh thường Tăng
n % n %
Số lượng Bạch cầu 16 38,1 26 61,9
Bạch cầu ỏi toan 32 76,19 10 23,81
Bạch cầu trung tớnh 11 26,19 31 73,81
Nhận xột: Nhúm bệnh nhi cú tăng số lượng bạch cầu là 61,9%, tăng bạch cầu ỏi toan là 23,81% và tăng bạch cầu đa nhõn trung tớnh là 73,81% .
3.3.2. Biến đổi bạch cầu trong mỏu ở trẻ HPQ cú nhiễm RSV
Bảng 3.8. Biến đổi bạch cầu trong cơn hen cấp ỏ trẻ HPQ cú nhiễm RSV
RSV (+) RSV (-) p Bỡnh thường Tăng Bỡnh thường Tăng Số lượng Bạch cầu 6 8 10 18 >0,05
Bạch cầu ỏi toan 8 6 24 4 <0,05
Bạch cầu trung tớnh 4 10 7 21 >0,05
Nhận xột: Khụng cú sự khỏc biệt về số lượng bạch cầu, bạch cầu đa nhõn trung tớnh giữa trẻ HPQ cú nhiễm RSV và trẻ HPQ khụng nhiễm RSV. Trẻ HPQ cú nhiễm RSV cú tỷ lệ bạch cầu ỏi toan cao là 42,85%, trẻ HPQ khụng nhiễm RSV cú tỷ lệ bạch cầu ỏi toan cao là 14,29%. Sự khỏc biệt này cú ý nghĩa thống kờ với p <0,05.
3.3.3. Biến đổi một số tế bào miễn dịch trong mỏu ngoại vi
Bảng 3.9. Biến đổi một số tế bào miễn dịch trong mỏu ngoại vi
Chỉ số n = 42 %
2100 – 6200/ml 40 95,2 > 6200/ml 2 4,8 CD4 < 1300/ml 1 2,4 1300 – 4300/ml 41 97,6 >43 00/ml 0 0 CD8 <500 0 0 500 – 2000/ml 42 100 > 2000/ml 0 0 CD4/CD8 < 1,2 0 0 1,2 – 1,5 42 100 > 1,5 0 0 Nhận xột: Hầu hết cỏc tế bào TCD3, TCD4, TCD8 và tỷ số CD4/CD8 nằm trong giới hạn bỡnh thường.
3.3.4. Biến đổi một số tế bào miễn dịch trong mỏu ngoại vi ở trẻ HPQ cúnhiễm RSV nhiễm RSV
Bảng 3.10. Biến đổi một số tế bào miễn dịch trong mỏu ngoại vi ở trẻ HPQ cú nhiễm RSV Chỉ số RSV(+) RSV (-) p CD3 < 2100/ml 0 0 2100 – 6200/ml 13 27 p>0,05 > 6200/ml 1 1 CD4 < 1300/ml 0 1
1300 – 4300/ml 14 27 p>0,05 >43 00/ml 0 0 CD8 <500 0 0 500 – 2000/ml 14 28 > 2000/ml 0 0 CD4/CD8 < 1,2 0 0 1,2 – 1,5 14 28 > 1,5 0 0
Nhận xột: Khụng cú sự khỏc biệt về tế bào miễn dịch giữa trẻ HPQ cú nhiễm RSV và trẻ HPQ khụng nhiễm RSV.
3.3.5. Cỏc cytokine liờn quan đến tế bàoTh1
Bảng 3.11. Nồng độ cỏc cytokine trong mỏu ngoại vi cú liờn quan đến tế bào Th1 Cytokine RSV (+) n= 14 RSV (-) n =28 Nhúm chứng n =30 p IL-2 2,07 1,77 4,102 >0,05 TNF-α 4,32 6,5 3,613 >0,05 IFN-γ 42,15 62,14 77,561 >0,05 IL-12 1,02 0,55 0,27 >0,05
Nhận xột: Cỏc cytokine được bài tiết cú liờn quan đến tế bào Th1 khụng cú sự khỏc biệt giữa nhúm trẻ bỡnh thường và nhúm trẻ HPQ, đồng thời nồng độ cỏc cytokine này cũng khụng cú sự khỏc biệt giữa nhúm nhiễm RSV và nhúm khụng nhiễm RSV. Tuy nhiờn, nồng độ IFN-γ ở trẻ hen phế quản thấp hơn
nhúm chứng, đồng thời nồng độ IFN-γ ở trẻ HPQ cú nhiễm RSV thấp hơn
nhúm trẻ HPQ khụng nhiễm RSV (62,14 pg/ml so với 42,15 pg/ml; p=0,08), tuy nhiờn sự khỏc biệt này khụng cú ý nghĩa thống kờ.
3.3.6. Cỏc cytokine cú liờn quan đến tế bào Th2
Biểu đồ 3.6. Nồng độ cỏc cytokine trong mỏu ngoại vi cú liờn quan đến tế
bào Th2
Nhận xột:Nồng độ IL-4 và IL-5 ở trẻ HPQ cao hơn một cỏch cú ý nghĩa so với nhúm chứng ( p<0,05). Ở nhúm nhiễm RSV, cả nồng độ IL-4 và IL-5 ở nhúm nhiễm RSV đều cao hơn nhúm khụng nhiễm RSV, tuy nhiờn chỉ cú nhúm nhiễm RSV cú nồng độ IL-5 cao hơn một cỏch rú rệt so với nhúm khụng nhiễm RSV (3,95 pg/ml so với 2,29 pg/ml, p<0,05). Nồng độ IL-13 khụng cú sự khỏc biệt giữa nhúm nhiễm RSV, khụng nhiễm RSV và nhúm chứng.
3.3.7.Giỏ trị cỏc cytokine khỏc Bảng 3.12. Giỏ trị cỏc cytokine khỏc Cytokins RSV (+) RSV (-) Nhúm chứng p n= 14 n =28 n = 30 IL-8 21,25 14,05 7,59 >0,05 IL-10 7,72 6,347 5,29 <0,05
với nhúm chứng. Nhúm trẻ nhiễm RSV cú nồng độ IL-10 cao hơn nhúm trẻ khụng nhiễm RSV (7,72 pg/ml so với 6,35 pg/ml; p=0,02). Mặc dự nồng độ Il-8 ở trẻ HPQ cao hơn nhúm chứng nhưng sự khỏc biệt này khụng cú ý nghĩa thống kờ.
3.3.8. Mối liờn quan giữa cỏc cytokine cú liờn quan đến tế bào Th1 vớimức độ nặng cơn hen phế quản ở trẻ cú nhiễm RSV mức độ nặng cơn hen phế quản ở trẻ cú nhiễm RSV
Bảng 3.13. Mối liờn quan giữa cỏc cytokine cú liờn quan đến tế bào Th1 với mức độ nặng cơn hen phế quản ở trẻ cú nhiễm RSV
Mức độ nặng Cytokine Nhẹ n=0 Trung bỡnh n=10 Nặng n=14 P IL-2 2,14 2,02 >0,05 TNF-α 2,20 8,93 >0,05 IFN-γ 54,55 36,56 >0,05 IL-12 1,12 0,89 >0,05
Nhận xột: Nồng độ TNF - α ở nhúm hen nặng nhiễm RSV cao hơn nhúm hen mức độ trung bỡnh cú nhiễm RSV (8,93 pg/ml so với 2,2 pg/ml, p=0,12). Ngược lại, nồng độ IFN- γ ở nhúm hen nặng nhiễm RSV thấp hơn nhúm hen mức độ trung bỡnh nhiễm RSV (36,56 pg/ml so với 54,55 pg/ml, p= 0,065). Tuy nhiờn do cỡ mẫu bộ nờn sự khỏc biệt khụng cú ý nghĩa thống kờ.
3.3.9. Mối liờn quan giữa cỏc cytokine cú liờn quan đến tế bào Th2 vớimức độ nặng cơn hen phế quản ở trẻ cú nhiễm RSV mức độ nặng cơn hen phế quản ở trẻ cú nhiễm RSV
Bảng 3.14. Mối liờn quan của cytokine cú nguồn gốc từ tế bào Th2 với mức độ nặng cơn hen phế quản ở trẻ cú nhiễm RSV
Mức độ nặng Cytokine Nhẹ n=0 Trung bỡnh n=10 Nặng n=4 p IL-4 0,38 0,68 >0,05 IL-5 3,58 5,81 >0,05 IL-13 2,92 8,12 <0,05
Nhận xột: Kết quả nghiờn cứu cho thấy khụng cú sự khỏc biệt về nồng độ IL-4 và IL-5 ở trẻ HPQ cú nhiễm RSV mức độ trung bỡnh và nặng. Tuy nhiờn nồng độ IL-13 cao một cỏch cú ý nghĩa ở trẻ cú cơn hen cấp mức độ nặng so với cơn hen cấp mức độ trung bỡnh ( 8,12 pg/ml so với 2,92 pg/ml, p< 0,05). Điều này chứng tỏ IL-13 là yếu tố tiờn lượng mức độ nặng của cơn hen cấp.
3.3.10. Mối liờn quan của cỏc cytokine khỏc với mức độ nặng cơn henphế quản ở trẻ cú nhiễm RSV phế quản ở trẻ cú nhiễm RSV
Bảng 3.15. Mối liờn quan giữa cỏc cytokine với mức độ nặng cơn hen phế quản ở trẻ cú nhiễm RSV Mức độ nặng Cytokins Nhẹ n=0 Trung bỡnh n=10 Nặng n=4 P IL-8 15,75 23,52 >0,05