định cho các thơng số tiếp theo.
3.1.4. Ảnh hưởng của số lần chiết đến hoạt tính chống oxy hĩa của dịch chiết từ hải miên. hải miên.
Kết quả thí nghiệm ảnh hưởng của số lần chiết đến hoạt tính chống oxy hĩa và hàm lượng protein của dịch chiết từ hải miên được trình bày ở đồ thị hình 3.7.
Hình 3.7. Ảnh hưởng của số lần chiết khác nhau đến khả năng khử gố tự do DPPH (a), tổng năng lực khử (b) và hàm lượng protein (c) của dịch chiết hải
Số liệu trên đồ thị là giá trị trung bình của 3 lần thí nghiệm ± SD. Các ký tự khác nhau thể hiện sự khác biệt cĩ ý nghĩa thống kê (P<0,05).
Hình 3.7a cho thấy nồng độ DPPH bị khử TB 3 lần đo sau pha lỗng cho thấy rằng khi chiết ở các thời gian khác nhau điều cĩ xu hướng tăng dần, số lần chiết 3 (lần) cho nồng độ cao nhất, ta nhìn thấy rằng ở các thể tích dịch chiết khác nhau lại cho thấy sự tăng giảm khác nhau. Hình 3.7b cho thấy tổng năng lực khử dịch chiết TB 3 lần chiết cũng thể hiện sự thay đổi tăng dần ở các số lần chiết khác nhau, nhưng tổng năng lực tương đương số mg BHT/ml ở các thể tích khác nhau điều thây đổi tăng giảm khác nhau, đường thể hiện 3 lần chiết cĩ sự tăng rõ nhất ở các thể tích dịch chiết từ 0,2 đến 0,5 (ml). Như vậy, để dễ dàng nhận thấy được điều kiện chiết thích hợp nhất ta thực hiện tính IC50 cho khả năng khử gốc tự do của DPPH và tổng năng lực khử. Hình 3.7c cho thấy nồng độ protein 3 lần chiết sau pha lỗng, ở đồ thị này sự chênh lệch về nồng độ được thể hiện rất rõ rệt. Cùng ở một hàm lượng dịch mẫu là 0,3ml nhưng ở các thời gian khác nhau thì nồng độ protein cho được khơng khác nhau nhiều, giữa các số lần chiết 2,3,4,5 khơng cĩ sự khác biệt cĩ ý nghĩa thống kê (p>0,05), lần chiết thứ 1 so với 2,3,4,5 cĩ sự khác biệt cĩ ý nghĩa thống kê (p<0,05). Từ nhiệt độ lần chiết 1 đến 3 nồng độ protein tăng dần từ 1,477 đến 1,853 (mg/ml), nhưng từ 3 đến 5 cĩ xu hướng giảm dần từ từ xuống 1,844 (mg/ml) ở 5 lần chiết. Như vậy, ở số lần chiết 3 (lần) cho nồng độ protein cao nhất.
Trong điều kiện khả năng khử gốc tự do DPPH và tổng năng lực khử được phân tích với nhiều thể tích khác nhau, so sánh thường dựa vào giá trị IC50 . Giá trị
IC50 là thể tích dịch chiết cĩ khả năng khử được 50% gốc tự do DPPH hoặc tổng
năng lực khử trong điều kiện thí nghiệm được xác định từ mối quan hệ tuyến tính giữa thể tích dịch chiết và khả năng khử gốc tự do DPPH hoặc tổng năng lực khử. Kết quả tính được thể hiện ở hình 3.8.
Hình 3.8. Ảnh hưởng của số lần chiết đến hoạt tính chống oxy hĩa của dịch chiết từ hải miên (Spongia sp.) thể hiện qua giá trị IC50 (a): Khả năng khử gốc
tự do DPPH, (b): Tổng năng lực khử.
Số liệu trên đồ thị là giá trị trung bình của 3 lần thí nghiệm ± SD. Các ký tự khác nhau thể hiện sự khác biệt cĩ ý nghĩa thống kê (P<0,05).
Kết quả trên đồ thị hình 3.8. cho thấy khi tăng số lần chiết từ 1 thì khả năng khử gốc tự do và tổng năng lực khử thấp nhưng lên 2 và 3 thì khả năng khử gốc tự do và tổng năng lực khử của dịch chiết tăng (p<0,05). Tiếp tục tăng số lần chiết lên từ 3 lên 5 thì hoạt tính chống oxy hĩa khơng tăng nữa, cĩ xu hướng giảm dần
(p>0,05).
Điều này được giải thích là khi chiết ở lần chiết 1 thì ta chưa chiết triệt để vì lượng nước chiết đã đủ thẩm thấu vào bên trong nhưng chưa đủ thời gian để tách
chiết hết nên hoạt tính chống oxy hĩa thấp. Do đĩ cho hiệu suất chống oxy hĩa thấp. sau lần chiết thứ 2 và 3 thì thời gian thẩm thấu nhiều và hịa tan hết lượng chất chống oxy hĩa cĩ trong hải miên nên hiệu suất tăng mạnh. Nhưng sau lần chiết thứ 3 thì hiệu suất cĩ nguy cơ giảm dần là do chất chống oxy hĩa trong nguyên liệu đã được chiết triệt để sau lần chiết thứ 3.
Do vậy, ta chọn số lần chiết là 3 lần để làm điều kiện cho dịch chiết từ hải miên cĩ hoạt tính oxy hĩa cao nhất.