Phương pháp đánh giá các chỉ tiêu

2.3.3.1. Xác định hiệu suất bào chế vi nang

Hiệu suất bào chế vi nang được xác định theo công thức sau: HSBC =

m_tt

x 100 % m_lt

Trong đó

mtt: khối lượng vi nang thu được sau khi sấy (g).

mlt: khối lượng nguyên liệu ban đầu (gồm natri alginat, GPZ, Aerosil) (g). HSBC: hiệu suất bào chế vi nang (%).

2.3.3.2. Xác định hàm lượng dược chất có trong vi nang

Phương pháp định lượng GPZ trong vi nang

Qua tham khảo tài liệu, chúng tôi tiến hành định lượng dựa vào nguyên tắc đo quang, so sánh độ hấp thụ của mẫu chuẩn và mẫu thử ở bước sóng 223 nm [9].

 Mẫu thử:

Cân vi nang (tương ứng khoảng 10 mg GPZ), cho vào cối nghiền, tạo hỗn dịch với 15 ml dung dịch phosphat 7,4. Dùng khoảng 30 ml methanol (chia thành nhiều lần) để chuyển hỗn dịch vào bình định mức 50 ml, tiến hành siêu âm 2 lần, mỗi lần 15 phút, 2 lần siêu âm cách nhau 10 phút. Bổ sung methanol cho vừa đủ rồi ly tâm ở 5000 vòng/phút trong 5 phút. Dịch sau khi ly tâm được lọc qua màng lọc 0,45 μm. Hút 5 ml dịch lọc cho vào bình định mức 100 ml, bổ sung vừa đủ thể

tích bằng dung dịch đệm phosphat 7,4. Tiến hành đo quang ở bước sóng 223 nm (D_th).

 Mẫu chuẩn:

Cân chính xác 50 mg GPZ vào bình định mức 50 ml, thêm khoảng 30 ml methanol, siêu âm 15 phút, bổ sung vừa đủ methanol. Hút 5 ml dung dịch chuyển vào bình 25 ml, bổ sung vừa đủ bằng methanol để thu được dung dịch có nồng độ 200 μg/ml. Tiếp tục hút 5 ml dung dịch thu được, cho vào bình định mức 100 ml, bổ sung vừa đủ thể tích bằng dung dịch đệm phosphat 7,4. Tiến hành đo quang ở bước sóng 223 nm (Dch).

 Mẫu trắng: hút 5 ml methanol cho vào bình định mức 100 ml, bổ sung vừa đủ bằng đệm phosphat 7,4. Lắc đều.

 Tiến hành thử tương tự với mẫu vi nang không có dược chất để xác định ảnh hưởng của tá dược trong phép đo quang.

 Lượng dược chất trong vi nang được tính theo công thức sau: m_DC/VN =

D_th x

m_ch

Dch ₅

Hàm lượng dược chất có trong vi nang được tính theo công thức %DC =

m_DC/VN

x 100% mlt

Trong đó:

mDC/VN: khối lượng dược chất thực tế có trong mẫu thử (mg).

D_th : mật độ quang đo được của mẫu thử. Dch : mật độ quang đo được của mẫu chuẩn. m_ch : khối lượng chất chuẩn (mg).

m_lt : khối lượng vi nang đem đi định lượng (mg)

2.3.3.3. Xác định hiệu suất vi nang hóa

HSVNH =

m_DC/VN

x 100 % m_lt

Trong đó

m_DC/VN : lượng GPZ thực tế có trong mvnđem đi định lượng (mg).

m_lt : lượng GPZ có trong vi nang theo lý thuyết (mg).

(lượng GPZ tính theo tỉ lệ theo lý thuyết có trong mvn đem đi định lượng)

HSVNH : hiệu suất vi nang hóa (%).

2.3.3.4. Đánh giá hình dạng, kích thước vi nang

+ Hình dạng vi nang được đánh giá sơ bộ bằng quan sát cảm quan. + Kích thước được đánh bằng phân loại qua hệ thống rây.

+ Hình dạng, kích thước được đánh giá bằng kính hiển vi điện tử quét (S.E.M).

2.3.3.5. Thử khả năng giải phóng dược chất của vi nang

Thiết bị sử dụng: máy thử hòa tan sử dụng cánh khuấy + Môi trường: 900 ml đệm phosphat 7,4.

+ Tốc độ khuấy: 50 ± 2 vòng/phút. + Nhiệt độ: 37 ± 0,5o

C. + Thời gian thử: 7 giờ.

Tiến hành: Cân lượng vi nang tương ứng với 10 mg GPZ vào trong cốc thử

có chứa 900 ml môi trường hòa tan, sau khoảng thời gian nhất định hút 10 ml mẫu và bổ sung 10 ml môi trường hòa tan. Lượng mẫu vừa hút ra được đem đi lọc và đo quang ở bước sóng 223 nm (Dth).

Mẫu trắng: Dung dịch đệm phosphat 7,4.

Mẫu chuẩn: Cân chính xác khoảng 50 mg GPZ, hòa tan vào khoảng 40 ml

methanol trong bình định mức 50 ml. Siêu âm 15 phút cho GPZ tan hoàn toàn. Bổ sung vừa đủ methanol được dung dịch có nồng độ 1000 μg/ml. Hút 1 ml dung dịch trên cho vào bình định mức 100 ml, bổ sung dung dịch đệm phosphat cho vừa đủ 100 ml, lắc đều, đem đi đo quang ở bước sóng 223 nm (Dch).

Nồng độ GPZ trong mẫu hút thứ n được tính theo công thức C_n = D_th x C_ch + 10 x (C₀ + C₁ + … + C_n-1) Dch 900 Trong đó C_n : nồng độ hiệu chỉnh tại lần hút thứ n (μg/ml). Cn-1 : nồng độ hiệu chỉnh tại lần hút thứ n-1 (μg/ml). D_th : mật độ quang của mẫu thử rút ra tại lần n. D_ch : mật độ quang của mẫu chuẩn.

Phần trăm dược chất giải phóng tại thời điểm n được tính theo công thức %GPZ = mvn x hàm lượng DC/VN /900*1000

%GPZ = ^{900 x Cn} x 100%

m_vn x %DC x 1000 Trong đó

%GPZ :phần trăm GPZ giải phóng tại thời điểm thứ n (%) m_vn :lượng vi nang đem đi thử giải phóng (mg)

%DC :hàm lượng DC có trong vi nang (%)

Chương 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN