Pha dung dich chuẩn có nồng độ 10 μg/ml trong môi trường đệm phosphat pH 7,4. Quét phổ dung dịch trên bằng máy đo quang phổ hấp thụ UV - VIS trong khoảng bước sóng 200 – 400 nm. Từ đó xác định bước sóng tại đó xuất hiện đỉnh hấp thụ cực đại (λmax).
Cách pha dung dịch chuẩn có nồng độ 10 μg/ml: cân chính xác khoảng 100 mg GPZ cho vào bình định mức 100 ml. Thêm khoảng 80 ml methanol, siêu âm 15 phút cho GPZ tan hoàn toàn, bổ sung methanol vừa đủ 100 ml. Hút 1 ml dung dịch trên chuyển sang bình định mức 100 ml, bổ sung cho vừa đủ 100 ml bằng dung dịch đệm phosphat 7,4.
2.3.1.2. Xây dựng đường chuẩn glipizid trong môi trường đệm phosphat 7,4
+ Cân chính xác 100 mg glipizid hòa tan hết trong khoảng 80ml methanol, bổ sung methanol đủ 100 ml được dung dịch gốc có nồng độ 1000 µg/ml .
+ Từ dung dịch gốc pha loãng thành các dung dịch có nồng độ lần lượt là 2; 5; 8; 10; 12; 14; 16 µg/ml bằng môi trường đệm phosphat pH 7,4.
+ Đo mật độ quang (D) các dung dịch trên ở λmax (223nm).
+ Xây dựng phương trình hồi quy thực nghiệm, vẽ đồ thị tương quan giữa mật độ quang và nồng độ dược chất.
2.3.2. Phương pháp bào chế vi nang
Quy mô bào chế mỗi mẻ 3 – 5 g vi nang
+ Nghiền dược chất (DC), rây DC và Aerosil qua rây 0,125 mm. + Cân DC, Aerosil, alginat.
+ Ngâm alginat trong khoảng 40ml dung môi thích hợp (nước hoặc đệm phosphat pH 7,4) cho trương nở hoàn toàn.
+ Rây DC, Aerosil qua rây 0,125 mm. + Trộn đều bằng chày, cối.
+ Làm hỗn dịch đặc với lượng nước vừa phải (khoảng 5 – 10 ml). + Pha loãng hỗn dịch đặc bằng dung dịch alginat.
+ Khuấy từ đến khi tạo hỗn dịch đồng nhất (1h). + Rây hỗn dịch qua rây 0,125 mm.
+ Nhỏ giọt hỗn dịch thu được vào dd CaCl2 (nồng độ khảo sát từ 4% đến 10%) qua hệ thống bơm nhu động với đầu kim cỡ 25G, tốc độ thích hợp tùy độ đặc của hỗn dịch (thường từ 30 – 60 giọt/phút), khuấy nhẹ môi trường để tránh kết dính các vi nang.
+ Ủ khoảng 15- 20 phút. + Gạn, rửa bằng nước cất.
+ Để khô ở nhiệt độ phòng (12h) + sấy se bằng máy sấy tóc. + Sấy bằng tủ sấy 50oC, thỉnh thoảng đảo.