Thu nhận chế phẩm PPO thô từ nguyên liệu

Một phần của tài liệu Luận văn thạc sĩ sinh học nghiên cứu các đặc tính, ứng dụng và biện pháp kiềm chế tác hại của enzyme polyphenol oxidase từ thực vật (Trang 86)

Chúng tôi tiến hành tách chiết PPO và tạo chế phẩm PPO thô từ nguyên liệu lá trà xanh theo phương pháp được nêu trong mục 2.2.9 và kết quả được thể hiện trong bảng 3.19

Bảng 3.19. Kết quả thu nhận chế phẩm PPO thô từ lá trà nguyên liệu

Mẫu 1 Mẫu 2 Mẫu 3

Trọng lượng nguyên liệu khô ban đầu (g) 11,22 11,24 11,20 Trọng lượng chế phẩm PPO thô (g) 0,7939 0,7941 0,7900

Tỉ lệ CPE/NL (%) 7,08 7,06 7,05

Tỉ lệ TB CPE/NL (%) 7,06 ± 0,01 2

Hoạt độ chung CPE (UI/gCPE) 2287,78 2268,86 2277,90 Hoạt độ chung TB CPE (UI/gCPE) 2278,18 ± 9, 46

Hàm lượng protein (mg/gCPE) 23,30 24,96 23,52 Hàm lượng protein TB (mg/gCPE) 23,93 ± 0,90

Hoạt độ riêng CPE (UI/mg Pr-E) 95,20

Kết quả bảng 3.19 thể hiện rằng chúng tôi đã thu nhận được chế phẩm PPO thô từ nguyên liệu với tỉ lệ trung bình của chế phẩm enzyme thô/nguyên liệu khô là 7,06% và enzyme thể hiện hoạt độ chung trung bình là 2278,18 UI/gCPE và hoạt độ riêng là 95,20 UI/mg Pr-E. Chế phẩm PPO có hoạt độ riêng thấp hơn so với hoạt độ riêng của PPO trong nguyên liệu do PPO là enzyme oxi hóa khử dễ bị giảm hoạt độ trong quá trình tách chiết và sấy khô để tạo chế phẩm enzyme thô.

CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ

4.1. Kết luận

Từ những kết quả thu được trong luận văn đối chiếu với mục tiêu đã đề ra trong đề tài, chúng tôi rút ra một số kết luận sau đây: 4.1.1. Đã xác định các đặc tính của PPO từ lá trà như sau:

- Hoạt độ chung của PPO là 2222,64 UI/gNL và hoạt độ riêng 275,76 UI/mg-PrNL - pH tối ưu cho hoạt động của enzyme là 5,0

- Enzyme hoạt động ổn định ở pH tối ưu và kém bền ở pH 3,0 và pH 8,0 sau khi ủ trong thời gian 30 phút

- Nhiệt độ tối ưu cho hoạt động của enzyme là 30oC

- Enzyme hoạt động ổn định khi ủ ở 40oC và kém bền khi ủ trong khoảng nhiệt độ từ 60 oC – 80 oC trong 30 phút

- Nồng độ cơ chất (catechol) tối ưu cho hoạt động của enzyme là 50mM - Enzyme bị ức chế bởi một số hóa chất như acid ascorbic, acid citric, NaCl. Trong đó acid ascorbic ức chế hoạt động của PPO mạnh hơn acid citric và NaCl

- Thu được chế phẩm PPO thô từ lá trà với tỉ lệ trung bình của CPE thô/NL là 7,06% và enzyme thể hiện HđC TB là 2287,42 UI/gCPE và HđR là 95,20 UI/mg Pr-E

4.1.2. Ứng dụng được tính chất có lợi của enzyme PPO trong tạo màu cho sản phẩm trà đen do PPO xúc tác quá trình oxi hóa hợp chất polyphenol thành quinon tạo sẫm màu trong sản phẩm trà đen. Ngược lại trong quá trình chế biến trà xanh cần bất hoạt PPO bởi nhiệt độ cao nên không có sự hình thành màu đen và giữ được màu xanh và vị chát trong sản phẩm trà xanh

4.1.3. Đề xuất một số biện pháp kiềm chế tác hại của PPO gây hiện tượng hóa nâu trong rau củ và trái cây khi cắt gọt như: sử dụng nhiệt độ thấp hơn 4oC hay nhiệt độ cao 100oC, dùng dung dịch đệm acid citric – phosphate 0,1M ở pH thấp 2, 3, 4, sử dụng một số hóa chất ức chế hiện tượng hóa nâu như acid ascorbic, acid citric và NaCl 0,1M hay sử dụng enzyme ficin và bromelin.

- Tiến hành tinh sạch PPO và nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt động của PPO sau khi tinh sạch

- Khảo sát thêm một số biện pháp khác trong việc ức chế hiện tượng hóa nâu - Nghiên cứu thêm một số ứng dụng của PPO trong chế biến thực phẩm.

TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tài liệu Tiếng Việt

[1]. Đào Thị Ngọc Ánh (2009), Nghiên cứu phân loại, khả năng phân hủy DDT và sinh Laccase của chủng nấm sợi phân lập từ đất ô nhiễm hỗn hợp thuốc trừ sâu, Luận

văn thạc sĩ sinh học, Đại học Thái Nguyên.

[2]. Phan Thanh Bình, Nguyễn Văn Thường, Nguyễn Đình Tuyến, Đỗ Trung Sỹ, Hoàng Thị Bích, Trần Đình Toại (2009), Nghiên cứu sự biến đổi hoạt tính của enzyme

polyphenol oxidase trong quá trình lên men cacao, Tạp chí Hóa Học, T. 47 (6B), trang

281 – 285.

[3]. Lâm Thị Kim Châu, Nguyễn Thượng Lệnh, Văn Đức Chín, (2001), Thực tập lớn sinh

hóa, Nhà xuất bản Đại học quốc gia TPHCM.

[4]. Phạm Thị Ánh Hồng (2003), Kỹ thuật sinh hóa, Nhà xuất bản Đại học Quốc gia TPHCM

[5]. Lê Văn Việt Mẫn (chủ biên), Lại Quốc Đạt, Nguyễn Thị Hiền, Tôn Nữ Minh

Nguyệt, Trần Thị Thu Trà (2010), Công nghệ chế biến thực phẩm, Nhà xuất bản Đại học Quốc gia TPHCM

[6]. Nguyễn Văn Mùi (2011), Thực hành hóa sinh học, Nhà xuất bản Khoa học và kỹ thuật.

[7]. Ngô Đại Nghiệp (2002), Thu nhận, khảo sát một số đặc tính, ứng dụng của enzym ficin từ cây sung giống ficus, Luận văn thạc sĩ sinh học, Đại học Khoa học tự nhiên TPHCM.

[8]. Lương Hồng Quang (2004), Bài giảng: Các phương pháp bảo quản và chế biến trà, Khoa công nghệ thực phẩm, Đại học nông lâm TPHCM.

[9]. Đồng Thị Thanh Thu, (2008), Hóa sinh ứng dụng, Nhà xuất bản Đại học Khoa học tự nhiên TPHCM.

[10]. Lê Ngọc Tú và cộng tác, (2005), Hóa sinh công nghiệp, Nhà xuất bản khoa học kỹ thuật.

Tài liệu Tiếng Anh

[11]. Adinarayana Kunamneni, Antonio Ballesteros, Francisco J. Plou and Miguel Alcalde (2007), Fungal laccase – a versatile enzyme for biotechnological applications, Departamento de Biocatalisis, Instituto de Catalisis y Petroleoquimica,

CSIC, 28049 – Madrid, Spain.

[12]. Adinarayana Kunamneni, Francisco J. Plou, Antonio Ballesteros and Miguel Alcalde, Laccases and their applications: A patent review, Departamento de Biocatálisis, Instituto de Catálisis y Petroleoquímica, CSIC, Cantoblanco, 28049 Madrid, Spain.

[13]. Ahmet Yemenicioglu, Mehmet Özkan, Bekir Cemeroglu (1997) , Some Characteristics of Polyphenol Oxidase and Peroxidase from Taro (Colocasia antiquorum), Tr. J. of Agriculture and Forestry Vol 23, pp 425-430.

[14]. Alfred M. Mayer and Eitan Harel (1978), Review polyphenol oxidase in plants,

phytochemistry, vol 18, pp193-215.

[15]. A.M.C.N. Rocha, C.M.Brochado and A.M.M.B. Morais (1996), Influence of chemical treatment on quality of cut apple (cv. Jonagored), Journal of Food Quality,

21, pp 13-28.

[16]. A.M.C.N. Rocha and A.M.M.B. DE Morais (2005), Polyphenoloxidase activity

of minimally processes „Jonagored‟ apple (Malus Domestica), Journal of Food

Processing and Preservation, Vol 29, pp 8–19.

[17]. A.M.C.N Rocha, A.M.M.B. Morais, Characterization of polyphenol oxidase

(PPO) extracted from „Jonagored‟ apple, Escola Superior de Biotecnologia,

Universidade catolica Portuguesa, Rua Dr.Antonio Bernardino de Almeida, 4200072 Porto, Portugal.

[18]. Arnnok, P., Ruangviriyachai, C., Mahachai, R., Techawongstien, S. and Chanthai, S. (2010), Optimization and determination of polyphenol oxidase and

[19]. Bora, P.S. Holschuh, H.J, da Silva Vasconcelos, M.A (2004),

Characterization of polyphenol oxidase of soursop (Annona muricata L.) fruit and a

comparative study of its inhibition in enzyme extract and pulp, Cienc. Tecnol.

Aliment, Vol 4, No 4, pp 267-273.

[20]. Caodi Fang, Changzheng Wang, Youling L.Xiong, Kirk W. Pomper, (2006),

Extraction and characterization of polyphenol oxidase in Pawpaw (Asimina Triloba) fruit, Journal of Food Biochemistry, 31, pp 603-620.

[21]. Chang-Peng Yang, Shuji Fujita, Koei Kohno, Akiko Kusubayashi, MD. Ashrafuzzaman, and Nobuyuki Hayashi, Partial purification and characterization of

Polyphenol oxidase from banana (Musa sapientum L.) peel, Laboratory of Food

Science, Faculty of Agriculture, Saga University, Saga 840-8502, Japan.

[22]. Christiane Queiroz, Maria Lúcia Mendes Lopes, Eliane Fialho and Vera Lúcia Valente-Mesquita, (2008), Polyphenol oxidase: Characteristics and mechanisms of browning control, Derpartamento de Nutricao Basica experimental, Food Reviews

International, 24, pp 361-375.

[23]. Claudia POPA, Gabriela BAHRIM (2011), Streptomyces tyrosinase: production

and practical applications, Innovative Romanian Food Biotechnology, Vol 8, pp 1-7

[24]. Claus H, (2004), Laccase: structure, reactions, distribution. Micron Oxford England, Vol 35, p 93-96.

[25]. Dhirayos Wititsuwannakula, Nopphakaew Chareonthiphakornb, Mario Pacec, Rapepun Wititsuwannakulb (2002), Polyphenol oxidases from latex of Hevea brasiliensis: purification and characterization, Phytochemistry Vol. 61, pp 115– 121

[26]. Didem Sutay, (2003), Isolation, characterization and immobilization of polyphenol oxidase from Muberry (morus alba) leaf tissues, A thesis submitted to the

graduate school of natural and applied sciences of the Middle East Technical University, In partial fulfillment of the requirements for degree of master of science in the department of chemical engineering.

[27]. Edna C. Ramirez, John R. Whitaker and Victoria M. Virador, Polyphenol oxidase,

[28]. Emine Ziyan, Sule Pekyardimci (2001), Characterization of Polyphenol Oxidase

from Jerusalem Artichoke (Helianthus tuberosus), Turkey Journal of Chemistry, Vol

27, pp 217-225

[29]. Erhan Astarci, (2003), Production and biochemical characterization of polyphenol oxidase from Thermomyces Lanuginosus, A thesis submitted to the

graduate school of natural and applied sciences of the Middle East Technical University, In partial fulfillment of the requirements for degree of master of science in the department of biotechnology.

[30]. Fabienne Crumière (2000), Inhibition of enzymatic browning in food products using bio-ingredients, A thesis submitted to the graduate studies and research in

partial fulfillment of the requirement of the degree of Master of Science, McGill University Montreal, Québec.

[31]. Gisele Polete Mizobutsi, Fernando Luiz Finger, Rosilene Antônio Ribeiro, Rolf Puschmann, Ludmila Lafetá de Melo Neves, Wagner Ferreira da Mota (2010), Effect

of pH and temperature on peroxidase and polyphenoloxidase activities of litchi pericarp, Science of Agricultural (Piracicaba, Brazil), vol 67, pp 213-217. [32]. Gao

Jia, Wang Baogang, Feng Xiaoyuan, Tang Haoru, LI Wensheng and Zhang Kaichun (2011), Partial Properties of Polyphenol Oxidase in Sour Cherry (Prunus cerasus L.

CV. CAB) Pulp,World Journal of Agricultural Sciences 7 (4), pp 444-449

[33]. Greta Faccio, (2011), Discovery of oxidative enzymes for food engineering: Tyrosinase and sulfhydryl oxidase, Faculty of Biological and Environmental Sciences

– Division of Genetics, University of Helsinki, Finland.

[34]. Hülya Yağar, Ayten Sağiroğlu (2000), Partially purification and characterization of polyphenol oxidase of quince, Journal of Chemistry, 26, pp 97103.

[35]. Ikram Madani, Pat M. Lee, Lee Kong Hung (2011), Partial Purification and Characterisation of Polyphenol Oxidase from Hibiscus rosa–sinensis L., International

Conference on Biotechnology and Food Science IPCBEE, vol.7 (2011) IACSIT Press, Singapore.

[37]. James K. Palmer (1963), Banana Polyphenoloxidase: Preparation and Properties, Central Research Laboratories, United Fruit Company, Norwood, Massachusetts. [38]. Jyotsnabaran Halder, Prodip Tamuli and A.N. Bhaduri (1998), Isolation and characterization of polyphenol oxidase from indian tea leaf (Camellia sinensis),

Nutritional Biochemistry, 9, pp 75-80.

[39]. Keisuke Ikehata (1999), Characterisation of tyrosinase for the treatment of aqueous phenols, Department of Civil Engineering and Applied Mechanics McGill

University, Montreal.

[40]. Loera Corral Octavio, Perez Perez Ma. Cristina Irma Barbosa Rodriguez Juan Ricardo and Villasenor Ortega Francisco (2006), Laccases, Departmento de Ingenieria Bioquimica, Instituto Tecnologico de Celaya Av. Tecnologico esq. A. Garcia Cubas S/N, Col. Fovissste C.P.38010 Celaya Guanajuato, Mexico. [41]. Melda Zeynep Guray, (2009), Partial purfication and characterization of polyphenol oxidase from thermophilic bacillus sp, A thesis submitted to the graduate of

engineering and sciences of Izmir Institute of Technology in Partial Fulfillment of requirements for degree of master of science in biotechnology.

[42]. M. Oktay, I. Kufrevioglu, I. Kocacaliskan and H. Sakiroglu (1995),

Polyphenoloxidase from Amasya apple, Journal of food science, Vol 60, No 3. pp

494-496.

[43]. M. Umit Unal, Selin N. Yabaci, Aysun Sener (2011), Extraction, partial purification and characterization of polyphenol oxidase from tea leaf (Camellia sinensis), GIDA 36 (3), pp. 137-144

[44]. Oktay Arslan, Arzu Temur and I˙ srafil Tozlu (1998), Polyphenol Oxidase from Malatya Apricot (Prunus armeniaca L.), Journal of Agricultural and Food

Chemistry, Vol 46, pp 1239−1241.

[45]. Oktay Arslan, Mahmut Erzengin, Selma Sinan, Ozen Ozensoy, Purification of

mulberry (Morus alba L.) polyphenol oxidase by affinity chromatography and investigation of its kinetic and electrophoretic properties, Balikesir University

[46]. Per E. M. Siegbahm (2004), The catalytic cycle of catechol oxidase, J. Biol .Inorg Chemi, 9, pp 577-590.

[47]. Robert B. Barrett (2002), Characterisation of apricot polyphenol oxidase during

fruit development, Thesis submitted for the degree of master of applied science in the

university of Adelaide.

[48]. Ron Shin, Tim Froderman and William H. Flurkey (1996), Isolation and characterization of a mung bean leaf polyphenol oxidase, Phytochemistry, Vol 45, pp

15-21.

[49]. Ruhiye Yoruk and Maurice R. Marshall (2003), Physicochemical Properties and

Plant Polyphenol oxidase: A Review, Journal of Food Biochemistry, Vol 27, pp 361 -

422.

[50]. Tengku Adnin Bin Tengku Adnan, M.A. Augustin and Hasanah Mohd. Ghazali (1986), Polyphenoloxidase from Starfruit (Averrhoa carambola, L.), Pertanika Vol 9(2), pp 219 – 224.

[51]. T. N. Prabha and M. V. Patwardhan (1982), Purification and properties of polyphenoloxidase of mango peel (Mangifera indica), J. Biosci., Vol. 4, Number 1,

pp. 69-78.

[52]. Valdir Augusto Neves , Douglas Gatte Picchi and Maraiza Aparecida da Silva (2009), Some Biochemical Properties of Polyphenoloxidase from Spearmint (Mentha

arvensis), An internation Journal Brazilian Archives Of Biology and Technology, Vol.52, No 4, pp. 1001-1010.

[53]. Vernekar Madhavi and S.S. Lele (2009), Laccase: properties and applications,

BioResources 4(4), 1694-1717.

[54]. Véronique J. Barthet (1997), Polyphenol oxidase from cassava (Manihot Esculenta C.) Root : Extraction, Purification and Characterization, A Thais

submitted to the Faculty of Graduate Studies and Research in partial rulfillment of the requirements for the degree of Doctor of Philosophy, Department or Food Science

CHƢƠNG 5: PHỤ LỤC

5.1. Cách pha một số hóa chất 5.1.1. Cách pha dung dịch đệm [4,6]

*Dung dịch đệm acid citric - Na2HPO4 (pH 3, 4, 5)

- Dung dịch acid citric 0,1M: Hòa tan 10,504g acid citric (C6H8O7) trong 500ml nước cất (dung dịch a)

- Dung dịch Na2HPO4 0,2M: Hòa tan 71,7g Na2HPO4. 12H2O trong 500ml nước cất (dung dịch b) Dung dịch đệm acid citric - Na2HPO4 có pH khác nhau phụ thuộc vào số ml dung dịch a và số ml dung dịch b với tổng thể tích 100ml Acid citric 0,1M (dd a, ml) Na2HPO4 0,2M (dd b, ml) pH 79,45 20,55 3,0 61,45 38,55 4,0 48,50 51,50 5,0 *Dung dịch đệm phosphate (pH 6, 7, 8)

- Dung dịch NaH2PO4 0,2M: Hòa tan 27,8g NaH2PO4 trong 500ml nước cất (dung dịch a)

- Dung dịch Na2HPO4 0,2M: Hòa tan 71,7g Na2HPO4. 12H2O trong 500ml nước cất (dung dịch b) Dung dịch đệm phosphat có pH khác nhau phụ thuộc vào số ml dung dịch a và số ml dung dịch b với tổng thể tích 200ml NaH2PO4 0,2M (dd a, ml) Na2HPO4 0,2M (dd b, ml) Nước (ml) pH 87,7 12,3 100 6,0 39,0 61,0 100 7,0 5,3 94,7 100 8,0 5.1.2. Cách pha một số hóa chất khác [4,6]

- Thuốc nhuộm Bradford: Hòa tan 10mg Coomassive Brilliant Blue vào 50ml etanol 96o, thêm 100ml H3PO4 85%, định mức với nước cất đến 1000ml.

- Dung dịch Albumin 100 µg/ml: cân 10mg Albumin pha với nước cất thành 100ml - Dung dịch Na2HPO4 1/15M: hoà tan 5,96g Na2HPO4.12H2O trong nước thành 250 ml

- Dung dịch KH2PO4 1/15M: hoà tan 0,9072g KH2PO4 trong nước thành 100ml - Dung dịch đệm Sorensen 1/15M, pH 7.6: trộn 177ml dung dịch Na2HPO4 1/15M và 23 ml dung dịch KH2PO4 đo và chỉnh lại pH cho đúng.

- Dung dịch Casein 1%: đun sôi cách thuỷ 1g Casein trong đệm Sorensen đến tan hoàn toàn rồi sau đó định mức bằng đệm Sorensen cho đủ 100ml.

- Dung dịch TCA (tricloro acid) 10%: hoà tan 10g TCA trong nước cho đủ 100ml - Dung dịch NaOH 0,5N: hoà tan 10g NaOH trong nước cho đủ 500 ml

- Dung dịch HCl 0,2N: trộn 4,25ml HCl đậm đặc với nước cho đủ 250 ml

- Dung dịch tyrosin 20mM: khuấy nghiền 0,118 g tyrosin trong dung dịch HCl 0,2N vừa đủ 50ml

- Dung dịch tyrosin chuẩn 1mM: pha loãng 5 ml tyrosin 20mM trong HCl 0,2N thành 100 ml.

5.2.Xây dựng đƣờng chuẩn Bradford

Bảng 5.1. Tương quan giữa giá trị ∆OD với nồng độ albumin

Ống nghiệm số 1 2 3 4 5 6 Nồng độ protein (μg/ml) 0 10 20 30 40 50 OD595nm 0,051 0,070 0,084 0,099 0,110 0,125 ΔOD 0 0,019 0,033 0,048 0,059 0,074

Nồng độ protein (µg/ml)

Đồ thị 5.1. Sự tương quan giữa giá trị ∆OD và nồng độ albumin

Bảng 5.2 . Giá trị OD tương ứng khi xác định hàm lượng protein trong lá trà nguyên liệu

Mẫu 1 Mẫu 2 Mẫu 3

OD595nm 0,119 0,119 0,120

ΔOD 0,068 0,068 0,069

Hàm lượng protein trong nguyên liệu suy ra từ đường

chuẩn (µg/ml) 45,33 x 50 = 2266,5 45,33 x 50 = 2266,5 46 x 50 = 2300 Hàm lượng protein trong

nguyên liệu suy ra từ đường chuẩn (mg/ml)

2,27 2,27 2,30

5.3.Các số liệu thực nghiệm

Bảng 5.3. Giá trị OD tương ứng khi xác định hoạt độ PPO trong nguyên liệu

OD420nm KC OD420nm TN ∆OD

Mẫu 1 0,016 0,321 0,305

Mẫu 2 0,018 0,327 0,309

Mẫu 3 0,019 0,349 0,330

Bảng 5.4. Giá trị OD tương ứng khi xác định pH tối ưu cho hoạt động của PPO

pH OD420nm KC OD420nm TN ∆OD ∆OD TB

y = 0,0015x R2 = 0,9907 0 0 , 01 0 , 02 03 0 , 0 , 04 , 05 0 0 , 06 0 , 07 , 008 0 10 20 30 40 50 60

0,007 0,164 0,157 ± 0,002 0,010 0,170 0,160 4 0,011 0,250 0,239 0,238 ± 0,002 0,010 0,245 0,235 0,012 0,251 0,239 5 0,010 0,330 0,320 0,322 ± 0,006 0,010 0,327 0,317 0,011 0,340 0,329 6 0,015 0,232 0,217 0,218 ± 0,001 0,015 0,232 0,217 0,016 0,235 0,219 7 0,017 0,164 0,140 0,151 ± 0,003 0,019 0,172 0,153 0,017 0,170 0,160 8 0,018 0,099 0,081 0,090 ± 0,005 0,017 0,112 0,095 0,017 0,110 0,093

Anova: Single Factor SUMMARY

Groups Count Sum Average Variance se

3 3 3356,8905 1118,9635 116,5370 10,80 4 3 5038,8693 1679,6231 266,3703 16,32 5 3 6826,8551 2275,6184 1947,8330 44,13 6 3 4614,8410 1538,2803 66,5926 8,16 7 3 3201,4134 1067,1378 599,3332 24,48 8 3 1901,0601 633,6867 1664,8146 40,80 ANOVA

Source of Variation SS df MS F P-value F crit

Between Groups 4919341,122 5 983868,2244 1266,3807 6,70064E-16 3,105875 Within Groups 9322,961539 12 776,9134616

Total 4928664,083 17

Bảng 5.5. Giá trị OD tương ứng khi xác định ảnh hưởng của pH đến độ bền của PPO

0,010 0,052 0,042 ± 0,003 0,008 0,055 0,047 4 0,010 0,159 0,149 0,154 ±0,006 0,012 0,172 0,160 0,010 0,163 0,153 5 0,011 0,331 0,320 0,322 ±0,002 0,011 0,332 0,321 0,012 0,336 0,324 6 0,015 0,236 0,221 0,219 ±0,005 0,017 0,240 0,223 0,018 0,231 0,213 7 0,019 0,172 0,153 0,155 ±0,007 0,020 0,170 0,150 0,020 0,183 0,163 8 0,019 0,118 0,099 0,100 ±0,002 0,018 0,116 0,098 0,019 0,121 0,102

Anova: Single Factor

SUMMARY

Groups Count Sum Average Variance se

3 3 954,0636042 318,0212014 349,61106 18,70 4 3 3265,017668 1088,339223 1548,2775 39,35 5 3 6819,787986 2273,262662 216,42589 14,71 6 3 4643,109541 1547,70318 1398,4442 37,40 7 3 3293,286219 1097,762073 2314,0922 48,11 8 3 2113,074205 704,3580683 216,42589 14,71 ANOVA

Source of Variation SS df MS F P-value F crit

Between Groups 6943231,211 5 1388646,242 1378,7019 4,02872E-16 3,105875 Within Groups 12086,55371 12 1007,212809

Total 6955317,765 17

Một phần của tài liệu Luận văn thạc sĩ sinh học nghiên cứu các đặc tính, ứng dụng và biện pháp kiềm chế tác hại của enzyme polyphenol oxidase từ thực vật (Trang 86)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(121 trang)