Phương pháp sinh khí in vitro ra đời dựa trên nền tảng của in vitro Tilley và
Terry (1963), sự tiêu hóa VSV dạ cỏ có thể quan sát được trong điều kiện ống nghiệm dưới sự tham gia của VSV dạ cỏ trong môi trường nước bọt nhân tạo. Kết quả của sự lên men này có thể được quan sát từ thức ăn còn lại sau khi được tiêu hóa ở phương pháp in vitro Tilley và Terry (1963) hoặc từ sản phẩm sinh ra của sự
tiêu hóa ở phương pháp sinh khí in vitro của Menke et al, (1979). Mặc dù phương
pháp in vitro của Tilley và Terry (1963) đã được đánh giá và cho thấy có nhiều thuận lợi trong ước lượng thức ăn như ít tốn chi phí, nhanh nhưng nó vẫn có những hạn chế nhất định: 1) yêu cầu phải có gia súc để cung cấp dịch dạ cỏ; 2) cách đo lường vật chất không bị tiêu hóa phức tạp có thể dẫn đến sai số lớn, đặc biệt các loại thức ăn có chứa tannin cao, do tannin có thể tan trong môi trường ủ của in vitro
nhưng đây lại là thành phần không thể tiêu hóa (Makkar, 2004). Từ những hạn chế
trên Menke et al, (1979) đã đề nghị sử dụng phân làm nguồn VSV thay thế cho dịch dạ cỏ trong phương pháp tiêu hóa in vitro và giới thiệu phương pháp sinh khí in
vitro, thay thế cho việc đo trọng lượng trong phương pháp in vitro Tilley và Terry
(1963) bằng sựđo lượng khí sinh ra từ sự lên men. Từđó sinh khí in vitro được ra
đời bởi Menke et al, (1979). Kỹ thuật này phát hiện được các sai khác nhỏ trong một số loại thức ăn và cho phép lấy mẫu lặp lại thường xuyên hơn so với các phương pháp xác định tỷ lệ tiêu hóa in vitro.