... enzyme gii hn thớch hp cchoa k thut PCR - RFLP xỏc nh kiu genHBV ỏnh giỏ c hiu v s phự hp ca k thut PCR - RFLP xỏc nh kiu genHBV so vi k t hut c trỡnh t gen CHNG TNG QUAN TI LIU 1.1 Tỡnh hỡnh ... ng v trớ ct trờn b genHBV ca enzyme EcoRI (Hỡnh 1.2) Chiu di ca b gen thay i tựy theo tng kiu gen khỏc nhau, [11], [23] 12 Hỡnh 1.2 S cu trỳc cỏc genb gen ca HBV B gen ca HBV c t chc thnh n ... kiu gen C Khi so sỏnh vi phng phỏp PCR - RFLP thỡ cú mu l kiu gen A, 11 mu kiu gen B v 37 mu kiu gen C Kt qu c trỡnh t v phõn tớch loi cho thy ch cú mu l kiu gen A, 14 mu kiu gen B v 37 mu kiu gen...
... ứng dụng kỹthuậtPCR – RFLPxácđịnhkiểu gene vi rút viêm gan B” với mục tiêu: Hoàn thiện qui trình kỹthuậtPCR – RFLPxácđịnhkiểu gene HBV Bước đầu xácđịnh phân bố kiểu gene HBV nhóm bệnh ... chế kỹthuật miễn dịch kinh điển Các kỹthuật sinh học phân tử bao gồm xét nghiệm HBV – DNA : kỹthuật PCR, Realtime – PCR (PCR với thời gian thực) bDNA (khuyếch đại tín hiệu), xácđịnhkiểu gene ... pháp PCR đa mồi + Phương pháp PCR – RFLP Tuy nhiên phương pháp có ưu nhược điểm riêng Phương pháp giải trình tự gene, lai pha rắn, kỹthuật Realtime – PCRPCR đa mồi có ưu điểm xácđịnhkiểu gene...
... ứng dụng kỹthuậtPCR – RFLPxácđịnhkiểu gene vi rút viêm gan B” với mục tiêu: Hoàn thiện qui trình kỹthuậtPCR – RFLPxácđịnhkiểu gene HBV Bƣớc đầu xácđịnh phân bố kiểu gene HBV nhóm bệnh ... kỹthuậtPCR – RFLPxácđịnhkiểu gene vi rút viêm gan B Hình ảnh đối chiếu GenBank genotype B Hình diagram genotype C www.khotrithuc.com 21 Nghiên cứu ứng dụng kỹthuậtPCR – RFLPxácđịnhkiểu ... xácđịnhkiểu gene vi rút viêm gan B 2.3 Các phƣơng pháp xácđịnhkiểu gene HBV Có nhiều phương pháp nghiên cứu dùng việc xácđịnhHBV genotypes giải trình tự chuỗi (sequencing), PCR - RFLP (Restriction...
... chế kỹthuật miễn dịch kinh điển Các kỹthuật sinh học phân tử bao gồm xét nghiệm HBV – DNA : kỹthuật PCR, Realtime – PCR (PCR với thời gian thực) bDNA (khuyếch đại tín hiệu), xácđịnhkiểu gene ... kiểu gene vi rút viêm gan B” với mục tiêu: Hoàn thiện qui trình kỹthuậtPCR – RFLPxácđịnhkiểu gene HBV Bước đầu xácđịnh phân bố kiểu gene HBV nhóm bệnh nhân nghiên cứu Footer Page of 113 ... trình tự gene xem có nhiều ưu điểm bật bên cạnh việc xácđịnh trình tự chuỗi Nucleotids genHBV để từ so sánh với thư viện genxácđịnhHBV genotypes mà dựa vào kết giải trình tự xácđịnh số dạng...
... genome enzyme giới hạn phải thiết kế probe thích hợp việc phân tích đa hình DNA kỹthuậtRFLP ngƣời ta đƣa kỹthuậtPCR – RFLPPCR – RFLPkỹthuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹthuật ... prolactin Thực phẩm: Xácđịnh tác nhân gây bệnh vi khuẩn vius có mẫu thực phẩm Dùng chứng nhận sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên sản phẩm chuyển gen 2.5 Giới thiệu kỹthuậtRFLPkỹthuậtPCR – RFLP ... 2.3.2.6 Các vấn đề thƣờng gặp PCR phƣơng pháp khắc phục .16 2.3.2.7 Ứng dụng PCR 18 2.4 Giới thiệu kỹthuậtRFLPkỹthuậtPCR – RFLP .18 2.4.1 KỹthuậtRFLP ( restricton fragment...
... tây thành phố Đà Lạt kỹthuật ELISA - Phát virus PLRV kỹthuật RT -PCR - Giải trình tự đoạn gen có đƣợc sau thực phản ứng RT -PCR để xácđịnh nguồn gốc đoạn gen 1.3 Yêu cầu - Thực phản ứng ELISA để ... Đây kỹthuật nhạy đơn giản, cho phép xácđịnh kháng nguyên kháng thể nồng độ thấp (0,1 ng / ml) So với với kỹthuật miễn dịch khác kỹthuật rẻ tiền an toàn mà đảm bảo độ xác ELISA đƣợc dùng để xác ... phƣơng pháp RT -PCR Các mẫu sau đƣợc kiểm tra kỹthuật ELISA đƣợc chọn để thực tiếp phản ứng RT -PCR Trong đề tài thực phản ứng RTPCR đối tƣợng virus PLRV Tiêu chuẩn chọn mẫu để thực RT -PCR - Dƣơng...
... genome enzyme giới hạn phải thiết kế probe thích hợp việc phân tích đa hình DNA kỹthuậtRFLP ngƣời ta đƣa kỹthuậtPCR – RFLPPCR – RFLPkỹthuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹthuật ... prolactin Thực phẩm: Xácđịnh tác nhân gây bệnh vi khuẩn vius có mẫu thực phẩm Dùng chứng nhận sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên sản phẩm chuyển gen 2.5 Giới thiệu kỹthuậtRFLPkỹthuậtPCR – RFLP ... 2.3.2.6 Các vấn đề thƣờng gặp PCR phƣơng pháp khắc phục .16 2.3.2.7 Ứng dụng PCR 18 2.4 Giới thiệu kỹthuậtRFLPkỹthuậtPCR – RFLP .18 2.4.1 KỹthuậtRFLP ( restricton fragment...
... 2.3.2.6 Các vấn đề thƣờng gặp PCR phƣơng pháp khắc phục .16 2.3.2.7 Ứng dụng PCR 18 2.4 Giới thiệu kỹthuậtRFLPkỹthuậtPCR – RFLP .18 2.4.1 KỹthuậtRFLP ( restricton fragment ... dựng qui trình khuyếch đại PCR cắt enzyme giới hạn 24 3.4.2.5 Ứng dụng PCR phát gen thụ thể prolactin xácđịnh tần số kiểugen PRLR mẫu phân tích 27 PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ... Kết việc thực phản ứng PCR 33 4.2.1 Kết thực phản ứng PCR theo qui trình khác 33 4.2.1.1 Qui trình phản ứng PCR theo nhiệt độ bắt cặp khác .33 48 4.2.1.2 Qui trình phản ứng PCR theo...
... BB: Các kiểugen PRLR 4.4 Tần số xuất kiểugen quần thể Sau xây dựng thành công qui trình thựckỹthuậtPCR qui trình cắt enzyme hiệu tiến hành áp dụng kết đạt đƣợc vào việc xácđịnh diện gen thụ ... thực phản ứng PCR thu đƣợc 23 mẫu có xuất gen PRLR Xử lý 23 mẫu với AluI theo qui trình bảng 3.3 để xácđịnhkiểugen Kết đƣợc trình bày nhƣ bảng 4.8 sau: Bảng 4.8: Tỉ lệ xuất kiểugen PRLR Kiểu ... Cả ba kiểugen thụ thể prolactin xuất giống Yorkshire Tần số kiểugen BB chiếm tỉ lệ cao (50 %), kiểugen AB chiếm tỉ lệ 23,3 %, kiểugen AA chiếm tỉ lệ thấp (3,33 %) Các heo nái có kiểugen AA...
... ±0,11 ±7,46 33 4.2 Kết việc thực phản ứng PCR 4.2.1 Kết thực phản ứng PCR theo qui trình khác 4.2.1.1 Qui trình phản ứng PCR theo nhiệt độ bắt cặp khác Để tiến hành xácđịnh nhiệt độ bắt cặp tối ... 4.2.1.2 Qui trình phản ứng PCR theo nồng độ primer khác Để tiến hành xácđịnh nồng độ primer thích hợp cho phản ứng PCR phát gen thụ thể prolactin, tiến hành thực phản ứng PCR mẫu da tai Mỗi qui ... Các giếng diện sản phẩm PCR 1’ 2’ 3’ 4’ Sản phẩm PCR Hình 4.2: Kết điện di sản phẩm PCR theo qui trình nhiệt với nồng độ gel LMP 1,5 % Giếng 1, 2, 3, 4: Sản phẩm PCRthực theo qui trình 35 4.2.1.2...
... prolactin Thực phẩm: Xácđịnh tác nhân gây bệnh vi khuẩn vius có mẫu thực phẩm Dùng chứng nhận sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên sản phẩm chuyển gen 2.5 Giới thiệu kỹthuậtRFLPkỹthuậtPCR – RFLP ... giống xácđịnh yếu tố gây bệnh trồng Dùng chuẩn đoán bệnh công tác chăn nuôi, chọn giống Dùng phát gen dự tuyển suất sinh sản chăn nuôi heo nhƣ việc xácđịnhgen thụ thể estrogen, gen halothan, gen ... hình thành allen đƣợc định nghĩa lại nhƣ sau: “ Allen 12 dạng khác genđịnh vị locus nhiễm sắc thể qui định tính trạng thể sinh vật” Allen sở để xácđịnh tính đa hình genGen có nhiều allen tính...
... 2 Xácđịnh qui trình phản ứng PCR phù hợp Thực phản ứng PCR mẫu ly trích đƣợc Xử lý enzyme mẫu có diện gen PRLR Xácđịnh tần số xuất kiểugen PRLR mẫu PHẦN 2: TỔNG QUAN ... 90 bp đƣợc xácđịnh đa hình Những sản phẩm PCR có diện băng 90 bp đƣợc xácđịnh alen A, băng 110 bp đƣợc xácđịnh alen B Gen PRLR có tính đa hình cao Ở dòng heo khác xử lý enzyme AluI gen PRLR ... nhiễm sắc thể 16 Gen liên kết chặt chẽ với ba marker nằm locus: S0006 (LOD – 10,29), GHR (6,35), S0077 (3,23) Để xácđịnh đƣợc tính đa hình gen PRLR, Vincent cộng dùng kỹthuậtPCR – RFLP (polymerase...
... genome enzyme giới hạn phải thiết kế probe thích hợp việc phân tích đa hình DNA kỹthuậtRFLP ngƣời ta đƣa kỹthuậtPCR – RFLPPCR – RFLPkỹthuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹthuật ... prolactin Thực phẩm: Xácđịnh tác nhân gây bệnh vi khuẩn vius có mẫu thực phẩm Dùng chứng nhận sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên sản phẩm chuyển gen 2.5 Giới thiệu kỹthuậtRFLPkỹthuậtPCR – RFLP ... 2.3.2.6 Các vấn đề thƣờng gặp PCR phƣơng pháp khắc phục .16 2.3.2.7 Ứng dụng PCR 18 2.4 Giới thiệu kỹthuậtRFLPkỹthuậtPCR – RFLP .18 2.4.1 KỹthuậtRFLP ( restricton fragment...
... Kết xácđịnh tỷ lệ phân lập E coli loại bệnh phẩm NTBV, phân bố E coli - Lấy bệnh phẩm: tuỳ theo loại bệnh phẩm mà có kỹthuật lấy khác - Nuôi cấy xácđịnh E coli - Các bớc tiến hành làm PCR ... đợc tiến hành xácđịnh loại gen độc lực: gen tiêu chảy, gen afa, sfa gian pap thì: - Có chủng E coli mang loại gen afa, sfa pap (E.coli phân lập từ BP mủ) - Có chủng E coli mang loại gen sfa pap ... lệ thấp Xácđịnh tỷ lệ E coli NTBV mang gen độc lực: Có chủng mang loại gen afa, sfa pap Có chủng mang loại gen afa sfa Có chủng mang loại gen sfa afa Không có chủng E coli mang gen TC -...
... sát kiểugenHBV đư c th c b ng phương pháp PC -giải trình t cỡ mẫu 894 bệnh nhân, tác giả ghi nhận có kiểugen B, C D, nhiên kiểugen D có mẫu chiếm 0,11%, lại kiểugen B với 678 mẫu kiểugen ... lệ kiểugen B chiếm xấp xỉ 85%, kiểugen C chiếm xấp xỉ 15% hư vậy, tỷ lệ nhiễm kiểu g n /C đ vào khoảng lớn 5/1 hư vậy, nói r ng kiểugen B C hai kiểugen nhiễm chiếm đa ố chủng tộc châu Á; kiểu ... Đắk-lắk ghi nhận kiểugen B 63 mẫu, kiểugen C chiếm 21 mẫu nghĩa tỷ lệ nhiễm kiểugen B/C vào khoảng /1 ; đồng thời có 16 mẫu nhiễm hai kiểugen B C[1] 200 bệnh nhân nhiễm HBV bệnh viện Đa khoa...