... liệu dNTP, nước, dung dịch đệm, 1.5 Các lĩnh vực ứng dụng phảnứngPCRPhảnứngchuỗi trùng hợp PCR, từ Kary Mullis đề xuất hoàn thiện, có ứng dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực khác nhau, khoa học ... tự nucleotit Hình 7.3 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR (Đinh Duy Kháng, 2002) 1.2 Phảnứng RT -PCR (PCR ngược) 1.2.1 Nguyên lí Thực chất RT -PCR phảnứng nhân trình tự từ khuôn ARN, gồm giai đoạn: ... để xác định có mặt đoạn ADN nhân PCR 97 Hình 7.4 Hình ảnh điện di sản phẩm RT -PCR (Đinh Duy Kháng, 2002) 1.4 Những yếu tố ảnh hưởng đến phảnứngPCR Kết phảnứngPCR chịu ảnh hưởng yếu tử như:...
... tạo dòng sau Nguyên tắc PCR hai giai đoạn hai phảnứngPCR xảy liền nhau, phảnứng thứ PCR phát sinh sợi khuôn mẫu tương ứng với gen tổng hợp sau khuếch đại phảnứngPCR lần thứ hai (Hình 3.10) ... DNA Hình 3.2 Sơ đồ phảnứngchuỗi polymerase Hình 3.3 Các chu kỳ kỹ thuật PCR Có ba kỹ thuật PCR thông dụng: PCR chuẩn, PCR mỏ neo PCR đảo ngược Trong PCR chuẩn (standard PCR) , DNA khuôn mẫu ... real-time PCR cho phép phát định lượng sản phẩm khuếch đại tiến trình phảnứng diễn dựa sở phảnứng huỳnh quang, tăng lên số lượng DNA tương ứng với tăng lên tín hiệu huỳnh quang Trong real-time PCR, ...
... Phải có quy trình hướng dẫn cụ thể thực giai đoạn chu kỳ PCRPhảnứngchuỗi polymerase (PCR) với kỹ thuật :PCR chuẩn ,PCR neo ,PCR ảo PCR chuẩn: DNA mục tiêu mở dây đơi,sau primer tác động hai ... dụng cụ cho phảnứng PCR: Thực chất thiết bị dùng để tiến hành phảnứngPCR cần đáp ứng u cầu thay đổi nhiệt độ thật nhanh xác Các thiết bị cải tiến để tránh tối đa bốc nước q trình phản ứng, hay ... PCR kỹ thuật xử lý in vitro chuỗi mã hố di truyền DNA, dựa sở phảnứng sinh tổng hợp DNA theo trình tự sau: Biến thành dây đơn (denature) Phảnứng primer gắn vào đầu dây chuỗi mã đối xứng...
... nước nóng Dung dịch đệm cho phảnứng PCR, thường chứa muối đệm Tris HCL 10 mM, KCL 50Mm MgCl�2 1.5mM Ngoài dung dịch đệm PCR chứa 0.001% BSA hay Gelatine số phảnứngPCR thêm tween hay formamide ... ống nghiệm làm phảnứngPCR men Uracil N Glycosylase (UNG) men có khả phá hủy sản phẩm PCR ngoại nhiễm trước phảnứngPCR xảy ra[4] Chính nhờ việc sử dụng UNG mà thử nghiệm PCR chẩn đoán phát ... phẩm chất ức chế phảnứngPCR Trong trường hợp kết PCR âm tính, âm tính giả Vì vấn đề sửa soạn bệnh phẩm cho thử nghiệm PCR phải coi trọng, đặc biệt phòng thí nghiệm áp dụng PCR để chẩn đoán...
... gid - Phan irng PCR va xiir li ket qua: Tien hanh thu nhan DNA tir cac mau tang sinh theo phuang phap da trinh bay cac tai lieu trudc [10, 11] lam khudn cho phan img PCRPhan irng PCR dugc thuc ... san phSm d 10°C KSt qua cua phan ijmg PCR dugc danh gia bang dien di san phim PCR tren gel agarose 1,5% - Phuong phap dien di DNA: pi san phim cua phan irng PCR duac ki6m tra bing phuang phap dien ... den dugc diing lam khudn cho phan img PCR vdi cap mdi 16 S/F San phim PCR vdi cap mdi 16 S/F dugc tinh sach vdi kit tinh sach DNA Invitrogen cung cip San pham PCR vdi doan gen 16S rDNA dugc giri...
... real-time PCR of Page of which two were positive by pp65 antigenemia assay and 12 were negative by both real-time PCR and pp65 antigenemia assay One donor was positive only by realtime PCR Seventeen ... at -20°C until used These extracted DNA samples were used for quantitative PCR assays 10 Real Time PCR Assay Real-time PCR targeting the morphologically transforming region mtr II sequence was ... doi:10.1186/1743-422X-7-322 Cite this article as: Madhavan et al.: “pp65 antigenemia and real time polymerase chainreaction (PCR) based-study to determine the prevalence of human cytomegalovirus (HCMV) in kidney donors...
... sát điều kiện phản ứng: nhiệt độ bắt cặp, nồng độ MgCl2, hàm lượng mồi Nhằm đạt phảnứngPCR tốt với tính đặc hiệu cao, tiến hành khảo sát hiệu chỉnh điều kiện phảnứng Để cho kết PCR tốt cho qui ... hành: - PCR tiến hành DNA vi khuẩn E sakazakii chuẩn chứng nội thêm vào PCR mastermix sau sản phẩm PCR chạy điện di Thực PCR lần lặp lại cho mẫu có không sử dụng chứng nội chung mồi - Bên cạnh PCR ... sakazakii PCR 3.1.1 Chọn lựa qui trình PCR Kết chạy PCR với nồng độ primer 10 µM µM cho PCR1 PCR2 cho thấy sản phẩm 469 bp (PCR1 ) gel điện di rõ, đẹp, không phát sản phẩm khác, sử dụng 10 µM primer PCR2 ...
... PCR (Polymerase Chain Reaction) PCRphảnứng tổng hợp dây chuyền dùng để khuyếch đại trình tự DNA đích dựa bắt cặp đặc hiệu mồi với DNA mạch khn hoạt tính kéo dài cuả enzyme polymerase Phảnứng ... Hố chất mơi trường 2.1.2.1 Hố chất dùng cho phảnứngPCR + Đệm TE (10mM, Tris-HCl, 1mM EDTA): dùng cho q trình tách chiết DNA khn cho phảnứngPCR + PCR mix cho tiêu: B cereus, C perfringens, ... PhảnứngPCR gồm nhiều chu kỳ, chu kỳ gồm bước tương ứng với thay đổi nhiệt độ phản ứng, theo đó, số lượng DNA ngày tăng Q trình minh họa Hình 2.2 Hình [57] Hình 2.2 Các bước phảnứngPCR Hình...
... luật chung, thông thường phải xác đònh cho phảnứng - Số lượng chu kỳ phản ứng: Số lượng chu kỳ phảnứngPCR thông thường không vượt 40 chu kỳ Do phảnứngPCR diễn tiến qua giai đoạn, giai đoạn đầu ... Dòch phía sử dụng làm khuôn DNA cho phảnứngPCR 2.7 Điều kiện phảnứngPCR phát E coli PhảnứngPCR thực thể tích 25l với thành phần sau: - d H2O 13l - Đệm PCR 10X 2,5l - dNTP 10X 2,5l - MgCl2 ... trường nuôi cấy rửa tế bào trước tiến hành phảnứngPCR 4.4 Các nghiên cứu ứng dụng PCR phát vi sinh vật thực phẩm [10] Hiện nay, có nhiều ứng dụng phảnứngPCR kit thương mại dùng để phát đặc hiệu...
... đề kháng thuốc Rifampin Vì phảnứngPCR ta cần phải dùng giây mồi (5 primers) xác định biến dạng gen rpoG Trở ngại dùng PCR Mặc dầu phảnứngPCR nhanh (3-4 giờ) phảnứng cần dùng DNA tinh khiết ... thông dụng PCR RT -PCR dùng DNA mẫu (DNA template) khoảng 1-10 pg cho phảnứng Kết phảnứng lên ảnh (monitor) máy vi tính chi tiết kiện (data) giữ lại ổ cứng (hard drive) máy Như dùng RT -PCR có kết ... sequencing PCR Nếu dùng ug DNA khoảng tiếng đồng hồ có đến mg DNA tinh khiết để dùng cho thử nghiệm mà khỏi phải thời nuôi cấy vi trùng ly trích DNA Hiện qPCR (quick PCR) gọi RT -PCR (Real Time PCR) ...
... týp gene tổ hợp BCR-ABL b2a2 b3a2 kỹ thuật RT -PCR (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction) sau tiến hành xét nghiệm định lượng Real-Time PCR nhờ 03 nồng độ chuẩn gen β-glucuronidase (GUS) ... samples from 60 Chronic Myeloid Leukemia patients were tested by RT -PCR (Reverse Trancription-Polymerase Chain Reaction) and Real-Time PCR to detect Philadelphia chromosome containing BCR-ABL fusion ... thời có kế hoạch điều trị theo dõi đáp ứng điều trị bệnh CML cách hiệu Kết luận Từ kết thu trình bày nghĩ cần phải nhanh chóng phát triển ứng dụng kỹ thuật PCR lĩnh vực đời sống, đặc biệt ngành...