phương pháp real time rt pcr

... phẩm có chứa bắp - So sánh phương pháp sàng lọc sản phẩm biến đổi gen Real- Time PCR với phương pháp PCR truyền thống - Xác định phương pháp định lượng kĩ thuật Real- Time PCR với hóa chất thuốc nhuộm ... định lƣợng phƣơng pháp Real- Time PCR 76 4.1.Độ nhạy phương pháp: 76 4.2.Độ xác phương pháp 78 5.Thí nghiệm 5: Ứng dụng phƣơng pháp định lƣợng Real- Time PCR 79 KẾT LUẬN ... Phƣơng pháp 2: Phƣơng pháp 1: Real- Time PCR với thuốc nhuộm PCR truyền thống SYBR Green Phương pháp sàng lọc đề nghị Phƣơng pháp 1: Thí nghiệm 3: Xác định phƣơng pháp định lƣợng GMO Thử nghiệm phương...

Ngày tải lên: 17/11/2012, 09:48

... 3.3 Phương pháp Real- Time PCR Phản ứng Real- Time PCR sử dụng TaqMan probe thiết lập với µl DNA-CMV với 20 µl master mix pha từ iTaq DNA Polymerase (Bio-Rad), phản ứng Real- Time PCR sử dụng PCR ... 1.10 Khái niệm Real- Time PCR [1], [2], [4], [7], [10], [15], [22], [57], [64], [68] 1.10.1 Khái niệm: Real- Time PCR định tính mà định lượng, Real- Time PCR cải biên phương pháp PCR dùng để định lượng ... huỳnh quang, Real- Time PCR dùng để định lượng gọi PCR định lượng (qPCR) Tín hiệu huỳnh quang đo lường phản ánh sản phẩm khuyếch đại chu kỳ 1.10.3 Ưu điểm  Ưu điểm Real- Time PCR so với PCR truyền...

Ngày tải lên: 16/03/2013, 09:26

... TCCATTGTGGCCGRA/GACAC PCR RNA Mẫu dò (FAM) CTCACCAAGGCGACGATCGGTAGC (TAMRA) III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Chuẩn hóa phản ứng RT- PCR -3.1.1 Xác nhận giá trị phương pháp RT- PCR Giá trị phương pháp RT- PCR xác nhận ... ứng Real- time PCR dùng chẩn đoán Leptospira từ mẫu bệnh phẩm; giới hạn phát phương pháp 0,0015 ng DNA Leptospira/phản ứng đặc hiệu với chủng Leptospira gây bệnh gia súc - Đã ứng dụng phương pháp ... phát kính hiển vi đen, nhuộm miễn dịch (Faine, 1999, Levett, 2001) Hiện nay, kỹ thuật PCR Real time- PCR (RT- PCR) sử dụng rộng rãi để chẩn đoán bệnh Leptospira gây gia súc (Levett cs., 2005; Adler...

Ngày tải lên: 02/04/2014, 23:20

... 200-250µl 1.5.2.3 Phương pháp Real- time PCR [6] ü Nguyên lý c a Real- time PCR Real- time PCR ki m soát lư ng huỳnh quang gi i phóng ph n ng, t có th bi t đư c lư ng s n ph m PCR t ng th i m (chu ... probe Realtime PCR [7] SVTH: Võ Th H i Y n 28 Khóa lu n t t nghi p ü M t s u lưu ý th c hi n ph n ng Real- time PCR - Kích thư c s n ph m PCR ph n ng Real- time PCR Chi u dài t i ưu c a s n ph m PCR ... c a Real- time PCR SVTH: Võ Th H i Y n 41 Khóa lu n t t nghi p CHƯƠNG 3: K T QU VÀ TH O LU N v Phân tích k t qu đ nh lư ng HBV d a vào đư ng chu n b ng phương pháp Real- time PCR Đ Real- time PCR...

Ngày tải lên: 27/04/2014, 19:27

... Corn-Ref Bt Đợt 3: Định lƣợng bắp chuyển gen Bt 176 1% (lần 2) Promoter 35S: PCR Standard Curve Report with PCR Amp Cycle Graph PCR Base Line Subtracted Curve Fit Data Current Date: Data generated on: ... Standard Standard Unknown ST 35S ST 35S ST 35S ST 35S Bt 19 Gen tham chiếu: PCR Standard Curve Report with PCR Amp Cycle Graph PCR Base Line Subtracted Data Current Date: Data generated on: 19-Aug-05 ... 8.00E+01 1.25E+04 N/A N/A 30.64 24.51 N/A N/A Đợt 4: Độ nhạy phản ứng PCR Standard Curve Report with PCR Amp Cycle Graph PCR Base Line Subtracted Curve Fit Data Current Date: Data generated on:...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... Descriptor 101 Phụ lục 10: Kết chạy phản ứng Real- Time PCR với mẫu dò Taqman Đợt 1: Đƣờng chuẩn p35S PCR Standard Curve Report with PCR Amp Cycle Graph PCR Base Line Subtracted Data Current Date: ... 10.911 11.268 11.352 92 93 Phụ lục 9: Kết phản ứng Real- Time PCR với thuốc nhuộm SYBR Green I Đợt 1: PCR Quantification with Melt Curve Report PCR Base Line Subtracted Curve Fit Data Current Date: ... 62.0 90.0 74.5 70.5 65.5 61.5 90.0 80.5 75.0 73.0 68.5 63.5 98 Đợt 3: PCR Standard Curve Report with PCR Amp Cycle Graph PCR Base Line Subtracted Curve Fit Data Current Date: Data generated on:...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... tượng phương pháp Real- Time PCR - Các kết thí nghiệm với kết sàng lọc phương pháp Real- Time PCR (SYBR Green I) cố thêm chứng minh độ nhạy cao phương pháp Mặc dù kết khác biệt, chúng cho thấy phương ... khơng ly trích DNA Giải pháp: Thử nghiệm phương pháp mới, sử dụng kit ly trích - Bước 2: Sàng lọc sản phẩm biến đổi gen dựa promoter 35S Phương pháp đề nghị: Real- Time PCR với thuốc nhuộm SYBR ... mẫu Giải pháp: Cần tiến hành nghiên cứu tối ưu hóa phương pháp - Bước 3: Định lượng sản phẩm biến đổi gen có kết sàng lọc dương tính, dựa promoter 35S Phương pháp đề nghị: Real- Time PCR với mẫu...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... nhiên, phương pháp (Real- time PCR với mẫu dò Taqman) có kết dựng đường chuẩn tốt hơn, thể qua thông số sau: Hệ số tương quan phương pháp cao phương pháp (1,000 so với 0,995) (Bảng 4.10) Hiệu PCR phương ... Mức giá không đắt so với phương pháp PCR truyền thống Như vậy, với ưu điểm nêu trên, hiệu phương pháp Real- Time PCR chuẩn đoán sản phẩm biến đổi gen ưu so với phương pháp truyền thống Đặc biệt, ... định lƣợng phƣơng pháp Real- Time PCR Trong thí nghiệm này, mục tiêu đánh giá khả định lượng phương pháp Real- Time PCR với mẫu dò Taqman Các kết thí nghiệm sau: Độ nhạy phƣơng pháp: Mẫu thí nghiệm:...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... nghiệm phương pháp: - Phương pháp 1: PCR truyền thống (phương pháp ứng dụng rộng rãi giới) - Phương pháp 2: Real- Time PCR với thuốc nhuộm SYBR Green I (phương pháp đề nghị) Phƣơng pháp 1: PCR truyền ... lượng phương pháp Các kết thu giúp tiến hành ứng dụng phương pháp mẫu sản phẩm thị trường Ứng dụng phƣơng pháp Real- Time PCR khảo sát số mẫu thị trƣờng Mục tiêu Bằng phương pháp Real- Time PCR đề ... mẫu dò Taqman Phương pháp đề nghị ứng dụng cho thí nghiệm sau Thí nghiệm 4: Đánh giá khả định lƣợng phƣơng pháp Real- Time PCR Mục tiêu Đánh giá khả định lượng phương pháp Real- Time PCR đề nghị...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... 35S (123 bp) phương pháp: PCR thông thường (đang sử dụng) phương pháp RealTime PCR (đề nghị) Đánh giá khả sử dụng phương pháp Real- Time PCR giai đoạn sàng lọc mẫu so với phương pháp thông thường ... nghiệm tiến hành theo phương pháp: - Phương pháp 1: PCR truyền thống (đang sử dụng rộng rãi) Sản phẩm kiểm tra phương pháp điện di gel agarose 41 42 Phương pháp 2: Real- Time PCR với thuốc nhuộm ... Curve Kết thí nghiệm giúp so sánh hiệu phương pháp sáng lọc sản phẩm biến đổi gen nay, phương pháp PCR truyền thống phương pháp Real- Time PCR đề nghị phương pháp cho quy trình sàng lọc sản phẩm...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... phẩm có chứa bắp - So sánh phương pháp sàng lọc sản phẩm biến đổi gen Real- Time PCR với phương pháp PCR truyền thống - Xác định phương pháp định lượng kĩ thuật Real- Time PCR với hóa chất thuốc nhuộm ... Phƣơng pháp 2: Phƣơng pháp 1: Real- Time PCR với thuốc nhuộm PCR truyền thống SYBR Green Phương pháp sàng lọc đề nghị Phƣơng pháp 1: Thí nghiệm 3: Xác định phƣơng pháp định lƣợng GMO Thử nghiệm phương ... lƣợng GMO Thử nghiệm phương pháp định lượng Phƣơng pháp 2: Định lượng Real- Time PCR Định lượng Real- Time với thuốc nhuộm SYBR Green Phương pháp định lượng đề nghị PCR với mẫu dò Taqman Thí nghiệm...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... khoá luận tốt nghiệp là: Bước đầu xây dựng quy trình định lượng sản phẩm biến đổi gen phương pháp Real- Time PCR Mục đích yêu cầu Mục đích - Xây dựng quy trình định lượng bắp biến đổi gen dựa trình ... chất di truyền) hay nông sản biến đổi di truyền Trong số kĩ thuật nước giới ứng dụng, nói Real- time PCR kĩ thuật cho phép phát định lượng thay đổi DNA sinh vật cách xác Hiện nay, kĩ thuật sử ... thu ngoại tệ đáng kể cho nước ta thời gian qua Trong trình xuất nhập mặt hàng này, biện pháp quản lý phương pháp giúp xác định nguồn gốc nông sản nhằm đảm bảo tiêu an tồn sức khỏe mơi trường quan...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... định lƣợng phƣơng pháp Real- Time PCR 76 4.1.Độ nhạy phương pháp: 76 4.2.Độ xác phương pháp 78 5.Thí nghiệm 5: Ứng dụng phƣơng pháp định lƣợng Real- Time PCR 79 KẾT LUẬN ... Thành phần phản ứng Real- Time PCR 57 8.6.4 Chương trình nhiệt thiết lập máy Real- Time PCR 57 8.6.5 Phân tích kết 58 9.Ứng dụng phƣơng pháp Real- Time PCR khảo sát số mẫu thị ... đổi gen có kết sàng lọc dương tính, dựa promoter 35S Phương pháp đề nghị: Real- Time PCR với mẫu dò Taqman Kết đánh giá: phương pháp Real- Time PCR có khả phát định lượng copy gen đích mẫu thí nghiệm,...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 04:21

... phƣơng pháp có độ nhạy độ đặc hiệu thấp, khả phát gene fimA thấp ( theo Jose F Siqueira ctv, 2002) 5.3 Phƣơng pháp PCR realtime PCR Ngày phƣơng pháp sinh học phân tử đặc biệt kỹ thuật PCR, realtime ... 45 Hình 30: Kết real time PCR khảo sát độ nhạy với primer probe fimA 47 Hình 31: Kết real time PCR khảo sát độ nhạy với primer probe 16S rRNA 48 Hình 32: Kết real time PCR mẫu 1-6, với primer/probe ... 16S rRNA 53 Hình 33: Kết real time PCR mẫu 1-6, với primer/probe fimA .53 Hình 34: Kết real time PCR mẫu 7-12, với primer/probe 16S rRNA 54 Hình 35: Kết real time PCR mẫu 7-12, với primer/probe...

Ngày tải lên: 31/08/2014, 08:38

Ngày tải lên: 19/09/2014, 04:50

Ngày tải lên: 08/10/2014, 12:10

... Boppana [23] năm 2005 Real- Time qPCR (gB) Mẫu máu 1x104 x Ravit Arav-Boger [66] năm 2007 Real- Time qPCR (US17) Dịch ối 2,8x105 x Ravit AravBoger [66] năm 2007 Real- Time qPCR (US17) Dịch ối 8x103 ... 2002 Real- Time qPCR (UL83) Dịch ối 2,8x105 x Mẫu máu 3,5 log10 Mẫu máu 4,2log10 x Marianne LeruezVille [49] năm 2003 Marianne LeruezVille [49] năm 2003 Real- Time qPCR (UL123) Real- Time qPCR (UL123) ... có kit thử định lượng CMV từ máu bệnh nhân Real- Time PCR, chưa thấy cơng trình xây dựng kỹ thuật định lượng CMV từ nước tiểu phương pháp Real- Time PCR Xuất phát từ thực tiễn trên, tiến hành đề...

Ngày tải lên: 17/08/2016, 15:11

... đàn gia cầm ứng dụng phương pháp Real time - PCR chẩn đoán bệnh” MỤC TIÊU ĐỀ TÀI - Góp phần xác định lưu hành virus cúm type A/H5N6 Lạng Sơn - Ứng dụng phương pháp Real time – PCR chẩn đoán bệnh ... có vật chất di truyền RNA nên phản ứng real time PCR có thêm q trình chép ngược từ RNA → cDNA gọi Reverse transcription nên phương pháp gọi Real time RT – PCR - Ngun lí hoạt động Probe Có nhiều ... 35 Kit RT- PCR Qiagen OneStep dùng Master mix tạo hỗn hợp cho q trình nhân gen (nếu có) Máy realtime RT- PCR Master cycler tube phù hợp với máy 2.4.2 Các bước tiến hành phản ứng Real time - PCR a)...

Ngày tải lên: 04/02/2017, 22:53