... máy PCR máy móc-trang thiết bị khác phòng Công nghệ Tế bào Thực vật Phòng Thí nghiệm Trọng điểm Công nghệ gen, Viện Công nghệ sinh học 2.3 PHƯƠNGPHÁP 2.3.1 Phươngpháp nuôi cấy tế bào BY-2 Tế ... tế bào mặt thạch phơi 5-10 phút box cấy đến tế bào bám lên mặt thạch Dán Parafilm ủ 25°C Các thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố kháclên hiệu chuyển gen • Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng nồng độ ... đảo nhẹ nhàng - Lấy ml tế bào rửa trải lên đĩa Petri chứa 50 ml môi trường MS bổ sung 500 mg/l cefotaxime để loại bỏ tế bào Agrobacterium (không chọn lọc) ml lên MS bổ sung 500 mg/l cefotaxime 50...
... tumefaciens, phươngpháp trực tiếp sử dụng xung điện, vi tiêm, xử lý polyethylene glycol (PEG) dùng súng bắn gen Mỗi phươngpháp chuyển gen có ưu, nhược điểm riêng tùy vào loài khác Trong phươngpháp ... (psy) thông qua A.tumefsciens [53] Phươngpháp làm giảm thời gian nuôi cấy mô truyền thống chứng tỏ phươngpháp chuyển gen đơn giản Năm 2009, Kim cs sử dụng phươngpháp chuyển gen thông qua A.tumefaciens ... Phƣơng pháp chuyển gen vào thực vật thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens Hiện nay, có nhiều phươngpháp chuyển gen nhà khoa học sử dụng để chuyển gen vào thực vật như: phươngpháp gián...
... gen vào động vật phươngpháp vi tiêm dung dịch DNA vào hợp tử phươngpháp có hiệu động vật có vú phươngpháp chủ yếu sử dụng để chuyển gen vào vật nuôi Ðối với thực vật phươngpháp sử dụng tế ... biểu gen chuyển Phươngpháp tiêm chủng vaccine an toàn phươngphápkhác DNA ngoại lai đưa vào protein ngoại lai (Lin, 2000) - Liệu pháp gen tự sát (Suicide gene therapy): phươngpháp bắn gen sử ... Perrny, 2001) Phươngpháp này, trước tiên sử dụng cho Xeponus, chứng tỏ thành công chuột Tuy nhiên không cho kết cao phươngpháp vi tiêm vào tiền nhân phươngpháp đơn giản nhiều Phươngpháp ISCI...
... (OD) dung dịch khuẩn thích hợp • Xác định thời gian biến nạp thích hợp • Nghiên cứu ảnh hưởng phươngpháp gây tổn thương nốt mầm đến hiệu biến nạp • Xây dựng quy trình tái sinh đậu tương chuyển ... đề tài: - Mục đích: Xây dựng quy trình công nghệ chuyển gen gus có hiệu để từ áp dụng chuyển gen khác gen kháng hạn, gen kháng sâu bệnh, gen kháng thuốc diệt cỏ,… nhằm cải tạo giống đậu tương Việt...
... chuy n gen Có hai phươngpháp chuy n gen vào th c v t, ñó là: Phươngpháp chuy n gen tr c ti p phươngpháp chuy n gen gián ti p 2.2.1 Phươngpháp chuy n gen tr c ti p phươngpháp chuy n gen tr ... quy trình chuy n gen [2] Phươngpháp chuy n gen tr c ti p thông qua ng ph n Phươngpháp chuy n gen ñư c g i phươngpháp chuy n gen không qua nuôi c y mô Theo phươngpháp DNA chuy n vào có th ... Cơ s khoa h c c a phươngpháp PCR 15 2.4 Tình hình nghiên c u th gi i 16 ð I TƯ NG, N I DUNG VÀ PHƯƠNGPHÁP NGHIÊN C U 22 3.1 V t li u 22 3.2 N i dung nghiên c u 23 3.3 Phươngpháp nghiên c u 24...
... vật Hiện nay, có nhiều phươngpháp chuyển gen vào thực vật khác sử dụng súng bắn gen, dùng xung điện, dùng vi tiêm, chuyển gen thông qua đường ống phấn,… Tuy nhiên, phươngpháp chuyển gen gián ... Agrobacterium công bố mà có công trình chuyển gen phươngpháp bắn gen công bố như: + Xây dựng quy trình biến nạp gen bar – gen kháng thuốc diệt cỏ vào khoai mì phươngpháp bắn gen Trước tiến hành chuyển gen, ... dụng nuôi cấy mẫu 16 2.3 Phươngpháp nghiên cứu 17 2.3.2 Tạo vật liệu chuyển gen 17 2.3.3 Các bước chuyển gen 19 2.3.4 Phươngpháp xác định hiệu chuyển gen nhuộm...
... liệu pháp gen Mở đầu Chiến lược chuyển gen In vivo Ex vivo Mở đầu Các phươngpháp chuyển gen Phươngpháp chuyển gen sử dụng virus Phươngpháp chuyển gen không sử dụng virus Phương ... huyết 20 Chuyển gen không sử dụng virus Phươngpháp DEAE-dextran 21 Chuyển gen không sử dụng virus Phươngpháp Cationic lipid (Liposome) Một phươngpháp không sử dụng virus hiệu Khi cho Cationic ... 22 Chuyển gen không sử dụng virus Phươngpháp Cationic lipid (Liposome) 23 Chuyển gen không sử dụng virus Phươngpháp vật lý Thường sử dụng phươngpháp chuyển gen hóa học hiệu Không...
... nạp hoàn chỉnh Sau đó, từ chuyển gen thu được, cần đánh giá ổn định di truyền qua hệ, sử dụng phươngpháp lai hữu tính để thu mang gen mong muốn Đồng thời đánh giá tác động môi trường chuyển gen ... ipt kích thích cho hình thành xytokinin Tỷ lệ auxin/xytokinin kích thích hình thành callus tạo lên khối u Đặc diểm cấu trúc Agrobacterium tumefaciens Ti plasmid Agrobacterium vi khuẩn đất nhuộm ... có hình thành số vật chất như: nopaline, octoine gọi chung opine Các chất không tồn bình thường khác Điều đặc biệt khối u không ngừng tăng trưởng kể diệt vi khuẩn Điều cho phép kết luận: vi khuẩn...
... cảnh khác ghiên cứu chuyển gen kháng bệnh nấm Chitinase vào cà chua P375 a Kết biến nạp gen Chitinase Tiến hành biến nạp gen Chitinase có khả kháng nấm gây bệnh vào giống cà chua P375 phươngpháp ... định số mẫu sống sót, số tái sinh thu được, số tái sinh chuyển gen - Số liệu thí nghiệm xử lý phươngpháp Duncan's III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ghiên cứu khả tái sinh giống cà chua Những kết nghiên ... thực vật, - Gen kháng nấm Chitinase tách từ Phaseolus vulgaris cv Saxa (nguồn N CBI-Genbank) Phươngpháp nghiên cứu - N uôi cấy mẫu phục vụ cho biến nạp: Lá mầm trụ mầm cắt nhỏ, đặt vào đĩa petri...
... vector mang gen amiRNA V-ATPase vào gi ng ñ u cove GS012 30 2.3 Phươngpháp nghiên c u 30 2.3.1 Phươngpháp nuôi c y mô 30 2.3.2 Phươngpháp chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium tumefaciens 34 CHƯƠNG ... Schartz, 2010) Bên c nh phươngpháp phòng ch ng sâu h i truy n th ng s d ng thu c hóa h c, bi n pháp canh tác, bi n pháp th công, IPM… vi c s d ng tr ng bi n ñ i gen bi n pháp r t ñư c quan tâm ... có r t nhi u phươngpháp chuy n gen vào th c v t khác s d ng súng b n gen, dùng xung ñi n t bào mô th c v t, dùng vi tiêm, chuy n gen thông qua ñư ng ng ph n,… Tuy nhiên, hai phươngpháp thư ng...
... chồi 30 2.3 Phươngpháp nghiên cứu 31 2.3.1 Phươngpháp thiết kế thí nghiệm 31 2.3.2 Phươngpháp chuân bị mâu thực vật 32 2.3.3 Phươngpháp chuân bị dịch vi ... bầu nhụy lớn, dễ thao tác ■ Phươngpháp Agrolistic Phươngpháp Agrolistic kết hợp ưu điểm hai phươngpháp bắn gen chuyến gen thông qua Agrobacterium Trong phươngpháp này, vector thiết kế có ... biến đôi gen Phưongpháp nghiên cứu ■ Phươngpháp nuôi cấy mô tế bào (theo quy trình Yee shirley cộng sự, 2001) ■ Phươngpháp chuyển gen (theo quy trình De Block, 1988) ■ Phươngpháp đánh giá biếu...
... callus/bèo lên môi trờng đồng nuôi cấy (Đồng nuôi cấy 2-3 ngày) Quan sát biểu tạm thời gen Gus Chuyển callus/bèo lên môi trờng diệt khuẩn (Diệt khuẩn 2-3 đợt (5-6ngày/đợt) Chuyển callus/bèo lên môi ... bo ng vt bc cao, vi khun, nm menGn õy t bo cụn trựng, thc vt bin i gen c s dng khc phc cỏc nhc im ca h thng sn xut protein s dng t bo ng vt bc cao, vi khun v nm men Do ú nhim v to ln t cho cỏc ... chỳng (Landolt, 1986) Trong t nhiờn, sinh sn vụ tớnh l phng thc ch yu giỳp cho qun th bốo phỏt trin nhanh chỳng, cn phng thc sinh sn hu tnh gip cho qun th bo cỳ s a dng v di truyn v ch xy iu kin...
... tây biến đối gen Phươngpháp nghiên cứu ■ Phươngpháp ni cấy mơ tế bào (theo quy trình Yee shirley cộng sự, 2001) ■ Phươngpháp chuyến gen (theo quy trình De Block, 1988) ■ Phươngpháp đánh giá ... hai phươngpháp nghiên cứu RRA PRA RRA (đánh giá nhanh nơng thơn): Là q trình nghiên cứu coi điểm bắt đầu cho hiểu biết tình hình địa phương PRA (đánh giá nơng thơn có tham gia): Là loạt cách phương ... cứu làm sở cho việc đề xuất biện pháp nhằm bảo tồn phát triển nguồn dược liệu quan trọng địa phương CHƯƠNG ĐĨI TƯỢNG, PHẠM VI, NỘI DUNG, THỜI GIAN VÀ PHƯƠNGPHÁP NGHIÊN cứu 2.1 Đối tượng nghiên...
... Phươngpháp phân tích sinh học phân tử chuyển gen 2.2.5.1 Phươngpháp tách chiết ADN tổng số từ ngô Tiến hành thu mẫu ngô đƣợc để tách chiết ADN tổng số ADN đƣợc tách chiết tinh theo phƣơng pháp ... iii 2.2.4 Thí nghiệm nảy mầm hạt ngô hệ T0 24 2.2.5 Phươngpháp phân tích sinh học phân tử chuyển gen 24 2.2.6 Phươngpháp thu thập số liệu thống kê 27 CHƢƠNG III KẾT QUẢ ... thức ăn thô quan trọng cho trâu bò nhiều vùng Giá trị dinh dƣỡng thân, ngô tăng lên đƣợc chế biến theo cách lênmen ủ chua - Làm nguyên liệu cho số ngành công nghiệp Ngô đƣợc sử dụng làm nguyên...
... Phƣơng pháp nghiên cứu 31 2.3.1 Phươngpháp thiết kế thí nghiệm 31 2.3.2 Phươngpháp chuẩn bị mẫu thực vật 32 2.3.3 Phươngpháp chuẩn bị dịch vi khuẩn 32 2.3.4 Phương ... bầu nhụy lớn, dễ thao tác Phươngpháp Agrolistic Phươngpháp Agrolistic kết hợp ưu điểm hai phươngpháp bắn gen chuyển gen thông qua Agrobacterium Trong phươngpháp này, vector thiết kế có ... biến đổi gen Phƣơng pháp nghiên cứu Phươngpháp nuôi cấy mô tế bào ( theo quy trình Yee shirley cộng sự, 2001) Phươngpháp chuyển gen (theo quy trình De Block, 1988) Phươngpháp đánh giá biểu...
... 37 3.3 Phơng pháp nghiên cứu 39 3.3.1.Bố trí thí nghiệm 39 3.3.2 Các tiêu theo dõi, phơng pháp thu thập v xử lý số liệu 39 3.3.3 Phơng pháp nuôi cấy mô v chuyển gen 40 3.3.4 Phơng pháp xác định ... khác nhau, có nhiều loại tế b o khác thực chức khác Các mô có cấu trúc chuyên môn định l nhờ phân hóa Phân hóa tế b o l chuyển hóa tế b o phôi sinh th nh tế b o mô chuyên hóa, đảm nhận chức khác ... sau lâu nhiễm cách n y mang gen nptII Phơng pháp thấm lọc chân không Phơng pháp chuyển gen thấm lọc chân không tơng tự nh phơng pháp ngâm cụm hoa Phơng pháp n y đ đợc áp dụng số trồng, đặc biệt...
... nhiều phƣơng pháp có phƣơng pháp chuyển gen thực vật khác nhƣ sử dụng súng bắn gen, dùng xung điện tế bào mô thực vật, dùng vi tiêm, chuyển gen thông qua đƣờng ống phấn,…Phƣơng pháp chuyển gen ... nhiều mô phân sinh thu đƣợc vài thể khảm Đây phƣơng pháp hay nhƣng việc ứng dụng nhiều hạn chế Phươngpháp biến nạp gen qua ống phấn Phƣơng pháp chuyển gen qua ống phấn phát triển hệ thống chuyển ... Streptomyces hygroscopicus Phƣơng pháp đơn giản để kiểm tra có mặt gen bar phƣơng pháp trực tiếp Mô, tế bào chuyển gen đƣợc đặt môi trƣờng có nồng độ phosphinothricin khác (hoặc thuốc trừ cỏ tƣơng...