Khảo sát quy trình chiết xuất và thử nghiệm hoạt tính kháng viêm trên mô hình in vivo của curcuminoid trích từ thân rễ cây nghệ (curcuma longa l ) nghiên cứu khoa học

TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN KHẢO SÁT QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH KHÁNG VIÊM TRÊN MƠ HÌNH IN VIVO CỦACURCUMINOID TRÍCH TỪ THÂN RỄ CÂY NGHỆ (CURCUMA LONGA L.) Mã số: Thuộc nhóm ngành khoa học: Y DƯỢC TP.Hồ Chí Minh, Tháng 04/2013 TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN KHẢO SÁT QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH KHÁNG VIÊM TRÊN MƠ HÌNH IN VIVO CỦA CURCUMINOID TRÍCH TỪ THÂN RỄ CÂY NGHỆ (CURCUMA LONGA L.) Mã số: Thuộc nhóm ngành khoa học: Y DƯỢC Sinh viên thực hiện: LÂM THIỆN VINH Nam, Nữ: Nam Dân tộc: Kinh Lớp, khoa: SH09A1, Công nghệ Sinh học Năm thứ: 04/Số năm đào tạo: 04 Ngành học: Công nghệ Dược phẩm Người hướng dẫn: ThS NGUYỄN MINH HOÀNG ThS LAO ĐỨC THUẬN TP.HCM, Tháng 04/2013 MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG – SƠ ĐỒ iv DANH MỤC HÌNH v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii ĐẶT VẤN ĐỀ Phần 1.1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU KHÁI QUÁT CHUNG VỀ CÂY NGHỆ 1.1.1 Đặc điểm hình thái 1.1.2 Thành phần hoá học 1.1.3 Tác dụng dƣợc lý 1.2 SƠ LƢỢC VỀ HỢP CHẤT CURCUMINOID 1.2.1 Tính chất hố lý phân loại hợp chất 1.2.2 Hoạt tính sinh học 1.3 PHƢƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT VÀ TINH CHẾ .11 1.3.1 Phƣơng pháp chiết hệ thống Soxhlet 11 1.3.2 Phƣơng pháp đun khuấy từ hồi lƣu 12 1.3.3 Phƣơng pháp chiết hợp chất lƣỡng cực 12 1.3.4 Phƣơng pháp kết tinh 13 1.4 KHÁI QUÁT CHUNG VỀ PHẢN ỨNG VIÊM 16 1.4.1 Nguyên nhân gây viêm phân lo ại 16 1.4.2 Những biến đổi chủ yếu viêm 17 1.4.3 Mối liên hệ phản ứng viêm thể 20 1.4.4 Các thuốc kháng viêm 20 1.5 SỬ DỤNG MÔ HÌNH ĐỘNG VẬT TRONG NGHIÊN CỨU Y SINH 20 1.5.1 Ý nghĩa việc sử dụng mơ hình động vật nghiên cứu y sinh 20 1.5.2 Phƣơng pháp nghiên cứu tác dụng dƣợc lý thuốc chống viêm mơ hình động vật 21 Mục lục i Phần 2.1 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VẬT LIỆU VÀ ĐỐI TƢỢNG THÍ NGHIỆM .24 2.1.1 Đối tƣợng thí nghiệm 24 2.1.2 Dụng cụ, thiết bị hóa chất 25 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.2.1 Quy trình chiết xuất chung curcuminoid từ thân rễ nghệ 28 2.2.2 Khảo sát trình chiết curcuminoid hệ dung mơi khác 29 2.2.3 Khảo sát q trình chiết curcuminoid theo thời gian chiết phƣơng pháp khác 30 2.2.4 Phân tích định tính định lƣợng curcuminoid .31 2.2.5 Xây dựng mơ hình chuột bị viêm chân .32 2.2.6 Khảo sát tác dụng kháng viêm cucurminoid .33 2.2.7 Thống kê xử lý số liệu 36 Phần 3.1 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN KHẢO SÁT Q TRÌNH CHIẾT CURCUMINOID BẰNG CÁC LOẠI DUNG MƠI KHÁC NHAU 38 3.2 KHẢO SÁT QUÁ TRÌNH CHIẾT CURCUMINOID THEO THỜI GIAN BẰNG CÁC PHƢƠNG PHÁP KHÁC NHAU 41 3.3 PHÂN TÍCH ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƢỢNG CURCUMINOID 43 3.3.1 Định tính phƣơng pháp sắc ký mỏng 43 3.3.2 Định tính phƣơng pháp đo điểm nóng chảy 44 3.3.3 Định tính phƣơng pháp phổ hồng ngoại FT-IR 44 3.3.4 Định lƣợng phƣơng pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ LC-MS 47 3.4 KẾT QUẢ TẠO MƠ HÌNH CHUỘT BỊ VIÊM CHÂN .48 3.5 KẾT QUẢ KHẢO SÁT TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM CỦA CURCUMINOID 50 3.5.1 Chỉ tiêu tỷ lệ phù chân chuột 50 3.5.2 Chỉ tiêu trọng lƣợng chuột 53 Mục lục ii Phần 4.1 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ KẾT LUẬN 56 4.1.1 Khảo sát trình chiết curcuminoid loại dung môi khác 56 4.1.2 Khảo sát trình chiết curcuminoid theo thời gian chiết phƣơng pháp khác 56 4.1.3 Phân tích định tính curcuminoid 56 4.1.4 Xây dựng mơ hình chuột bị viêm chân .57 4.1.5 Khảo sát tác dụng kháng viêm curcuminoid .57 4.2 ĐỀ NGHỊ .57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 PHỤ LỤC Mục lục iii DANH MỤC BẢNG – SƠ ĐỒ PHẦN – TỔNG QUAN TÀI LIỆU Bảng 1.1 Khóa phân loại thực vật nghệ chi Curcuma Bảng 1.2 Thành phần hóa học nghệ Curcuma longa L Bảng 1.3 Tính chất lý hóa curcuminoid Bảng 1.4 Ƣu nhƣợc điểm phƣơng pháp chiết soxhlet 12 Bảng 1.5 Ƣu nhƣợc điểm phƣơng pháp đun khuấy từ hồi lƣu 12 Bảng 1.6 Hiệu suất chất lƣỡng cực dùng chiết xuất curcuminoid .13 PHẦN – VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Sơ đồ 2.1 Quy trình chiết xuất chung curcuminoid từ thân rễ nghệ Curcuma longa L 28 Sơ đồ 2.2 Bố trí thí nghiệm khảo sát dung môi chiết tối ƣu 29 Sơ đồ 2.3 Bố trí thí nghiệm khảo sát phƣơng pháp thời gian chiết .30 Sơ đồ 2.4 Quy trình khảo sát tác dụng kháng viêm curcuminoid 34 PHẦN – KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Bảng 3.1 Khối lƣợng tinh thể curcuminoid chiết loại dung môi khác nhau.38 Bảng 3.2 Năng suất chiết trung bình hiệu suất loại dung môi .38 Bảng 3.3 Khối lƣợng tinh thể curcuminoid theo thời gian chiết hai phƣơng pháp khác 41 Bảng 3.4 Năng suất trung bình hiệu suất chiết theo thời gian hai phƣơng pháp chiết 41 Bảng 3.5 Kết xác định hệ dung môi chạy sắc ký mỏng 43 Bảng 3.6 Kết đo điểm nóng chảy 44 Bảng 3.7 Kết đo quang phổ hồng ngoại IR 44 Bảng 3.8 Kết sắc ký lỏng ghép khối phổ curcuminoid .47 Bảng 3.9 Tỷ lệ phù chân chuột hiệu suất tạo mơ hình viêm 49 Bảng 3.10 Tỷ lệ phù chân chuột qua ngày thí nghiệm .51 Bảng 3.11 Trọng lƣợng chuột qua ngày thí nghiệm 53 Mục lục iv DANH MỤC HÌNH PHẦN – TỔNG QUAN TÀI LIỆU Hình 1.1 Curcuma longa L Hình 1.2 Curcumin .8 Hình 1.3 Demethoxycurcumin .8 Hình 1.4 Bisdemethoxycurcumin .8 Hình 1.5 Hệ thống chiết Soxhlet 11 Hình 1.6 Đồ thị thể mối quan hệ độ tan nhiệt độ 14 Hình 1.7 Các bƣớc kết tinh thu tinh thể 15 Hình 1.8 Hiện tƣợng viêm da chân (A) tƣợng viêm da bàn tay (B) 16 Hình 1.9 Các biến đổi phản ứng viêm 19 PHẦN – VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Hình 2.1 Nghệ tƣơi bột nghệ Curcuma longa L 24 Hình 2.2 Chuột bạch Mus musculus var albino 24 Hình 2.3 Bếp khuấy từ VELP ARE máy đo điểm nóng chảy Stuart SMP11 26 Hình 2.4 Curcumin chuẩn, thuốc medexa dầu olive 26 Hình 2.5 Đèn UV huỳnh quang Vilber Lourmat VL – 6.LC 27 Hình 2.6 Máy đo phổ FT- IR BRUKER EQUINOX 55 27 Hình 2.7 Máy sắc ký lỏng ghép khối phổ LC – MS micrOTOF – Q .27 Hình 2.8 Sát trùng vùng chân (A) tiêm formol gây viêm (B) 33 Hình 2.9 Curcuminoid hịa tan dầu olive 35 Hình 2.10 Lơ chuột thí nghiệm 35 Hình 2.11 Thao tác giữ chuột (a) đƣa kim cho uống vào thực quản (b) 35 Hình 2.12 Các vị trí đo chu vi bắp chân chuột 36 Mục lục v PHẦN – KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Hình 3.1 Bản mỏng sắc ký curcuminoid chiết đƣợc .39 Hình 3.2 Tinh thể curcuminoid chiết đƣợc 39 Hình 3.3 Đồ thị biểu diễn hàm lƣợng curcuminoid chiết dung môi khác 40 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn lƣợng curcuminoid qua chiết hai phƣơng pháp chiết 42 Hình 3.5 Sắc ký mỏng định tính curcuminoid chiết đƣợc .43 Hình 3.6 Phổ IR curcuminoid chiết xuất 45 Hình 3.7 Phổ IR cucumin chuẩn 46 Hình 3.8 Chuột co chân (A) chân chuột liệt tạm thời (B) sau gây viêm 48 Hình 3.9 Chân chuột trƣớc sau gây viêm 48 Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ phù chân chuột sau gây viêm lơ thí nghiệm 49 Hình 3.11 Đồ thị biểu diễn biến thiên tỷ lệ phù chân chuột .51 Hình 3.12 Đồ thị biểu diễn biến thiên trọng lƣợng chuột 53 Mục lục vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Bcl-2 B – cell lymphoma c-Myc v-myc myelocytomatosis viral oncogene homolog (avian) ĐC Đối chứng HIV Human immunodecifiency virus NSAID Non-steroidal anti-inflammatory drugs ROS Reactive oxygen spices TGF Tranforming growth factor TNF Tumor necrosis factors Mục lục vii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP.HCM THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung KHẢO SÁT QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH KHÁNG VIÊM TRÊN MƠ HÌNH IN VIVO CỦA CURCUMINOID TRÍCH TỪ THÂN RỄ CÂY NGHỆ (CURCUMA LONGA L.) - Tên đề tài: Sinh viên thực Lớp Khoa Năm thứ/ số năm đào tạo Lâm Thiện Vinh SH09A1 Công nghệ sinh học 04/04 Nguyễn Vũ Thanh Tùng SH09A1 Công nghệ sinh học 04/04 Nguyễn Thị Thanh Xuân SH09A2 Công nghệ sinh học 04/04 Mai Thị Thanh Huệ SH09A1 Công nghệ sinh học 04/04 Trần Thanh Tùng SH10A1 Công nghệ sinh học 03/04 Ngƣời hƣớng dẫn: ThS NGUYỄN MINH HOÀNG ThS LAO ĐỨC THUẬN Mục tiêu đề tài Khảo sát loại dung môi chiết, thời gian chiết, phƣơng pháp chiết xuất tối ƣu tinh hợp chất curcuminoid từ thân rễ nghệ Curcuma longa L Xây dựng mơ hình chuột bị viêm chân formol khảo sát nồng độ formol gây viêm tối ƣu Khảo sát tác dụng kháng viêm curcuminoid liều lƣợng khác Tính sáng tạo Tận dụng nguồn dƣợc liệu nghệ Curcuma longa L phong phú địa phƣơng ứng dụng vào chiết xuất thu nhận hợp chất curcuminoid có hoạt tính dạng tinh sạch, phù hợp với xu Sử dụng hợp chất curcuminoid chiết đƣợc ứng dụng vào thực tiễn với bƣớc đầu thử nghiệm hoạt tính kháng viêm mơ hình in vivo viii Phụ lục N1 - N6 *24,5171 N1 - N7 *31,7586 N1 - N8 *34,32 N2 - N3 7,44143 N2 - N4 *12,9043 N2 - N5 *13,82 N2 - N6 *15,59 N2 - N7 *22,8314 N2 - N8 *25,3929 N3 - N4 5,46286 N3 - N5 6,37857 N3 - N6 8,14857 N3 - N7 *15,39 N3 - N8 *17,9514 N4 - N5 ,915714 N4 - N6 2,68571 N4 - N7 9,92714 N4 - N8 12,4886 N5 - N6 1,77 N5 - N7 9,01143 N5 - N8 11,5729 N6 - N7 7,24143 N6 - N8 9,80286 N7 - N8 2,56143 * Cặp ngày có khác biệt có ý nghĩa với độ tin cậy 95% Những ngày có chữ giống không khác biệt mức tin cậy 95% 23 Phụ lục Phụ lục 15 SO SÁNH TỶ LỆ PHÙ CHÂN CHUỘT CỦA CÁC LƠ THÍ NGHIỆM Ở NGÀY N3 Multiple Range Tests for Ty le phu by Lo thi nghiem Method: 95,0 percent Duncan Lo thi nghiem Count Mean Homogeneous Groups Lo DC duong 28,3257 X a Lo 90 mg/kg 32,1471 XX ab Lo 70 mg/kg 44,69 XXX abc Lo 50 mg/kg 47,61 XX bc Lo DC am 55,1657 X c Contrast Difference Lo 50 mg/kg - Lo 70 mg/kg 2,92 Lo 50 mg/kg - Lo 90 mg/kg 15,4629 Lo 50 mg/kg - Lo DC am -7,55571 Lo 50 mg/kg - Lo DC duong *19,2843 Lo 70 mg/kg - Lo 90 mg/kg 12,5429 Lo 70 mg/kg - Lo DC am -10,4757 Lo 70 mg/kg - Lo DC duong 16,3643 Lo 90 mg/kg - Lo DC am Lo 90 mg/kg - Lo DC duong Lo DC am - Lo DC duong *-23,0186 3,82143 *26,84 * Cặp lô thí nghiệm có khác biệt có ý nghĩa với độ tin cậy 95% Những lơ thí nghiệm có chữ giống không khác biệt mức tin cậy 95% 24 Phụ lục Phụ lục 16 SO SÁNH TỶ LỆ PHÙ CHÂN CHUỘT CỦA CÁC LƠ THÍ NGHIỆM Ở NGÀY N4 Multiple Range Tests for Ty le phu by Lo thi nghiem Method: 95,0 percent Duncan Lo thi nghiem Count Mean Homogeneous Groups Lo DC duong 22,8629 X a Lo 90 mg/kg 30,1329 X a Lo 50 mg/kg 36,0571 X a Lo 70 mg/kg 37,87 XX ab Lo DC am 51,9229 X b Contrast Difference Lo 50 mg/kg - Lo 70 mg/kg -1,81286 Lo 50 mg/kg - Lo 90 mg/kg 5,92429 Lo 50 mg/kg - Lo DC am *-15,8657 Lo 50 mg/kg - Lo DC duong 13,1943 Lo 70 mg/kg - Lo 90 mg/kg 7,73714 Lo 70 mg/kg - Lo DC am -14,0529 Lo 70 mg/kg - Lo DC duong 15,0071 Lo 90 mg/kg - Lo DC am Lo 90 mg/kg - Lo DC duong Lo DC am - Lo DC duong *-21,79 7,27 *29,06 * Cặp lơ thí nghiệm có khác biệt có ý nghĩa với độ tin cậy 95% Những lơ thí nghiệm có chữ giống không khác biệt mức tin cậy 95% 25 Phụ lục Phụ lục 17 SO SÁNH TỶ LỆ PHÙ CHÂN CHUỘT CỦA CÁC LƠ THÍ NGHIỆM Ở NGÀY N5 Multiple Range Tests for Ty le phu by Lo thi nghiem Method: 95,0 percent Duncan Lo thi nghiem Count Mean Homogeneous Groups Lo DC duong 21,9471 X a Lo 90 mg/kg 24,7143 X a Lo 70 mg/kg 32,4929 X a Lo 50 mg/kg 32,5686 X a Lo DC am 46,1829 X b Contrast Difference Lo 50 mg/kg - Lo 70 mg/kg ,0757143 Lo 50 mg/kg - Lo 90 mg/kg 7,85429 Lo 50 mg/kg - Lo DC am *-13,6143 Lo 50 mg/kg - Lo DC duong 10,6214 Lo 70 mg/kg - Lo 90 mg/kg 7,77857 Lo 70 mg/kg - Lo DC am Lo 70 mg/kg - Lo DC duong Lo 90 mg/kg - Lo DC am Lo 90 mg/kg - Lo DC duong Lo DC am - Lo DC duong *-13,69 10,5457 *-21,4686 2,76714 *24,2357 * Cặp lơ thí nghiệm có khác biệt có ý nghĩa với độ tin cậy 95% Những lơ thí nghiệm có chữ giống không khác biệt mức tin cậy 95% 26 Phụ lục Phụ lục 18 SO SÁNH TỶ LỆ PHÙ CHÂN CHUỘT CỦA CÁC LƠ THÍ NGHIỆM Ở NGÀY N6 Multiple Range Tests for Ty le phu by Lo thi nghiem Method: 95,0 percent Duncan Lo thi nghiem Count Mean Homogeneous Groups Lo DC duong 20,1771 X a Lo 90 mg/kg 23,0057 X a Lo 70 mg/kg 29,2529 XX ab Lo 50 mg/kg 31,2771 XX ab Lo DC am 41,64 X b Contrast Difference Lo 50 mg/kg - Lo 70 mg/kg 2,02429 Lo 50 mg/kg - Lo 90 mg/kg 8,27143 Lo 50 mg/kg - Lo DC am -10,3629 Lo 50 mg/kg - Lo DC duong 11,1 Lo 70 mg/kg - Lo 90 mg/kg 6,24714 Lo 70 mg/kg - Lo DC am -12,3871 Lo 70 mg/kg - Lo DC duong 9,07571 Lo 90 mg/kg - Lo DC am Lo 90 mg/kg - Lo DC duong Lo DC am - Lo DC duong *-18,6343 2,82857 *21,4629 * Cặp lơ thí nghiệm có khác biệt có ý nghĩa với độ tin cậy 95% Những lơ thí nghiệm có chữ giống không khác biệt mức tin cậy 95% 27 Phụ lục Phụ lục 19 SO SÁNH TỶ LỆ PHÙ CHÂN CHUỘT CỦA CÁC LƠ THÍ NGHIỆM Ở NGÀY N7 Multiple Range Tests for Ty le phu by Lo thi nghiem Method: 95,0 percent Duncan Lo thi nghiem Count Mean Homogeneous Groups Lo DC duong 12,9357 X a Lo 90 mg/kg 19,1271 XX ab Lo 50 mg/kg 27,1214 XX bc Lo 70 mg/kg 27,8171 XX bc Lo DC am 37,9271 X c Contrast Difference Lo 50 mg/kg - Lo 70 mg/kg -,695714 Lo 50 mg/kg - Lo 90 mg/kg 7,99429 Lo 50 mg/kg - Lo DC am -10,8057 Lo 50 mg/kg - Lo DC duong *14,1857 Lo 70 mg/kg - Lo 90 mg/kg 8,69 Lo 70 mg/kg - Lo DC am -10,11 Lo 70 mg/kg - Lo DC duong *14,8814 Lo 90 mg/kg - Lo DC am *-18,8 Lo 90 mg/kg - Lo DC duong Lo DC am - Lo DC duong 6,19143 *24,9914 * Cặp lơ thí nghiệm có khác biệt có ý nghĩa với độ tin cậy 95% Những lơ thí nghiệm có chữ giống khơng khác biệt mức tin cậy 95% 28 Phụ lục Phụ lục 20 SO SÁNH TỶ LỆ PHÙ CHÂN CHUỘT CỦA CÁC LƠ THÍ NGHIỆM Ở NGÀY N8 Multiple Range Tests for Ty le phu by Lo thi nghiem Method: 95,0 percent Duncan Lo thi nghiem Count Mean Homogeneous Groups Lo DC duong 10,3743 X a Lo 90 mg/kg 17,9743 XX ab Lo 70 mg/kg 24,2586 XX bc Lo 50 mg/kg 25,2371 XX bc Lo DC am 32,3657 X c -Contrast Difference Lo 50 mg/kg - Lo 70 mg/kg ,978571 Lo 50 mg/kg - Lo 90 mg/kg 7,26286 Lo 50 mg/kg - Lo DC am -7,12857 Lo 50 mg/kg - Lo DC duong *14,8629 Lo 70 mg/kg - Lo 90 mg/kg 6,28429 Lo 70 mg/kg - Lo DC am -8,10714 Lo 70 mg/kg - Lo DC duong *13,8843 Lo 90 mg/kg - Lo DC am *-14,3914 Lo 90 mg/kg - Lo DC duong Lo DC am - Lo DC duong 7,6 *21,9914 * Cặp lơ thí nghiệm có khác biệt có ý nghĩa với độ tin cậy 95% Những lơ thí nghiệm có chữ giống khơng khác biệt mức tin cậy 95% 29 Phụ lục Phụ lục 21 SO SÁNH TRỌNG LƢỢNG CHUỘT CỦA CÁC LƠ THÍ NGHIỆM Ở NGÀY N0 Anova: Single Factor SUMMARY Groups Column Column Column Column Column Count 7 7 Sum 160,52 169,79 164,49 158,26 162,27 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 11,06476 71,32931 df 30 Total 82,39407 34 Average 22,93143 24,25571 23,49857 22,60857 23,18143 Variance 1,245014 1,326529 3,348914 3,777481 2,190281 MS F P-value F crit 2,76619 1,163416 0,346558 2,689628 2,377644 Nhận xét: F = 1,16 < F crit = 2,69 P-value = 0,35 > 0,05 Kết luận: Trọng lƣợng chuột lơ thí nghiệm vào ngày N0 khơng có khác biệt có ý nghĩa mức độ tin cậy 95% 30 Phụ lục Phụ lục 22 SO SÁNH TRỌNG LƢỢNG CHUỘT CỦA CÁC LƠ THÍ NGHIỆM Ở NGÀY N8 Anova: Single Factor SUMMARY Groups Column Column Column Column Column Count 7 7 Sum 167,07 175,84 165,42 161,95 167,61 Average 23,86714 25,12 23,63143 23,13571 23,94429 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 14,97873 Within Groups 56,87077 df 30 Total 34 71,8495 Variance 1,574724 1,475867 1,348914 3,601329 1,477629 MS F P-value F crit 3,744681 1,975363 0,123773 2,689628 1,895692 Nhận xét: F = 1,98 < F crit = 2,69 P-value = 0,12 > 0,05 Kết luận: Trọng lƣợng chuột lơ thí nghiệm vào ngày N8 khơng có khác biệt có ý nghĩa mức độ tin cậy 95% 31 Phụ lục Phụ lục 23 SO SÁNH TRỌNG LƢỢNG CHUỘT GIỮA NGÀY N0 VÀ N8 CỦA LÔ 50 MG/KG t-Test: Two-Sample Assuming Unequal Variances Mean Variance Observations Hypothesized Mean Difference df t Stat P(T