ĐỘC TỐ NẤM MỐC AFLATOXIN

MÔN VI SINH THỰC PHẨM BÁO CÁO ĐỀ TÀI -o0o ĐỘC TỐ NẤM MỐC AFLATOXIN GVHD: TS VŨ THỊ LÂM AN Thành viên: 11156026 Cao Thị Thùy Dung 11156034 Nguyễn Thị Ngọc Hiệp 11156057 Nguyễn Thị Sâm 11156066 Ninh Phương Thúy 11156068 Trần Thị Anh Thư 11156070 Trần Diễm Hoài Thương   I.Tổng quan Aflatoxin II Một số biện pháp phòng ngừa aflatoxin thực phẩm III Phương pháp xác định aflatoxin I Tổng quan Aflatoxin • • • • Lịch sử: 1924: Shofiel cộng phát loại độc tố sản sinh từ nấm mốc gây dịch bệnh cho gia cầm 1960: Một vụ dịch lớn gây chết hàng loạt gà tây nước Anh.Chỉ lâu sau,các nhà khoa học tìm thủ phạm chất có “màu xanh da trời” đặt tên Aflatoxin Aflatoxin: tinh thể trắng, bền nhiệt, không bị phân hủy nhiệt độ thông thường (ở 1200C, đun 30’ MT kiềm tác dụng độc) Không bền ánh sáng mặt trời tia tử ngoại  việc khử độc có nhiều biện pháp Hiện nay, tìm thấy 18 loại Aflatoxin khác nhau, có loại thường gặp là: AFB1 (B1), AFB2 (B2), AFG1 (G1), AFG2 (G2) Aflatoxin B1 chiếm nhiều nông sản, gây tác hại nhiều nhất, gây ngộ độc nhanh phổ biến • Các Aflatoxin có khả phát huỳnh quang hấp thụ tia tử ngoại mức độ khác • Aflatoxin B1 B2: xanh da trời • Aflatoxin G1 G2: màu xanh nước biển Nguồn gốc • Aflatoxin sinh chủ yếu loại nấm: Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus Aspergillus parasiticus Aspergillus flavus Không phải tất chủng Aspergillus flavus sinh độc tố Aflatoxin, 73% có khả sinh độc tố, 23% sản sinh Aflatoxin mức cao • Khả sinh độc tố Aflatoxin phụ thuộc vào yếu tố chủng nấm mốc, nhiệt độ, chất, độ ẩm chất mơi trường • Một số lồi nấm mốc khác có khả sinh Aflatoxin với lượng : Penicillium puberulum Bai, Aspergillus tamariikita, Aspergillus niger tiegh, Aspergillus ostiamis wehmen, Aspergillus ruper… • Nhiệt độ thích hợp để sản sinh Aflatoxin chủng nấm mốc từ 25-28 0C Bảng : Các sản phẩm nhiễm Aflatoxin Các hạt ngũ cốc Ngơ,thóc,gạo,lúa mì Hạt có dầu Lạc,dừa,đậu tương,hướng dương Củ Sắn,khoai tây… Sữa Sữa tươi,pho mat… Thủy sản Cá,tôm… Sản phẩm lên men Bia,nước giải khát,rượu vang… Các sản phẩm nhiễm Aflatoxin + Nhóm tuổi mắc bệnh : xuất nhiều 15 – 29 + Gây tử vong cho 19 người II.Một số biện pháp phòng ngừa aflatoxin thực phẩm Có nhiều loại lương thực thực phẩm dễ bị nhiễm aflatoxin: • Ngũ cốc: ngơ, đậu, gạo, lúa mì, sản phẩm chế biến • Các loại hạt có dầu • Các loại sữa sản phẩm từ sữa  Cần phải có biện pháp thích hợp để tránh xâm nhiễm aflatoxin vào thực phẩm a Thực giáo dục truyền thông cho người nơng dân b Phịng chống nấm mốc cho lương thực bảo quản • Xử lý củ: diclofluanit diflolatan, captan, oxinat • Lựa chọn củ, hạt Làm khơ • Điều kiện tồn trữ c Điều trị bị nhiễm độc d Các phương pháp dùng để khử độc tố aflatoxin • Phương pháp vật lí • Phương pháp hố học Chiết xuất dung mơi Làm biến đổi phân tử • Phương pháp sinh học Cạnh tranh lồi nấm Các chuyển hố sinh học Một số có khả làm thối biến aflatoxin III Phương pháp xác định aflatoxin Sắc ký lớp mỏng • Phương pháp sắc kí lớp mỏng sử dụng rộng rãi để xác định hàm lương Aflatoxin lần vào năm 1960 Người ta sử dụng mỏng tráng silicagel, để xác đinh aflatoxin • Dung môi sử dụng cho dung dịch chạy mỏng choloroforrin: metthnol choloroform: aceton Việc thêm nước vào hệ thống dung mơi làm tăng khả hịa tan aflatoxin • Hệ dung mơi gồm: nước, aceton, choloroforin (1.5, 12, 88) Các mỏng chảy qua dung môi chạy đưa vào đèn tử ngoại (UV) 365mm Các vết mẫu phân tích tạo màu huỳnh quang xanh da trời xanh • Nhược điểm phương pháp phụ thuộc vào người phân tích b Sắc ký lớp mỏng chiều: Chiều cao đạt khoảng 10 cm dừng Chấm mẫu lên sắc ký Cho vào dung môi Dùng đèn UV để đọc kết Đưa ra, để khô b Sắc ký lớp mỏng hai chiều: • Nếu có nhiễu xuất vạch sắc ký gần với điểm huỳnh quang, tiến hành chạy sắc ký lớp mỏng hai chiều Chấm mẫu theo hướng hướng Đặt SK hướng vào hộp chứa dd TLC chiều SK hướng 7cm dừng Làm nóng tủ sấy 50oC, phút Để nguội, đặt SK hướng thứ hai, chiều xuống vào hộp chứa dd TLC hai chiều SK hướng 7cm dừng Lấy ra, để khơ Sử dụng đèn UV để đọc Tính tốn kết theo cơng thức: • Trong đó: • Vs giá trị thể tích điểm chấm dung dịch chuẩn làm việc AFM1 dung dich A dung dich B • Cs hàm lương AFM1 dung dịch làm việc A B • V1 thể tớch ca cn hũa tan (àl) ã V2 l th tớch im chm phn mu ó tinh sch (àl) ã mt thể tích khối lượng mẫu thử (ml mg) Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Cách tiến hành Chiết 25g mẫu thử + 5g NaCl + 125ml dung môi Lọc (bằng giấy lọc) Làm 15ml dịch lọc + 30ml H2O Nhận dạng Lọc (giấy lọc vi sợi thủy tinh) Xác định Chạy sắc ký cột lực Chuẩn bị cột IA 15ml dịch lọc + dung môi cột IA Chiết Cột tách Làm Nhận dạng Rửa cột - Loại chất rửa giải Rửa giải aflatoxin Thu lấy chất rửa giải + H2O Xác định Định mức Chiết So sánh thời gian lưu chất chuẩn tương ứng Làm Bơm 50l hỗn hợp chuẩn lên vòng bơm Nhận dạng Xác định Rửa giải aflatoxin Bơm 50l dịch chiết mẫu vào vịng bơm •2  Kết • Tính khối lượng mẫu thử mt • Tính phần khối lượng aflatoxin wi ... sinh độc tố Aflatoxin, 73% có khả sinh độc tố, 23% sản sinh Aflatoxin mức cao • Khả sinh độc tố Aflatoxin phụ thuộc vào yếu tố chủng nấm mốc, nhiệt độ, chất, độ ẩm chất môi trường • Một số lồi nấm. .. quan Aflatoxin II Một số biện pháp phòng ngừa aflatoxin thực phẩm III Phương pháp xác định aflatoxin I Tổng quan Aflatoxin • • • • Lịch sử: 1924: Shofiel cộng phát loại độc tố sản sinh từ nấm mốc. .. lây nhiễm Aflatoxin: Trong điều kiện khí hậu thuận lợi (nóng ẩm), nấm mốc sản sinh độc tố vi nấm nhiễm vào thức ăn.Con người gia súc ăn phải thức ăn nhiễm Aflatoxin có triệu chứng nhiễm độc cấp