BÁO CÁO THỰCHÀNH VI SINH THỰC PHẨM

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ ĐỒNG NAI KHOA THỰC PHẨM – MÔI TRƯỜNG – ĐIỀU DƯỠNG BÁO CÁO THỰC HÀNH VI SINH THỰC PHẨM GVHD: Trần Thị Hà DANH SÁCH SINH VIÊN Stt Họ đệm Tên Mã số sv Ghi Lâm Diễm Tiên 1303397 Nhóm Nguyễn Thị Thủy 1303438 Nhóm Lê Trần Anh Thư 1303391 Nhóm Nguyễn Thị Bích Nguyệt 1303367 Nhóm 5 Nguyễn Hồng Mai Trâm 1303207 Nhóm 6 Lê Thị Hằng 1303160 Nhóm Nguyễn Thị Thủy Tiên 1303755 Nhóm Dương Thị Cẩm Hồng Nhóm Bài 1: PHƯƠNG PHÁP CHUẨN BỊ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY VI SINH VẬT I BÁO CÁO THÍ NGHIỆM Trả lời câu hỏi Câu 1.Tại pH điều kiện quan trọng môi trường? -pH môi trường có ý nghĩa định sinh trưởng nhiều vi sinh vật Các ion H+ OH- hai ion hoạt động lớn tất ion Những biến đổi nồng độ chúng dù nhỏ có ảnh hưởng mạnh mẽ đến vi sinh vật Cho nên việc xác định pH thích hợp việc trì pH cần thiết thời gian sinh trưởng tế bào quan trọng.pH môi trường ảnh hưởng mạnh đến sinh trưởng mà tác động sâu sắc đến trình trao đổi chất Câu Có phải mơi trường thích hợp cho loại VSV phát triển hay khơng? - Phải loại hình dinh dưỡng vi sinh vật phức tạp, vi sinh vật khác có u cầu khơng giống chất dinh dưỡng vi du :Các vi khuẩn sử dụng CO2 khơng khí (hay hịa tan nước) để cung cấp nguồn carbon Với vi sinh vật tự dưỡng quang việc cung cấp chất dinh dưỡng cần tiết cần chiếu sáng để cung cấp lượng cho chúng Đối với vi sinh vật dị dưỡng cần cung cấp chất hữu nhu cầu dinh dưỡng nhóm khác khác nhau.Một mơi trường thích hợp cho loại vi sinh vật phát triển vi sinh vật khác có u cầu khơng giống chất dinh dưỡng Câu 3.Trình bày sản phẩm sau kết thúc thí nghiệm - Sản phẩm sau kết thúc thí nghiệm ống nghiệm đĩa perti chứa môi trường nuôi cấy nấm men ống nghiệm đĩa perti chứa môi trường nuôi cấy nấm mốc, bên môi trường nuôi cấy nấm men, nấm mốc cung cấp - đầy đủ nhu cầu dinh dưỡng cho phát triển chúng Sau ống nghiệm đĩa petri bên nuôi cấy nấm mốc nấm men vào môi trường khác chờ phân lập Câu nấm men gì? - Là loại nấm đơn bào với số lồi thường sử dụng để lên men bánh mì hay sản xuất loại đồ uống chứa cồn số mẫu tế bào nhiên liệu thử nghiệm phần lớn loại men thuộc ngành nấm túi (Ascomycota) có số loài thuộc ngành nấm đảm (basidomycota) số lồi nấm chẳng hạn candida albicans Có thể gây nhiễm độc nấm người (candidiasis).trên 1000 loài nấm men miêu tả loài men người sử dụng phổ biến sacharomyces • cerevisiae.nó dùng để sản xuất rượu vang bánh mì bia từ hàng nghìn năm trước Cơng dụng nấm men: Men Saccharomyces cerevisiae loài men chung cho làm bánh mì lẫn chế biến rượu, • • • • • • bia Có khả kết lắng làm dung dịch nhanh Tạo mùi đặc trưng riêng biệt Chịu độ acid môi trường chất sát trùng Có khả khử đường sacaroza thành fructoza glucoza Làm giảm lưu lượng nước chất điện giải ruột, điều hòa đương ruột… Men bia giúp tăng hoạt tính enzyme ruột disaccharidase, maltase, • lactase để giúp giảm triệu chứng tiêu chảy Men bia chứa nhiều chromium giúp tăng hoạt động insulin có ích cho bệnh nhân tiểu đường người có cholesterol cao Câu nấm mốc gì? - Là lồi nấm sợi điển hình gồm tất nấm khơng phải nấm men khơng sinh mũ nấm ( thể có kích thước lớn)như nấm lớn coi nấm sợi - nghiên cứu mặt sinh lí ,sinh hóa di truyền … nấm sợi khác Công dụng nấm mốc quy trình chế biến thực phẩm có liên quan đến lên men cần đến có mặt vsv có nấm mốc nấm mốc giúp tổng hợp loại kháng sinh (penicillin,griseofulvin) acid hữu ,vitaminmo6t5 số enzim hợp chất khác dùng công nghiệp thực phẩm y dược … sữ dụng rộng rãi tồn giới ngồi nấm cịn giữ vai trò phân giải chất hữu trả lại độ màu mỡ cho đất • trồng , số ứng dụng sản xuất tương Tác hại nấm mốc : Nấm mốc phát sinh hợp chất hữu độc hại Hợp chất phát tán khơng khí, gây mùi nồng khó chịu Nhiễm hợp chất làm mắt bị dị ứng, đường hô hấp viêm • nhiễm gây nhức đầu, chóng mặt, mệt mỏi, viêm mũi có số lồi nấm mốc gây độc tố vd: độc tố snh từ nấm Aspergillus Aspergillus parasiticus, nấm aflatoxin làm giảm khả hấp thụ dinh dưỡng ảnh hưởng tới tốc độ tăng trưởng trình sử dụng gia súc , gây phá hủy gan , giảm hệ miễn dịch , ăn mòn thành ruột dày BÀI 2: PHƯƠNG PHÁP QUAN SÁT TRẠNG THÁI VI SINH VẬT Câu Nêu đặc điểm xạ khuẩn nấm men, nấm mốc - Xạ khuẩn nhóm vi khuẩn đặc biệt Chúng có khuẩn lạc khơ đa số có dạng hình phóng xạ (actino-) khuẩn thể lại có dạng sợi phân nhánh nấm (myces) Xạ khuẩn có cấu trúc nhân nguyên thuỷ, chiều ngang sợi nhỏ vi khuẩn Xạ • khuẩn phân bố rộng rãi tự nhiên Một số xạ khuẩn loài thuộc chi Actinomyces Nocardia giống với lồi • vi khuẩn thuộc chi Lactobacillusvà Corynebacterium Xạ khuẩn giống vi khuẩn chỗ khơng có nhân thật, chúng chứa nhiễm sắc chất phân • bố dọc theo sợi tế bào Đường kính sợi xạ khuẩn bào tử giống với vi khuẩn Đồng thời sợi xạ khuẩn thường không chứa vách ngănXạ khuẩn đích cơng thực khuẩn thể giống vi khuẩn, đó, nấm khơng bị cơng thực khuẩn thể Xạ khuẩn thường nhạy cảm với kháng sinh có tác dụng lên vi khuẩn, lại thường kháng với • kháng sinh tác dụng lên nấm polyen Xạ khuẩn không chứa chitin, chất có mặt sợi bào tử nhiều nấm, mà khơng • có vi khuẩn Đồng thời giống phần lớn vi khuẩn, xạ khuẩn không chứa cellulose Tương tự với vi khuẩn, xạ khuẩn nhạy cảm với phản ứng acid môi trường,đặc điểm - khơng có nấm Đặc điểm nấm mốc: hình sợi có màu trắng số lồi nấm khẩn ti khơng có vách ngăn bên có nhiều nhân khuẩn ti lồi nấm có vách ngăn chứa nhân nhân bên ngồi có thành tế bào thường cấu tạo chitin cellulozo hai tế bào chất có nhân phân hóa Màng nhân có cấu tạo hai lớp , - màng có nhiều lỗ nhỏ Đặc điểm nấm men : có hình bầu dục, nhiên tùy lồi mà nấm men có tế bào hình cầu, hình trứng hình elip … kích thước lớn gấp 10 gần vi khuẩn đường kính 1-5micromet dài 5-30 micromet ,nấm men vsv kị khí bắt buộc Nấm men có khả sinh sản nhanh chóng, sinh khối chúng giàu protein, lipid vitamin (đặc biệt vitamin B) Nấm men sinh vật có nhân thật, cấu tạo tế bào có màng tế bào, nguyên sinh chất, nhân, ty thể, ribosome, không bào, số thể vùi (glycogen, lipit, volutin…) Câu 2.Vẽ hình vi sinh vật quan sát kính hiển vi Câu Nêu cấu tạo kính hiển vi? - Thị kính: Có thể từ đến thấu kính thủy tinh cho phép tạo ảnh cuối vật qua hệ quang học Độ phóng đại thị kính nhỏ, - thường 10x, lắp đặt ống trụ, cho phép thay đổi dễ dàng Giá điều chỉnh vật kính - Vật kính: thấu kính quan trọng hệ tạo ảnh nhờ thấu kính, (hoặc hệ nhiều thấu kính) có tiêu cự ngắn, cho phép phóng đại vật với độ phóng đại lớn Nhờ có giá điều chỉnh, vật kính khác xoay để thay đổi trị số phóng đại.Có loại vật kính, thườ ng dùng 3loại: • Vật kính x10: có thị trường lớn nhất, sau điều chỉnh để thấy rõ mẫu vật, vật kính thường cách kính mang vật khoảng 16mm • Vật kính x40: có độ phóng đại trung bình, sau điều chỉnh để thấy rõ mẫu vật, vật kính thường cách kính mang vật khoảng 4mm • Vật kính x100: có độ phóng đại lớn nhất, sau điều chỉnh để thấy rõ mẫu vật, vật kính thường cách kính mang vật khoảng 1mm - Giá vi chỉnh, cho phép điều chỉnh độ cao mẫu vật để lấy nét trình tạo ảnh - Giá đặt mẫu vật - Hệ thống đèn, gương tạo ánh sáng để chiếu sáng mẫu vật - Hệ thống độ, thấu kính hội tụ để hội tụ tạo chùm sáng song song chiếu qua mẫu vật - Vi chỉnh cho phép dịch chuyển mẫu vật theo chiều ngang để quan sát phần khác theo ý muốn Câu Nêu cách làm tiêu giọt ép? - Dùng que cấy ống hút lấy giống vi sinh vật để làm vết bơi Đặt kính lên giọt canh trường thật nhẹ nhàng tránh không tạo thành bọt khí Muốn để mép kính tiếp xúc với phiến kính từ từ hạ kính xuống - Đưa tiêu lên quan sát kính hiển vi Bài : PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG VSV BÁO CÁO KẾT QUẢ Câu Xác định mật độ tế bào huyền phù vi khuẩn xác định phương pháp đếm khuẩn lạc? - Pha loãng mẫu thành nồng độ : 10-1 , 10-2, 10-3 Dùng pipette 1ml hút 0,1ml mẫu nồng độ pha loãng khác cho vào đĩa - petri vô trùng Nấu chảy môi trường hấp khử trùng, để nguội 450C, đổ vào đĩa petri có - mẫu, Lắc hộp hai chiều ngược để trộn dều mẫu với môi trường Để ấm 370C 48 Đếm khuẩn lạc mọc đĩa Chọn nồng độ pha lỗng có số lượng khuẩn lạc (p) khoảng 25-250 Tính lượng tế bào sống (N) mẫu sau : A= Trong : A : số tế bào (đơn vị hình thành khuẩn lạc) vi khuẩn 1g hay 1ml mẫu N : tổng số khuẩn lạc đếm đĩa chọn Ni : số lượng đĩa cấy độ pha lỗng thứ i V : thể tích dịch mẫu (ml) cấy vào đĩa Fi : độ pha loãng tương ứng Bài 4: PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP LÀM THUẦN NẤM MEN, NẤM MỐC Câu Chụp hình nấm men, nấm mốc sau làm Câu Thành phần môi trường định tới phương pháp khử trùng mơi trường? sao? - Thành phần vi sinh vật môi trường định tới phương pháp khử trùng mơi trường vì: khử trùng dùng để trình dùng để loại trừ tiêu diệt tất hình thái sống bao gồm tác nhân gây truyền nhiễm nấm, vi khuẩn, virus, dạng bào tử, diện bề mặt, hay tồn canh trường Bài 5: ĐỊNH LƯỢNG COLIFORM TRONG NƯỚC THẢI PHƯƠNG PHÁP MPN Xác định số MPN có mẫu nước thải? Câu Số MPN coliforms có mẫu nước Số ống Số ml mẫu sử dụng 0,1 0,01 3 Số MPN/ 100ml mẫu >1100 dương tính Câu Nhận xét: - Sau thực xong thí nghiệm giúp nhận biết xuất - coliforms mẫu nước Biết cách thực phương pháp MPN Bài PHƯƠNG PHÁP NHUỘM GRAM Câu nêu cách nhuộm gram - Chuẩn bị tiêu bản, cố định vi khuẩn Nhỏ vài giọt tím tinh thể lên tiêu để 30 giây Nghiêng tiêu rửa nước từ – giây Thấm khô tiêu Nhỏ vài giọt dung dịch iod lên tiêu khô để 10 giây Nghiêng tiêu rủa nước từ – giây Nhỏ ethanol lên tiêu để 30 giây Rửa trôi lại nước Nhỏ safranin lên tiêu để 30 giây Rửa lại nước, để khô quan sát kính hiển vi Câu Điển khác gram âm gram dương Tính chất Phản ứng với Gram dương Tím tía Gram âm Mất màu tím tẩy, rửa, nhuộm chất nhuộm gram màu phụ đỏ safranin(hoặc Lớp Dày, nhiều lớp Fuchsin) Khơng có Peptidoglucan Lớp thành ngồi Khơng có có Lớp Ít, khơng có Nhiều, hàm lượng cao lipopolisaccharit HL lipit Thấp Cao lipoprotein Tạo độc tố Ngoại độc tố Nội độc tố Tác nhân vật lí Chống chịu cao Chống chịu thấp Cấu trúc gốc tiêm vòng ổ đĩa giốc mao vòng ổ đĩa gốc Mẫn cãm với Mẫn cảm,dễ bị tan Ít mẫn cảm lizozim Mẫn cảm với Cao Thấp sulfonamid Chống chịu với Cao Thấp muối natri Chống chịu với Cao Thấp khô hạn Kết hợp với Cao, chặt chẽ Thấp, lõng lẻo Penicilin thuốc nhuộm kiềm BÀI 12 LÊN MEN CHAO Nhận xét đánh giá sản phẩm - Màu sắc: Miếng chao ngả vàng, màu cam nước chao, khơng có váng nhớt Trạng thái: miếng chao đồng đều, rắn chắc, khơng nát, khơng có nhiễm nấm mốc Hương vị: có vị béo hương thơm đặc trưng hấp dẫn, khơng có mùi lạ Độ mặn vừa phải  ... loài men người sử d? ??ng phổ biến sacharomyces • cerevisiae.nó d? ?ng để sản xuất rượu vang bánh mì bia từ hàng nghìn năm trư? ?c Công d? ??ng nấm men: Men Saccharomyces cerevisiae lồi men chung cho làm... men thu? ?c ngành nấm túi (Ascomycota) c? ? số lồi thu? ?c ngành nấm đảm (basidomycota) số lồi nấm chẳng hạn candida albicans C? ? thể gây nhiễm đ? ?c nấm người (candidiasis).trên 10 0 0 loài nấm men miêu... thu? ?c chi Actinomyces Nocardia giống với lồi • vi khuẩn thu? ?c chi Lactobacillusvà Corynebacterium Xạ khuẩn giống vi khuẩn chỗ khơng c? ? nhân thật, chúng ch? ?a nhiễm s? ?c chất phân • bố d? ? ?c theo sợi