Phân lập và nghiên cứu một số chủng nấm mốc trên sâu hại khoai lang tại phường đông vĩnh, thành phố vinh, tỉnh nghệ an

Tr-ờng đại học Vinh Khoa sinh học === === Lê nh- trang Phân lập nghiên cứu số chủng nấm mốc sâu hại khoai lang ph-ờng Đông Vĩnh, thành phố Vinh, tỉnh Nghệ An Khoá luận tốt nghiệp đại học Ngành khoa học sinh học Vinh 2008 Lời cảm ơn Trong trình học tập nghiên cứu để hoàn thành luận văn, nỗ lực thân em đà nhận đ-ợc giúp đỡ, tạo điều kiện Thầy Cô, bạn bè ng-ời thân Tr-ớc hết cán phòng Thí nghiệm Di truyền - Vi sinh, Thầy, Cô giáo Khoa đà tạo điều kiƯn gióp ®ì em ®Ĩ em cã ®đ ®iỊu kiƯn b-ớc vào đ-ờng nghiên cứu khoa học hoàn thành luận văn, cảm ơn khích lệ, động viên ng-ời thân, bạn bè thời gian qua Đặc biệt, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo Nguyễn D-ơng Tuệ đà bảo tận tình, h-ớng dẫn chu đáo cho em suốt thời gian học tập hoàn thành luận văn Trong suốt thời gian nghiên cứu thu mẫu, em đà nhận đ-ợc giúp đỡ nhiệt tình bác nông dân ph-ờng Đông Vĩnh, thành phố Vinh, tỉnh Nghệ An Nhân em xin chân thành cảm ơn! Vinh, tháng 4/2008 Sinh viên Lê Nh- Trang Môc lôc Trang Đặt vấn đề Chương Tổng quan tài liệu 1.1 Sơ lược tình hình nghiên cứu nấm mốc hại sâu giới 1.2 Sơ lược tình hình nghiên cứu nấm mốc hại sâu Việt Nam 1.3 Các nhóm nấm mốc kí sinh sâu 1.4 Những biểu bệnh sâu 1.5 Ý nghĩa lồi nấm mốc kí sinh sâu Chương Đối tượng phương pháp nghiên cứu 10 2.1 Đối tượng nghiên cứu 10 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 10 2.2.1 Thời gian nghiên cứu 10 2.2.2 Địa điểm nghiên cứu 10 2.3 Phương pháp nghiên cứu 10 2.3.1 Phương pháp thu mẫu sâu 10 2.3.2 Phương pháp phân lập nấm mốc 10 2.3.3 Phương pháp xác định số lượng nấm mốc 11 2.3.4 Phương pháp tìm hiểu ảnh hưởng nhiệt độ 12 2.3.5 Phương pháp tìm hiểu ảnh hưởng độ ẩm 13 2.3.6 Phương pháp tìm hiểu ảnh hưởng cuả pH 13 2.3.7 Phương pháp tìm hiểu ảnh hưởng thời gian 13 2.3.8 Phương pháp thử nghiệm ảnh hưởng số chủng nấm mốc đến đời sống sâu hại khoai lang 13 Chương Kết nghiên cứu thảo luận 15 3.1 Đặc điểm sâu phá hoại khoai lang phường Đông Vĩnh, thành phố Vinh, tỉnh Nghệ An 15 3.2 Kết điều tra nấm mốc xác số loài sâu 15 3.3 Đặc điểm chủng nấm phân lập 18 3.4 Sinh trưởng chủng nấm mốc 20 3.4.1 Kết đo độ đục 20 3.4.2 Xác định số l-ợng bào tử ca chủng 21 3.5 Kết nghiên cứu vÒ ảnh hưởng số điều kiện môi trường tới phát triển nấm 23 3.5.1 ¶nh hưởng nhiệt độ 23 3.5.2 ¶nh hưởng độ ẩm 26 3.5.3 ¶nh hưởng pH 28 3.5.4 Ảnh hưởng thời gian đến hình thành khuẩn lạc 31 3.6 Kết thử nghiệm ảnh hưởng số chủng nấm mốc đến đời sống sâu hại khoai lang 32 3.7 Ứng dụng sản xuất chế phẩm nấm cám diệt sâu hại khoai lang 34 Kết luận đề nghị 36 Tài liệu tham khảo 38 Phụ lục 40 ĐặT VấN Đề Khoai lang l-ơng thực thứ giới sau lúa mì, lúa n-ớc, ngô, khoai tây, lúa mạch, sắn Khoai lang có hàm l-ợng đ-ờng bột (Cacbonhydrat), vitamin A l-ợng cao so với lúa mì, lúa n-ớc sắn Khoai lang đ-ợc sử dụng củ làm thức ăn gia súc, chế biến bột, r-ợu, cồn, bánh kẹo gần làm màng phủ sinh häc (Bioplastic) ë NghƯ An nãi chung vµ ph-êng Đông Vĩnh nói riêng, khoai lang bốn loại l-ơng thực sau lúa, ngô, sắn khoai lang đ-ợc trồng 4vụ/năm (tùy địa ph-ơng): Hai vụ mùa m-a: Từ đầu tháng đến -1- đầu tháng từ đầu tháng đến cuối tháng 10 Hai vụ mùa khô: Vụ đông xuân (từ tháng 11 đến tháng 2) vụ xuân hè (từ tháng đến tháng 4) Cũng nh- nhiều trồng nông nghiệp khác, khoai lang bị nhiều loại sâu phá hoại nh- sâu đo, sâu lá, sâu mèo, sâu phao, làm giảm suất [14] Tr-ớc kia, ng-ời coi trọng việc phòng trừ sâu hại thuèc hãa häc nh-ng sau mét thêi gian thuèc hãa học đà biểu mặt trái Một giải pháp ngăn chặn phát triển sâu hại khoai lang sử dụng loài nấm mốc có khả tiêu diệt côn trùng, sâu d-ới dạng chế phẩm sinh học nh- nấm mốc thuộc chi Beauveria, Metarhizium, Entomophthora, Coelomyces, Aspegillus… Víi mong mn t×m hiểu cỏc điều kiện ảnh h-ởng tới phát triển nấm mốc khả tiêu diệt sâu hại khoai lang nấm mốc, lựa chọn đề tài khoá luận tốt nghiệp cử nhân sinh học là: " Phân lập nghiên cứu số chủng nấm mốc sâu hại khoai lang ph-ờng Đông Vĩnh, thành phố Vinh, tỉnh Nghệ An" -2- Mục đích đề tài: Do thấy đ-ợc vai trò nấm mốc diệt sâu hại khoai lang, ảnh h-ởng dến suất, chất l-ợng trồng nên với đề tài nhằm: Thu thập sâu hại khoai lang từ phân lập chủng khiết Với chủng khiết đà phân lập đ-ợc, nghiên cứu số đặc điểm sinh học yếu tố ảnh h-ởng ®Õn sù sinh tr-ëng, ph¸t triĨn cđa mét sè chđng Chän läc chđng sinh tr-ëng, ph¸t triĨn tèt, cã khả diệt sâu hại tốt để sử dụng vào thực tiễn Rèn luyện kĩ thực hành thí nghiệm Nhiệm vụ đề tài: Để đạt đ-ợc mục tiêu nói trên, nhiệm vụ đề tài gồm: Điều tra tình hình sản xuất khoai lang địa ph-ơng biện pháp phòng trừ sâu hại Lấy mẫu nuôi cấy phòng thí nghiệm, theo dõi số tiêu phát triển chúng Làm thí nghiệm ảnh h-ởng số yếu tố môi tr-ờng đến sinh tr-ởng, phát triển Từ tìm điều kiện tối -u để ®iỊu khiĨn sù sinh tr-ëng, ph¸t triĨn tèt Tõ yếu tố thích hợp nhất, xây dựng quy trình sản xuất sinh khối để sử dụng thực tiễn -3- nội dung Ch-ơng TổNG QUAN TàI LIệU 1.1 Sơ l-ợc tình hình nghiên cứu nấm mốc hại sâu giới Việc nghiên cứu nấm mốc kí sinh ứng dụng nấm mốc nhằm tiêu diệt côn trùng bắt đầu thực I I.Mechnikoff năm 1879 Và vào năm cuối kỉ 19, nhiều nhà khoa học Châu Âu đ-ợc Mechnikoff cổ vũ sử dụng nấm Beauveria spp Nấm mốc có nhiều loại sâu côn trùng khác số l-ợng loài nấm đà đ-ợc mô tả theo tài liệu Carle M I, Ignoffe (1967) đà đạt tới 530 loài Năm 1954, Macleod đà phân chia chi Beauveria thành hai loài Beauveria bassiana Beauveria tenella Năm 1975, Hoog công bố thêm hai loài nấm có tác dụng diệt sâu Beauveria alba Beauveria vermiconia Sau ú Carrmichae (1980) Samson (1982) công bố thêm ba loài Beauveria femila, Beauveria velata Beauveria amorpha Năm 1984, Nhật Bản đà phân lập đ-ợc nhiều loại nấm bạch c-ơng diệt sâu có bào tử hình ống hình que, giũa thắt lại uốn cong, tế sinh bào tử hình bình, đuôi hình chữ Z Năm 1981, Liang đà phân lập đ-ợc năm loài nấm mèc tùa xanh lµ Paecilomyces cateniobliquus, P cateniannulatus, P tenuipes, P farinosus P Năm 1903, Riley phát số loài nấm côn trùng họ ngài dêm Bắc Mĩ đặt tên Botrytis rileyi Spicaria rileyi châu tìm nấm kí sinh họ ngài đêm Botrytis prasina Spicaria prasina Đến năm 1983 Nomura đặt tên Normuraea ông chia thành hai loài N rileyi N alypicota Nấm đ-ợc dùng để phòng trừ sâu ruộng đậu, sâu hại bông, sâu lá, sâu đục thân ngô -4- Gần nhất, Hibett cộng (2007) đà phát đ-ợc 700 loài nấm gây bệnh cho côn trùng, quan trọng giống Beauveria, Metarhizium, Nomurasa Chúng kí sinh 30 loài sâu, rệp, bọ cánh cứng hại trồng Điều më mét h-íng míi øng dơng c«ng nghƯ sinh học vào việc bảo vệ trồng không ô nhiễm môi tr-ờng [16] Trên sở việc tìm loài nấm mốc kí sinh sâu côn trùng ng-ời ta đà ứng dụng loại nấm ®Ĩ diƯt s©u nh- ë MÜ ®· sư dơng nÊm Hirrsutella thompsonii để phòng trừ nhện hại cam quýt, từ loài nấm Paecilomyces ng-ời ta đà sản xuất chế phẩm Pelomin phòng trừ ngài đục táo sâu róm thông có hiệu cao, dùng nấm Normuraea để phòng trừ sâu ruộng đậu, sâu hại bông, sâu lá, sâu đục thân ngô Hay viện lâm nghiệp tỉnh Quảng Tây- Trung Quốc đà sản xuất chế phẩm Boverin từ chủng nấm Beauveria để phòng trừ sâu bệnh [11] 1.2 Sơ l-ợc tình hình nghiên cứu nấm mốc hại sâu Việt Nam Việc nghiên cứu nấm mốc kí sinh côn trùng đ-ợc nhiều tác giả quan tâm nghiên cứu nh- tác giả Tạ Kim Chỉnh, Vũ Quang Côn, Phạm Thị Thuỳ nh-ng việc nghiên cứu nấm mốc kí sinh sâu Việt Nam tác giả quan tâm nghiên cứu Vũ Quang Côn (1986) đà nghiên cứu nhóm vi sinh vật kí sinh sâu hi bưởi ®ã cã nÊm mèc v¯ «ng ®± cho xuÊt b°n Đặc điểm to thnh hệ thống vật chủ- kí sinh cc loi sâu hi bưởi [10] Các tác giả đà trọng tới việc ứng dụng chế phẩm sinh học có khả tiêu diệt sâu cao nh- nấm N rileyi có khả tiêu diệt sâu xanh sâu Việt Nam đà sử dụng chế phẩm Beauveria bassiana từ năm 1979 đến có tác dụng diệt sâu róm hại thông số loài sâu hại nông nghiệp -5- Liên Xô ®· nhËp néi tõ ViÖt Nam gièng Aschersonia placenta cã khả gây bệnh mạnh rận phấn cam đạt tỉ lệ tới 90% [7] n-ớc ta, việc sản xuất chế phẩm Beauveria có tên gọi Boverin đ-ợc thực (1984) nhiều tỉnh nh- Nghệ An, Thanh Hoá, Ninh Bình, Quảng Ninh từ năm 1980 đạt hiệu cao [7] Năm 2006, đại học Cần Thơ đà dùng nấm Metarhizium, Paecilomyces, Verticilium cho thấy nấm diệt ấu trùng sâu ăn tạp hoa màu, diệt rầy bí, loại dừa, diệt bọ cánh cứng dừa Tại Đà Nẵng, Phú Yên (2006), sử dụng nấm Beauveria trừ sâu hại dừa, trừ rầy bọ xít lúa, ăn tới 85- 90% 1.3 Các nhóm nấm mốc kí sinh sâu Nấm quần thĨ vi sinh vËt kh«ng cã chÊt diƯp lơc, cã phân hoá tế bào hữu tính, số loài đơn bào Chúng bao gồm nấm hoại sinh nấm kí sinh Nấm gây bệnh cho côn trùng đà phát đ-ợc hơn750 loài Phần lớn nấm gây bệnh cho côn trùng thuộc chi mốc sâu (Entermophthorales) ngành phụ nấm tiếp hợp (Zygomicotina) lớp nấm sợi (Hyphomycetes) ngành nấm bất toàn (Deuteromycotina) Trong có nhiều loài thuộc chi Beauveria, Metarrhizium, Entomophthora, Coelomyces gây dịch bệnh cho sâu hại có tác dụng khống chế tự nhiên [7] * Ngành phụ nấm tiếp hợp (Zygomicotina) th-ờng gặp loµi: En Muscae (nÊm mèc ruåi), En Aulicae (nÊm mèc ngài đèn), Erynia brahmina (nấm mốc dịch bọ hung), En Delphacis (nÊm mèc rËn) * Ngµnh nÊm bÊt toµn (Deuteromycotina) th-ờng gặp chi: Aschersonia Mont (nấm bào tử hình thoi), Beauveria Vuill (nấm bạch c-ơng), Metarhizium Sorokin (nấm lục c-¬ng), Paecilomyces Bainier (nÊm mèc tùa xanh), Normuraea Maublane, Hirsutella Pat, Cephalosporium Corda -6- Theo Zhang (1999), nấm bạch c-ơng bào tử cầu (Beuveria bassiana) có phạm vi kí sinh rộng, gây bệnh cho 700 loài thuộc 149 họ 15 côn trùng, 10 loài nhện Nấm mốc tựa xanh (Paecilomyces) đ-ợc nhiều nhà khoa học coi trọng, chúng làm sâu róm thông sâu thông chết 90- 100% 1.4 Những biểu bệnh sâu Phát dục không bình th-ờng: Biểu chỗ phát dục kéo dài, thân sâu gầy yếu, đầu to, thân nhỏ Hành vi không bình th-ờng: Khi bị bệnh, sâu th-ờng bị kích động Sau bị bệnh, sâu th-ờng b-ớc vào ngủ nghỉ sớm, thiếu phản ứng với môi tr-ờng sâu bị bệnh di chuyển từ nơi nghỉ đến nơi khác, nh- bò lên cao để chết Tiêu hoá không bình th-ờng: Sâu bị bệnh th-ờng ăn ít, có tiết dịch thể từ hậu môn, có phân khô, thành viên nhỏ dính vào hậu môn, màu phân khác th-ờng Màu sắc khác th-ờng: Sự biến màu thân sâu th-ờng nhiều nguyên nhân: - Do tồn vật gây bệnh thân sâu nh- nấm bạch c-ơng (có màu trắng), nấm lục c-ơng (có màu xanh), nấm hồng c-ơng (có màu đỏ) Cũng vi khuẩn gây nên - Do vi sinh vật tạo sắc tố làm cho sâu biến màu nh- nấm Serrratia marcescens sinh sắc tố đỏ làm cho thân sâu có màu đỏ - Do phản ứng phòng vệ sâu tạo sắc tố đen, th-ờng thân sâu có đốm đen Biến đổi mô tế bào: Do vật gây bệnh khác nhau, quan phận biểu không bình th-ờng -7- Núi chung cỏc chng nm thớch hợp với điều kiện chua trung tính, phạm vi thích hợp từ 3- nảy mầm tốt pH 3- 9.4 Ví dụ nấm bạch cương có phạm vi pH nảy mầm 3- 9.4, nảy mầm nhiều pH= 4.4, hình thành bào tử tốt pH= Nấm lục cương sinh trưởng phạm vi pH từ 6.7- 7.2 Để xác định ảnh hưởng pH lên sinh trưởng chủng nấm mốc ni chủng nấm mốc độ pH khác (các chủng phải nuôi nhiệt độ độ ẩm) Nuôi chủng độ pH khác (từ đến 7), đo đường kính khuẩn lạc từ xuất đến ngày thứ xác định tốc độ sinh trưởng chủng độ pH tng ng Tốc độ sinh tr-ởng đ-ợc tính nh- Kết thu được trình bày bảng 3.6 - 30 - - 31 - Đồ thị cho thấy rõ kết bảng 3.6: V% M1 M2 M3 M4 M5 1400 1200 1000 800 600 400 200 pH th 3.6: So sánh ảnh hng ca pH n phát triển chủng nấm mốc Qua đồ th ta thấy pH thích hợp cho chủng nấm mốc phát triển (mụi trng trung tớnh) Riêng chủng M5 pH thích hợp ë pH = chØ cã nhÊt chñng M5 phát triển đ-ợc, pH= v cỏc chng phát triển yếu Do kết luận pH thấp (mơi trường axit) q cao khơng thích hợp cho chủng nấm phát triển Môi trường trung tính mơi trường thích hợp cho chủng nấm mốc phát triển Để nhân giống cần ni chủng nấm M1, M2, M3 M4 môi trường trung tính có pH= từ đến 6, chủng M5 pH= 3.5.4 ¶nh hưởng thời gian đến hình thành khuẩn lạc Thời gian nhân tố quan trọng ảnh hưởng đến sinh trưởng cùa nấm Các chủng nấm khác có thời gian sinh trưởng, nảy mầm hình thành bào tử khác - 32 - Để xác định ảnh hưởng thời gian lên hình thành khuẩn lạc chủng nấm ni chủng nấm điều kiện từ xác định thời gian đến hình thành khuẩn lạc chủng nấm mốc Sau 48 ni khuẩn lạc hình thành Kết thu được trình bày bảng 3.7 Bảng 3.7: Ảnh hưởng thời gian đến hình thành khuẩn lạc Chủng nấm M1 M2 M3 M4 M5 24 _ _ _ _ mọc 30 mọc mọc mọc _ _ 48 _ _ _ mọc _ Thời gian (giờ) Ghi chú: Tất chủng nuôi pH = 6, độ ẩm = 75% nhiệt độ 30oC Qua bảng ta thấy, sau 24 có chủng M5 hình thành khuẩn lạc sớm nhất, sau 30 chủng M1, M2 M3 mọc sau 48 chủng M4 mọc 3.6 Thư nghiƯm t¸c dơng cđa mét sè chđng nÊm mốc đến đời sống số loài sâu hại khoai lang Sau tiến hành nghiên cứu đặc điểm số chủng nấm mốc môi trường Czapeck, tiếp tục thử nghiệm ảnh hưởng số chủng nấm mốc lên đời sống số lồi sâu hại khoai lang Kết thí nghiệm trình bày bảng 3.8 - 33 - Bảng 3.8: Khả diệt sâu nấm Lô sâu nghiên cứu Chỉ tiêu Thời gian theo dõi Số lượng sâu thử nghiệm Số lượng sâu chết không nhiễm nấm mốc Số lượng sâu chết nhiễm nấm mốc Lô sâu đối chứng (Lơ sâu có nhiễm nấm mốc) Chủng Chủng Chủng Chủng M1 M2 M3 M4 25 25 25 25 25 Sau ngày 1 Sau ngày 0 0 Sau ngày 0 0 Sau ngày 0 24 Sau ngày 23 _ Sau ngày _ 17 _ 22 16 100 70.8 100 33.33 Số lượng sâu lại sau 10 ngày Tỉ lệ sâu chết (%) Từ bảng 3.8 cho thấy: - Số sâu chết thấy chưa nhiễm nấm nhiễm nấm tỉ lệ sâu chết cao - Sau ngày, tác dụng chủng M3 số lượng sâu chết 24/24tỉ lệ 100% - 34 - - Sau ngày, tác dụng chủng M1 số lượng sâu chết 23/23tỉ lệ 100% - Sau ngày, số lượng sâu chết tác dụng chủng M2 17/24tỉ lệ 70.8%, tác dụng chủng M4 8/24- tỉ lệ 33.33% - Đến ngày thứ 10, số lượng sâu hoá bướm đối chứng 22/22- tỉ lệ 100%, chủng M2 7/24- tỉ lệ 29.2% chủng M4 16/24, tỉ lệ 66.67% Như vậy, tỉ lệ sâu chết tối đa có chủng M1 M3 (100%) chủng M4 có hiệu suất diệt sâu yếu (33.3%) Để thấy rõ hơn, kết trình bày đồ thị sau: TØ lƯ s©u chÕt (%) 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 M1 M2 M3 M4 ĐC Thêi gian ngày 6ngày ngày Đồ thị 3.7 Tỉ lệ sâu chết nhiễm chủng nấm mc 3.7 Sản xuất chế phẩm nấm cám diệt sâu h¹i khoai lang Sản xuất sinh khối khâu quan trọng công nghệ nấm nhờ để lưu giữ, bảo quản lâu dài, cần thiết đem sử dụng Từ kết thu bảng 3.2, bảng 3.3, bảng 3.4, bảng 3.5 bảng 3.6, sản xuất sinh khối nấm với chủng lựa chọn sau: Sơ đồ sản xuất sinh khối nấm diệt sâu hại khoai lang: - 35 - Cân 100g cám, bổ sung 10g vỏ trấu để tăng độ xốp, thêm nước để có độ ẩm phù hợp (pH= 5-6, RH= 50- 75%) ↓ Cho vào bình tam giác có dung tích 500ml ↓ Khử trùng (1atm 30- 45phút) hc trïng Pasteur ↓ Lấy để nguội, cho vào bình 0.1g nấm, lắc trộn ↓ Nuôi 30oC 7- 10 ngày ↓ Trộn đều, đóng gói, bảo quản Qua sơ đồ thì: - Ngun liệu dùng để ni cám, lẽ cám nguồn dinh dưỡng quan trọng nấm - Thêm nước để có độ ẩm phù hợp (RH= 50- 75%), điều chỉnh pH phù hợp (pH= 5- 6) - Hỗn hợp phải vô trùng nống ẩm nồi khử trùng (Autoclave) để tránh lây nhiễm nấm từ môi trường không khí từ ngun liệu - Sau vơ trùng xong, hỗn hợp làm nguội nhiệt độ phòng, sau cấy nấm - Ni nhiệt độ thích hợp 30oC để nÊm mọc - Lắc đều, đóng gói bảo quản tủ lạnh - 36 - kết luận đề nghị Kết luận: Quá trình nghiên cứu đà phân lập đ-ợc chủng nÊm mèc (M1, M2, M3, M4 vµ M5) kÝ sinh sâu hại khoai lang Các chủng đà đ-ợc mô tả đặc điểm hình thái bảo quản phòng thí nghiệm Vi sinh, khoa sinh học, tr-ờng đại học Vinh, Các chủng M1, M2, M3, M4 M5 đà đ-ợc nghiên cứu điêù kiện môi tr-ờng khác để xác định ảnh h-ởng điều kiện môi tr-ờng lên phát triển chđng nÊm mèc: - Nhiệt độ: Nhiệt độ thích hợp cho chủng M3, M4 M5 phát triển 30oC, chủng M1 M2 20oC Chủng M5 phát triển nhiệt độ cao h¬n (40oC) - Độ ẩm: Độ ẩm thích hợp cho chủng phát triển 50- 75% Ở độ ẩm 25% chủng phát triển yếu không phát triển (chủng M4) - pH: pH thích hợp cho chủng 5- Ở pH= có chủng M5 phát triển c Khả diệt sâu hại khoai lang: C chủng nấm M1, M2, M3, M4 có khả tiêu diệt sâu hại khoai lang hiệu suất diệt sâu cao chủng M1 M3 (đạt 100%) Quy trình sản xuất sinh khối: Xây dựng quy trình sản xuất sinh khối dựa kết nghiên cứu để tạo số l-ợng vi sinh vật đáp ứng mục đích sử dụng Đề nghị: Do thêi gian hạn chế trình thực đề tài nên chưa thử nghiệm hết ảnh hưởng điều kiện môi trường lên phát triển - 37 - chủng nấm mốc (như chế độ dinh dưỡng, cường độ ánh sáng, c¸c chÊt kÝch thÝch sinh tr-ëng) chưa thử nghiệm ảnh hưởng chủng nấm mốc lên loài sâu hại trồng khác Do cần tiếp tục thử nghiệm loài sâu hại trồng khác theo hướng sản xuất chế phẩm diệt sâu xác định ảnh hưởng chúng lên môi trường sinh thái - 38 - Tài liệu tham khảo Tài liệu tiếng việt: Kiều Hữu Ảnh (1999) Giáo trình Vi sinh vật học công nghiệp Nxb Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2000) Vi sinh vật học, Nxb Giáo dục Nguyễn Lân Dũng cộng (1978) Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học Tập III Nxb Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội Bùi Xuân Đồng (2004) Ngun lí phịng chống nấm mốc Mycotoxin Nxb Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội Bùi Xuân Đồng, Nguyễn Huy Văn (2000) Vi nấm dùng công nghệ sinh học Nxb Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội Lê Văn Khoa cộng (2001) Phương pháp phân tích đất, nước, phân bón trồng Nxb Giáo dục GS TS Trần Văn Mão (2004) Sử dụng vi sinh vật có ích Tập II, Nxb Nông nghiệp Lê Văn Nhưng cộng (1978) Thu nhận ứng dụng chất hoạt động sinh học từ vi sinh vật Nxb Khoa học Kỷ thuật Bộ Khoa học Công nghệ Hội đồng khoa học tự nhiên nghành khoa học sống (2003) Những vấn đề Khoa học sống Nxb Khoa học Kỷ thuật Hà Nội 10.Bộ Khoa học Công nghệ Hội đồng khoa học tự nhiên nghành khoa học sống (2005) Những vấn đề Khoa học sống NXB Khoa học Kỷ thuật Hà Nội - 39 - 11 Trung tâm khoa học tự nhiên công nghệ quốc gia viện công nghệ sinh học Kỷ yếu Annual Report (1999) Nxb Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội, 2000 12.Egrop X.N 1983 Thực tập vi sinh học Nxb Đại học Trung học chuyên nghiệp Người dịch: Nguyễn Lân Dũng 13.Nguyễn Ngọc Tú, Nguyễn Cửu Thị Hương Giang (1997) Bảo vệ trồng chế phẩm từ vi nấm Nxb Nơng nghiệp TP Hồ Chí Minh 14.Sè liƯu phßng nông ngghiệp ph-ờng Đông Vĩnh, thành phố Vinh (2007) Tài liƯu tiÕng n-íc ngoµi: 15.Donald G, Me Neiljr (2005) Fungus Fatal to Mosquito May Aid Global war on Malaria 16.Hibett, D.Setall (2007) Ahigher Level phylogenetic classification of the Fungi 17.Rehner S A and Bukley E (2005) A Beauveria phylogeny inferned from nuclear ITS and EF- (alpha) Sequeness for Cryptic diversitication linky to cordyeep stelcomorphs 18.Chinh T.K, Kham N.D (1994), Preliminary research results on the ability of the termite esocrin gland secriten reisting to pathogenic microogaisrn Poced of the NC of Viet Nam Vol (2): 93- 96 19.G.M.Wang, J.D.Goeschl and D Tuset (1993) Abstracts of Internationnal yew Resources ference; 12- 13, 1993 Berkeley, Caliornia USA P 36 20.Gary A Strobel, A.Styerl and G M VankecÞk, 1992 Plant science, vol84, 1992, pps 65- 74 21.Ronald M Atlas Handbook of Media for Envionmental Microbilogy, University of Luoisville CRC press, 1995 - 40 - phơ lơc Một số hình ảnh q trình thực đề tài Chđng M1 Chđng M2 Chñng M5 Chñng M4 Chñng M3 Ảnh 2: Các chủng nấm mốc kính hiển vi - 41 - Chđng M1 Chñng M3 Chñng M4 Chñng M5 Chñng M2 Ảnh 3: Các chủng nấm mốc sau ngày tuổi - 42 - ảnh 4: Các lô thử nghiệm khả nhiễm nấm sâu hại khoai lang ảnh 5: Sâu hoá b-ớm sau 10 ngày - 43 - ảnh 6: Xác số mẫu sâu có nấm - 44 - ... nấm mốc khả tiêu diệt sâu hại khoai lang nấm mốc, lựa chọn đề tài khoá luận tốt nghiệp cử nhân sinh học là: " Phân lập nghiên cứu số chủng nấm mốc sâu hại khoai lang ph-ờng Đông Vĩnh, thành phố. .. khoai lang ph-ờng Đông Vĩnh, thành phố Vinh, tỉnh Nghệ An 2.3 Ph-ơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Ph-ơng pháp thu mẫu sâu - Địa điểm thu mẫu sâu cánh đồng trồng khoai lang ph-ờng Đông Vĩnh, thành phố Vinh,. .. ph-ơng pháp nghiên cứu 2.1 Đối t-ợng nghiên cứu Là loài nấm mốc thể số loài sâu thu thập đ-ợc cánh đồng trồng khoai lang ph-ờng Đông Vĩnh, thành phố Vinh, tỉnh Nghệ An 2.2 Thời gian địa ®iĨm