Bài giảng Miễn dịch học: Chương 4 - TS. Nguyễn Xuân Cảnh

Bài giảng Miễn dịch học: Chương 4 Kháng thể dịch thể, cung cấp cho người học những kiến thức như: Quy luật hình thành kháng thể dịch thể đặc hiệu; Các yếu tố ảnh hưởng đến sự hình thành kháng thể dịch thể; Kháng thể đa dòng (polyclonal Ab) và kháng thể đơn dòng (monoclonal Ab); Một số phương pháp miễn dịch sử dụng phản ứng kháng nguyên - kháng thể (Ag-Ab). Mời các bạn cùng tham khảo!

9/18/2020 Chương Kháng thể dịch thể  Kháng thể dịch thể đặc hiệu phân tử có chất glycoprotein thường gọi -globulin hay immunoglobulin (Ig)  Kháng thể tế bào B biệt hóa (tế bào plasma) tiết để hệ miễn dịch nhận biết vơ hiệu hóa tác nhân lạ  Mỗi kháng thể nhận diện epitope kháng nguyên  Trong huyết thanh, Ig chiếm khoảng 20% tổng lượng protein huyết Ở người trưởng thành ước tính có khoảng 1020 phân tử Ig, với 109 loại phân tử khác  Các Ig có nhiều lớp khác nhau: IgA, IgD, IgM, IgG, IgE, 9/18/2020 9/18/2020  Tất phân tử kháng thể có chung cấu trúc giống nhau; cấu trúc lõi đối xứng cấu tạo hai chuỗi nặng (Heavy-H) hai chuỗi nhẹ (Light-L) giống hệt Các chuỗi liên kết cầu nối disunfua -S-S- Chuỗi nhẹ (Light-L)  Chuỗi nhẹ có trọng lượng phân tử thấp; khoảng 24kDa với 214 amino acid Có 02 loại chuỗi nhẹ   Chia làm 02 vùng: • Vùng dễ biến đổi (Variable region light, VL) nằm đầu N với 107 amino acid, chứa số đoạn trình tự xếp amino acid dễ thay đổi gọi vùng siêu biến (Hypervariable region) • Vùng định (Constant region light, CL) nằm đầu C có 107 amino acid, trình tự xếp amino acid vùng thay đổi Chuỗi nặng (Heavy-H)  Có trọng lượng phân tử khoảng 55-70kDa với 440-446 amino acid  Vùng dễ biến đổi (Variable region heavy, VH) nằm đầu N với khoảng 116 amino acid, chứa số vùng siêu biến  Vùng định (Constant region heavy, CH) nằm đầu C gồm có 03 tiểu vùng CH1, CH2, CH3  Vùng giáp ranh CH1 CH2 gọi vùng lề, có cấu trúc linh hoạt giúp cho 02 cánh phân tử Ig dễ dàng đóng mở từ 0-1800, nhờ dễ dàng kết hợp với kháng nguyên  Vùng thay đổi H L nằm kề nhau, tham gia vào việc hình thành vị trí kết hợp kháng ngun hay trung tâm hoạt động kháng thể (paratop) Đây đoạn peptide liên tục mà amino acid nằm cách quãng, nơi tiếp xúc với epitop kháng nguyên 9/18/2020 Vùng lề Ig dễ bị tác động loại protease khác Tác động enzyme papain  Hai mảnh Fab (Antigen binding fragment) giống nhau, mảnh chứa toàn 01 chuỗi nhẹ phần chuỗi nặng đoạn CH1, mảnh chứa 01 vị trí liên kết kháng nguyên  Một mảnh Fc (Crystallizable fragment) gồm 02 đoạn CH2 CH3 chuỗi nặng, mảnh dễ kết tinh, khơng có hoạt tính kháng thể có số tính chất sinh học; có tính kháng ngun đưa vào thể khác lồi, có vị trí liên kết với bổ thể, có khả gắn với thụ thể tế bào mast hay đại thực bào Tác động enzyme pepsin  Mảnh lớn: gần giống mảnh Fab, có 02 vị trí kết hợp kháng ngun nên hoạt tính gần giống 01 kháng thể hồn tồn  Mảnh nhỏ: gồm phần lại Fc 9/18/2020  Các phân tử kháng thể chia thành nhiều lớp khác dựa khác biệt cấu trúc vùng C chuỗi nặng  Các lớp kháng thể gọi isotyp gồm có lớp đặt tên là: IgA, IgD, IgE, IgG, IgM  Ở người, isotyp IgA IgG chia thành tiểu lớp đặt tên là: IgA1, IgA2, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4  Các chuỗi nặng đặt tên theo chữ Hy Lạp tương ứng với isotyp kháng thể: IgA chứa α, IgD chứa δ, IgE chứa ε, IgG chứa γ IgM chứa μ  IgG, IgD IgE tiết dạng đơn phân tử tức dạng đơn vị kháng thể (bao gồm chuỗi nặng chuỗi nhẹ), IgM IgA thường tạo nên phức hợp đa phân tử  IgM IgA chứa polypeptid phụ với trọng lượng phân tử 15 kD gọi chuỗi J (liên kết), gắn với phân tử kháng thể cầu nối disulphua có chức làm bền vững phức hợp đa phân tử 9/18/2020 Lớp IgG  Chiếm số lượng lớn tổng sô Ig (80% người), phẩn lớn kháng thể lưu động thuộc lớp  Đây kháng thể xuyên qua thai  Căn vào khác biệt tính kháng nguyên mảnh Fc lớp IgG chia thành 04 lớp: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4  Vai trị IgG hoạt hóa bổ thể (trừ IgG4) theo đường cổ điển opsonine hóa  Trên bề mặt tế bào đại thực bào, bạch cầu nhân đa hình, mast có thụ thể với Fc  Là lớp kháng thể chủ yếu đáp ứng miễn dịch thứ phát Lớp IgM 9/18/2020  Chiếm 5-10% tổng số Ig huyết thanh, có trọng lượng phân tử lớn  IgM tạo thành từ 05 đợn vị bản, nối với chuỗi J  Chuỗi J polypeptide gồm 118-125 amino acid, chuỗi có tính kháng ngun, phân tử IgM bị che lấp, chúng xuất IgM bị biến đổi  Đây lớp kháng thể xuất sau kích thích kháng ngun, sau IgG thay  Do cấu trúc IgM dễ dàng kết hợp với kháng nguyên, chúng có khả hoạt hóa bổ thể mạnh Lớp IgA 9/18/2020  IgA huyết chiếm 15-20% tổng số Ig huyết thanh, thường tồn dạng monomer (>80%); số lại tồn dạng polymer 2-3 monomer nối với chuỗi J, tăng cao nhiễm trùng  IgA dịch tiết có dạng dimer nối với 02 chuỗi phụ có trọng lượng 1,5kDa: chuỗi J polypeptide, chuỗi thứ “secretory component” polypeptide có chức nối 02 monomer giúp IgA chống lại tác động enzyme đường tiêu hóa Có nước bọt, nước mắt, sữa, dịch tiết phổi ruột…  IgA tiết kháng thể chỗ, ngăn cản xâm nhập kháng nguyên vào thể  Trẻ em lấy lượng lớn IgA từ sữa mẹ  chịu pH thấp Lớp IgE  Chiếm tỷ lệ thấp khoảng 0,04% tổng số Ig huyết  Dễ bị biến tính nhiệt  Đây lớp kháng thể dễ gây dị ứng  Trên bề mặt tế bào kiềm, mast có thụ thể cho phần Fc lớp kháng thể 9/18/2020 Lớp IgD  Chiếm tỷ lệ thấp khoảng 0,4-0,2% tổng số Ig huyết  Đây lớp kháng thể dễ bị tác động protease  Chức IgD chưa thực rõ ràng Nó thường tăng bệnh nhiễm khuẩn mãn tính khơng đặc hiệu cho loại  Có bề mặt lympho B, hoạt động kháng nguyên bề mặt B Vị trí chủ IgG IgA IgM IgE IgD Máu Dịch tiết, niêm mạc Lympho B, máu Bạch cầu Lympho B yếu kiềm, tế bào nhày mast Nồng độ 800-1700 huyết ♂: 100-400 ♂: 50-250 ♀: 85-450 ♀: 60-270