KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử

KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060KST3 bài 4 chấn đoán sinh học phân tử TẢI HỘ 0984985060

ỨNG DỤNG MỘT SỐ KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ TRONG XÉT NGHIỆM KÝ SINH TRÙNG PGS.TS Nguyễn Thu Hương Khoa Y học sở nth14@huph.edu.vn Chuẩn đầu Liệt kê ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử chẩn đoán bệnh ký sinh trùng 10/28/21 Giải thích nguyên tắc kỹ thuật PCR Giải thích nguyên tắc kỹ thuật LAMP Giải thích nguyên tắc kỹ thuật xMAP KÝ SINH TRÙNG VÀ VẤN ĐỀ PHÂN LOẠI • Ký sinh trùng (KST) lây nhiễm phát sinh bệnh người động vật với hệ sinh thái mơi trường • • • Phương pháp việc giám định, chẩn đoán 10/28/21 Phương pháp tối ưu việc nghiên cứu quy luật dịch tễ, điều trị Lập phả hệ quần thể sinh học xác định nguồn gốc lây nhiễm ký sinh trùng • • • 10/28/21 KST coi tập hợp đa dạng Hình thái học KST phức tạp Phân loại giám định: – – Dựa vào hình thái học Dựa sinh học phân tử Đơn vị phân loại phụ ĐN: Là đơn vị sử dụng phân loại, thể đặc tính sinh học tự nhiên tiến hố nhiều cá thể có quan hệ chung mặt di truyền • • • • • 10/28/21 Loài (species) Dưới loài (subspecies) Chủng (strain) Mẫu (isolate) Biến chủng (variants) Mối quan hệ chủng -lồi • • • Loài, loài chủng khái niệm đại diện cho quần thể, Là mốc đánh giá tiến hoá quần thể Các đơn vị phân loại có ảnh hưởng lớn đến hệ thống phân loại quần thể sinh học • 10/28/21 Sự phức tạp ảnh hưởng đến chẩn đốn, điều trị phịng chống bệnh KST Phương pháp giám định phân loại lồi • • • 10/28/21 Phương pháp hình thái học Sử dụng rộng rãi thực tế Là phương pháp dễ làm, nhanh chóng Khơng đơn phương sử dụng phương pháp hình thái học để giám định phân loại Các phương pháp dựa sản phẩm protein ký sinh trùng • Hai nhóm protein: + protein cấu trúc + protein hoạt tính sinh học • Có hai PP chính: + điện di enzym đồng phân (isoenzyme analysis) + điện di enzym dị phân (alloenzyme analysis) • • 10/28/21 Địi hỏi protein tinh sạch, trang thiết bị đắt tiền tốn nhiều công sức NC: Plasmodium, Trypanosoma nhiều loại sán đường ruột Các phương pháp truyền thống khác giám định phân loại : - 10/28/21 Dựa vào đặc tính dịch tễ học vịng đời Dựa vào đặc tính phân bố theo vùng, địa lý phân bố vật chủ Dựa vào đặc tính lai chéo sinh lý, sinh hoá Dựa vào phương pháp huyết học Dựa vào đặc tính nhuộm màu cá thể tế bào Phương pháp sinh học phân tử dựa cấu trúc ADN hệ gen Phương pháp di truyền học tế bào Các phân đoạn ADN nhánh nhiễm sắc thể (NST) có hệ gen chọn nghiên cứu thơng thường vùng chứa gen đặc hiệu, hay vùng có cấu trúc đặc biệt Đối với KST, nghiên cứu cấu trúc lặp vùng gen đặc hiệu thơng thường có giá trị sử dụng hình thái đặc tính NST 10/28/21 10 KỸ THUẬT LAMP Các thiết bị • • • • • • • • • Tủ an toàn sinh học cấp II Máy ly tâm, spin down Máy vortex Máy chụp gel Hệ thống điện di Máy ổn nhiệt Bộ micropipettes Tube 0,2ml; 2ml; đầu loại Hộp đá, đá giữ lạnh hóa chất, sinh phẩm 10/28/21 87 KỸ THUẬT xMAP Luminex xMAP kỹ thuật giúp xác định nhiều mục tiêu phân tử lúc cách đếm dòng  chảy hạt huỳnh quang.  10/28/21 88 KỸ THUẬT xMAP • • 10/28/21 Các hạt tiểu cầu liên kết cộng hóa trị với kháng nguyên, kháng thể đoạn oligonucleotide dùng làm mẫu dị phân tử thí nghiệm Khoảng 100 loại hạt tiểu cầu 89 10/28/21 90 KỸ THUẬT xMAP Luminex xác định nhiều chủng sinh vật kiểu gene khác chủng sinh vật phản ứng với lượng thể tích thấp Phương pháp dần chứng tỏ hiệu đặc biệt việc nghiên cứu đa dạng kháng nguyên, allele kháng thuốc chẩn đoán bệnh ký sinh trùng gây 10/28/21 91 KỸ THUẬT xMAP Tại cần kỹ thuật này? 10/28/21 Lượng mẫu Lượng thơng tin thu thập lớn từ mẫu – – Giảm thí nghiệm Thu tồn bọ thơng tin từ thí nghiệm Giảm lượng hóa chất nhân công sử dụng Tạo nhiều thông tin tương hỗ mấu phân tích 92 KỸ THUẬT xMAP 10/28/21 93 KỸ THUẬT xMAP Ứng dụng • • 10/28/21 chủng C hominis và C parvum  chủng ký sinh trùng sốt rét Plasmodium người (falciparum, vivax, malariae ovale) 94 LƯỢNG GIÁ Nối cột chữ (A,B,C) với cột số (1,2,3 ) tương ứng A Kỹ thuật chẩn đoán hình thái B Kỹ thuật sinh học phân tử C Kỹ thuật miễn dịch A-1, 2, Soi tươi Nuôi cấy PCR LAMP Nhuộm soi RFLP-PCR ELISA xMAP Dot-ELISA B-7,9 C-3, 4, 6, 10/28/21 95 Chọn ý Câu Tính đặc hiệu kháng nguyên phụ thuộc : A B C D Bản chất hóa học kháng nguyên, nhóm định kháng nguyên, cá nhân miễn dịch Cấu trúc phân tử protein kháng nguyên, nhóm định kháng nguyên, đường xâm nhập kháng nguyên Bản chất hóa học kháng nguyên, nhóm định kháng nguyên, trọng lượng phân tử kháng nguyên Cấu trúc phân tử kháng nguyên, nhóm định kháng nguyên, trọng lượng phân tử kháng nguyên Câu Nhiệt độ cố định phản ứng tách chuỗi tự tổng hợp ADN kỹ thuật LAMP A B C D 10/28/21 60-65 °C 94–98 °C 70–74 °C 45-55 °C 97 Câu Căn nguyên ký sinh trùng xác định xác lồi gây bệnh chẩn đoán dựa vào: A B C D 10/28/21 Chẩn đốn triệu chứng lâm sàng Chẩn đốn xác định hình thể Ký sinh trùng Chẩn đoán miễn dịch Chẩn đoán sinh học phân tử 98 Câu Thời gian phản ứng LAMP A B C D 10/28/21 1,5 4-5 Tối đa 45 phút 99 Câu Phương pháp Luminex xMAP xác định chủng sinh vật dựa kiểu gene phản ứng với lượng thể tích thấp bệnh phẩm A 10/28/21 Đúng B Sai 100 Câu Đối với Ký sinh trùng, nghiên cứu cấu trúc lặp vùng gen đặc hiệu thơng thường có giá trị sử dụng hình thái đặc tính NST A Đúng B Sai ... thể sinh học xác định nguồn gốc lây nhiễm ký sinh trùng • • • 10/28/21 KST coi tập hợp đa dạng Hình thái học KST phức tạp Phân loại giám định: – – Dựa vào hình thái học Dựa sinh học phân tử Đơn... thuật sinh học phân tử chẩn đoán bệnh ký sinh trùng 10/28/21 Giải thích nguyên tắc kỹ thuật PCR Giải thích nguyên tắc kỹ thuật LAMP Giải thích nguyên tắc kỹ thuật xMAP KÝ SINH TRÙNG VÀ VẤN ĐỀ PHÂN... phân loại : - 10/28/21 Dựa vào đặc tính dịch tễ học vịng đời Dựa vào đặc tính phân bố theo vùng, địa lý phân bố vật chủ Dựa vào đặc tính lai chéo sinh lý, sinh hoá Dựa vào phương pháp huyết học