Dề tài Xác định hàm lượng sắt trong nước bằng UVVis

Xác định hàm lượng sắt trong nước bằng phương pháp UVVis: “Xác nhận giá trị sử dụng phương pháp thử xác định hàm lượng sắt tổng trong nước bằng phương pháp Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến dựa trên phương pháp tiêu chuẩn”

SỞ Y TẾ PHÚ YÊN TRUNG TÂM KIỂM NGHIỆM THUỐC – MP – TP PHÚ YÊN ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp thử xác định hàm lƣợng sắt tổng nƣớc phƣơng pháp Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến dựa phƣơng pháp tiêu chuẩn Chủ nhiệm đề tài: PHAN THỊ THU THỦY ĐẶNG VĂN ĐÔNG Phú Yên, ngày 12 tháng 10 năm 2021 MỤC LỤC I ĐẶT VẤN ĐỀ: .1 II MỤC TIÊU ĐỀ TÀI: III THỜI GIAN THỰC HIỆN ĐỀ TÀI: IV.TỔNG QUAN ĐỀ TÀI: V ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU: 5.1 Đối tƣợng nghiên cứu: 5.2 Phƣơng pháp nghiên cứu: 5.2.1 Phƣơng pháp Xác định hàm lƣợng Sắt tổng nƣớc phƣơng pháp Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến: 5.2.1.1 Máy móc thiết bị, dụng cụ: 5.2.1.2 Hóa chất, chất chuẩn: 5.2.1.3 Tiến hành thử nghiệm: 5.2.1.4 Tính kết quả: 5.2.2 Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp: 5.2.2.1 Trình tự xác nhận giá trị sử dụng PP 5.2.2.2 Nội dung khảo sát: 5.2.2.3 Tiến hành khảo sát: VI KẾT QUẢ – BÀN LUẬN: 10 6.1 Kết khảo sát Phƣơng pháp Xác định hàm lƣợng Sắt tổng nƣớc phƣơng pháp UV-Vis: 10 6.1.1 Khảo sát kỹ thuật: .10 6.1.1.1 Độ tuyến tính: 10 6.1.1.2 Độ lặp lại (RSDr), giới hạn phát (LOD), giới hạn định lƣợng (LOQ):… 11 6.1.1.3 Độ tái lập (RSDR), độ không đảm bảo đo(U):…………………………………14 6.1.1.4 Độ thuhồi:…………………………………………………………………… 15 6.1.2 Kết xác nhận giá trị sử dụng: 18 VII KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ: 19 VIII KIẾN NGHỊ .19 I ĐẶT VẤN ĐỀ: Trong sống đóng vai trò nhƣ nguồn thực phẩm, đặc biệt nhờ có nƣớc thể đƣợc cung cấp chất, vi chất cần thiết cho chuyển hóa giúp tạo xƣơng Nhờ có nƣớc mà vitamin tan nƣớc đƣợc đƣa vào thể vitamin đóng vai trò nhƣ coenzym giúp phản ứng sinh hóa xảy q trình chuyển hóa chất thể Nƣớc giúp thể đảm bảo vệ sinh cá nhân nhƣ tắm, giặc, rửa tay chân để chống bệnh lý lây nhiễm qua da, niêm mạc Nƣớc cịn đóng nhiều vai trị quan trọng khác Tuy nhiên nƣớc chất trung gian lƣu truyền bệnh nhƣ: tả, lụy, thƣơng hàn Nƣớc truyền bệnh giun, sán Ngồi môi trƣờng nƣớc mà sô chất độc nhƣ: Chì, arsen, đồng, thủy ngân, hóa chất bảo vệ thực vật xâm nhập vào thể gây tác hại cho thể ngƣời Sắt chất gây tác hại cho thể ăn uống nƣớc nhiễm sắt gây lên việc rối loạn tiêu hóa, viêm đƣờng ruột, bệnh máu, chí nguyên nhân dẫn đến ung thƣ Sử dụng nƣớc nhiễm sắt sinh hoạt hàng ngày làm cho quần áo bị ố vàng Làm cho thiết bị gia đình bị ố vàng hỏng đồ dùng gia đình Là đơn vị kiểm tra chất lƣợng thực phẩm việc kiểm tra chất lƣợng nƣớc cần thiết Nhằm để Trung tâm có đƣợc phƣơng pháp thử nghiệm tiêu xác định hàm lƣợng sắt nƣớc với điều kiện có Trung tâm nhằm khẳng định lại điều kiện lực thử nghiệm phòng KN Mỹ phẩm – Thực phẩm thuộc Trung tâm kiểm nghiệm Thuốc-Mỹ phẩm-Thực phẩm Phú Yên, tiến hành thực đề tài nghiên cứu khoa học “Xác nhận giá trị sử dụng phương pháp thử xác định hàm lượng sắt tổng nước phương pháp Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến dựa phương pháp tiêu chuẩn” II MỤC TIÊU ĐỀ TÀI: Mục tiêu đề tài cơng bố đƣợc thơng số: Tính tuyến tính, đƣờng chuẩn, độ chụm, độ đúng, LOD, LOQ cho việc Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp thử xác định hàm lƣợng sắt tổng nƣớc phƣơng pháp Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến dựạ theo Tiêu Chuẩn để áp dụng Trung tâm kiểm nghiệm Thuốc-Mỹ phẩm-Thực phẩm Phú Yên III THỜI GIAN THỰC HIỆN ĐỀ TÀI: Từ tháng 03 năm 2021 đến tháng 11 năm 2021 IV.TỔNG QUAN ĐỀ TÀI: Đầu kỷ 19, hầu hết phƣơng pháp phân tích hóa học định lƣợng sử dụng phƣơng pháp trọng lƣợng (gravity method) phƣơng pháp chuẩn độ (titrimetry method), với phƣơng pháp đạt đƣợc độ cao (accuracy), nhƣng khó xác định đƣợc thành phần hợp chất có nồng độ thấp nƣớc Trong suốt thời gian nhiều nghiên cứu SMEWW2012 3500 Fe – B đƣợc bắt đầu để mở rộng khả phân tích định lƣợng đặc biệt yếu tố vết môi trƣờng Một phƣơng pháp phƣơng pháp so màu quang phổ UV-VIS Nguyên lý phƣơng pháp so màu quang phổ đo độ hấp thụ quang hợp chất tạo thành sau chuyển thành hợp chất có khả hấp thụ ánh sáng, so sánh cƣờng độ màu dung dịch nghiên cứu với dung dịch chuẩn, từ suy hàm lƣợng chất cần xác định Ngày nay, phƣơng pháp so màu quang phổ đƣợc sử dụng phổ biến hầu hết phịng thí nghiệm giới nhƣ Việt Nam cho việc phân tích nƣớc, nƣớc bờ mặt, nƣớc thải Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp khẳng định việc kiểm tra cung cấp chứng khách quan chứng minh phƣơng pháp đáp ứng đƣợc yêu cầu đặt Kết việc xác nhận giá trị phƣơng pháp đƣợc sử dụng để đánh giá chất lƣợng, độ tin cậy kết phân tích Xác nhận giá trị phƣơng pháp phần khơng thể thiếu muốn có kết đáng tin cậy V ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU: 5.1 Đối tƣợng nghiên cứu: Nƣớc ăn uống, nƣớc sinh hoạt: mẫu nƣớc giếng thôn Phú Mỹ, xã Hòa đồng, huyện Tây Hòa, mẫu nƣớc máy TT Kiểm nghiệm Thuốc-MP-TP 103 Nguyễn văn Linh, p PL, Tp Tuy Hòa 5.2 Phƣơng pháp nghiên cứu: 5.2.1 Phƣơng pháp Xác định hàm lƣợng Sắt tổng nƣớc phƣơng pháp Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến: SMEWW2012 3500 Fe – B, TCVN 6177:1996, HD.02.24/TP 5.2.1.1 Máy móc thiết bị, dụng cụ: Thiết bị thơng thƣờng phịng thí nghiệm  Máy quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến  Bếp điện  Các dụng cụ thông thƣờng khác Tất dụng cụ thuỷ tinh, kể bình đựng mẫu, cần phải rửa dung dịch HCl có C(HCl)= mol/l tráng nƣớc trƣớc dùng 5.2.1.2 Hóa chất, chất chuẩn: - Axit clohidric (HCl) đậm đặc - Dung dịch Axit hydrocloric C (HCl)= mol/l - Dung dịch Amonium acetate: Hòa tan 250g Amonium acetate (NH4C2H3O2) becher 1000ml với 150ml nƣớc cất Sau thêm vào 700ml acid acetic đậm đặc (CH3COOH) - Hydroxyl - amoni clorua, dung dịch 100 g/l Hoà tan 40g hydroxyl- amoni clorua (NH2OH.HCl) nƣớc Thêm nƣớc đến 100ml Dung dịch ổn định tuần - Dung dịch 1.10- phenantrolin Hoà tan 0.5g 1.10- phenantrolin clorua, ngậm phân tử nƣớc (C12H9CIN2.H2O) nƣớc pha lỗng tới ml Có thể thay cách hoà tan 0.42g 1.10- phenantrolin ngậm nƣớc (C12H9N2.H2O) 100 ml nƣớc chứa hai giọt axit clohydric HCl 7M Dung dịch ổn định tuần đƣợc bảo quản tối - Sắt, dung dịch gốc (1ml = 1000μg Fe) Cân 0,5g sắt (độ tinh khiết 99.99%) cho vào bình định mức 500 ml Thêm 20 ml nƣớc, ml dung dịch HCl 7M hơ ấm từ từ cho hoà tan Làm nguội thêm nƣớc tới vạch Dung dịch ổn định tháng bình thuỷ tinh bền bình nhựa Có thể sử dụng dung dịch gốc bán sẵn - Dung dịch chuẩn trung gian (1ml = 100μg Fe): Dùng pipette bầu hút xác 10ml dung dịch trữ sắt vào bình định mức 100ml pha loãng nƣớc cất đến vạch - Dung dịch chuẩn làm việc (1ml = 5μg Fe): Dùng pipette bầu hút xác 5ml dung dịch chuẩn trung gian vào bình định mức 100ml pha lỗng nƣớc cất đến vạch 5.2.1.3 Tiến hành thử nghiệm: - Lập đƣờng chuẩn: Khoảng tuyến tính đƣờng chuẩn từ 0,1mg/l đến 4mg/l - Cách tiến hành: + Dựng đƣờng chuẩn tiến hành mẫu thử nhƣ sau: Bình nón 250ml Blank Thử Thử Số ml dd chuẩn 1ml = 100μg Fe 0 0 0 Số ml dd chuẩn 1ml = 5μg Fe 10 0 0 Số ml nƣớc cất thêm vào 50 49 45 40 49 48 0 Số μg Fe tƣơng ứng 25 50 100 200 0 Nồng độ dung dịch chuẩn (mg Fe/l) 0,1 0,5 0 50 50 2 Mẫu thử (ml) HCl đđ (ml) 2 2 2 Hydroxyl amoni clorua 1 1 1 1 (ml) Đun sơi thể tích cịn khoảng 15– 20ml Nhắc xuống, để nguội nhiệt độ phịng Chuyển sang bình định mức 50ml Dung dịch Amonium 10 10 10 10 10 10 10 10 acetate (ml) Dung dịch 1.10phenantrolin 2 2 2 2 (ml) Thêm nƣớc cất đến vạch 50ml, lắc Để yên tối thiểu 10 phút để cƣờng độ màu phát triển cực đại + Đo độ hấp thu dung dịch bƣớc sóng λ = 510 nm Mẫu trắng mẫu blank + Dựng đồ thị chuẩn cách đặt nồng độ dung dịch sắt (mg/l) trục hoành tƣơng ứng với độ hấp thụ trục tung + Từ phƣơng trình hồi qui tính nồng độ sắt tổng mẫu thử 5.2.1.4 Tính kết quả: Hàm lƣợng sắt tổng mẫu, biểu thị miligam lít đƣợc tính theo cơng thức: X = C.f Trong đó: C: nồng độ mẫu tính theo đƣờng chuẩn, mg/l f: hệ số pha loãng 5.2.2 Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp: 5.2.2.1 Trình tự xác nhận giá trị sử dụng PP Sơ đồ trình: Xác định nhu cầu xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp Lập kế hoạch Phân công nhiệm vụ, chuẩn bị điều kiện Tiến hành khảo sát: - Khả nguồn lực - Khả kỹ thuật Tổng hợp, xử lý kết quả, xem xét Đánh giá tổng hợp, Kết luận Lƣu hồ sơ, cập nhật, theo dõi 5.2.2.2 Nội dung khảo sát: a Xem xét tổng quát: - Tìm hiểu kỹ nội dung, yêu cầu PP - Xem xét phạm vi xác định mẫu áp dụng PP b Khả nguồn lực: Xem xét khả nguồn lực theo yêu cầu PP gồm: - Thiết bị - Hóa chất, vật dụng TN - Tính liên kết chuẩn - Dụng cụ, phƣơng tiện phục vụ TN - Việc lấy mẫu xử lý mẫu - Điều kiện môi trƣờng - Điều kiện an toàn - Yêu cầu lực KNV c Khả kỹ thuật: Các thông số xác định: - Tính tuyến tính - Độ lặp lại - Độ tái lập - Độ (độ chệch/độ thu hồi) - Giới hạn phát phép thử định lƣợng - Giới hạn định lƣợng - Độ không đảm bảo đo 5.2.2.3 Tiến hành khảo sát: a Xây dựng kế hoạch tiến hành xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp thử: Bảng 1: Kế hoạch triển khai cho tiêu cần xác định Nội dung thực Cách thức thực Trách nhiệm Xem xét tổng quát: Đọc, tìm hiểu kỹ để hiểu rõ yêu cầu PP Đọc, hiểu rõ phƣơng pháp Xem xét phạm vi áp dụng phƣơng pháp Xem xét qui định PP loại mẫu áp dụng phạm vi xác định PP có phù hợp với nhu cầu thử nghiệm mẫu PTN Thủy Duy Phƣơng Bình Đơng Thủy Khả nguồn lực: Thiết bị Dung mơi, hóa chất, chất chuẩn Tính liên kết chuẩn Xem xét yêu cầu thiết bị dùng để thử nghiệm theo yêu cầu PP PTN có đáp ứng đƣợc khơng? Thủy Duy Xem xét u cầu dung mơi, hóa chất, chất chuẩn để thử nghiệm theo yêu cầu PP, PTN có đáp ứng đƣợc khơng? Xem xét thiết bị có khả hiệu chuẩn khơng? chất chuẩn, hóa chất chuẩn có khả mua Thủy Phƣơng Thủy Phƣơng Dụng cụ, phƣơng tiện phục vụ TN Việc lấy mẫu xử lý mẫu Điều kiện môi trƣờng Điều kiện an toàn Yêu cầu lực KNV Khả kỹ thuật 3.1 Độ chụm (Độ lặp lại, độ tái lập) 3.2 Tính tuyến tính đƣợc khơng có khả chứng nhận? Xem xét dụng cụ, phƣơng tiện phục vụ TN theo yêu cầu PP PTN có đáp ứng đƣợc khơng? Xem xét khả năng, điều kiện, yêu cầu lấy mẫu xử lý mẫu theo PP PTN có đảm bảo đƣợc khơng? Xem xét yêu cầu ĐKMT theo yêu cầu PP PTN có đáp ứng kiểm sốt đƣợc khơng? Xem xét yêu cầu điều kiện an toàn theo PP? Xem xét yêu cầu trình độ, tay nghề KNV có đáp ứng theo u cầu PP? Bình Đơng Thủy Đơng Duy Thủy Thủy Duy Phƣơng Bình Đơng XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG SẮT TỔNG TRONG NƢỚC - Tiến hành mẫu nƣớc máy, nƣớc giếng địa bàn tỉnh Phú Yên Độ lặp lại - KNV thực lặp lại lần mẫu thêm chuẩn mức độ (MRL/2, MRL, MRL*2) - Tính độ lệch chuẩn lặp lại tƣơng đối RSDr Độ tái lặp - KNV, kiểm nghiệm mẫu, thử lặp lại lần - Tính độ lệch chuẩn tái lặp tƣơng đối RSDR -Theo thông tƣ số 41/2018/TT-BYT ngày 14 tháng 12 năm 2018 qui định Ngƣỡng giới hạn cho phép sắt 0,3 mg/l - Thực đo dung dịch chuẩn có nồng độ sắt tổng từ – 8mg/l khảo sát khoảng tuyến tính theo nồng độ sau: Nồng độ Fe (mg/l) Blank 0,05 0,1 0,5 Thủy Đơng Bình Phƣơng Thủy Đơng Phƣơng Xây dựng đường chuẩn: 3.3 Độ (Độ thu hồi) xác định hệ số hồi quy tƣơng quan R Đƣờng chuẩn đạt yêu cầu khi: 0,995 ≤ R ≤ Thực mẫu thêm chuẩn không thêm chuẩn 03 mức nồng độ khác Thủy, Duy, Bình, + Cách 1: Tính hiệu suất thu hồi (R%): R= xt x spike Đông x100 xt: Nồng độ xác định đƣợc mẫu thêm chuẩn xspike: Nồng độ mẫu sau thêm chuẩn (lý thuyết) Tính độ chệch: % Bias = 100 – R + Cách 2: Tính hiệu suất thu hồi (R%): x1 – x2 R= x 100 x3 x1: nồng độ xác định đƣợc mẫu thêm chuẩn x2: nồng độ xác định đƣợc mẫu không thêm chuẩn x3: nồng độ chuẩn thêm vào mẫu Tính độ chệch: % Bias = 100 – R + Giới hạn phát (LOD): Sử dụng mẫu thử có nồng độ chất phân tích thấp Thực phân tích lặp lại – 10 lần Tính độ lệch chuẩn: Trong đó: 3.4.Xác định giới hạn phát (LOD) giới hạn định lƣợng (LOQ) x : giá trị trung bình mẫu thử xi: giá trị mẫu thử thứ i SD: độ lệch chuẩn mẫu thử n: Số lần thử nghiệm LOD = 3SD Đánh giá LOD qua hệ số R: R = x / LOD Nếu < R < 10 nồng độ dung dịch thử phù hợp LOD tính đƣợc đáng tin cậy Nếu R < phải dùng dung dịch thử đậm đặc hơn, thêm chất chuẩn vào dung dịch thử dùng, làm lại thí nghiệm, tính R Nếu R > 10 phải dùng dung dịch thử loãng hơn, pha loãng dung dịch thử dùng, làm lại thí nghiệm, tính R Thủy, Đơng, Phƣơng 10 Trung bình 0.061 0.044 0.156 Sr RSDR LOD LOQ R RSDr (theo AOAC) U% U 0.16 0.14 0.0151 10.55 0.05 0.15 3.16 11 18.25 0.026 *Nhận xét: Qua kết khảo sát mẫu nước giếng mức nồng độ thực (0,14 mg/l) độ tái lặp cho phép tối đa 22% (theo AOAC) Giá trị độ tái lặp thu 10,55% nhỏ giá trị cho phép Do đó, độ tái lặp phương pháp phân tích đáp ứng yêu cầu định lượng Để tăng tính xác phương pháp, lựa chọn độ tái lặp phương pháp RSDR ≤ 10% Độ không đảm bảo đo phương pháp là: U = 0,14 ± 0,026 mg/l 6.1.1.4 Độ thu hồi: Thực lặp lại 10 lần mẫu nƣớc máy mẫu nƣớc giếng mức nồng độ thực thêm chuẩn mức nồng độ khác (Mức MRL/2, MRL, MRL x 2) Kết đánh thu đƣợc nhƣ sau: 15 Bảng 6: Khảo sát độ thu hồi mẫu nƣớc giếng: S T T Mẫu thử (ml) Mẫu trắn g (mg/l) Abs Blank Nồng độ Fe tính theo đƣờng chuẩn (mg/l) Lƣợng thêm chuẩn 0.15 (mg/l) 0.3 (mg/l) 0.6 (mg/l) Lƣợng tìm lại (mg/l) Độ thu hồi (%) (mg/l ) 0.15 (mg/l ) 0.3 (mg/l ) 0.6 (mg/l ) 0.15 (mg/l ) 0.3 (mg/l ) 0.6 (mg/l ) R% (0.15) R% (0.3) R% (0.6) Absblank Abs Absblank Abs Absblank Abs Absblank 0.027 0.079 0.051 0.117 0.089 0.181 0.153 0.07 0.19 0.38 0.70 0.12 0.31 0.63 81.0 104.0 105.5 0.029 0.081 0.053 0.117 0.089 0.179 0.151 0.08 0.20 0.38 0.69 0.13 0.31 0.62 87.6 104.0 103.8 0.023 0.086 0.058 0.120 0.092 0.185 0.157 0.05 0.23 0.40 0.72 0.16 0.33 0.65 104.3 109.0 108.8 0.079 0.051 0.114 0.086 0.180 0.152 0.19 0.37 0.70 0.12 0.30 0.63 81.0 99.0 104.6 0.080 0.052 0.117 0.089 0.179 0.151 0.20 0.38 0.69 0.13 0.31 0.62 84.3 104.0 103.8 0.080 0.052 0.122 0.094 0.172 0.144 0.20 0.41 0.66 0.13 0.34 0.59 84.3 112.3 97.9 0.085 0.057 0.114 0.086 0.178 0.150 0.22 0.37 0.69 0.15 0.30 0.62 101.0 99.0 103.0 0.081 0.053 0.119 0.091 0.173 0.145 0.20 0.39 0.66 0.13 0.32 0.59 87.6 107.3 98.8 0.20 0.38 0.70 0.13 0.31 0.63 87.6 104.0 105.3 80110 80110 80110 Abs 0.055 50 0.028 0.057 50 50 0.051 TB 0.07 RSDr 7.19 Độ thu hồi (theo AOAC) RSDr (theo AOAC) 11 3.42 11 2.87 11 16 Bảng 7: Khảo sát độ thu hồi mẫu nƣớc máy: STT Mẫu Mẫu thử trắn (ml) g Nồng độ Fe tính theo đƣờng chuẩn (mg/l) Lƣợng thêm chuẩn (mg/l) Abs Blan k 0.15 (mg/l) 0.3 (mg/l) 0.6 (mg/l) Lƣợng tìm lại (mg/l) Độ thu hồi (%) (mg/l ) 0.15 (mg/l ) 0.3 (mg/l ) 0.6 (mg/l ) 0.15 (mg/l ) 0.3 (mg/l ) 0.6 (mg/l ) R% (0.15 ) R% (0.3 ) R% (0.6) Absblank Abs Absblank Abs Absblank Abs Absblank 0.018 0.068 0.042 0.096 0.070 0.152 0.126 0.03 0.15 0.29 0.57 0.13 0.27 0.55 84.2 88.9 91.2 0.016 0.070 0.044 0.094 0.068 0.142 0.116 0.02 0.16 0.28 0.52 0.14 0.26 0.50 90.9 85.6 82.9 0.018 0.068 0.042 0.092 0.066 0.144 0.118 0.03 0.15 0.27 0.53 0.13 0.25 0.51 84.2 82.2 84.6 0.072 0.046 0.091 0.065 0.143 0.117 0.17 0.26 0.52 0.15 0.24 0.50 97.6 80.5 83.7 0.067 0.041 0.095 0.069 0.148 0.122 0.14 0.28 0.55 0.12 0.26 0.53 80.9 87.2 87.9 0.068 0.042 0.098 0.072 0.144 0.118 0.15 0.30 0.53 0.13 0.28 0.51 84.2 92.2 84.6 0.069 0.043 0.092 0.066 0.144 0.118 0.15 0.27 0.53 0.13 0.25 0.51 87.5 82.2 84.6 0.067 0.041 0.094 0.068 0.143 0.117 0.14 0.28 0.52 0.12 0.26 0.50 80.9 85.6 83.7 0.071 0.045 0.097 0.071 0.153 0.127 0.16 0.29 0.57 0.14 0.27 0.55 94.2 90.6 92.1 10 0.067 0.041 0.093 0.067 0.149 0.123 0.14 0.27 0.55 0.12 0.25 0.53 80.9 83.9 88.7 0.15 0.27 0.54 0.13 0.25 0.52 87.5 84.9 86.1 80110 80110 80110 Abs 0.044 50 50 0.026 0.042 0.044 50 TB 0.02 RSDr 6.69 4.00 3.54 Độ thu hồi (theo AOAC) RSDr (theo AOAC) 11 11 11 17 *Nhận xét: Kết thu hồi mẫu nước giếng 87,6% đến 105,3%, mẫu nước máy 84,9 % đến 87,5% Ở mức nồng độ theo quy định AOAC, 80% ≤ R% ≤ 110% Như vậy, độ thu hồi phương pháp đạt yêu cầu 6.1.2 Kết xác nhận giá trị sử dụng: Trên sở kết nghiên cứu thu đƣợc, rút kết luận nhƣ sau: Bảng 8: Kết xác nhận giá trị sử dụng TT Thông số khảo sát Kết xem xét, khảo sát Giới hạn Kết luận chấp nhận I Xem xét tổng quát 1.1 Đọc, hiểu rõ phƣơng pháp Đọc, tìm hiểu kỹ hiểu rõ yêu cầu Phù hợp Hiểu rõ PP PP 1.2 Xem xét phạm vi áp dụng phƣơng pháp Loại mẫu áp dụng phù hợp với nhu cầu Phù hợp thử nghiệm mẫu PTN với PP Phù hợp Phù hợp 1.1 Máy quang phổ hấp thụ tử ngoại & khả Đáp ứng kiến Biochrom – S32PC yêu cầu PP Các thiết bị liên quan khác 1.2 Hóa chất, vật dụng TN Đáp ứng yêu cầu kiểm nghiệm mẫu nt Nt Các thiết bị đƣợc kiểm tra/ hiệu chuẩn có giấy chứng nhận kiểm tra/ hiệu chuẩn nt Nt nt Nt II Khả nguồn lực Thiết bị Tính liên kết chuẩn 1.3 Dụng cụ, phƣơng tiện Pipet 1.4 phục vụ TN Các dụng cụ PTN khác 1.5 Việc lấy mẫu xử lý Đảm bảo yêu cầu lấy mẫu xử lý mẫu mẫu nt Nt Nhiệt độ phòng: 25 – 30oC nt Nt nt Nt 1.7 Việc bố trí thiết bị khơng gian thử nghiệm hợp lý, đạt yêu cầu an toàn cho KNV/KTV 1.8 Yêu cầu lực Phù hợp, đáp ứng yêu cầu kiểm nghiệm KNV/KTV mẫu nt Nt 1.6 Điều kiện môi trƣờng Điều kiện an toàn III Khả kỹ thuật 3.1 Độ lặp lại 3.2 Độ tái lặp RSDr ≤ 6.5% RSDR ≤ 10% TT tự công Phù hợp bố TT tự công Phù hợp bố 18 3.3 Giới hạn phát LOD = 0,06 3.4 Giới hạn định lƣợng LOQ = 0,2 3.5 Độ tuyến tính R2 = 0,9998→ R = 0,9999 3.6 Độ không đảm bảo đo U = 0,14 ± 0,026 mg/l 3.7 Độ thu hồi R ≥ 80 % TT tự công bố TT tự công bố TT tự công bố TT tự công bố TT tự công bố Phù hợp Phù hợp Phù hợp Phù hợp Phù hợp Bàn luận: Kết đánh giá thông số phƣơng pháp thử “Xác định hàm lƣợng Sắt tổng nƣớc phƣơng pháp Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến” theo HD.02.24/TP cho thấy điều kiện thử nghiệm nhƣ: trang thiết bị; dụng cụ, chất chuẩn thử nghiệm; điều kiện thử nghiệm lực Kiểm nghiệm viên đáp ứng thỏa mãn yêu cầu phƣơng pháp thử VII KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ: Trên sở kết nghiên cứu thu đƣợc, rút kết luận nhƣ sau: - Các thông số sau thẩm định đáp ứng đƣợc yêu cầu đặt - Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng sắt tổng nƣớc phƣơng pháp đo quang UV – VIS theo tiêu chuẩn SMEWW2012 3500 Fe – B HD.02.24/TP có đƣờng chuẩn với phƣơng trình y = 0,1995x + 0,0128 với hệ số hồi qui tuyến tính đƣờng chuẩn đạt yêu cầu R2 = 0,9998 > 0,99 khoảng tuyến tính từ 0,05mg/l đến 8mg/l - Phƣơng pháp có giới hạn phát LOD = 0,06mg/l giới hạn định lƣợng LOQ = 0,2mg/l - Phƣơng pháp có độ lặp lại độ tái lặp đạt yêu cầu: RSDr ≤ 7% RSDR ≤ 11% - Phƣơng pháp có độ thu hồi > 80% Vì vậy, phƣơng pháp xác định hàm lƣợng sắt tổng nƣớc phƣơng pháp UV – VIS theo tiêu chuẩn SMEWW2012 3500 Fe – B HD.02.24/TP phù hợp với điều kiện phịng thí nghiệm áp dụng Trung tâm kiểm nghiệm Thuốc-Mỹ phẩm-Thực phẩm Phú Yên VIII KIẾN NGHỊ - Đề nghị áp dụng qui trình xác định hàm lƣợng sắt tổng nƣớc phƣơng pháp đo quang UV – VIS theo tiêu chuẩn SMEWW2012 3500 Fe – B HD.02.24/TP với thông số đƣợc công bố tiến tới phê duyệt phƣơng pháp - Từ nghiên cứu tiến hành áp dụng để xác nhận giá trị sử dụng cho phƣơng pháp phân tích hàm lƣợng ion kim loại nƣớc phƣơng pháp đo quang máy UV – Vis mà Trung Tâm chƣa đƣợc thẩm định 19 Ý KIẾN CỦA CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG KHOA HỌC – CÔNG NGHỆ CỦA ĐƠN VỊ CHỦ NHIỆM HỘI ĐỒNG KHOA HỌC – KỸ THUẬT CỦA SỞ Y TẾ PHÚ YÊN 20 TỪ VIẾT TẮT PP: Phƣơng pháp TN: Thử nghiệm PTN: Phòng thử nghiệm KNV: Kiểm nghiệm viên ĐKMT: Điều kiện môi trƣờng TCVN: Tiêu chuẩn Việt Nam 21 PHỤ LỤC THAM KHẢO GIÁ TRỊ ĐỘ CHÍNH XÁC CỦA PHÉP THỬ GIÁ TRỊ ĐỘ LỆCH CHUẨN LẶP LẠI, TÁI LẶP VÀ VỀ ĐỘ THU HỒI TƢƠNG ỨNG VỚI CÁC KHOẢNG NỒNG ĐỘ ĐỐI VỚI TN HÓA LÝ (THEO AOAC VÀ CODEX) 1.1 Độ lặp lại tối đa chấp nhận nồng độ khác (theo AOAC) Hàm lƣợng % Tỷ lệ chất Đơn vị RSDr (%) 100 100% 1,3 10 10-1 10% 1,8 10-2 1% 2,7 0,1 10-3 0,1 % 3,7 0,01 10-4 100 ppm 5,3 0,001 10-5 10 ppm 7,3 0,0001 10-6 ppm 11 0,00001 10-7 100 ppb 15 0,000001 10-8 10 ppb 21 10 0,0000001 10-9 ppb 30 TT 1.2 Độ tái lặp tối đa chấp nhận nồng độ khác (theo AOAC) TT Hàm lƣợng % Tỷ lệ chất Đơn vị RSDr (%) 11 100 100% 2,0 12 10 10-1 10% 2,8 13 10-2 1% 4,0 14 0,1 10-3 0,1 % 5,6 15 0,01 10-4 100 ppm 8,0 16 0,001 10-5 10 ppm 11 17 0,0001 10-6 ppm 16 22 18 0,00001 10-7 100 ppb 22 19 0,000001 10-8 10 ppb 32 20 0,0000001 10-9 ppb 45 1.3 Độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác (theo AOAC) TT Hàm lƣợng [%] Tỷ lệ chất Đơn vị Độ thu hồi [%] 100 100% 98-102 >=10 10-1 10% 98-102 >=1 10-2 1% 97-103 >=0,1 10-3 0,1 % 95-105 0,01 10-4 100 ppm 90-107 0,001 10-5 10 ppm 80-110 0,0001 10-6 ppm 80-110 0,00001 10-7 100 ppb 80-110 0,000001 10-8 10 ppb 60-115 10 0,0000001 10-9 ppb 40-120 23 TÀI LIỆU THAM KHẢO Qui trình xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp thử (QT.15)-TTKN Thuốc-MP-TP Phú Yên Standard Methods for the Examination of Water and Waste Water, 22nd Edition 2012– SMEWW-3500 Fe B TCVN 6177-1996 Tài liệu tập huấn “Thẩm định phƣơng pháp ƣớc lƣợng độ không đảm bảo đo phân tích hóa học thực phẩm”- Viện vệ sinh an tồn thực phẩm Quốc gia-8/2018 Tài liệu tập huấn “ Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp kiểm nghiệm thực phẩm theo tiêu chuẩn ISO/IEC 17025: 2017”-Viện Pasteur Nha trang-6/2018 Bản tin Sức khỏe Phú Yên “ Nƣớc cách sử dụng nƣớc có hiệu quả”-BS Nguyễn Vinh Quang 24 ...MỤC LỤC I ĐẶT VẤN ĐỀ: .1 II MỤC TIÊU ĐỀ TÀI: III THỜI GIAN THỰC HIỆN ĐỀ TÀI: IV.TỔNG QUAN ĐỀ TÀI: V ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU: ... tài nghiên cứu khoa học “Xác nhận giá trị sử dụng phương pháp thử xác định hàm lượng sắt tổng nước phương pháp Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến dựa phương pháp tiêu chuẩn” II MỤC TIÊU ĐỀ TÀI:... nghiệm Thuốc-Mỹ phẩm-Thực phẩm Phú Yên III THỜI GIAN THỰC HIỆN ĐỀ TÀI: Từ tháng 03 năm 2021 đến tháng 11 năm 2021 IV.TỔNG QUAN ĐỀ TÀI: Đầu kỷ 19, hầu hết phƣơng pháp phân tích hóa học định lƣợng