Nghiên cứu chế phẩm chiết xuất từ cây neem (azadirachta indica) diệt bọ gậy 2 loài muỗi truyền bệnh cho người kháng hóa chất diệt tại hà nội

Viện đại học Mở hà nội khoa Công nghệ sinh học ----- & ----- Đề tài : Nghiên cứu chế phẩm chiết xuất từ cây Neem (Azadirachta indica) phòng trừ bọ gậy 2 loài muỗi truyền bệnh cho ngời kháng hoá chất diệt tại Hà Nội Giáo viên hớng dẫn : TS. Phạm Thị Khoa Sinh viên thực hiện : Vũ Thị Hải Giang Khoá : 2006 - 2010 hà nội - 2010 Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội Lời Cảm Ơn Tụi xin gi li cm n chõn thnh n ban giỏm hiu Vin i Hc M H Ni cựng quý thy cụ trong Khoa Cụng Ngh Sinh hc ó tn tỡnh dy d v to mi iu kin hc tp tt nht cho tụi trong sut bn nm hc va qua. hon thnh khúa lun ny, trc ht tụi xin by t lũng bit n sõu sc n TS.Phm Th Khoa - Trng Khoa Húa Thc Nghim, Vin St rột - Ký sinh trựng - Cụn trựng Trung ng ngi ó tn tỡnh giỳp , ch bo v hng dn tụi trong sut quỏ trỡnh thc hin ti ny. Xin chõn thnh cm n PGS.TS Lờ Mai Hng, Vin húa hc cỏc hp cht thiờn nhiờn, Vin Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam cựng cỏc bn sinh viờn trong nhúm thc tp ó gúp ý v giỳp tụi hon thnh khúa lun . Cui cựng, tụi xin gi li cm n n gia ỡnh, ngi thõn v bn bố ó luụn bờn cnh chia s, ng viờn, giỳp v to iu kin tt nht cho tụi hc tp, nghiờn cu v hon thnh khúa lun tt nghip ca mỡnh. H Ni , ngy 18 thỏng 05 nm 2010 Sinh viờn V Th Hi Giang Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội MC LC Trang M U . 1 CHNG 1: tổng quan tài liệu 1.1 TNG QUAN V LOI MUI 1.1.1 c tớnh chung ca mui 3 1.1.2 Vũng i ca mui . 4 1.1.2.1 Trng 4 1.1.2.2 B gy 5 1.1.2.3 Qung . 5 1.1.2.4 Mui trng thnh 5 1.2 TNG QUAN V VECTOR TRUYN BNH GIUN CH CULEX QUINQUEFASCIATUS Say, 1823 1.2.1 Bnh Giun ch . 6 1.2.2 Mui Culex quinquefasciatus Say, 1823 7 1.3 TNG QUAN V VECTOR TRUYN BNH SD/SXHD ADES AEGYPTI Linnaeus, 1757 1.3.1 Bnh st Dengue, st xut huyt Dengue 9 1.3.2 Aedes aegypti Linnaeus, 1757 vector chớnh truyn truyn SD/SXHD 11 1.4 CC BIN PHP DIT MUI V B GY 1.4.1 Bin phỏp húa hc 12 1.4.1.1 Cỏc húa cht ó v ang s dng 13 1.4.1.2 Tớnh khỏng húa cht 13 1.4.2 Bin phỏp sinh hc 15 1.4.2.1 Phng phỏp dựng cỏ n b gy 16 1.4.2.2 Phng phỏp dựng vi khun dit b gy 17 1.4.2.3 Phng phỏp dựng nm dit b gy . 18 Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội 1.4.2.4 Phng phỏp dựng giun kớ sinh dit b gy 19 1.4.2.5 Phng phỏp s dng t cõy c . 19 1.4.3 Bin phỏp dựng tinh du cõy Neem 1.4.3.1 Cõy Neem . 21 1.4.3.2 Hot cht Azadirachtin 24 CHNG 2: I TNG, THI GIAN, A IM V PHNG PHP NGHIấN CU 2.1 i tng nghiờn cu 26 2.2 Thi gian, a im nghiờn cu 26 2.3 Phng phỏp nghiờn cu 27 2.3.1 Phng phỏp thu thp b gy 27 2.3.2 Phng phỏp th nhy cm theo WHO/CDS/CPC/MAL/98.12. 27 2.2.3 Dit b gy bng ch phm Neem (Azadirachta indica) 30 Chơng 3: Kết quả và thảo luận 3.1 Kt qu nghiờn cu vi loi mui Culex quinquefasciatus . 31 3.1.1 Kt qu nh loi c im hỡnh thỏi . 31 3.1.2 Kt qu th nhy cm ca mui Culex quinquefasciatus 32 3.1.3 Kt qu dit b gy Culex quinquefasciatus bng du Neem 35 3.2 Kt qu nghiờn cu vi loi mui Aedes aegypti 38 3.2.1 Kt qu nh loi c im hỡnh thỏi . 38 3.2.2 Kt qu th nhy cm ca mui Aedes aegypti . 39 3.2.3 Kt qu dit b gy Aedes aegypti bng du Neem 42 THO LUN Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội chơng 4: kết luận và kiến nghị 1 Kt lun vi Culex quinquefasciatus 48 2 Kt lun vi Aedes aegypti 48 3. Kin ngh 49 Ti Liu Tham Kho 50 Ph lc Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội Các từ viết tắt AchE : V trớ ớch nhúm húa cht phospho hu c (Acetylcholinesterase) Cs : Cng s DDT : Dichloro - Dphenyl Trichloroethane NIMPE : Vin St rột - Ký sinh trựng - Cụn trựng Trung ng GABA : Gamma - Amino Butyric Acid kdr : khỏng ngó qu ( knock - down resistance ) SD/SXHD TB : St Dengue, st xut huyt Dengue : Trung Bỡnh PCSR : Phũng chng st rột PCR : Polymerase Chain Reaction WHO : T chc y t th gii (World Health Organization) Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội M U Mui l loi cụn trựng nh bộ. Chỳng ó tn ti trờn hnh tinh ca chỳng ta cỏch õy hng triu nm, vi khong 2700 loi, 35 ging gm : Anopheles, Aedes, Culex, Culiseta, Ochlerotatus, Psorophora, Haemagoggus, Sabethes, Wyeomyia .v.v. Tuy nhiờn, chỳng li gõy phin h v em rt nhiu nguy him n cho cỏc loi ng vt, thm chớ l con ngi. Ngoi vic hỳt mỏu ngi, mui cũn úng vai trũ l vector truyn bnh st rột, st Dengue-st xut huyt Dengue (SD/SXHD), bnh giun ch .v.v. Hng lot cỏc cụng trỡnh nghiờn cu v phõn b, phõn loi, sinh hc .v.v. c bit l bin phỏp phũng chng cỏc loi mui - vector truyn bnh nguy him ny ó c cụng b trờn th gii. Theo thụng bỏo ca T chc y t th gii (WHO,2006) cú hn 500 loi chõn t cú ý ngha y hc trờn ton th gii khỏng húa cht thỡ cú ti 50% l mui truyn bnh. Mt trong s ú l: Culex quiquefasciatus Say, 1823 l vector chớnh truyn bnh giun ch Aedes aegypti Linnaeus, 1762 l vector chớnh truyn bnh SD/SXHD Theo khuyn cỏo ca T chc Y t th gii (WHO) cn phi xỏc nh nhy cm vi húa cht dit v theo dừi nh k mc nhy cm ny m bo a ra nhng quyt nh ỳng n v kp thi s dng cỏc húa cht dit mui khỏc thay th, thay i chin lc phũng chng, ng thi cn phi tỡm ra cỏc ch phm mi cú kh nng dit mui v b gy, thõn thin vi mụi trng [17]. Chỳng tụi tin hnh ti : Nghiờn cu ch phm chit xut t cõy Neem (Azadirachta indica) dit b gy 2 loi mui truyn bnh cho ngi khỏng húa cht dit ti H Ni . Vi mc tiờu : - Bc u lm quen vi cụng tỏc nghiờn cu khoa hc Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học 1 Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội - Xỏc nh nhy cm ca mui truyn bnh giun ch Culex quinquefasciatus, mui truyn bnh SD/SXHD Aedes aegypti ti H Ni vi mt s húa cht dit mui bng k thut chun ca WHO. - Xỏc nh kh nng dit b gy 2 loi mui truyn bnh cho ngi Culex quinquefasciatus, Aedes aegypti khỏng húa cht dit ti H Ni bng ch phm chit xut t cõy neem (Azadirachta indica). Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học 2 Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội CHNG 1. TNG QUAN TI LIU 1.1. TNG QUAN V LOI MUI 1.1.1. c tớnh chung ca mui Mui cú mt ụi cỏnh vy, mt ụi chựy nh, thõn mng, cỏc chõn di. Mui cú kớch thc thay i theo loi, nhng ớt khi ln hn 15mm. a s cú trng lng khong t 2-2,5mg. Chỳng cú th bay vi tc 1,5-2,5 km/h. Bng 1 : Vt ch a thớch hỳt mỏu ca mt s loi mui Loi Vt ch chớnh Vt ch khỏc Aedes aegypti Ngi Aedes albopictus Ngi Bũ, chú, ln Anopheles maculatus Gia sỳc Ngi Anopheles sundaicus Ngi Gia sỳc, chut Culex quinquefasciatus Ngi, chim Bũ, chú, ln, g Tp tớnh hỳt mỏu - Aedes : hỳt mỏu ban ngy - Anopheles / Culex : hỳt mỏu ban ờm Con cỏi thng b cỏc vt ch thu hỳt bi : nhit c th, mựi m hụi, mựi CO 2 , mu sc (thớch mu ti) Tp tớnh trỳ u ã Aedes aegypti - u lờn qun ỏo, tm ph ging, mn, v cỏc vt khỏc bờn trong nh. ã Culex quinquefasciatus - u trờn tng, di mỏi nh, vt treo bờn trong nh, nh tm, nh v sinh. Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học 3 Khóa luận tốt nghiệp Viện Đại Học Mở Hà Nội ã Anopheles - mt s trỳ u trong nh, trong rng (An.minimus), trong cỏc khu bi rm, ngoi rng sõu, bỡa rng (An.dirus). 1.1.2. Vũng i ca mui (Hỡnh 1) Mui cú bn giai on phỏt trin trong vũng i ca chỳng bao gm: trng, b gy, qung v mui trng thnh. Hỡnh 1 : Vũng i ca mui (Theo Florida Medical Entomology Laboratory, University of Florida) 1.1.2.1 Trng Mui cỏi trng ch yu cỏc m ly, ao h hoc cỏc vựng nc ng. Trng cú mu ti v s tr nờn mu en khong 1-2 gi sau khi c ra. Trng mui ni trờn mt nc. Trng mui Culex c gn vi nhau thnh mt bố. Trng mui Anopheles v Aedes khụng gn vi nhau m l tỏch ri. Anopheles trng trờn mt nc v ni lờn nh nh nhng chic phao. Aedes trng riờng r nhau vo mộp nc hoc nhng ni m t, trng cú hỡnh xỡ g khụng cú phao. Vũ Thị Hải Giang Lớp 0602 - Khoa Công Nghệ Sinh Học 4 . Mở hà nội khoa Công nghệ sinh học ----- & ----- Đề tài : Nghiên cứu chế phẩm chiết xuất từ cây Neem (Azadirachta indica) phòng trừ bọ gậy 2 loài muỗi. muỗi truyền bệnh cho ngời kháng hoá chất diệt tại Hà Nội Giáo viên hớng dẫn : TS. Phạm Thị Khoa Sinh viên thực hiện : Vũ Thị Hải Giang Khoá : 20 06 - 20 10 hà