Phương phỏp thử nhạy cảm theo WHO/CDS/CPC/MAL/98.12

Một phần của tài liệu Nghiên cứu chế phẩm chiết xuất từ cây neem (azadirachta indica) diệt bọ gậy 2 loài muỗi truyền bệnh cho người kháng hóa chất diệt tại hà nội (Trang 33 - 37)

Húa chất : giấy thử cú nồng độ chuẩn do Tổ chức y tế thế giới cung cấp • DDT 4% • Malathion 5% • Alphacypermethrin 30mg/m2 • Deltamethrin 0,05% • Lambdacyhalothrin 0,05% • Permethrin 0,75%  Dụng cụ :

+ 14 ống nhựa cú chiều dài 125mm, đường kớnh 44mm. Trong đú 5 ống cú đỏnh dấu đỏ dựng để cho muỗi tiếp xỳc với giấy thử, 4 ống cú dấu xanh dựng để theo dừi muỗi đối chứng khụng cú húa chất diệt cụn trựng và 5 ống cú dấu

xanh dựng để theo dừi và chọn muỗi trước khi thử và theo dừi sau khi tiếp xỳc. Đầu ống được cú lưới muỗi.

+ 7 đế cú ren ở 2 đầu, giữa cú một tấm cửa đẩy qua đẩy lại được, cú một lỗ đường kớnh 20mm.

+ giấy sạch cỡ 12x15cm để lút ở phớa trong cỏc ống theo dừi.

+ 28 vũng kim loại trong đú cú 18 vũng kim loại để chặn giấy ở ống đối chứng, ống nghỉ sỏt vào thành ống và 10 vũng dựng cho ống thử nghiệm và giấy thử.

+ 2 ống hỳt thủy tinh đường kớnh 12 mm được lắp với ống cao su mềm, dài 60 cm để hút muỗi.

+ 1 cuộn băng dớnh, giấy hướng dẫn, mẫu bỏo cỏo

+ Giấy tẩm húa chất thử với nồng độ chuẩn do WHO cung cấp cũn hạn sử dụng. Dụng cụ thử và giấy thử cú tẩm húa chất diệt cụn trựng phải để riờng.

Tiến hành :

+ Bước 1: Chuẩn bị 7 ống theo dừi lút giấy sạch, 5 ống tiếp xỳc lút giấy tẩm húa chất và 2 ống chứng lút giấy chứng. Mỗi ống chặn giấy bằng 2 vũng kim loại, lắp ống theo dừi vào một đầu ren của đế.

+ Bước 2: Dựng ống thủy tinh bắt muỗi cỏi, mỗi ống chứa 10 muỗi cỏi. Bắt muỗi nhẹ nhàng, chuyển muỗi vào ống nhựa theo dừi qua lỗ ở tấm cửa đẩy của phần đế. Mỗi ống nhựa chứa 20 muỗi cỏi. Như vậy mỗi loại húa chất sẽ thử 100 muỗi và 40 chứng.

+ Bước 3: sau khi bắt đủ 20 con muỗi cỏi cho mỗi ống nhựa theo dừi, đặt ống đứng theo dừi muỗi ớt nhất 1 giờ, để trỏnh dựng muỗi bị thương. Sau thời gian nghỉ này, lấy những muỗi bị thương (ở đỏy) ra, thay vào đú những muỗi khỏc khỏe mạnh.

+ Bước 4: theo dừi trong 1 giờ tiếp xỳc. Lắp ống tiếp xỳc vào đầu ren cũn lại của phần đế. Lỳc này ống theo dừi và ống tiếp xỳc đối diện nhau nhưng ngăn cỏch nhau bằng một tấm cửa của đế. Chuyển muỗi sang ống tiếp xỳc bằng cỏch đẩy tấm cửa sang một bờn sao cho vũng hở của cửa đẩy trựng khớt

với miệng của 2 ống, thổi nhẹ để đẩy muỗi từ ống theo dừi sang ống tiếp xỳc, sau đú đẩy tấm cửa để đúng ống lại, thỏo ống theo dừi ra khỏi phần đế. Để ống tiếp xỳc theo chiều đứng trong 1 giờ, phớa cú lưới lờn trờn, chỗ ỏnh sỏng tản mỏt, nhẹ, khụng giú.

Theo dừi và đếm số muỗi ngó sau 10 phỳt, 20 phỳt, 30 phỳt, 40 phỳt, 50 phỳt, 60 phỳt

+ Bước 5: sau 1 giờ tiếp xỳc chuyển muỗi từ ống tiếp xỳc sang ống theo dừi. Nếu trong thời gian tiếp xỳc, một số muỗi bị choỏng thỡ để ống nằm ngang, gừ nhẹ vào ống để muỗi rời tấm cửa trước khi đẩy sang một bờn. Lắp ống theo dừi vào phần đế rồi mở cửa, thổi nhẹ đẩy muỗi từ ống tiếp xỳc sang ống theo dừi. Đúng tấm cửa lại rồi thỏo ống tiếp xỳc ra. Đặt ống theo dừi dựng đứng phớa cú lưới lờn trờn. Đặt một miếng bụng ẩm cú glucoza lờn trờn lưới. Giữ ống theo dừi 24 giờ ở nơi tĩnh, mỏt, ở nhiệt độ khụng quỏ 30 độ C, độ ẩm 70-80%.

24 giờ sau, đặt ống theo dừi vào trong lồng màn, mở cửa cho muỗi bay ra, muỗi chết rơi vào trong cốc. Đếm số muỗi chết và số cũn sống, con nào khụng cũn khả năng bay được thỡ coi như chết và ghi kết quả vào phiếu.

Song song với lụ thử nghiệm cú lụ đối chứng, nếu tỷ lệ muỗi chết ở lụ đối chứng > 20% thỡ phài làm lại thớ nghiệm, nếu tỷ lệ muỗi chết ở lụ đối chứng 5- 20% thỡ phải điều chỉnh theo cụng thức Abbote :

Tỷ lệ chết thực nghiệm – Tỷ lệ chết đối chứng Tỷ lệ chết điều chỉnh =

100 – Tỷ lệ chết đối chứng Đọc kết quả sau 24 giờ.

Đỏnh giỏ kết quả:

+ Tỷ lệ muỗi chết 98-100% : muỗi cũn nhạy cảm với húa chất

+ Tỷ lệ muỗi chết 80-97% : muỗi cú khả năng khỏng với húa chất, cần kiểm tra lại ( thử lại 100 muỗi khỏc)

2.3.3. Diệt bọ gậy bằng chế phẩm Neem (Azadirachta indica)

Húa chất : tinh dầu Neem thành phần gồm: 0,15% w/v azadirachitn, dung mụi polyoxyethylene ether, chất hoạt động bề mặt sorbitan dioleate và chất chống lại ảnh hưởng của ỏnh sỏng.

- Xuất xứ Ấn Độ, PGS.TS Lờ Mai Hương, Viện Húa học cỏc hợp chất thiờn nhiờn - Viện Khoa học và Cụng nghệ Việt Nam cung cấp.

Dụng cụ : khay đựng , ống hỳt  Tiến hành :

+ Bước 1 : chuẩn bị 4 khay. chọn 50 bọ gậy tuổi 2-3 thả vào một khay, mật độ 1 con/ cm2, bổ sung thức ăn của Viện Sốt Rột - KST - CT TƯ sản xuất, điều kiện nhiệt độ 23oC - 25oC, ẩm độ 80-85%, ỏnh sỏng 10 giờ/ ngày đờm. Một khay đối chứng, 3 khay thử húa chất

+ Bước 2 : cho bọ gậy tiếp xỳc với chể phẩm tinh dầu với cỏc nồng độ 0,065 %, 0,075 %, 0,15 %, 0,225 %

+ Bước 3 : theo dừi số bọ gậy chết hàng ngày trong tuần (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

Đỏnh giỏ kết quả :

+ Ghi lại số bọ gậy chết sau từng ngày

CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 KẾT QUẢ NGHIấN CỨU VỚI CULEX QUINQUEFASCIATUS

Một phần của tài liệu Nghiên cứu chế phẩm chiết xuất từ cây neem (azadirachta indica) diệt bọ gậy 2 loài muỗi truyền bệnh cho người kháng hóa chất diệt tại hà nội (Trang 33 - 37)