Đang tải... (xem toàn văn)
Burkholderia pseudomallei một loài trực khuẩn Gram âm sống hoại sinh trong đất và nước ở các vùng nhiệt đới là căn nguyên nhiễm trùng Melioidosis (hay còn gọi là bệnh Whitmore), một bệnh truyền nhiễm cấp tính nguy hiểm gây tử vong cao (3070%) và tử vong nhanh (trong vòng 48 giờ sau khi nhập viện). Hàng năm, trên thế giới có khoảng 165.000 ca mắc Melioidosis, trong đó có 89.000 ca tử vong. Việt Nam được coi là nước nằm trong tâm điểm lưu hành của Melioidosis ở cấp báo động đỏ (cấp cao nhất) trên bản đồ dịch tễ học toàn cầu với con số dự tính 10.430 ca mắc mỗi năm, trong đó có 4.703 ca tử vong.
khoa học - công nghệ đổi sáng tạo Bệnh Melioidosis Việt Nam: Những nỗ lực nâng cao hiệu chẩn đốn dự phịng ThS Trần Thị Lệ Quyên1, 2, PGS.TS Phạm Công Hoạt3, PGS.TS Bùi Thị Việt Hà2, TS Trịnh Thành Trung1 Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học, Đại học Quốc gia Hà Nội Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Vụ KH&CN ngành kinh tế - kỹ thuật, Bộ KH&CN Burkholderia pseudomallei - loài trực khuẩn Gram âm sống hoại sinh đất nước vùng nhiệt đới - nguyên nhiễm trùng Melioidosis (hay gọi bệnh Whitmore), bệnh truyền nhiễm cấp tính nguy hiểm gây tử vong cao (30-70%) tử vong nhanh (trong vòng 48 sau nhập viện) Hàng năm, giới có khoảng 165.000 ca mắc Melioidosis, có 89.000 ca tử vong Việt Nam coi nước nằm tâm điểm lưu hành Melioidosis cấp báo động đỏ (cấp cao nhất) đồ dịch tễ học toàn cầu với số dự tính 10.430 ca mắc năm, có 4.703 ca tử vong N hằm góp phần phát bệnh nhanh để có phương án điều trị kịp thời, Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học đề xuất Bộ Khoa học Công nghệ (KH&CN) phê duyệt thực đề tài “Nghiên cứu khai thác nguồn gen vi khuẩn Burkholderia pseudomallei (B pseudomallei) đánh giá đặc tính sinh học nhằm nâng cao hiệu chẩn đốn, dự phịng điều trị” Thơng qua việc thực đề tài, nhà khoa học phát triển thành cơng kit ELISA chẩn đốn bệnh Melioidosis, góp phần giúp phát bệnh sớm xác, từ tiếp cận phác đồ điều trị phù hợp Bệnh Melioidosis khó khăn q trình xét nghiệm Melioidosis bệnh truyền nhiễm gặp lứa tuổi, đặc biệt độ tuổi lao động Do vi khuẩn B pseudomallei sống hoại sinh cư trú đất nên đường lây nhiễm chủ yếu vị trí da bị tổn thương tiếp xúc trực tiếp với đất nhiễm khuẩn hít phải hạt bụi đất nhiễm khuẩn Vì vậy, đa số người mắc bệnh nơng dân, làm việc đồng ruộng khơng có bảo hộ lao động Bệnh cạnh đó, người mắc vấn đề tiểu đường, nghiện rượu, sử dụng corticoit dài ngày, mắc bệnh phổi thận mạn tính… có khả nhiễm bệnh cao nhiều lần so với người bình thường Biểu lâm sàng Melioidosis đa dạng khác nhau, từ nhiễm trùng huyết cấp tính đến bệnh lý mạn tính, nhiễm trùng tiềm ẩn tái nhiễm sau nhiều thập kỷ Do vậy, bệnh thường bị bỏ sót chẩn đốn nhầm thành bệnh khác Trong tất quan có khả nhiễm bệnh, phổi quan bị ảnh hưởng phổ biến nhất, với biểu ho, sốt áp-xe phổi, viêm phổi lan truyền thứ phát đến nhiễm khuẩn huyết Tỷ lệ tử vong người nhiễm B pseudomallei dao động từ 30 đến 70%, tùy thuộc vào việc bệnh nhân có nhiễm trùng huyết hay khơng Bệnh nhân nhiễm Melioidosis điều trị phát sớm, nhiên, việc điều trị sớm bị cản trở hai yếu tố chính: (1) Việc chẩn đốn liên quan đến ni cấy định danh vi khuẩn nhiều thời gian, (2) Vi khuẩn B pseudomallei có khả đề kháng với nhiều nhóm kháng sinh Khơng giống nhiều bệnh truyền nhiễm khác, điều trị bệnh Melioidosis cần có phác đồ kháng sinh riêng biệt vi khuẩn B pseudomallei kháng nhiều loại kháng sinh sử dụng Cephalosporins hệ 4, Penicillin, Rifamycin Aminoglycoside Ngồi ra, vi khuẩn cịn kháng với loại kháng sinh khác Quinolone Macrolide Vì vậy, chẩn đoán bệnh sử dụng kháng sinh phù Số năm 2021 37 Khoa học - Công nghệ đổi sáng tạo khoa vi sinh bệnh viện Việt Nam Hơn nữa, bệnh viện chưa có điều kiện tổ chức lớp đào tạo chuyên sâu nhằm nâng cao cảnh báo, khả chẩn đoán sớm điều trị bệnh Melioidosis khối lâm sàng, nên bác sĩ lâm sàng chưa có nhiều kinh nghiệm chẩn đốn nghi ngờ bệnh nhân mắc Melioidosis Khuẩn lạc vi khuẩn B pseudomallei hợp cơng việc gặp nhiều khó khăn bác sĩ Tiêu chuẩn vàng chẩn đốn nhiễm khuẩn B pseudomallei ni cấy phân lập vi khuẩn từ mẫu bệnh phẩm lâm sàng, sau định danh thiết bị tự động Tuy nhiên, phương pháp nuôi cấy thường 2-7 ngày với độ nhạy thấp, khoảng 60% Theo nghiên cứu môi trường nuôi cấy, vi khuẩn B pseudomallei biểu dạng khuẩn lạc khác nhau, từ trơn nhẵn đến nhăn nheo khơ ráp, địi hỏi người xét nghiệm phải có nhiều kinh nghiệm đào tạo việc nhận dạng khuẩn lạc Ngoài ra, quy trình ni cấy thường quy áp dụng bệnh viện đọc kết sau ngày ni cấy, số phịng xét nghiệm lưu đĩa tới ngày thứ Do đó, xét nghiệm ni cấy vi sinh theo quy trình thường dẫn đến bỏ sót ca bệnh 38 Đối với phương pháp định danh sử dụng bệnh viện, nhiều chứng cho thấy phương pháp phân loại sinh hóa API 20 NE phân loại nhầm B pseudomallei thành loài vi khuẩn khác B cepacia, Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas fluorescens Các máy phân loại tự động Vitek Phoenix phân loại nhầm B pseudomallei thành B cepacia Thậm chí máy định danh dựa kỹ thuật khối phổ Protein MALDI-TOF thường trả sai kết định danh vi khuẩn B pseudomallei thành loài vi khuẩn khác Hiện tại, kỹ thuật real-time PCR nhằm phát nhanh gen vi khuẩn B pseudomallei mẫu bệnh phẩm nhóm nghiên cứu giới phát triển cho độ xác cao Tuy nhiên, kỹ thuật chưa có điều kiện để triển khai Số năm 2021 Theo điều tra nhóm nghiên cứu, từ tháng 6/2018 đến 12/2020 44 bệnh viện thuộc 37 tỉnh/thành phố nước ghi nhận 412 ca mắc, số 1,55% so với dự đoán Điều đặt nhiều giả thiết như: i) Giáo trình dạy cho sinh viên y khoa trường đại học chưa đề cập nhiều đến bệnh; ii) Sinh viên kỹ thuật viên không thực hành xét nghiệm nuôi cấy vi khuẩn; iii) Các thiết bị xét nghiệm bệnh viện kỹ thuật định danh vi khuẩn (sử dụng máy định danh vi khuẩn tự động) thường trả sai kết vi khuẩn B pseudomallei thành loài vi khuẩn khác, dẫn đến chẩn đốn nhầm bỏ sót ca bệnh Đóng góp mang ý nghĩa khoa học xã hội bệnh Melioidosis Việt Nam Trong trình chứng kiến xét nghiệm Melioidosis bệnh viện tuyến tỉnh, nhóm nghiên cứu nhận thấy phương pháp xét nghiệm vi khuẩn B pseudomallei gặp nhiều khó khăn tốn thời gian, dẫn đến không đáp ứng kịp thời yêu cầu chẩn đoán điều trị Điều đặt yêu cầu cần phải có công cụ phát nhanh vi khuẩn B pseudomallei - nguyên gây bệnh Melioidosis, để giúp bệnh nhân tiếp cận sớm với phác đồ khoa học - công nghệ đổi sáng tạo bị phân loại vi sinh thường quy sử dụng bệnh viện định danh vi khuẩn B pseudomallei Kết thu tài liệu tham khảo có ý nghĩa lớn xét nghiệm, chẩn đoán điều trị bệnh Việt Nam Ngoài ra, vào nguồn gen này, nhà khoa học phát triển thêm kit chẩn đoán nhanh Melioidosis khác kit phát kháng nguyên, kit ngưng kết miễn dịch latex… Thay lời kết Bộ kit ELISA điều trị phù hợp việc làm vô cấp thiết ý nghĩa Từ thực tiễn trên, Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học đề xuất Bộ KH&CN phê duyệt thực đề tài “Nghiên cứu khai thác nguồn gen vi khuẩn B pseudomallei đánh giá đặc tính sinh học nhằm nâng cao hiệu chẩn đốn, dự phòng điều trị” Sau năm nghiên cứu (20172020), kit ELISA chẩn đoán nhanh bệnh Melioidosis hoàn thiện đưa vào thử nghiệm thực tế, thời điểm bệnh Melioidosis bùng phát sau trận lũ tháng 10/2020 tỉnh Trung Trung Bộ Có 1.000 mẫu bệnh phẩm từ bệnh nhân có biểu nghi nhiễm Melioidosis (như sốt kéo dài chưa rõ nguyên nhân; sốt kéo dài kèm theo số dấu hiệu viêm phổi, đau tức vùng nội tạng, viêm tấy xương khớp) đến từ vùng lũ Bệnh viện Đa khoa tỉnh Hà Tĩnh Bệnh viện Trung ương Huế Kết cho thấy, có 85 ca dương tính tổng số 1.000 ca nghi ngờ xác định kit ELISA Trong số 85 ca dương tính, có 28 ca xét nghiệm khẳng định dương tính phương pháp nuôi cấy Như vậy, dựa vào phương pháp ni cấy, có đến 57 ca dương tính với Melioidosis bị bỏ sót Kết cho thấy, kit ELISA hỗ trợ chẩn đoán xét nghiệm Melioidosis sớm hơn, nhanh xác cách đáng kể so với phương pháp nuôi cấy Từ giúp bệnh nhân điều trị với phác đồ kháng sinh đặc hiệu cho nhiễm trùng Melioidosis Hiện sản phẩm kit ELISA tiếp tục sử dụng miễn phí nhằm hỗ trợ cho bệnh nhân có biểu nhiễm trùng Melioidosis Trong thời gian tới, nhóm nghiên cứu tiếp tục phát triển kit ELISA thành que test nhanh nhằm giảm thời gian làm xét nghiệm từ xuống cịn 15 phút khơng địi hỏi hệ thống thiết bị ELISA kèm, bệnh viện tuyến chủ động triển khai xét nghiệm Bên cạnh đó, sản phẩm đề tài cịn có giống 1.095 chủng vi khuẩn B pseudomallei phân lập từ môi trường lâm sàng Việt Nam Với nguồn gen này, nhà nghiên cứu sử dụng để đánh giá độ xác thiết Melioidosis bệnh nhiễm trùng cấp tính nguy hiểm Với nỗ lực, miệt mài, phối hợp bác sĩ 40 bệnh viện nước, ủng hộ Bộ KH&CN, sàng lọc nhanh bệnh Melioidosis Việt Nam Kết nghiên cứu đóng góp tri thức hiểu biết dịch tễ học, mà giúp cho nhà khoa học bác sĩ lâm sàng hiểu đặc tính chủng vi khuẩn B pseudomallei, từ có định hướng nghiên cứu điều trị bệnh Sản phẩm kit ELISA xét nghiệm nhanh Melioidosis giúp nhiều bệnh viện tiếp cận với kỹ thuật xét nghiệm chẩn đốn nhanh bệnh Melioidosis, qua giảm tình trạng diễn tiến nặng bệnh, giảm tỷ lệ tử vong, giảm thời gian nằm viện giảm chi phí điều trị; đưa y tế chất lượng cao đến người dân, đồng thời làm giảm tải cho bệnh viện tuyến trung ương thông qua chuyển giao kỹ thuật cho bệnh viện tuyến ? Số năm 2021 39 ... sinh học nhằm nâng cao hiệu chẩn đốn, dự phịng điều trị” Sau năm nghiên cứu (20172020), kit ELISA chẩn đoán nhanh bệnh Melioidosis hoàn thiện đưa vào thử nghiệm thực tế, thời điểm bệnh Melioidosis. .. đổi sáng tạo khoa vi sinh bệnh viện Việt Nam Hơn nữa, bệnh viện chưa có điều kiện tổ chức lớp đào tạo chuyên sâu nhằm nâng cao cảnh báo, khả chẩn đoán sớm điều trị bệnh Melioidosis khối lâm sàng,... giá độ xác thiết Melioidosis bệnh nhiễm trùng cấp tính nguy hiểm Với nỗ lực, miệt mài, phối hợp bác sĩ 40 bệnh viện nước, ủng hộ Bộ KH&CN, sàng lọc nhanh bệnh Melioidosis Việt Nam Kết nghiên cứu