Khảo sát sự sinh trưởng và phát triển của nấm bào ngư pleurotus sajor caju khi phối trộn các nguyên liệu thường gặp với tỉ lệ khác nhau

TỔNG LIÊN ĐOÀN LAO ĐỘNG VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG KHOA KHOA HỌC ỨNG DỤNG 000 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT SỰ SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA NẤM BÀO NGƯ Pleurotus sajor - caju KHI PHỐI TRỘN CÁC NGUYÊN LIỆU THƯỜNG GẶP VỚI TỈ LỆ KHÁC NHAU GVHD: TS.HỒ THỊ KIM THẠCH Tp.HỒ CHÍ MINH - 2010 MỤC LỤC Lời cảm ơn i Mục lục .ii Danh mục bảng v Danh mục biểu đồ vi Danh mục hình vii Chương 1: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích phạm vi đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài Chương 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đại cương giới nấm 2.1.1 Khái niệm phân loại 2.1.2 Đặc điểm sinh lý biến dưỡng 2.1.2.1 Đặc điểm biến dưỡng nấm 2.1.2.2 Sự phát triển sợi nấm 2.1.3 Hình thái học 2.1.3.1 Hệ sợi nấm 2.1.3.2 Quả thể 2.1.4 Đặc trưng sinh sản chu trình sống nấm 10 2.1.5 Giá trị nấm 11 2.1.5.1 Giá trị dinh dưỡng 11 2.1.5.2 Giá trị dược liệu 12 2.1.5.3 Giá trị kinh tế xã hội 13 2.2 Giới thiệu nấm bào ngư 14 2.2.1 Vị trí phân loại đặc điểm phân bố 14 ii 2.2.2 Đặc điểm sinh học sinh trưởng 14 2.2.2.1 Hình dạng nấm bào ngư: 14 2.2.2.2 Chu trình sống nấm bào ngư 15 2.2.2.3 Ảnh hưởng điều kiện ngoại cảnh 16 2.2.3 Giá trị nấm bào ngư 17 2.2.3.1 Giá trị dinh dưỡng 17 2.2.3.2 Giá trị dược liệu 18 2.2.4 Giới thiệu nguyên liệu trồng nấm bào ngư 19 2.2.4.1 Tận dụng phế liệu nông lâm ngư nghiệp 19 2.2.4.2 Sự phân hủy hợp chất hữu nguyên liệu trồng nấm 22 2.2.4.3 Các qui trình trồng nấm bào ngư phổ biến 23 Chương 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 26 3.1 Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm 26 3.1.1 Địa điểm 26 3.1.2 Thời gian 26 3.2 Nội dung nghiên cứu 26 3.3 Vật liệu thí nghiệm 26 3.3.1 Đối tượng nghiên cứu 26 3.3.2 Trang thiết bị thí nghiệm 26 3.3.3 Hóa chất mơi trường thí nghiệm 27 3.3.4 Điều kiện nuôi trồng 27 3.4 Phương pháp tiến hành 27 3.4.1 Phương pháp xác định tỉ lệ C/N nguyên liệu 27 3.4.2 Phương pháp xác định độ ẩm 30 3.4.3 Xác định tốc độ lan tơ 31 3.4.4 Khảo sát tỉ lệ nhiễm 32 iii 3.4.5 Khảo sát trọng lượng suất nấm tươi 32 3.4.6 Khảo sát trọng lượng nấm khô 33 3.4.7 Tiến hành nuôi trồng nấm bào ngư P sajor-caju chất 34 3.5 Phương pháp xử lý số liệu: 37 Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 4.1 Xác định tỉ lệ C/N nguyên liệu ban đầu 38 4.1.1 Xác định hàm lượng carbon hữu (theo phương pháp so màu) 38 4.1.2 Xác định hàm lượng nitơ (phương pháp Kjeldahl) 38 4.1.3 Xác định tỉ lệ C/N nguyên liệu 39 4.2 Khảo sát tốc độ lan tơ, so sánh độ dài thời gian tơ lan đầy bịch 40 4.3 Khảo sát tỉ lệ nhiễm túi phôi chất phối trộn 46 4.4 Khảo sát thể thu hoạch chất: 51 4.4.1 Hình dạng, màu sắc, mùi vị 51 4.4.2 Khảo sát trọng lượng nấm tươi loại chất 53 4.4.3 Khảo sát trọng lượng nấm khô thu hoạch chất 57 4.5 Khảo sát suất nấm bào ngư đạt chất 58 Chương 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 64 5.1 Kết luận: 64 5.2 Đề nghị: 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO 65 PHỤ LỤC 66 iv DANH SÁCH CÁC BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Nồng độ số dạng muối khoáng cần cho nấm Bảng 2.2 So sánh chất lượng dinh dưỡng nấm với thực phẩm khác 12 Bảng 2.3 Nhiệt độ thích hợp cho ủ tơ thể vài loài nấm bào ngư 16 Bảng 2.4 Yếu tố ảnh hưởng sinh trưởng nấm bào ngư 17 Bảng 2.5 Thành phần vitamin có nấm bào ngư 18 Bảng 2.6 Giá trị dinh dưỡng số loại nấm thuộc nấm bào ngư .18 Bảng 3.1 Nghiệm thức khảo sát tốc độ lan tơ-tỉ lệ nhiễm-năng suất 33 Bảng 4.1 Bảng hàm lượng carbon tổng số nguyên liệu ban đầu .38 Bảng 4.2 Xác định nitơ tổng nguyên liệu ban đầu .38 Bảng 4.3 Kết xác định tỉ lệ C/N nguyên liệu 39 Bảng 4.4 So sánh độ dày thời gian tơ nấm lan đầy bịch chất 40 Bảng 4.5 Tốc độ lan tơ chất phối trộn Bã mía-Mạt cưa 41 Bảng 4.6 Tốc độ lan tơ chất phối trộn Rơm rạ-Mạt cưa 43 Bảng 4.7 Tốc độ lan tơ chất phối trộn Cùi bắp-Mạt cưa .44 Bảng 4.8 Tốc độ lan tơ môi trường phối trộn chất 45 Bảng 4.9 Tỉ lệ nhiễm túi phôi chất phối trộn Bã mía-Mạt cưa 47 Bảng 4.10 Tỉ lệ nhiễm túi phôi chất phối trộn Rơm rạ-Mạt cưa .48 Bảng 4.11 Tỉ lệ nhiễm túi phôi chất phối trộn Cùi bắp-Mạt cưa 48 Bảng 4.12 Tỉ lệ nhiễm túi phôi môi trường phối trộn chất 49 Bảng 4.13 Trọng lượng nấm tươi chất Bã mía-Mạt cưa .53 Bảng 4.14 Trọng lượng nấm tươi chất Rơm rạ-Mạt cưa 54 Bảng 4.15 Trọng lượng nấm tươi chất Cùi bắp-Mạt cưa 55 Bảng 4.16 Trọng lượng nấm tươi môi trường phối trộn chất 56 Bảng 4.17 Trọng lượng nấm khô môi trường phối trộn chất .57 Bảng 4.18 Năng suất nấm tươi môi trường phối trộn chất 58 Bảng 4.19 Năng suất nấm khô môi trường phối trộn chất 59 v DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 4.1 Hàm lượng carbon tổng số 38 Biểu đồ 4.2 Hàm lượng nitơ tổng số 39 Biểu đồ 4.3 Tỉ lệ C/N nguyên liệu 39 Biểu đồ 4.4 Thời gian tơ nấm lan đầy bịch 41 Biểu đồ 4.5 Tốc độ lan tơ chất phối trộn Bã mía-Mạt cưa 42 Biểu đồ 4.6 Tốc độ lan tơ chất phối trộn Rơm rạ-Mạt cưa 43 Biểu đồ 4.7 Tốc độ lan tơ chất phối trộn Cùi bắp-Mạt cưa 44 Biểu đồ 4.8 Tốc độ lan tơ môi trường phối trộn chất 46 Biểu đồ 4.9 Tỉ lệ nhiễm túi phơi chất phối trộn Bã mía-Mạt cưa 47 Biểu đồ 4.10 Tỉ lệ nhiễm túi phôi chất phối trộn Rơm rạ-Mạt cưa 48 Biểu đồ 4.11 Tỉ lệ nhiễm túi phôi chất phối trộn Cùi bắp-Mạt cưa 49 Biểu đồ 4.12 Tỉ lệ nhiễm túi phôi môi trường phối trộn chất 50 Biểu đồ 4.13 Trọng lượng nấm tươi thu hái chất Bã mía-Mạt cưa 53 Biểu đồ 4.14 Trọng lượng nấm tươi thu hái chất Rơm rạ-Mạt cưa 54 Biểu đồ 4.15 Trọng lượng nấm tươi thu hái chất Cùi bắp-Mạt cưa 55 Biểu đồ 4.16 Trọng lượng nấm tươi môi trường phối trộn chất 56 Biểu đồ 4.17 Trọng lượng nấm khô môi trường phối trộn chất 57 Biểu đồ 4.18 Năng suất nấm tươi môi trường phối trộn chất 58 Biểu đồ 4.21 Năng suất nấm khô môi trường phối trộn chất 59 vi DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1 Cấu tạo sợi nấm Hình 2.2 Cấu trúc sinh sản nấm lớn Hình 2.3 Chu trình sinh trưởng phát triển nấm lớn 11 Hình 2.4 Các giai đoạn phát triển nấm bào ngư 15 Hình 3.1 Nhà trồng nấm trung tâm Cơng Nghệ Sinh Học Ứng Dụng 37 Hình 3.2 Thiết bị hấp khử trùng 37 Hình 4.1 Tơ nấm phát triển chất phối trộn Bã mía-Mạt cưa 42 Hình 4.2 Tơ nấm phát triển chất phối trộn Rơm rạ-Mạt cưa 44 Hình 4.3 Tơ nấm phát triển chất phối trộn Cùi bắp-Mạt cưa 45 Hình 4.4 Bịch phôi bị nhiễm 51 Hình 4.5 Quan sát hình dạng màu sắc thể 60 Hình 4.6 Các giai đoạn phát triển nấm bào ngư P sajor-caju 56 vii Chương 1: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề Việt Nam nước có kinh tế nông nghiệp chủ yếu Các hoạt động sản xuất chế biến nông phẩm thải môi trường nhiều nguồn phế phẩm Những nguồn phế phẩm lớn hầu hết chưa tận dụng cách triệt để, chí cịn vấn nạn gây ô nhiễm môi trường Pleurotus sajor - caju Trong nhiều giải pháp để khắc phục tình trạng giải pháp trồng nấm giải pháp hữu hiệu để tận dụng tối đa nguồn phế phẩm Nấm không sản phẩm có giá trị kinh tế cao mà nguồn dược liệu, loại “rau sạch, thịt sạch” có nhiều giá trị dinh dưỡng Đất nước có khí hậu nhiệt đới gió mùa, thuận lợi cho phát triển nhiều loại nấm có giá trị Nấm bào ngư (Pleutorus) loại nấm trồng đại trà nước ta Những năm gần nhu cầu nấm bào ngư cho xuất tiêu thụ tăng dần Nấm Bào ngư mang lại nhiều công dụng đồng thời tận dụng nguồn phế phẩm, hướng để giải vấn nạn mơi trường hữu hiệu Chính lí đó, bước đầu chúng tơi thực đề tài “Khảo sát sinh trưởng phát triển nấm bào ngư Pleurotus sajor-caju phối trộn nguyên liệu thường gặp với tỉ lệ khác nhau” 1.2 Mục đích phạm vi đề tài Khảo sát sinh trưởng, phát triển đánh giá suất nấm Bào ngư Pleurotus sajor-caju loại nguyên liệu (bã mía, mạt cưa, rơm rạ, cùi bắp) với nhiều tỉ lệ phối trộn khác 1.3 Ý nghĩa đề tài Xác định tỉ lệ phối trộn thích hợp mà nấm phát triển đạt suất cao Chương 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đại cương giới nấm 2.1.1 Khái niệm phân loại [8, 10, 16] Nấm khác với thực vật xanh: lục lạp, khơng có phân hóa thành rễ, thân, lá, khơng có hoa, khơng chứa cenllulose thành tế bào, khơng có chu trình phát triển chung thực vật Nấm hấp thu chất dinh dưỡng cần thiết cho thể từ thể khác hay từ đất qua bề mặt tế bào hệ sợi nấm Hệ thống phân loại sinh giới coi nấm giới riêng, tương đương với giới thực vật động vật Năm 1980, Woese vào trật tự nucleotid acid ribonucleid (ARN) ribosome 16S, 5S để tách vi khuẩn làm hai giới:  Giới vi khuẩn thật (Eubacteria)  Giới vi khuẩn cổ (Archaebacteria) Ông gộp nấm, thực vật, động vật thành giới chung gọi sinh vật có nhân thật (Eukaryota) Hiện nay, nghiên cúu nấm người ta dựa vào hệ thống phân loại R.H.Whitaker (1969) hệ thống phân loại A.L.Takhtadjan (1973) Khoa phân loại nấm đại bao gồm ngành ngành phụ sau: (Allexopoloux, 1962)  Nấm nhầy (Exomycotina) dạng nấm đặc biệt, có tích chất vừa động vật vừa thực vật Chúng có kiểu sinh sản bào tử thực vật tế bào lại khối sinh chất khơng có vách bao bọc di chuyển nuốt thức ăn động vật (amib)  Nấm thật (Eumycotina) chiếm số lượng đông đảo, bao gồm tế bào với nhân tương đối hồn chỉnh Tế bào nấm có vách bao bọc tế bào thực vật, đa số cấu tạo chitin glucan Nhiều tế bào nấm cịn tích trữ đường dạng glycogen, giống động vật Một số loài sinh sản theo lối tạo giao tử có lông roi để di động (động bào tử), hợp tử lại phát triển theo kiểu chung nấm Dựa theo sinh sản hữu tính, nhà phân loại chia chúng thành ngành phụ sau: o Ngành phụ nấm tiên mao (Mastigomycotina) o Ngành phụ nấm tiếp hợp (Zygomycotina) o Ngành phụ nấm túi (Ascomycotina) o Ngành phụ nấm đảm (Basidiomycotina) o Ngành phụ nấm bất toàn (Deuteromycotina) 2.1.2 Đặc điểm sinh lý biến dưỡng 2.1.2.1 Đặc điểm biến dưỡng nấm [6, 10] Nấm chủ yếu sống dị dưỡng, lấy thức ăn từ nguồn hữu (động vật thực vật) Hầu hết loài nấm lấy chất dinh dưỡng qua màng tế bào hệ sợi (giống rễ cây) Nhiều loại nấm có hệ men (enzyme) phân giải tương đối mạnh biến đại phân tử chất xơ (cellulose, hemicellulose), chất đạm (protein), chất bột (amidon, amylose), chất mộc (lignin)…thành dạng đơn giản để dễ hấp thụ Với cấu trúc hệ sợi, tơ nấm len lỏi sâu vào chất (rơm rạ, mạt cưa, gỗ…) lấy thức ăn ni tồn thể (tản dinh dưỡng hay tản sinh sản) Dựa theo cách dinh dưỡng nấm, chia thành nhóm: o Hoại sinh: đặc tính chung hầu hết lồi nấm, có nấm trồng Thức ăn chúng xác bã thực vật hay động vật Nhóm nấm có hệ men tiêu hóa tương đối mạnh Phân giải nhiều loại chất (thức ăn) Chúng có khả biến đổi chất thành thành phần đơn giản để hấp thu Tuy nhiên, có trường hợp nấm khơng thể phân giải chất, mà nhờ vào vi sinh vật khác (vi khuẩn, nấm mốc, xạ khuẩn) tiến hành trước bước o Kí sinh: bao gồm chủ yếu loài nấm gây bệnh Chúng sống bám vào thể sinh vật khác (động vật, thực vật lồi nấm khác) Thức ăn chúng chất lấy từ thể ký chủ Một số nấm ăn sống cịn tươi, đời sống hoại sinh, nên xếp vào nhóm trung gian , gọi bán ký sinh (trường hợp nấm mèo)  Tạo thêm nguồn thực phẩm có lợi cho cộng đồng 2.2 Giới thiệu nấm bào ngư 2.2.1 Vị trí phân loại đặc điểm phân bố [10, 18] Tên gọi thông thường: nấm bào ngư (abalon), nấm dai (ở miền Nam), nấm sò (oyster), nấm hương chân ngắn (ở miền Bắc) Nấm bào ngư tên dùng cho loại thuộc giống Plerotus Trong hệ thống phân loại Bào ngư thuộc nhóm sau:  Lồi (species): Sajor-caju  Chi (Genus): Pleurotus  Họ (Family): Pleurotaceae  Bộ (Order): Agaricales  Lớp phụ (Subclass): Hymenomycetidae  Lớp (Class): Hymenomycetes  Ngành phụ (Subdivion): Basidomycotina  Ngành nấm thật (Division): Eumycota  Giới nấm (Kingdom): Mycota hay Fungi Theo Singer (1975) có tất 39 lồi chia làm nhóm Trong có hai nhóm lớn:  Nhóm “ưa nhiệt trung bình” (ơn hịa) kết thể nhiệt độ từ 10-20 oC  Nhóm “ưa nhiệt” kết thể nhiệt độ từ 20-30oC Đây nấm có nhiều lồi ni trồng Pháp, có lồi (P cornucopiae, P ostreatus, P florida, P du Québec, P columbinus, P pulmonarius) Ở nước châu Á cịn thấy có lồi P flabellatus (Indonesia, Ấn độ, Philippines), P sajor-caju (Ấn Độ, Thái Lan Úc), P abalonus (Đài Loan Thái Lan), ngồi cịn có P fossulatus, P corticatus, P eryngii… 2.2.2 Đặc điểm sinh học sinh trưởng [10, 12] 2.2.2.1 Hình dạng nấm bào ngư: 14 Nấm bào ngư có đặc điểm chung tai nấm dạng phễu lệch, phiến mang bào tử, cuống nấm gần gốc có lớp lơng nhỏ mịn Tai nấm bào ngư cịn non có màu sắc sậm tối trưởng thành màu trở nên sáng  Dạng san hô: thể tạo thành, dạng sợi mảnh hình chùm  Dạng dùi trống: mũ xuất dạng khối tròn, cuống phát triển chiều ngang chiều dài nên đường kính cuống mũ không khác  Dạng phễu: mũ mở rộng, cuống (giống phễu)  Dạng bán cầu lệch: cuống lớn nhanh bên bắt đầu lệch so với vị trí trung tâm mũ  Dạng lục bình: cuống ngừng tăng trưởng, mũ tiếp tục phát triển, bìa mép thẳng đến gợn sóng a Dạng san hô b Dạng dùi trống d Dạng bán cầu lệch c Dạng phễu e Dạng lục bình Hình 2.4 Các giai đoạn phát triển nấm bào ngư 2.2.2.2 Chu trình sống nấm bào ngư Chu trình sống nấm bào ngư loại nấm đảm khác, đảm bào tử hữu tính, nảy mầm cho hệ sợi tơ dinh dưỡng (sơ thứ cấp) “Kết thúc” việc hình thành quan sinh sản tai nấm Tai nấm sinh đảm bào tử chu trình lại tiếp tục Quả thể nấm bào ngư phát triển qua nhiều giai đoạn: dạng san hô, dạng dùi trống, dạng phễu, dạng bán cầu lệch, dạng lục bình (trưởng thành) Từ giai đoạn phễu sang bán cầu lệch có thay đổi chất (giá trị dinh dưỡng tăng), từ giai đoạn bán cầu lệch sang dạng có nhảy vọt khối lượng (trọng lượng tăng), sau giảm dần 15 2.2.2.3 Ảnh hưởng điều kiện ngoại cảnh  Yếu tố nhiệt độ: Nấm bào ngư mọc biên độ nhiệt độ tương đối rộng Nhiệt độ cần cho ủ tơ khoảng 20 – 30oC để nấm tạo thể từ 15 – 30oC Bảng 2.3 Nhiệt độ thích hợp cho ủ tơ thể vài loài nấm bào ngư Nhiệt độ thích hợp Nhiệt độ thích hợp tăng trưởng tơ nấm P ostreatus 20-30oC 15oC P florida 25-30oC 20oC P sajor-caju 25-30oC 25oC P cortinatus 27-32oC 28oC P cystidious 27-32oC 25-28oC P fabellatus 20-28oC 20-25oC P eryngii 20-30oC 20-22oC 35oC 28-30oC 27-32oC 25oC 25oC 15-25oC Loài nấm bào ngư P tuber-regium P abakonus P cornucopiae  Yếu tố độ ẩm: Độ ẩm quan trọng phát triển thể Trong thời kỳ tưới đón nấm, độ ẩm khơng khí khơng 70%, tốt 70 – 95% Độ ẩm thấp 70% thể bị vàng khô mép Ở 50% nấm ngừng phát triển chết, dạng bán cầu lệch dạng thường bị khơ mặt cháy vàng bìa mép mũ nấm Ngược lại, độ ẩm cao (95%) chưa hẳn tốt cho nấm, tai nấm dễ bị nhũn rũ xuống  PH: Cơ chất chế biến thường có biến đổi pH Đối với nấm bào ngư khả chịu đựng dao động pH tương đối tốt, pH mơi trường giảm xuống 4.4 tăng lên tơ nấm mọc Tuy nhiên pH thích hợp hầu 16 hết loài bào ngư khoảng 5.0 – 6.0, pH thấp làm thể khơng hình thành ngược lại pH kiềm tai nấm bị dị hình  Yếu tố ánh sáng: Ánh sáng cần thiết cho việc tạo nụ nấm, phải có cường độ thích hợp Nếu ánh sáng mạnh ngăn cản việc hình thành nụ nấm, cịn ánh sáng yếu làm chân nấm dài ra, mũ hẹp  Yếu tố thông thống: Q trình nảy mầm bào tử tăng trưởng tơ nấm bào ngư có liên quan đến nồng độ CO2 cao (22%), cần nấm nồng độ CO2 phải giảm lượng oxy tăng lên Nếu không mũ nấm hẹp lại chân dài ra, dẫn đến tai nấm bị dị hình Bảng 2.4 Yếu tố ảnh hưởng sinh trưởng nấm bào ngư Nhiệt độ Yếu tố Giai đoạn 20 – 30oC Độ ẩm Độ ẩm chất khơng khí 50 – 60 oC ≥ 70% 27 – 32oC nuôi ủ tơ Giai đoạn 15 – 25oC Ánh sáng Không cần pH Thơng khí - Thơng thống nhiều ánh sáng 50 – 60 oC 70 – 90% thể 25 – 32oC 400 – 500 lux - Vừa phải, tránh gió lùa trực tiếp 2.2.3 Giá trị nấm bào ngư [1, 10, 11, 17, 20] Nấm bào ngư loài nấm dễ trồng, cho suất cao, phẩm chất ngon, có nhiều đặc tính 2.2.3.1 Giá trị dinh dưỡng  Nấm bào ngư có nhiều chất đường, chí nấm rơm, nấm mỡ, nấm đơng Về đạm khống khơng thua loài nấm kể Xét lượng, nấm bào ngư lại cung cấp lượng mức tối thiểu, thấp đông cô, tương đương nấm rơm, nấm mỡ, nên thích hợp cho người ăn kiêng 17  Các loài nấm bào ngư nguồn thực phẩm bổ dưỡng quý giá với hàm lượng protein cao tới 33 – 43% trọng lượng khô, thành phần acid amin phong phú, có đủ acid amin khơng thay thế, bên cạnh thành phần glucid, vitamin, khống chất, acid béo (chủ yếu acid không no, acid hữu cơ)… Bảng 2.5 Thành phần vitamin có nấm bào ngư Vitamin (mg/100g nấm khô) Nấm bào ngư Acid Vit C Vit B1 P sajor-caju 111 1.75 60.0 P floridanus 113 1.36 72.9 nicotinic Acid Acid pantotenic folic 6.66 21.1 1278 7.88 29.4 1412 Vit B2 Bảng 2.6 Giá trị dinh dưỡng số loại nấm thuộc nấm bào ngư Protein thô Lipid Carbon Tro Năng lượng (%) (%) hydrat (%) (%) cung cấp (Kcal) P.ostreatus tươi 30.4 2.2 57.6 9.8 345 P.ostreatus khô 27.4 1.0 65.0 6.6 356 P.sp (Ấn độ) 21.6 7.2 60.5 10.7 351 Loại nấm 2.2.3.2 Giá trị dược liệu o Là thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao, có lợi cho sức khỏe người đồng thời dược liệu quý việc trì, bảo vệ sức khỏe, phịng chống nhiều bệnh tật Theo kết nhà nghiên cứu cho thấy nấm bào ngư có chất kháng sinh Pleurotin, ức chế hoạt động vi khuẩn gram dương Bên cạnh đó, nấm cịn chứa hai polysaccharid có hoạt tính kháng ung bướu Ngồi ra, nấm cịn chứa nhiều acid folic, cần cho người bị thiếu máu o Nhiều nghiên cứu cho thấy nấm bào ngư có tác dụng chống ung thư, hạ huyết áp, làm giảm lượng cholesterol máu, ức chế phát triển nhiều loài vi 18 khuẩn: Staphylococcus aureus, Mycobacterium phlei…đặc biệt vòng kháng khuẩn nấm bào ngư non cao nấm bào ngư trưởng thành o Thử nghiệm ung thư chuột bạch cho thấy dùng nước nóng chiết suất nấm bào ngư Pleurotus ostreatus làm tiêu hoàn toàn khối u với tỉ lệ 50% chuột Theo nghiên cứu Nayana Jose K K Janardhanan - Ấn Độ chứng minh nấm bào ngư trắng Pleurotus florida có chất chống oxi hóa khối u tích cực 2.2.4 Giới thiệu nguyên liệu trồng nấm bào ngư 2.2.4.1 Tận dụng phế liệu nông lâm ngư nghiệp [10, 16, 19] Nấm bào ngư thuộc nhóm hoại sinh, sống chủ yếu xác bã thực vật Trong tự nhiên, nấm góp phần vi sinh vật khác để vệ sinh rừng, tham gia vào chu trình tuần hồn vật chất Ngun liệu trồng nấm chủ yếu phế liệu nông, lâm nghiệp (rơm rạ, mạt cưa, gỗ vụn, phế liệu bắp, mía, đậu, bơng…) Phế liệu trồng nấm, sau cịn sử dụng làm phân bón tốt Do trồng nấm ưu ngành khác biến chất thải bỏ, có khả làm ô nhiễm môi trường, thành thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao Riêng tỉnh phía Nam, dồi nguồn nguyên liệu cho trồng nấm, đồng thời khí hậu tương đối ơn hịa Do đó, trồng nhiều loại nấm trồng quanh năm Việc phát triển nghề trồng nấm chắn góp phần khơng nhỏ việc cải thiện đời sống nơng thơn Ngồi số huyện ngoại thành có sản xuất nơng nghiệp Bình chánh, Hóc Mơn, Củ Chi, Thủ Đức,… nguồn ngun liệu trồng nấm tìm thấy chỗ, cịn lại phải vận chuyển từ tỉnh lân cận  Mạt cưa Nấm bào ngư loại nấm phá gỗ nên việc trồng gỗ hay mạt cưa có ý nghĩa Tuy nhiên ni trồng mạt cưa có số ưu điểm sau:  Chế biến bổ sung dinh dưỡng dễ dàng  Có thể khử trùng để hạn chế nhiễm  Chăm sóc thu hái thuận tiện 19  Thời gian thu hái rút ngắn lại Mạt cưa nguồn phế phẩm nhà máy sản xuất gỗ, kích thước hạt mạt cưa không đồng đều, hạt nhỏ giúp tơ nấm lan nhanh cịn hạt to giúp tơ nấm dày lên hình thành hạch nấm Thành phần mạt cưa:  Cellulose  Hemicellulose  Lignin  Các chất khoáng Trên giới mạt cưa nguyên liệu sử dụng phổ biến để trồng nấm, mạt cưa loại rộng thường sử dụng: dương, liễu, sồi Ở Việt Nam nguồn mạt cưa thường dùng để trồng nấm mạt cưa cao su (Hevea brasiliensis) Cây cao su loại công nghiệp trồng dạng tập trung Tính đến năm 2002 Việt Nam nước đứng thứ tư giới tổng diện tích rừng cao su Mạt cưa cao su khơng chứa hợp chất có nhân thơm dầu nên khơng độc cho nấm  Bã mía Hiện ngành cơng nghiệp mía đường nước ta phát triển mạnh mẽ, năm đạt triệu đường, tương ứng có khoảng 2.5 triệu bã mía (lượng bã mía thường chiếm khoảng 25 – 26% trọng lượng mía tươi) Lượng bã mía sử dụng khoảng 60% làm nguyên liệu (các sản phẩm sợi, giấy, chất lợp…), cịn lại 40% thải mơi trường gây nhiễm Vì vậy, việc sử dụng bã mía để trồng nấm biện pháp thiết thực Bã mía sau trồng nấm trở thành nguồn phân bón hữu thay phân hóa học để cải tạo đất trồng Qua q trình ni cấy, nấm phân hủy bã mía thành phân vi sinh nhờ enzyme Các chất dinh dưỡng nấm tiết góp phần phục hồi độ màu đất Nguồn đường bã mía cung cấp carbon cho tơ nấm phát triển kích thích hình thành thể Nhưng hàm lượng đường cịn sót lại bã mía q cao 20 ảnh hưởng đến tỷ lệ C/N chất trồng nấm Để tận dụng bã mía trồng bã mía phải xử lý trước trồng, phơi khô, nghiền nhỏ chặt vụn ra, xử lý nước vơi hay xơng nước nóng để giảm lượng đường thừa  Cùi bắp Bắp loại lương thực trồng rộng rãi giới với nhiều giống khác nhau, Việt Nam bắp lương thực xếp thứ hai sau lúa, có hai loại bắp trồng phổ biến: bắp hạt vàng dùng làm thức ăn gia súc (bắp lai hạt vàng), bắp hạt trắng làm thực phẩm cho người (bắp nếp) Ở vùng ĐBSCL nói chung, tỉnh Vĩnh Long nói riêng, bắp nếp trồng quanh năm, góp phần làm phong phú nguồn nông sản thực phẩm đa dạng Thành phần dinh dưỡng cùi bắp:  Cellulose  Lignin  Protein amin acid: lysin, arginin, leucin, prolin, glutamic  Acid  Hemicellulose nhiều xylose, arabinose, galactose mannose Để tận dụng cùi bắp trồng nấm, cùi bắp phải xử lý trước trồng, cùi bắp phơi khô, đập nhỏ chặt vụn thành miếng nhỏ, hàm lượng đường bắp nên cần xử lý nước vôi thời gian cần thiết  Rơm rạ Hiện nay, năm Việt Nam sản xuất hàng chục triệu lúa, từ cho lượng rơm rạ khổng lồ Phần lớn, rơm rạ sử dung làm chất đốt, phần nhỏ dùng làm thức ăn cho trâu, bị Thậm chí số nơi cịn đem đổ bỏ xuống sông gây ô nhiễm môi trường Rơm rạ nắng màu vàng tươi có mùi thơm Thành phần chủ yếu rơm lúa :  Cellulose (có tỷ lệ cao)  Protein 21  Nghèo chất khoáng Rơm nguyên liệu tơi xốp, thích hợp cho việc ni trồng nấm bào ngư, giúp rút ngắn thời gian thu hoạch, cho suất cao Việc tận dụng nguồn rơm rạ có ý nghĩa khơng giải vấn đề vật liệu, giảm thiểu ô nhiễm môi trường, mà cịn góp phần tạo thêm cơng ăn việc làm tăng thu nhập cho người dân 2.2.4.2 Sự phân hủy hợp chất hữu nguyên liệu trồng nấm [2, 4, 14] Hầu hết nguyên liệu trồng nấm có chứa lượng : cellulose, hemicellulose, ligin Cellulose chiếm tỷ trọng lớn (chiếm đến 60-70%) thành phần tế bào thể thực vật Cellulose homopolyme gồm gốc glucose nối với liên kết β-glucosid Mức độ polymer hóa phân tử cellulose thay đổi nhiều (từ vài trăm đến 15000) trung bình 3000 Cellulose khơng tan nước, bị phân hủy nhiệt độ bình thường hay nhiệt độ 40-50oC nhờ enzyme phân hủy cellulose gọi chung cellulase Cellulose bị phân hủy đun nóng với acid hay kiềm với nồng độ cao Trong thực tế thực vật cellulose liên kết chặt chẽ với hemicellulose, pectin, ligin Điều ảnh hưởng đến phân hủy cellulose enzyme Hemicellulose polysaccharide tan kiềm gắn với cellulose thành tế bào thực vật Hemicellulose khơng có cấu trúc mạch thẳng cellulose, chúng có mạch bên nối vào mạch Thủy phân hemicellulose tạo hai loại : pentose (xylose, arabinose) hexose (glucose, mannose, galactose) Hemicellulase có dạng enzyme endo exo-glucanase, endoglucanase phổ biến Ligin loại đa phân tử phức tạp có cấu tạo khoảng 69%C, 7%H, 24%O Đơn vị cấu trúc dẫn xuất phenyl propan Trong vách tế bào thực vật, cellulose gắn chặt lignin-chất vơ định hình hemicellulose Ba loại polymer kết hợp chặt chẽ với nối cộng hóa trị tạo thành phức hợp biết đến lignocellulose chiếm 90% trọng lượng khô tế bào thực vật 22 Gỗ mềm chứa nhiều lignin gỗ cứng, trung bình lignocellulose bao gồm 45% cellulose, 30% hemicellulose 25% lignin Thông thường phân giải lignin xảy đồng thời sử dụng nguồn carbon khác cho vào glucose, cellulose…đối với riêng lignin vi sinh vật khơng thể sử dụng nguồn lượng độc hay nguồn carbon 2.2.4.3 Các qui trình trồng nấm bào ngư phổ biến [10, 13, 15]  Qui trình ni trồng nấm bào ngư mạt cưa Nguyên liệu sử dụng mạt cưa cao su Tuy nhiên, dùng mạt cưa tạp rộng, gỗ mềm : xồi, mít, sung, so đũa, điều, điệp… Mạt cưa tạp Mạt cưa cao su (gỗ mềm không tinh dầu) Trộn nước vôi 0.5% Ủ đống ngày Thêm dinh dưỡng Trộn nước vôi 0.5% Ủ đống ngày Thêm dinh dưỡng Cơ chất trồng nấm Cơ chất trồng nấm Vào túi Khử trùng Thanh trùng Cấy giống Nuôi ủ 20 – 25 ngày Bịch phôi Đưa vào nhà trồng Mở miệng bịch Tưới đón nấm Quả thể nấm 23 Thu hái Mạt cưa trộn với nước vôi 0.5% đến độ ẩm 60%, ủ đống khoảng ngày (tùy nguyên liệu, mụn gỗ mụn dừa cần xả chát trước), sau bổ sung dinh dưỡng cám tấm, hay bắp 6% đạm vơ S.A, DAP, urê Cho nguyên liệu vào túi nylon nén chặt vừa phải, trọng lượng trung bình túi khoảng kg Dùng khúc trịn, đường kính 1,5 cm để nong lổ túi, cách đáy khoảng 1-2cm, sau dùng nút nhựa cố định miệng túi nút chai dùng bơng gịn chặn kín miệng túi bao kín giấy Đem hấp khử trùng nhiệt độ 100oC, (hoặc 120oC, giờ) Làm nguội tự nhiên 24 Cấy meo dụng cụ vô trùng nuôi ủ tơ nhiệt độ 25-30 oC, khoảng 20-30 ngày tơ trắng Chọn bịch không loang lổ, không bị nhiễm nấm mốc, nấm dại đưa nhà trồng để tưới đón nấm  Qui trình ni trồng nấm bào ngư bã mía Bã mía Phơi khơ Làm ẩm với nước vơi 2% Ủ đống 4-5 ngày (có thể bổ sung urê 1%) Vào túi Túi nguyên liệu Trộn giống vào túi Cấy giống Nuôi ủ 15 – 20 ngày Túi phôi Túi phôi Mở miệng, tưới nước Quả thể 24  Qui trình trồng nuôi nấm bào ngư cùi bắp : Cùi bắp khô Làm ẩm nước vôi 2% Ủ đống – ngày, bổ sung dinh dưỡng Nguyên liệu xử lý Meo giống Đóng thành túi Ni ủ tơ Tưới đón nấm Quả thể nấm  Qui trình nuôi trồng nấm bào ngư rơm rạ Rơm rạ khô Làm ẩm nước nước vôi 2% ủ đống – 10 ngày, bổ sung dinh dưỡng Nguyên liệu xử lý Meo giống Làm mô hay túi Ni ủ tơ Tưới đón nấm Quả thể nấm 25 Chương 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 3.1 Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm 3.1.1 Địa điểm Trung tâm Cơng Nghệ Sinh Học Ứng Dụng phịng thí nghiệm Hóa Sinh trường Đại Học Tơn Đức Thắng 3.1.2 Thời gian Đề tài thực từ tháng 09/2009 đến tháng 01/2010 3.2 Nội dung nghiên cứu  Xác định tỉ lệ C/N nguyên liệu ban đầu  Điều chỉnh nguyên liệu tỉ lệ C/N=30 phân urê  Khảo sát tốc độ lan tơ nấm bào ngư loại nguyên liệu (mạt cưa, cùi bắp, bã mía, rơm rạ) với tỉ lệ phối trộn khác  Khảo sát tỉ lệ nhiễm nấm bào ngư trồng loại nguyên liệu (mạt cưa, cùi bắp, bã mía, rơm rạ), với tỉ lệ phối trộn khác  Khảo sát suất nấm bào ngư trồng loại nguyên liệu (mạt cưa, cùi bắp, bã mía, rơm rạ), với tỉ lệ phối trộn khác  Khảo sát trọng lượng tươi, khô nấm sau thu hoạch 3.3 Vật liệu thí nghiệm Tải FULL (79 trang): https://bit.ly/2UH6BFK Dự phòng: fb.com/TaiHo123doc.net 3.3.1 Đối tượng nghiên cứu Nấm bào ngư Pleurotus sajor-caju trung tâm Công Nghệ Sinh Học Ứng Dụng cung cấp 3.3.2 Trang thiết bị thí nghiệm o Bình Kjeldahl o Lị nung điện o Bình hút ẩm có chứa canxi clorua o Tủ sấy điều chỉnh nhiệt độ đến 300 oC o Cân kỹ thuật có độ xác đến 0.001g o Máy đo độ ẩm 26 o Tủ cấy vô trùng o Lò khử trùng o Cân, kẹp cấy, ống nghiệm, đèn cồn… 3.3.3 Hóa chất mơi trường thí nghiệm  Hóa chất: o H2SO4, NaOH, CuSO4, K2SO4, methy red, K2Cr2O7  Môi trường nuôi trồng: o Rơm rạ: lấy từ quận 12, thành phố Hồ Chí Minh o Cùi bắp: lấy từ quận 12, thành phố Hồ Chí Minh o Bã mía: huyện Củ Chi, thành phố Hồ Chí Minh o Mạt cưa cao su: lấy từ sở quận 7, thành phố Hồ Chí Minh 3.3.4 Điều kiện ni trồng o Nhiệt độ thích hợp cho tơ tăng trưởng: 25-30oC o Nhiệt độ thích hợp thể: 25 oC 3.4 Phương pháp tiến hành 3.4.1 Phương pháp xác định tỉ lệ C/N nguyên liệu [9, 14] a Phương pháp xác định hàm lượng carbon hữu Mục đích: Xác định hàm lượng carbon hữu nguyên liệu ban đầu phương pháp so màu (theo Grham)  Nguyên tắc Tải FULL (79 trang): https://bit.ly/2UH6BFK Dự phịng: fb.com/TaiHo123doc.net Dựa sở oxy hóa chất hữu K2Cr2O4 theo phương pháp Walkley – Black, xác định hàm lượng chất hữu phương pháp so màu xanh Cr3+ tạo thành (K2Cr2O4 bị khử) bước sóng 625 nm  Thuốc thử: Các dung dịch oxy hóa Walkley – Black (K2Cr2O4, H2SO4 đậm đặc) Pha dung dịch K2Cr2O4 cách cân xác 49.04g K2Cr2O4 tinh thể pha thành lít dung dịch Dung dịch tiêu chuẩn chất hữu 3% (dung dịch mẹ): cân xác 7.125g saccarose (đường mía C12H22O11) pha 100ml nước cất 27 Dung dịch tiêu chuẩn sử dụng (dung dịch con): sở xác định dãy tiêu chuẩn từ – 1.0ml (chứa – 30mg C, tương ứng – 3% C mẫu 1g)  Tiến hành:  Cân xác khoảng 0.1g mẫu nghiền qua rây 0.2mm cho vào bình tam giác 125ml  Thêm pipet 10ml K2Cr2O4 lắc  Cho nhanh 20ml H2SO4 đậm đặc từ xilanh hay buret  Thêm xác 60ml nước cất trộn  Để qua đêm cho lắng (có thể ly tâm để tiến hành tiếp tục ngay)  Trích phần dung dịch để so màu bước sóng 625nm  Tiến hành dãy tiêu chuẩn: dùng micropipette lấy từ – 1.0ml dung dịch tiêu chuẩn mẹ (tương ứng – 3mg C) cho vào bình tam giác 125ml, tiến hành với mẫu thử  Làm đồng thời thêm mẫu trắng  Cách tính: Xác định đồ thị tiêu chuẩn sở đo máy xác định hàm lượng C mẫu thử b Phương pháp xác định hàm lượng nitơ (phương pháp Kjeldahl)  Mục đích: Xác định hàm lượng nitơ nguyên liệu ban đầu phương pháp Kjeldahl  Nguyên tắc Tổng hàm lượng nitơ amoniac nitơ hữu xác định phương pháp phân hủy chưng cất Khi có diện acid sulfuric (H2SO4), kali sulfate (K2SO4) đồng sulfate (CuSO4) làm chất xúc tác, nitơ thành phần hợp chất hữu chuyển thành amonium, amoniac chuyển thành amonium Cho thêm dung dịch kiềm đem chưng cất, dùng dung dịch H2SO4 để hấp thu amoniac Dùng NaOH 0.1N thị hỗn hợp định phân dung dịch chưng cất  Nguyên lý: 28 3485173 ... đề tài ? ?Khảo sát sinh trưởng phát triển nấm bào ngư Pleurotus sajor- caju phối trộn nguyên liệu thường gặp với tỉ lệ khác nhau? ?? 1.2 Mục đích phạm vi đề tài Khảo sát sinh trưởng, phát triển đánh... C/N=30 phân urê  Khảo sát tốc độ lan tơ nấm bào ngư loại nguyên liệu (mạt cưa, cùi bắp, bã mía, rơm rạ) với tỉ lệ phối trộn khác  Khảo sát tỉ lệ nhiễm nấm bào ngư trồng loại nguyên liệu (mạt cưa,... mía, rơm rạ), với tỉ lệ phối trộn khác  Khảo sát suất nấm bào ngư trồng loại nguyên liệu (mạt cưa, cùi bắp, bã mía, rơm rạ), với tỉ lệ phối trộn khác  Khảo sát trọng lượng tươi, khơ nấm sau thu