Phân tích các biến đổi hình thái học và sinh lý học trong các quá trình phát sinh cơ quan và phôi thể hệ ở một số giống chuối (musa sp )

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THANH HƯƠNG PHÂN TÍCH CÁC BIẾN ĐỔI HÌNH THÁI HỌC VÀ SINH LÝ HỌC TRONG CÁC Q TRÌNH PHÁT SINH CƠ QUAN VÀ PHƠI THỂ HỆ Ở MỘT SỐ GIỐNG CHUỐI (Musa sp.) LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh - 2011 ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THANH HƯƠNG PHÂN TÍCH CÁC BIẾN ĐỔI HÌNH THÁI HỌC VÀ SINH LÝ HỌC TRONG CÁC Q TRÌNH PHÁT SINH CƠ QUAN VÀ PHƠI THỂ HỆ Ở MỘT SỐ GIỐNG CHUỐI (Musa sp.) Chuyên ngành: Sinh lý Thực vật Mã số: 62 42 30 05 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS BÙI TRANG VIỆT GS.TS FENG TENG-YUNG Thành phố Hồ Chí Minh - 2011 Cộng hòa xã hội chủ nghĩa Việt Nam Độc lập – Tự – Hạnh phúc LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận án Ký tên Trần Thanh Hương LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận án tơi chân thành tỏ lòng biết ơn: Cố GS.TS Mai Trần Ngọc Tiếng, Chủ tịch hội đồng chấm luận án cấp sở, Người sáng lập Bộ môn Sinh lý thực vật, Người thầy dạy Những lời khuyên, lời động viên chân tình Người kiến thức q báu nghiên cứu khoa học gương sang cho noi theo Chân thành cám ơn hai thầy hướng dẫn: - PGS.TS Bùi Trang Việt, Trưởng Bộ môn Sinh lý thực vật, Người giảng dạy từ năm đại học, gợi ý đề tài, tận tình hướng dẫn truyền đạt kiến thức q báu suốt thời gian học tập, làm việc thực luận án - GS.TS Feng Teng-Yung, Phó viện trưởng Viện Sinh học thực vật vi sinh Sinica, Đài Loan nhận lời hướng dẫn, hỗ trợ kinh phí tạo điều kiện cho tơi thời gian thực phần luận án Viện Trân trọng cám ơn quý Thầy, Cô phản biện, phản biện độc lập; Thầy, Cô tham gia hội đồng chấm luận án cấp sở nhà nước dành thời đọc đóng góp ý kiến cho luận án: - PGS.TS Bùi Văn Lệ, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - PGS.TS Trần Văn Minh, Viện Sinh học Nhiệt đới Tp Hồ Chí Minh - PGS.TS Võ Thị Bạch Mai, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - PGS.TS Lê Văn Hòa, Trường Đại học Cần Thơ - PGS.TS Trương Thị Đẹp, Trường Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh - PGS.TS Dương Tấn Nhựt, Viện Sinh học Đà Lạt - TS Hoàng Kim, Trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh - TS Lê Thị Trung, Trường Đại học Sư Phạm Tp Hồ Chí Minh Xin chân thành cảm ơn hỗ trợ, góp ý giúp đỡ của: - Ban Giám đốc Đại học Quốc Gia Tp Hồ Chí Minh - Ban Giám hiệu Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Tp HCM - Ban Chủ nhiệm Khoa Sinh học, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên - PGS.TS Hồ Huỳnh Thùy Dương, Trưởng Phòng đào tạo Sau đại học, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên - PGS.TS Nguyễn Minh Châu, Viện trưởng Viện Cây Ăn Quả Miền Nam - PGS.TS Nguyễn Thị Quỳnh, Phó Viện Trưởng Viện Sinh học nhiệt đới Tp Hồ Chí Minh - TS Nguyễn Du Sanh, Trưởng Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh - TS Nguyễn Hữu Hổ, Trưởng Phịng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ tế bào, Viện Sinh học nhiệt đới Tp Hồ Chí Minh - TS Wann-Neng Jane, Trưởng Phịng thí nghiệm Sinh học tế bào thực vật, Viện Sinh học thực vật vi sinh Sinica, Đài Loan, Trung Quốc - TS Fang Mei-Jane, Ths Connie Yip, Ths Chou Hung-Wen, Thầy Cô, đồng nghiệp nhân viên Viện Sinh học thực vật vi sinh Sinica, Đài Loan, Trung Quốc - GVC.Ths Phan Ngơ Hoang, Trưởng Phịng thí nghiệm Sinh lý thực vật, Khoa Sinh học Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh - Ths Trịnh Cẩm Tú, Ths Đỗ Thường Kiệt, Ths Trần Thị Thanh Hiền, Cô Lê Thị Thanh Xuân, Bộ môn Sinh lý thực vât, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh - TS Đặng Thị Phương Thảo, Trưởng Bộ môn Công nghệ sinh học phân tử- môi trường, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh - TS Lê Thị Thủy Tiên, Trường Đại học Bách Khoa Tp Hồ Chí Minh - TS Bùi Thị Mỹ Hồng, Viện Cây Ăn Quả Miền Nam - Ths Nguyễn Thị Phương Hiếu, Phịng thí nghiệm Cơng nghệ sinh học phân tử, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh - Ths Cung Hồng Phi Phượng, Bộ môn Công nghệ sinh học thực vật chuyển hóa sinh học, Khoa Sinh, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên - Ths Nguyễn Huy Du, Phịng thí nghiệm Phân tích trung tâm, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên - Ths Nguyễn Thanh Bình, Viện Khoa học nơng nghiệp Miền Nam - Cô Lê Bạch Mai, Bộ môn Sinh thái sinh học tiến hóa, Khoa Sinh, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên - Các Thầy, Cô Khoa Sinh học, Phòng Sau đại học Phịng, Ban, Bộ mơn liên hệ - Các Anh, Chị nghiên cứu sinh, học viên cao học bạn sinh viên chuyên ngành Sinh lý Thực vật - Các Thầy, Cô giảng dạy thời gian học, bạn bè đồng nghiệp động viên sống thời gian làm luận án Cuối cùng, xin trân trọng cảm ơn Ba Mẹ, Anh Chị Cháu gia đình hỗ trợ, chia sẻ động viên để hồn thành luận án TP Hồ Chí Minh, tháng 03 năm 2011 Trần Thanh Hương i MỤC LỤC Trang CÁC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH x MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược chuối 1.2 Các nghiên cứu nhằm cải tiến giống chuối giới Việt Nam 1.2.1 Sự nuôi cấy chồi mô phân sinh chồi 1.2.2 Sự thu nhận phôi soma 1.3 Phát sinh hình thái thực vật, phát sinh quan phát triển phôi hợp tử 1.3.1 Phát sinh hình thái thực vật 1.3.2 Mô phân sinh chồi phát triển chồi 1.3.3 Mô phân sinh rễ phát triển rễ 11 1.3.4 Sự phát triển phôi hợp tử 13 1.4 Vai trò chất điều hòa tăng trưởng thực vật phát sinh quan phát triển phôi hợp tử 14 1.4.1 Auxin 15 1.4.2 Cytokinin 18 1.4.3 Gibberellin acid abscisic 19 1.5 Cơ sở phân tử phát sinh hình thái 20 1.6 Sự phát sinh hình thái in vitro ứng dụng vi nhân giống 23 1.6.1 Sự phát sinh quan 23 1.6.2 Sự phát sinh phôi soma 24 ii CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 VẬT LIỆU 31 2.1.1 Vật liệu nuôi cấy 31 2.1.2 Vật liệu dùng sinh trắc nghiệm 31 2.2 PHƯƠNG PHÁP 34 2.2.1 Quan sát biến đổi hình thái học, giải phẫu học 34 2.2.2 Đo cường độ hô hấp 35 2.2.3 Đo hàm lượng chất điều hòa tăng trưởng thực vật 35 2.2.4 Nuôi cấy khúc cắt chồi khúc cắt mô phân sinh chồi 39 2.2.5 Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa tăng trưởng thực vật phát triển chồi 40 2.2.6 Áp dụng phối hợp chất điều hòa tăng trưởng thực vật hủy mô phân sinh chồi 40 2.2.7 Áp dụng phương pháp nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh chồi vi nhân giống 41 2.2.8 Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa tăng trưởng thực vật phát triển rễ bất định từ khúc cắt chồi 41 2.2.9 Tạo mô sẹo dịch treo tế bào 42 2.2.10 Tạo phôi soma từ dịch treo tế bào 44 2.2.11 Áp dụng chất điều hòa tăng trưởng thực vật phát triển phôi 47 2.2.12 Sự chuyển vườn ươm 48 2.2.13 Thử dùng dịch treo tế bào để cô lập, dung hợp nuôi cấy tế bào trần 48 2.2.14 Xử lý thống kê kết thu 50 iii CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN KẾT QUẢ 51 3.1 Sự hình thành phát triển chồi 51 3.1.1 Các biến đổi hình thái trình phát triển chồi 51 3.1.2 Mối liên hệ kiểu gen, kích thước mô phân sinh chồi phát triển chồi 62 3.1.3 Ảnh hưởng chất điều hòa tăng trưởng thực vật phát triển chồi 65 3.1.4 Sự thay đổi cường độ hô hấp chồi 68 3.1.5 Sự thay đổi hàm lượng chất điều hòa tăng trưởng thực vật nội sinh trình phát triển chồi 70 3.1.6 Áp dụng phối hợp chất điều hịa tăng trưởng thực vật hủy mơ phân sinh phát triển chồi 73 3.1.7 Áp dụng phương pháp nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh chồi vi nhân giống 77 3.2 Sự hình thành rễ bất định từ khúc cắt chồi 79 3.2.1 Các biến đổi hình thái trình phát triển rễ bất định 79 3.2.2 Vai trò chất điều hịa tăng trưởng thực vật q trình phát triển rễ bất định 86 3.3 Sự tạo mô sẹo dịch treo tế bào 86 3.3.1 Sự hình thành mô sẹo từ hoa đực non 86 3.3.2 Sự hình thành dịch treo tế bào từ mơ sẹo có nguồn gốc hoa đực non 86 3.3.3 Sự hình thành dịch treo tế bào từ cụm chồi tăng sinh cao 86 3.3.4 Ảnh hưởng pH loại 2,4-D hình thành tế bào có khả sinh phôi 93 3.4 Sự sinh phôi soma chuối 96 3.4.1 Các thay đổi hình thái trình phát triển phơi 96 iv 3.4.2 Ảnh hưởng mật độ tế bào ban đầu phát sinh phôi 104 3.4.3 Ảnh hưởng pH loại chất điều hịa tăng trưởng thực vật mơi trường Ma2, Ma3 phát sinh phôi 105 3.4.4 Ảnh hưởng phối hợp auxin cytokinin sinh phôi 105 3.4.5 Số lần cấy chuyền dịch treo tế bào khả phát sinh phôi 109 3.4.6 Ảnh hưởng acid abscisic trưởng thành phôi 109 3.4.7 Ảnh hưởng TIBA hình thành phát triển phơi 111 3.4.8 Sự thay đổi hàm lượng chất điều hịa tăng trưởng thực vật nội sinh q trình phát triển phôi 115 3.4.9 Áp dụng chất điều hòa tăng trưởng thực vật phát triển phôi 116 3.5 Sự chuyển vườn ươm 123 3.6 Sự cô lập, dung hợp nuôi cấy tế bào trần 126 THẢO LUẬN 131 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 152 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ 154 TÀI LIỆU THAM KHẢO 156 PHỤ LỤC Ducan Subset for alpha = 05 IAA N 6.00 5.00 3 4.00 3.00 3 1.00 8367 9700 1.1200 2.00 1.1500 1.1500 1.2800 1.4200 Sig 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 .626 051 Subset for alpha = 05 ZEATIN 6.00 N 3 1633 5.00 2667 4.00 3200 3200 3.00 3500 3500 2.00 3 1.00 Sig 1.000 094 3867 3867 4600 172 119 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Subset for alpha = 05 GA 6.00 5.00 N 1.2733 1.9133 2.00 2.0200 2.0200 4.00 2.0800 2.0800 3.00 1.00 2.2067 2.4400 Sig 1.000 094 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 .064 Subset for alpha = 05 ABA 1.00 N 1500 3.00 2267 2.00 3 4.00 6.00 5.00 Sig 2267 2667 2867 5000 5500 147 271 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 .332 1.000 1.000 Phụ lục 3.13 Hàm lượng chất điều hòa tăng trưởng thực vật dạng tự (đo phương pháp sinh trắc nghiệm) mẫu cấy phát triển từ khúc cắt mô phân sinh chồi (của in vitro tuần tuổi) sau tuần nuôi cấy môi trường CHP* với IAA 0,17mg/l, BA 2,5 mg/l zeatin mg/l Paired Samples Statistics Mean Pair IAA TUDO CAUMAN IAA TUDO HOT Pair ZEA TUDO CAUMAN ZEATUDO HOT Pair GA3 TUDO CAUMAN GA3 TUDO HOT Pair ABA TUDO CAUMAN N Std Deviation Std Error Mean 1.3900 10566 06100 5560 08200 04734 2.6053 04311 02489 9437 06962 04019 1.5693 14050 08112 4467 12550 07246 0000(a) 00000 00000 ABA TUDO HOT 0000(a) 00000 00000 a The correlation and t cannot be computed because the standard error of the difference is Paired Samples Test Paired Differences Mean Std Deviation Std Error Mean 95% Confidence Interval of the Difference Lower Pair Pair Pair AIA TD CM – AIA TD HOT ZEA TD CM – ZEA TD HOT GA3 TD CM GA3 TD HOT t df Sig (2-tailed) Upper 8340 18136 10471 3835 1.2845 7.965 015 1.6617 11272 06508 1.3816 1.9417 25.533 002 1.1227 01501 00867 1.0854 1.1600 129.538 000 Phụ lục 3.14 Hàm lượng chất điều hòa tăng trưởng thực vật dạng liên kết (đo phương pháp sinh trắc nghiệm) mẫu cấy phát triển từ khúc cắt mô phân sinh chồi (của in vitro tuần tuổi) sau tuần nuôi cấy môi trường CHP* với IAA 0,17 mg/l, BA 2,5 mg/l zeatin mg/l Paired Samples Statistics Mean Pair IAA LIENKET CAUMAN IAA LIENKET HOT Pair ZEA LIENKET CAUMAN ZEA LIENKET HOT Pair Pair N Std Deviation Std Error Mean 7063 07666 04426 1240 03439 01986 1.1987 02212 01277 8737 01823 01053 GA3 LIENKET CAUMAN 1.7640 28100 16224 GA3 LIENKET HOT 1.5730 25000 14434 ABA LIENKET CAUMAN 0000 00000 00000 ABA LIENKET HOT 0827 03550 02050 Paired Samples Test Paired Differences Mean Std Deviation Std Error Mean 95% Confidence Interval of the Difference Lower Pair Pair Pair Pair AIA LK CM – AIA LK HOT ZEA LK CM – ZEA LK HOT GA3 LK CM GA3 LK HOT ABA LK CM – ABA LK HOT t df Sig (2-tailed) Upper 5823 04250 02454 4768 6879 23.732 002 3250 00656 00379 3087 3413 85.844 000 1910 03100 01790 1140 2680 10.672 009 -.0827 03550 02050 -.1709 0055 -4.033 056 Phụ lục 3.15 Sự phát sinh chồi từ mẫu cấy chịu kiểu tác động lên mô phân sinh chồi khác sau tuần nuôi cấy môi trường CHP* với với IAA 0,17 mg/l, BA 2,5 mg/l zeatin mg/l N 95% Confidence Interval for Mean Std Deviation Mean Minimum Maximum Std Error 1.00 10 2.8000 63246 20000 Lower Bound 2.3476 Upper Bound 3.2524 2.00 4.00 2.00 10 4.2000 78881 24944 3.6357 4.7643 3.00 5.00 3.00 10 3.5000 97183 30732 2.8048 4.1952 2.00 5.00 4.00 10 11.3000 2.16282 68394 9.7528 12.8472 8.00 15.00 5.00 10 10.9000 2.23358 70632 9.3022 12.4978 8.00 14.00 6.00 10 60 14.8000 7.9167 2.39444 4.92070 75719 63526 13.0871 6.6455 16.5129 9.1878 10.00 2.00 18.00 18.00 Total Subset for alpha = 05 VAR00001 N 1.00 10 2.8000 3.00 10 3.5000 2.00 10 4.2000 5.00 10 10.9000 4.00 10 11.3000 6.00 10 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 10.000 14.8000 Phụ lục 3.16 Sự phát triển chồi từ khúc cắt mô phân sinh chồi số giống chuối sau tuần nuôi cấy môi trường CHP* với IAA 0,17 mg/l, BA 2,5 mg/l zeatin 1mg/l 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 Total N Mean 10 10 10 10 10 10 10 10 80 3.8000 3.3000 2.1000 2.3000 4.1000 2.9000 4.8000 5.1000 3.5500 VAR00001 Std Deviation 91894 94868 73786 67495 87560 87560 78881 87560 1.31110 29059 30000 23333 21344 27689 27689 24944 27689 14659 Minimum Maximum 3.00 2.00 1.00 1.00 3.00 2.00 4.00 4.00 1.00 5.00 5.00 3.00 3.00 5.00 4.00 6.00 6.00 6.00 Subset for alpha = 05 N 3.00 10 2.1000 4.00 10 2.3000 6.00 10 2.00 10 1.00 10 5.00 10 7.00 10 10 8.00 Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound 3.1426 4.4574 2.6214 3.9786 1.5722 2.6278 1.8172 2.7828 3.4736 4.7264 2.2736 3.5264 4.2357 5.3643 4.4736 5.7264 3.2582 3.8418 2.3000 2.9000 2.9000 3.3000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 10.000 3.3000 3.8000 3.8000 4.1000 4.1000 4.8000 4.8000 5.1000 Phụ lục 3.17 Ảnh hưởng auxin hình thành sơ khởi rễ (quan sát kính hiển vi) từ khúc cắt chồi sau ngày nuôi cấy môi trường MSK với IAA, NAA hay 2,4-D nồng độ khác CAUMAN N Mean Std Deviation 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound Std Error Minimum Maximum 1.00 15 1.2000 42164 13333 8984 1.5016 1.00 2.00 2.00 15 1.7000 48305 15275 1.3544 2.0456 1.00 2.00 3.00 15 2.0000 66667 21082 1.5231 2.4769 1.00 3.00 4.00 15 3.4000 51640 16330 3.0306 3.7694 3.00 4.00 5.00 15 3.8000 78881 24944 3.2357 4.3643 3.00 5.00 6.00 15 3.3000 1.15950 36667 2.4705 4.1295 2.00 5.00 7.00 15 2.2000 78881 24944 1.6357 2.7643 1.00 3.00 8.00 15 4.0000 66667 21082 3.5231 4.4769 3.00 5.00 9.00 15 4.6000 96609 30551 3.9089 5.2911 3.00 6.00 10.00 15 4.7000 1.25167 39581 3.8046 5.5954 3.00 6.00 11.00 15 2.8000 78881 24944 2.2357 3.3643 2.00 4.00 12.00 15 1.3000 48305 15275 9544 1.6456 1.00 2.00 13.00 15 2.1000 73786 23333 1.5722 2.6278 1.00 3.00 14.00 15 2.6000 51640 16330 2.2306 2.9694 2.00 3.00 15.00 15 1.2000 78881 24944 6357 1.7643 00 2.00 Total 225 2.7267 1.37033 11189 2.5056 2.9478 00 6.00 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets CAUMAN Duncan VAR0 0001 N Subset for alpha = 05 1.00 15 1.2000 15.00 15 1.2000 12.00 15 1.3000 1.3000 2.00 15 1.7000 1.7000 1.7000 3.00 15 2.0000 2.0000 2.0000 13.00 15 2.1000 2.1000 2.1000 7.00 15 2.2000 2.2000 2.2000 14.00 15 2.6000 2.6000 2.6000 11.00 15 2.8000 2.8000 2.8000 6.00 15 3.3000 3.3000 3.3000 4.00 15 3.4000 3.4000 5.00 15 3.8000 8.00 15 4.0000 9.00 15 10.00 15 Sig .192 056 192 116 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 15.000 4.0000 4.6000 4.7000 065 056 103 065 056 GIÀ HƯƠNG N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound Minimum Maximum 1.00 15 1.2000 42164 13333 8984 1.5016 1.00 2.00 2.00 15 2.4000 69921 22111 1.8998 2.9002 2.00 4.00 3.00 15 6.2000 1.39841 44222 5.1996 7.2004 5.00 9.00 4.00 15 5.1000 1.37032 43333 4.1197 6.0803 4.00 8.00 5.00 15 5.0000 66667 21082 4.5231 5.4769 4.00 6.00 6.00 15 4.1000 87560 27689 3.4736 4.7264 3.00 5.00 7.00 15 3.0000 66667 21082 2.5231 3.4769 2.00 4.00 8.00 15 3.4000 84327 26667 2.7968 4.0032 2.00 4.00 9.00 15 4.4000 1.07497 33993 3.6310 5.1690 3.00 6.00 10.00 15 6.0000 1.15470 36515 5.1740 6.8260 5.00 8.00 11.00 15 4.2000 1.22927 38873 3.3206 5.0794 3.00 6.00 12.00 15 3.2000 1.03280 32660 2.4612 3.9388 2.00 5.00 13.00 15 8.0000 1.49071 47140 6.9336 9.0664 6.00 10.00 14.00 15 4.4000 1.07497 33993 3.6310 5.1690 3.00 6.00 15.00 15 1.8000 78881 24944 1.2357 2.3643 1.00 3.00 Total 225 4.1600 1.98342 16195 3.8400 4.4800 1.00 10.00 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets GIAHUONG Duncan VAR0 0001 N Subset for alpha = 05 1.00 15 1.2000 15.00 15 1.8000 2.00 15 7.00 15 3.0000 3.0000 12.00 15 3.2000 3.2000 3.2000 8.00 15 3.4000 3.4000 3.4000 6.00 15 4.1000 4.1000 4.1000 11.00 15 4.2000 4.2000 9.00 15 4.4000 4.4000 14.00 15 4.4000 4.4000 5.00 15 5.0000 4.00 15 5.1000 10.00 15 3.00 15 13.00 15 10 1.8000 2.4000 2.4000 Sig .195 195 103 418 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 15.000 5.1000 6.0000 6.0000 6.2000 8.0000 066 054 058 053 665 1.000 SỨ N Std Deviation Mean Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound Minimum Maximum 1.00 15 9000 56765 17951 4939 1.3061 00 2.00 2.00 15 1.5000 52705 16667 1.1230 1.8770 1.00 2.00 3.00 15 1.6000 51640 16330 1.2306 1.9694 1.00 2.00 4.00 15 1.6000 84327 26667 9968 2.2032 1.00 3.00 5.00 15 1.8000 42164 13333 1.4984 2.1016 1.00 2.00 6.00 15 2.2000 42164 13333 1.8984 2.5016 2.00 3.00 7.00 15 2.6000 84327 26667 1.9968 3.2032 2.00 4.00 8.00 15 2.8000 1.03280 32660 2.0612 3.5388 2.00 4.00 9.00 15 2.8000 78881 24944 2.2357 3.3643 2.00 4.00 10.00 15 3.8000 1.39841 44222 2.7996 4.8004 2.00 6.00 11.00 15 2.8000 78881 24944 2.2357 3.3643 2.00 4.00 12.00 15 1.0000 00000 00000 1.0000 1.0000 1.00 1.00 13.00 15 2.8000 78881 24944 2.2357 3.3643 2.00 4.00 14.00 15 3.4000 51640 16330 3.0306 3.7694 3.00 4.00 15.00 15 2.4000 51640 16330 2.0306 2.7694 2.00 3.00 Total 225 2.2667 1.07857 08806 2.0926 2.4407 00 6.00 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets SỨ Duncan Subset for alpha = 05 VAR00001 N 1.00 15 9000 12.00 15 1.0000 2.00 15 1.5000 1.5000 3.00 15 1.6000 1.6000 4.00 15 1.6000 1.6000 5.00 15 1.8000 1.8000 6.00 15 2.2000 2.2000 2.2000 15.00 15 2.4000 2.4000 7.00 15 2.6000 8.00 15 2.8000 2.8000 9.00 15 2.8000 2.8000 11.00 15 2.8000 2.8000 13.00 15 2.8000 2.8000 14.00 15 10.00 15 Sig .058 058 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 15.000 3.4000 3.4000 3.8000 086 118 106 225 Phụ lục 3.18 Vai trò auxin phát sinh hình thái rễ từ khúc cắt chồi chuối Cau Mẵn sau ngày nuôi cấy môi trường MSK với IAA, NAA hay 2,4-D nồng độ khác MPS Sơ khởi Kéo dài 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 Total 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 Total 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 Total N Mean 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 210 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 210 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 210 2000 6000 7333 8000 8000 1.0000 8000 6000 1.4000 2.0000 1.2000 8000 2.4000 3.4000 1.1952 2667 8000 1.0000 1.0000 1.4000 1.0000 9333 1.0000 1.4000 1.6000 1.4000 6000 2.0000 2.4000 1.2000 0000 6000 8000 1.2000 1.4000 8000 2.2000 8000 7333 2.2667 1.8000 2000 1.0000 8000 1.0429 Std Deviation 41404 50709 45774 41404 94112 00000 41404 50709 50709 92582 41404 77460 1.40408 1.54919 1.11749 45774 41404 65465 65465 50709 84515 70373 92582 50709 82808 50709 82808 1.85164 1.24212 99183 00000 82808 77460 1.08233 50709 77460 77460 77460 79881 1.16292 86189 41404 92582 1.20712 1.03668 Std Error 10690 13093 11819 10690 24300 00000 10690 13093 13093 23905 10690 20000 36253 40000 07711 11819 10690 16903 16903 13093 21822 18170 23905 13093 21381 13093 21381 47809 32071 06844 00000 21381 20000 27946 13093 20000 20000 20000 20625 30026 22254 10690 23905 31168 07154 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound -.0293 3192 4798 5707 2788 1.0000 5707 3192 1.1192 1.4873 9707 3710 1.6224 2.5421 1.0432 0132 5707 6375 6375 1.1192 5320 5436 4873 1.1192 1.1414 1.1192 1414 9746 1.7121 1.0651 0000 1414 3710 6006 1.1192 3710 1.7710 3710 2910 1.6227 1.3227 -.0293 4873 1315 9018 4293 8808 9868 1.0293 1.3212 1.0000 1.0293 8808 1.6808 2.5127 1.4293 1.2290 3.1776 4.2579 1.3473 5202 1.0293 1.3625 1.3625 1.6808 1.4680 1.3230 1.5127 1.6808 2.0586 1.6808 1.0586 3.0254 3.0879 1.3349 0000 1.0586 1.2290 1.7994 1.6808 1.2290 2.6290 1.2290 1.1757 2.9107 2.2773 4293 1.5127 1.4685 1.1839 Minimum 00 00 00 00 00 1.00 00 00 1.00 1.00 1.00 00 1.00 2.00 00 00 00 00 00 1.00 00 00 00 1.00 1.00 1.00 00 00 1.00 00 00 00 00 00 1.00 00 1.00 00 00 1.00 00 00 00 00 00 Maximum 1.00 1.00 1.00 1.00 3.00 1.00 1.00 1.00 2.00 3.00 2.00 2.00 5.00 6.00 6.00 1.00 1.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 3.00 2.00 2.00 5.00 4.00 5.00 00 2.00 2.00 3.00 2.00 2.00 3.00 2.00 2.00 4.00 3.00 1.00 2.00 3.00 4.00 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets Mô phân sinh rễ Duncan Subset for alpha = 05 VAR00001 N 1.00 15 2000 2.00 15 6000 6000 8.00 15 6000 6000 3.00 15 7333 7333 4.00 15 8000 8000 8000 5.00 15 8000 8000 8000 7.00 15 8000 8000 8000 12.00 15 8000 8000 8000 6.00 15 1.0000 1.0000 11.00 15 1.2000 1.2000 9.00 15 10.00 15 2.0000 13.00 15 2.4000 14.00 15 1.4000 3.4000 Sig .071 074 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 15.000 .068 158 1.000 Sơ khởi rễ Duncan Subset for alpha = 05 VAR00001 N 1.00 15 2667 12.00 15 6000 6000 2.00 15 8000 8000 8000 7.00 15 9333 9333 9333 9333 3.00 15 1.0000 1.0000 1.0000 4.00 15 1.0000 1.0000 1.0000 6.00 15 1.0000 1.0000 1.0000 8.00 15 1.0000 1.0000 1.0000 5.00 15 1.4000 1.4000 1.4000 9.00 15 1.4000 1.4000 1.4000 11.00 15 1.4000 1.4000 1.4000 10.00 15 1.6000 1.6000 13.00 15 14.00 15 Sig .053 284 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 15.000 2.0000 2.0000 2.4000 111 075 091 206 Kéo dài Duncan Subset for alpha = 05 VAR00001 N 1.00 15 0000 12.00 15 2000 2000 2.00 15 6000 6000 6000 9.00 15 7333 7333 7333 3.00 15 8000 8000 8000 6.00 15 8000 8000 8000 8.00 15 8000 8000 8000 14.00 15 8000 8000 8000 13.00 15 1.0000 1.0000 4.00 15 1.2000 1.2000 1.2000 5.00 15 1.4000 1.4000 11.00 15 7.00 15 2.2000 10.00 15 2.2667 1.8000 Sig .063 091 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 15.000 .095 062 063 1.8000 150 Phụ lục 3.19 Ảnh hưởng mật độ tế bào ban đầu phát sinh phôi dịch treo tế bào có nguồn gốc mơ sẹo từ hoa đực non chuối Cau Mẵn sau 21 ngày nuôi cấy môi trường đặc Ma3, pH 5,3 Descriptives SOPHOI / HỘP PETRI N 7.50 15.00 22.50 Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound Minimum Maximum 5 272.0000 468.8000 37.89459 57.56040 16.94698 25.74179 224.9477 397.3293 319.0523 540.2707 218.00 404.00 306.00 528.00 537.2000 68.27298 30.53261 452.4279 621.9721 454.00 624.00 30.00 569.6000 71.37787 31.92115 480.9727 658.2273 480.00 648.00 Total 20 461.9000 130.77015 29.24109 400.6977 523.1023 218.00 648.00 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets SOPHOI / HỘP PETRI Duncan Subset for alpha = 05 MATDO 7.50 15.00 N 272.0000 468.8000 22.50 537.2000 30.00 Sig 1.000 091 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 537.2000 569.6000 407 Phụ lục 3.20 Số phơi tạo từ dịch treo tế bào có nguồn gốc mô sẹo chuối Cau Mẵn môi trường có pH khác nhau, hộp Petri với 0,5 ml dịch treo tế bào ban đầu (mật độ 15 l tế bào lắng/ml dịch treo tế bào), sau 21 ngày nuôi cấy pH N Std Deviation Mean 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound Std Error Minimum Maximum Ma2 4.00 282.8000 42.03808 18.80000 229.6028 333.9972 216.00 330.00 không 5.30 428.0000 64.54456 28.86520 347.8573 508.1427 390.00 542.00 hormon 6.00 546.0000 79.43551 35.52464 447.3678 644.6322 420.00 602.00 7.00 392.8000 62.07415 27.76040 315.7248 469.8752 282.00 424.00 112.86894 25.23826 359.3257 464.9743 216.00 602.00 Total 20 412.1500 Ma * 4.00 498.8000 55.61654 24.87247 429.7429 567.8571 434.00 542.00 không 5.30 956.0000 102.30347 45.75150 828.9735 1083.0265 848.00 1064.00 Hormone 6.00 498.8000 53.09614 23.74532 432.8724 564.7276 440.00 544.00 7.00 402.0000 66.18157 29.59730 319.8247 484.1753 336.00 472.00 Total 20 588.9000 230.86608 51.62323 480.8513 696.9487 336.00 1064.00 4.00 254.0000 44.56456 19.92988 198.6658 309.3342 200.00 298.00 5.30 468.8000 57.56040 25.74179 397.3293 540.2707 404.00 528.00 6.00 662.8000 119.67122 53.51859 514.2086 811.3914 534.00 778.00 7.00 100.0000 28.39014 12.69646 64.7490 135.2510 68.00 126.00 Total 20 371.4000 228.37098 51.06530 264.5191 478.2809 68.00 778.00 Ma3 Duncan * Subset for alpha = 05 Ma không hormon N 4.00 7.00 392.8000 5.30 428.0000 281.8000 6.00 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 Ma * không hormon 546.0000 Subset for alpha = 05 N 7.00 402.0000 4.00 498.8000 6.00 498.8000 5.30 956.0000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 Subset for alpha = 05 Ma3 N 7.00 4.00 5.30 100.0000 254.0000 6.00 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 468.8000 662.8000 Phụ lục 3.21 Ảnh hưởng phối hợp auxin cytokinin phát sinh phôi (số phôi giai đoạn hình cầu hộp Petri) từ dịch treo tế bào có nguồn gốc cụm chồi tăng sinh cao chuối Cau Mẵn sau 28 ngày nuôi cấy (pH 5,3; mật độ 15 l tế bào lắng/ml dịch treo tế bào) N Std Deviation Mean 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound Std Error Minimum Maximum 1.00 520.6667 43.65012 25.20141 412.2337 629.0996 482.00 568.00 2.00 534.6667 43.46646 25.09537 426.6900 642.6433 488.00 574.00 3.00 4.00 3 720.0000 156.6667 40.00000 20.81666 23.09401 12.01850 620.6345 104.9552 819.3655 208.3781 680.00 140.00 760.00 180.00 5.00 826.6667 47.25816 27.28451 709.2709 944.0624 790.00 880.00 6.00 602.0000 33.04542 19.07878 519.9106 684.0894 564.00 624.00 Total 18 560.1111 218.05717 51.39657 451.6738 668.5484 140.00 880.00 Duncan VAR00002 Subset for alpha = 05 N 4.00 1.00 520.6667 2.00 6.00 3 534.6667 3.00 3 156.6667 534.6667 602.0000 720.0000 5.00 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 826.6667 Phụ lục 3.22 Mối liên hệ số lần cấy chuyền dịch treo tế bào (có nguồn gốc cụm chồi tăng sinh cao) khả phát sinh phôi sau tuần nuôi cấy môi trường Ma *3 với kinetin 0,1 mg/l, 2iP 0,2 mg/l zeatin 0,05 mg/l N Std Deviation Mean Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound Minimum Maximum 1.00 826.6667 47.25816 27.28451 709.2709 944.0624 790.00 880.00 2.00 810.0000 45.82576 26.45751 696.1625 923.8375 760.00 850.00 3.00 530.0000 43.58899 25.16611 421.7189 638.2811 480.00 560.00 Total 722.2222 149.64773 49.88258 607.1928 837.2517 480.00 880.00 Duncan Subset for alpha = 05 VAR00002 N 3.00 2.00 530.0000 810.0000 1.00 826.6667 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Phụ lục 3.23 Vai trị TIBA q trình phát sinh phôi sau 21 ngày nuôi cấy dịch treo tế bào chuối Cau Mẵn thời điểm phát triển phôi khác môi trường Ma *3 với kinetin 0,1mg/l, 2iP 0,2 mg/l, zeatin 0,05 mg/l TIBA mg/l N Std Deviation Mean Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound Minimum Maximum CAU 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 Total 3 3 3 3 27 523.3333 832.0000 1018.0000 48.0000 170.0000 904.0000 0000 32.0000 813.3333 482.2963 70.94599 85.15868 196.17339 11.13553 45.82576 187.58465 00000 9.16515 116.09192 414.31898 40.96069 49.16638 113.26076 6.42910 26.45751 108.30205 00000 5.29150 67.02570 79.73572 347.0937 620.4541 530.6783 20.3378 56.1625 438.0139 0000 9.2325 524.9450 318.3972 699.5729 1043.5459 1505.3217 75.6622 283.8375 1369.9861 0000 54.7675 1101.7216 646.1954 460.00 760.00 868.00 38.00 120.00 782.00 00 22.00 712.00 00 600.00 926.00 1240.00 60.00 210.00 1120.00 00 40.00 940.00 1240.00 NUILUA 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 Total 3 3 3 3 27 0000 0000 126.6667 0000 0000 5.3333 0000 0000 0000 14.6667 00000 00000 24.02776 00000 00000 3.05505 00000 00000 00000 40.94274 00000 00000 13.87243 00000 00000 1.76383 00000 00000 00000 7.87943 0000 0000 66.9784 0000 0000 -2.2558 0000 0000 0000 -1.5297 0000 0000 186.3549 0000 0000 12.9225 0000 0000 0000 30.8631 00 00 102.00 00 00 2.00 00 00 00 00 00 00 150.00 00 00 8.00 00 00 00 150.00 PHOICAU VAR00001 Subset for alpha = 05 N 7.00 0000 8.00 32.0000 4.00 3 48.0000 170.0000 Duncan(a) 5.00 1.00 3 523.3333 9.00 813.3333 2.00 832.0000 832.0000 6.00 904.0000 904.0000 3.00 Sig .087 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 1018.0000 1.000 336 056 NUILUA VAR00001 N Subset for alpha = 05 Duncan(a) 1.00 0000 2.00 0000 4.00 0000 5.00 0000 7.00 0000 8.00 3 0000 0000 5.3333 9.00 6.00 3.00 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 126.6667 Phụ lục 3.24 Tác động TIBA xử lý phôi chuối Cau Mẵn giai đoạn phát triển khác (được thu nhận môi trường Ma *3 với kinetin 0,1mg/l, 2iP 0,2 mg/l, zeatin 0,05 mg/l) mơi trường MS½ với BA 0,227 mg/l, IAA 1,5 mg/l TIBA mg/l) N 95% Confidence Interval for Mean Std Deviation Mean Std Error Minimum Lower Bound Maximum Upper Bound 1.00 5.0000 5.00000 2.88675 -7.4207 17.4207 00 10.00 2.00 66.6667 15.27525 8.81917 28.7208 104.6125 50.00 80.00 3.00 73.3333 11.54701 6.66667 44.6490 102.0177 60.00 80.00 4.00 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 5.00 13.3333 5.77350 3.33333 -1.0088 27.6755 10.00 20.00 6.00 33.3333 15.27525 8.81917 -4.6125 71.2792 20.00 50.00 Total 18 31.9444 31.01892 7.31123 16.5191 47.3698 00 80.00 ANOVA Sum of Squares df Mean Square Between Groups 15040.278 3008.056 Within Groups 1316.667 16356.944 12 17 109.722 Total F Sig 27.415 Subset for alpha = 05 Duncan(a) VAR00001 4.00 N 0000 1.00 5.0000 5.00 13.3333 6.00 2.00 3.00 Sig .163 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 33.3333 66.6667 73.3333 1.000 451 000 Phụ lục 3.25 Ảnh hưởng phối hợp auxin cytokinin phát triển phôi sau 42 ngày nuôi cấy phôi chuối Cau Mẵn giai đoạn phát triển khác (thu nhận mơi trường Ma *3 có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,2 mg/l, zeatin 0,05 mg/l) N Std Deviation Mean Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 0000 0000 Minimum Maximum 1.00 0000 00000 00000 00 00 2.00 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 3.00 3 0000 0000 00000 00000 00000 00000 0000 0000 0000 0000 00 00 00 00 4.00 5.00 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 6.00 11.6667 2.88675 1.66667 4.4956 18.8378 10.00 15.00 7.00 0000 00000 00000 0000 0000 00 00 8.00 23.3333 10.40833 6.00925 -2.5224 49.1891 15.00 35.00 9.00 5.0000 5.00000 2.88675 -7.4207 17.4207 00 10.00 10.00 40.0000 10.00000 5.77350 15.1586 64.8414 30.00 50.00 11.00 3 5.0000 66.6667 5.00000 15.27525 2.88675 8.81917 -7.4207 28.7208 17.4207 104.6125 00 50.00 10.00 80.00 12.00 13.00 73.3333 11.54701 6.66667 44.6490 102.0177 60.00 80.00 14.00 3.3333 5.77350 3.33333 -11.0088 17.6755 00 10.00 15.00 36.6667 15.27525 8.81917 -1.2792 74.6125 20.00 50.00 16.00 13.3333 5.77350 3.33333 -1.0088 27.6755 10.00 20.00 17.00 70.0000 10.00000 5.77350 45.1586 94.8414 60.00 80.00 18.00 76.6667 15.27525 8.81917 38.7208 114.6125 60.00 90.00 Total 54 23.6111 29.40313 4.00126 15.5856 31.6366 00 90.00 Duncan Subset for alpha = 05 VAR00001 1.00 1e 0000 2.00 0000 3.00 0000 4.00 0000 5.00 0000 7.00 0000 14.00 3 3.3333 5.0000 9.00 11.00 N 2d 3c 4b 5a 5.0000 6.00 11.6667 11.6667 16.00 13.3333 13.3333 8.00 15.00 10.00 12.00 3 66.6667 70.0000 73.3333 76.6667 17.00 13.00 18.00 Sig 23.3333 109 116 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 23.3333 36.6667 36.6667 40.0000 059 629 192 ...ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THANH HƯƠNG PHÂN TÍCH CÁC BIẾN ĐỔI HÌNH THÁI HỌC VÀ SINH LÝ HỌC TRONG CÁC Q TRÌNH PHÁT SINH CƠ QUAN VÀ PHƠI THỂ HỆ Ở MỘT SỐ GIỐNG CHUỐI... nhân giống thực vật quy mơ lớn 2 Đề tài ? ?Phân tích biến đổi hình thái học sinh lý học q trình phát sinh quan phơi soma số giống chuối (Musa sp. )? ?? thực nhằm tìm hiểu sở sinh lý học phát sinh hình. .. vitro số giống chuối trồng hoang dại Về mặt khoa học, luận án giải đáp số vấn đề liên quan tới phát sinh hình thái chuối: biến đổi hình thái học sinh lý học trình phát sinh quan (chồi r? ?) phôi