TÀI LIỆU THAM KHẢO VỀ HƯƠNG NGHIÊN CỨU NẤM VÂN CHI, NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY ĐẾN SINH KHỐI SỢI NẤM VÂN CHI (TRAMETES VERSICOLOR (L.) PILAT) TRÊN MÔI TRƯỜNG DỊCH THỂ VÀ BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG SỢI NẤM CÓ ĐẦY TỦ TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY ĐẾN SINH KHỐI SỢI NẤM VÂN CHI (TRAMETES VERSICOLOR (L.) PILAT) TRÊN MÔI TRƯỜNG DỊCH THỂ VÀ BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG SỢI NẤM \\ MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1.Tính cấp thiết đề tài Ngày nhiều lồi nấm sử dụng làm thực phẩm giàu dinh dưỡng, số sử dụng làm dược phẩm để chữa trị số bệnh nguy hiểm tim mạch, béo phì, giải độc bảo vệ tế bào gan, phịng điều trị lỗng xương Trên giới có khoảng 2000 loại nấm ăn làm thuốc, ngồi nguồn nấm thu hái từ thiên nhiên, người ta trồng 60 loại theo phương pháp thủ công, bán công nghiệp, công nghiệp với hiệu suất cao [22], [26] Nhiều nhà khoa học cho nấm thực phẩm quan trọng thông dụng người tương lai [6] Ở nước ta vài năm trở lại đây, nghề trồng nấm dược liệu xem hướng phát triển kinh tế tốt, vừa cung cấp cho thị trường nguồn dược liệu phong phú, vừa tận dụng phế phẩm nông nghiệp Từ việc sản xuất mang tính tiêu dùng chỗ, đến nấm dược liệu vào sản xuất quy mô lớn, mang lại hiệu kinh tế cao Xã hội ngày phát triển, chất lượng môi trường sống ngày giảm, nguồn thực phẩm ngày không đảm bảo an tồn, ảnh hưởng đến sức khỏe Chính người cần cung cấp nguồn thực phẩm an tồn, sản phẩm chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học Nấm vân chi loài nấm sử dụng phổ biến giới nguồn dược liệu giúp chống lại ung thư Các loại thuốc chống ung thư có thị trường khơng nhằm mục tiêu cụ thể mà gây nhiều tác dụng phụ biến chứng điều trị lâm sàng dạng ung thư khác nhau, phương pháp điều trị hiệu độc hại vô cấp thiết Hiện nay, số nấm đánh giá cao quan tâm có đặc tính chống ung thư có hợp chất hoạt động Trong nấm vân chi có chứa hợp chất polysaccharid liên kết với protein, gồm hai loại chính: PSP (polysaccharide peptide) PSK (polysaccharide krestin) Hai hợp chất nhà nghiên cứu Trung Quốc Nhật Bản phát chứng minh có đặc tính dược học quý giá PSP PSK có tác dụng với nhiều loại tế bào ung thư tế bào ung thư biểu mô (carcinoma) tế bào ung thư máu (leukemia) Ngồi nấm vân chi cịn có tác dụng với nhiều loại ung thư khác ung thư dày, ung thư phổi, ung thư gan, ung thư hệ bạch huyết [21] Hơn nữa, PSP giúp cải thiện chất lượng sống bệnh nhân ung thư trước sau điều trị thông qua trọng lượng thể số karnotsky tăng [38] Nấm vân chi sử dụng phổ biến khắp giới, đặc biệt Nhật Bản, Trung Quốc, Mỹ, nước châu Âu Tại Nhật Bản biệt dược bào chế từ nấm đứng đầu 10 loại thuốc chống ung thư tiêu thụ mạnh [14] Tại nước ta, nhu cầu sử dụng nấm vân chi ngày cao thực phẩm chức không bệnh nhân ung thư mà người khỏe mạnh Do dược chất nấm vân chi khơng có tác dụng loại ung thư mà giúp giải nhiệt, tăng cường sức khỏe, tăng cường hệ miễn dịch cho thể [34], [38], [40] Hiện nước ta hầu hết sử dụng quy trình trồng nấm truyền thống môi trường rắn Theo phương pháp tốn thời gian để thu hoạch, mà cịn trồng vào mùa đơng nấm vân chi có đặc tính nấm lạnh Do đó, sản lượng thu đáp ứng nhu cầu ngày tăng Việc nuôi cấy nấm vân chi môi trường lỏng có khả khắc phục hầu hết nhược điểm trồng môi trường rắn, rút ngắn thời gian sinh trưởng, chất lượng tốt, không phụ thuộc vào khí hậu thời tiết Và đặc biệt q trình chiết tách hợp chất sinh học nấm dễ dàng hơn, thích hợp sản xuất theo quy mơ công nghiệp [24] Nhằm khắc phục hạn chế nuôi trồng môi trường rắn, thực đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy đến sinh khối sợi nấm vân chi Trametes versicolor (L.:Fr) môi trường dịch thể bước đầu đánh giá chất lượng sợi nấm” CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu chung nấm vân chi sợi nấm vân chi 1.1.1 Giới thiệu nấm vân chi Vân chi có nhiều tên gọi khác Tên tiếng Anh Turkey tail (đuôi gà tây) Ở Trung Quốc, người ta gọi “Yunzhi” có nghĩa loại nấm có hình dạng mây Người Nhật gọi “Karawatake” người ta hay tìm thấy chúng nơi gần bờ sơng [1] Vân chi có tên khoa học phổ biến Trametes versicolor sau thời gian dài nghiên cứu đặt tên khác Trametes versicolor (L.:Fr) Pilát, tức lồi Coriolus versicolori (L.:fr) Quesl, Carl von Linnaeus tìm đặt tên đầu tiên: Boletus versicoler L Vân chi loài nấm lớn thuộc phân lớp Basidiomycetes gồm 22000 loài biết Nấm vân chi gây hoại sinh bệnh, cư trú gỗ chết, thuộc loại nấm gây mục trắng mạnh nhất, phá hủy đồng thời tất cấu tử gỗ (hemicellulose, cellulose, lignin), giúp phá vỡ gốc già, chết, chất dinh dưỡng trở đất để tái sử dụng [1], [11] Vị trí phân loại nấm vân chi [5], [13], [18]: Giới nấm : Fungi Ngành nấm thật : Eumycota Ngành phụ nấm đảm : Basidiomycotina Lớp nấm đảm : Basisiomycetes Phân lớp nấm đảm đơn bào : Holobasidiomycetidae Nhóm : Hymenomycetes Bộ nấm lỗ : Aphyllophorales Họ nấm nhiều lỗ : Polyporaceae Chi : Trametes Loài : Tramestes versicolor 1.1.2 Đặc điểm hình thái cấu tạo nấm vân chi Vân chi loại nấm hàng năm, trưởng thành dạng giá, chất da, hóa gỗ, khơng cuống Mặt tán phủ lông dày, mịn, dễ biến đổi mặt màu sắc Đảm non dạng u lồi trịn, sau phân hóa thành dạng bán cầu, già đảm có dạng thận, dạng quạt, thót dần lại phần gốc hay có trải sát giá thể hay trải cuộn lại thành dạng vành với mép tán màu trắng – trắng kem [14] Nấm thường mọc thành tán dạng ngói lợp Mặt tán dễ thay đổi màu sắc, đặc trưng vòng đồng tâm với màu sắc khác nhau, màu sắc từ trắng đến vàng nhạt, nâu nhạt, nâu rỉ có sắc thái xanh đến đen Kích thước thay đổi với đường kính tán trung bình cỡ – cm, dày cỡ 2,5 – mm Thịt nấm mỏng, màu kem – vàng, dày 0,6 – 2,5 mm, lát cắt hiển vi thấy rõ lớp sắc tố đen xanh đặc trưng bên lớp lông [19] 1.1.3 Đặc tính sinh học nấm vân chi Chu trình sống nấm vân chi: Đảm bào tử nảy mầm cho sợi sơ cấp Hai sợi sơ cấp khác phối hợp cho sợi thứ cấp Sợi thứ cấp phát triển thành mạng sợi Trong điều kiện thuận lợi mạng sợi kết hạch tạo tiền thể (nụ nấm) Nụ nấm tiếp tục lớn dần cho tai nấm trưởng thành, phiến mũ mang đảm sinh bào tử Đảm bào tử phóng thích chu trình lại tiếp tục [3], [12] Giai đoạn phát triển sợi nấm: Chu trình sống nấm bào tử đảm nảy mầm cho sợi nấm, sợi nấm lúc đầu nhỏ có đường kính khoảng 1,5–1,0 mm, sau lớn dần lên đến kích thước đường kính 1,0 – 2,0 mm Sau trình tiếp hợp hai sợi nấm sơ cấp đơn nhân hình thành nên sợi nấm thứ cấp song nhân Các sợi nấm tăng trưởng theo kiểu tạo móc (clamp) để lại dấu vết tế bào Khi gặp điều kiện bất lợi sợi nấm song nhân tạo bào tử màng dày (bào tử áo – chlamydospore) giúp sợi nấm sống sót qua trường hợp bất lợi Bào tử màng dày, điều kiện thuận lợi nảy mầm tạo sợi nấm Khi sợi nấm thứ cấp phát triển dày đặc chất bắt đầu trình phân hóa để tạo thể Trước thể sợi nấm phát triển sinh khối đến mức tối đa chuẩn bị cho trình thể Nhưng điều đặc biệt sợi nấm có đầy đủ lượng chất giống thể, phịng chữa bệnh cho người, sử dụng ăn hay chế phẩm sinh học [ 21] Trong giai đoạn phát triển sợi, nấm cần nguồn dinh dưỡng môi trường đảm bảo nguồn cung cấp C, N khoáng [2] 1.1.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng nấm vân chi Trong trình sinh trưởng phát triển nấm vân chi chịu ảnh hưởng nhiều yếu tố Các yếu tố ngoại cảnh nhiệt độ, độ ẩm, ánh sáng, độ pH, nồng độ CO2; chất dinh dưỡng cần thiết; vai trò điều khiển hoocmon, diện hoạt động đóng mở gen thơng qua hệ thơng tin chuyển hóa chất trao đổi trình trao đổi chất nấm [6], [15] *Dinh dưỡng Trong tự nhiên nấm sinh trưởng loại phế thải có nguồn gốc thực vật, nấm có khả phân huỷ chất hữu Đa số nấm ăn sinh vi sinh vật dị dưỡng nên nấm cần cung cấp carbon nitơ - Carbon: khoảng nửa trọng lượng khô tế bào nấm tạo thành từ carbon Nấm cần lượng lớn carbon nhiều nguyên tố khác Nguồn carbon thường muối carbonat, muối acid hữu (Trịnh Tam Kiệt, 2012) - Đạm: nitrogen yêu cầu mơi trường sợi nấm sinh trưởng, cần thiết cho tổng hợp axit amin, tổng hợp protein nguyên liệu cần thiết đòi hỏi cho việc tạo thành tế bào chất Khơng có protein, sinh trưởng không diễn [6] Nguồn nitrogen thường peptone, nước luộc ngũ cốc, bột đậu tương, cao nấm men, (NH4)2SO4, asparagine, alanine, glycin Cao nấm men nguồn nitơ tốt để kích thích tăng trưởng sợi nấm [30] *pH pH môi trường ảnh hưởng lớn đến sinh trưởng nấm, pH ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme, đến khả hồ tan hợp chất *Ánh sáng Giai đoạn sinh trưởng dinh dưỡng, ánh sáng dường có ảnh hưởng khơng tốt đến sinh trưởng hầu hết loài nấm Ánh sáng ảnh hưởng tới màu sắc hình dạng thể, đặc biệt ánh sáng làm thay đổi màu sắc rõ rệt thể nấm vân chi Ánh sáng cần thiết cho phát triển mũ nấm, chuyển chúng vào bóng tối kích thích hình thành cuống nấm mà khơng kích thích hình thành mũ nấm (Trịnh Tam Kiệt, 2012) *Khơng khí Nấm sinh vật hiếu khí, sử dụng oxi, nhả khí cacbonic Thành phần khơng khí, đặc biệt nồng độ khí cacbonic có ảnh hưởng lớn đến sinh trưởng nấm [15] 1.2 Giá trị dược tính nấm vân chi sợi nấm 1.2.1 Tính chất dược học Theo y học cổ truyền Trung Quốc, nấm vân chi đen có tính hàn, có vị ngọt, có tác dụng tốt gan lách Ngoài nấm vân chi sử dụng làm giảm trầm cảm, giảm đờm, chữa lành rối loạn phổi, tăng cường vóc dáng lượng Một số nghiên cứu khác cho thấy nấm vân chi giúp xua tan nhiệt, loại bỏ độc tố, tăng cường thể lực, tăng lượng tinh thần, nâng cao chức miễn dịch người [41] Tại Trung Quốc có nhiều nghiên cứu chứng minh dịch chiết xuất nấm vân chi có tác dụng ức chế 40 - 95% tăng trưởng tế bào ung thư, lại khơng thấy có tác dụng phụ đáng kể [8] Ngoài tác dụng chống ung thư, nấm vân chi cịn có hiệu bệnh nhân dương tính với HIV Bằng cách sử dụng sản phẩm từ nấm vân chi, giúp người có biểu tích cực tăng cân, cảm thấy khỏe khoắn hơn, giải tỏa ức chế tâm lý Đặc biệt số lượng virus thể họ giảm cách đáng kinh ngạc (từ vài chục nghìn xuống vài nghìn) số lượng tế bào trình diện kháng thể CD-4 tăng [45] 1.2.2 Thành phần dược tính trích từ nấm vân chi Vào khoảng năm 1965, Nhật, kỹ sư hoá học khám phá thành phần trị ung thư nấm vân chi sau ơng quan sát thấy người hàng xóm mắc bệnh ung thư hiểm nghèo chữa khỏi sau sử dụng vân chi Điều dẫn đến khám phá PSK (polysaccharide Kureha) Hợp chất PSP (polysaccharide peptide) - chất có cấu tạo gần giống PSK phân lập lần Trung Quốc năm 1983 PSK PSP sản xuất từ dòng CM-101 Cov-1 nấm vân chi Cả hai sản phẩm thu trình lên men theo lô Các polyme PSP / PSK tan nước khơng hịa tan methanol, pyridin, chloroform, benzen, hexane Lên men PSK kéo dài đến 10 ngày, sản xuất PSP thu sau 64 PSK PSP chiết tách dễ dàng dung môi nước nóng, PSK thu từ dịch chết nước nóng cách tủa muối amoni sunfat, PSP thu hồi cồn [24] Polysaccharides nghiên cứu để tách chiết tạo thương phẩm từ nhiều loài nấm Năm 2001, Reshernikov Cộng liệt kê 650 lồi chứa polysaccharides có hoạt tính sinh học tách chiết từ thể, sợi nấm lên men dịch thể ni cấy [42] Dịch trích polysaccharide peptide từ nấm (thuật ngữ gọi proteoglycan) chuỗi polypeptide hay phân tử protein nhỏ gắn kết chặt với chuỗi polysaccharide β-D-glucan, thành phần hiệu chữa trị chứng ung thư: dày, thực quản, ruột kết ung thư vú… Polysaccharides tìm thấy vách tế bào khơng tiêu hố vân chi có cấu trúc chiều với chuỗi bên (chuỗi đường mạch thẳng) mọc nhánh xung quanh cấu trúc trục (lõi protein hay polypeptide), chuỗi bên có chức sinh học hay hoạt tính miễn dịch cho phép tương tác chuỗi nhánh bên với thụ thể tế bào miễn dịch khác Thụ thể cho β-glucan tìm thấy nhiều tế bào khác nhau: Tế bào tự sát thương (NK), tế bào bạch cầu trung tính, tế bào bạch cầu đơn nhân to, đại thực bào tế bào lympho B, lympho T Nhiều nghiên cứu báo cáo β-1,3-glucan chất kích hoạt hệ miễn dịch chống ung thư tự nhiên người phần glucan kích ứng co lại khối u [3], [12] Theo nhà khoa học có polysaccharide nối với peptide tạo hiệu kháng ung thư *PSK Ở Nhật Bản từ năm 1970, PSK từ nấm vân chi chứng minh có khả kéo dài thời gian sống thêm năm cho bệnh nhân ung thư thuộc nhiều thể loại: ung thư dày, ung thư đại tràng, ung thư vòm họng, ung thư thực quản, ung thư phổi ung thư vú (P.M.Kidd, 2000) PSK có tính kháng sinh mạnh, hiệu Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Cryptococcus neoformans, Psedomonas aeruginosa, Candida albicans số loại vi trùng khác gây bệnh người *PSP PSP có số tác dụng bao gồm: tăng cường miễn dịch cách tạo interleukin - 6, interferon, immunoglobulin - G, đại thực bào, tế bào lympho T PSP cịn có tác dụng chống lại tác dụng ức chế miễn dịch hóa trị liệu, xạ trị truyền máu gây khối u PSP giúp ức chế phát triển loại ung thư khác cách sản xuất superoxide dismutase (SOD), peroxidase glutathione, miễn dịch nói chung Theo nghiên cứu khác, PSP giúp cải thiện ngon miệng chức gan, làm dịu tâm hệ thần kinh, điều trị rối loạn đường ruột có lợi điều trị bệnh nhiễm trùng hội ngăn chặn đáp ứng miễn dịch Ngồi ra, PSP có lợi cho sức khoẻ nói chung cách kích thích enzyme giải phóng gốc tự giảm thiểu oxy hoá PSP phân lập từ sợi nấm có tác dụng khác kháng u, hepatoprotective hoạt động giảm đau [24] Ngồi ra, PSP cịn có tác dụng trị đái tháo đường tiềm chất ức chế α-glucosidase (Lin et al, 2008; Yang et al) [52] 10 Ngoài hai chất PSK PSP tách chiết loại peptide khác từ dịch chiết thô polysaccharopeptide từ nấm vân chi [39] Chất peptide có hoạt tính chống ung thư cao so với PSK PSP có tác dụng tiềm với hệ miễn dịch (tăng cường số lượng bạch cầu lượng IgG chuột) 1.3 Các giá trị khác vân chi Giống nấm vân chi (T versicolor) ngồi mục đích thu sinh khối thể để làm thuốc cịn sử dụng nghiên cứu xử lý sinh học, sản xuất enzym (Walter cộng sự, 2005) Nấm vân chi sản xuất enzyme phá gỗ như: laccaza, mangan peroxidaze (MnP), lignin peroxidaze (LnP) Các enzyme nghiên cứu ứng dụng lĩnh vực tẩy trắng bột cellulose Laccaza từ nấm vân chi dùng xử lý chất thải, khử màu chất thải từ khâu tẩy trắng [28], [38] 1.4 Tình hình nghiên cứu sản xuất nấm vân chi 1.4.1 Tình hình nghiên cứu sản xuất giới Theo Liu cộng (2010), phương pháp nuôi cấy truyền thống, giống nấm ăn nấm dược liệu sản xuất môi trường rắn sử dụng nguyên liệu tổng hợp có chứa nhiều lignocellulose, q trình thường kéo dài -3 tháng để sản xuất đến thể Nuôi cấy môi trường dịch thể khác hẳn với ni cấy chất rắn đưa đến tiềm sản xuất giống nấm cao thời gian ngắn với mức độ nhiễm bệnh [50] Các nhà nghiên cứu phát rằng, sợi nấm sinh trưởng môi trường dịch thể phương pháp thay nhanh chóng để thu sinh khối sợi nấm với chất lượng phù hợp [36] Năm 1993 nhà sinh học Đại học Sư phạm Thượng Hải dùng phương pháp ni cấy chìm để thu nhận sợi nấm vân chi phối hợp với Xí nghiệp Dược phẩm Tân Khang để sản xuất thuốc Polysaccharopeptide PSP ứng dụng lâm sàng, phối hợp với biện pháp phẫu thuật hóa trị để điều trị ung thư phổi, ung thư đường tiêu hóa ung thư vú [41] Q.H Fang, J.J Zhong (2002), “Effect of initial pH on production of ganoderic acid and polysaccharide by submerged fermentation of Ganoderma lucidum”, Process Biochemistry, 37, pp.769-774 [42] Parris M Kidd, Ph.D, The use of mushroom glucan and proteoglycan in cancer treatment [43] Rajaram Panneerselvam Vadakkemuriyil Divya nải, ragupathi Gopi (2012), "Studies on methanolic extract of Rauvolfia species from Southern Western Ghats of India – In vitro antioxidant properties, characterization of nutrients and phytochemicals", Industrial Crops and Products(39), tr 17 – 25 [44] Reshernikov et al (2001), Medicinal Mushrooms: The Essential Guide [45] Richard A., Collins Tzi Bun Ng (1997), "Polysaccharopeptide from Coriolus versicolor has potential for use against human immunodeficiency virus type infection", Life Science 60(25), tr PL383-387 [46] Shin K.S., Yu K.W., Lee H.K., Lee H., Cho W.D (2007), Production of anti -complementary exopolysaccharides from submergedculture of Flammulina velutipes, Food Technol Biotechnol., 45(3): 319-326 [47] Stamets P Chilton J.S (1983), The mushroom cultivator, Agarikon Press, Washington [48] s.w Kim, H.J Hwang, c.p Xu, J.M Sung, J.w Choi, J.w Yun, (2003), “Optimization of submerged culture process for the production of mycelial biomass and exo-polysaccharides by Cordyceps militaris C738”, Journal of Applied Microbiology, 94(1), pp 120-126 [49] Ueno S, Yoshikumi C, Hirose F, Omura Y, Wada T, Fujii T, et al Method of producing nitrogen-containing polysaccharides US Patent 4,202,969, 1980a [50] Ugwu E.E Adebayo-Tayo B.C (2011), "Influence of Different Nutrient Sources on Exopolysaccharide Production and Biomass Yield by Submerged Culture of Trametes versicolor and Coprinussp", Australian Journal of Biotechnology 15(2), tr 63-69 [51] Yadav JS, Tripathi JP Optimization of cultivation and nutrition conditions and substrate pretreatment for solidsubstrate fermentation of wheat straw by Coriolus versicolor Folia Microbiol 1991;36:249– 301 [22] Yang MP cộng (1992), "The antitumor effect of a small polypeptide from Coriolus versicolor (SPCV)", Am J Chin Med 20(3-4), tr 221-232 Hình 1: Sợi nấm vân chi môi trường pH lần lược: 4,5; 5; 5,5; 6; 6,5; 7; 7,5; Hình 2: Hình dạng sợi nấm vân chi ni mơi trường lỏng, lắc 120 vịng/phút Hình 3: Sợi nấm vân chi nuôi cấy 22 ± 20C 30± 20C PHỤ LỤC Hình 4: Ni cấy lắc nấm vân chi (120 vịng/phút) Hình 5: Cường độ màu tăng dần thí nghiệm kháng oxy hóa dịch chiết sợi nấm vân chi Hình 6: Sợi nấm vân chi môi trường lần lược: Czapek, raper, PG cải tiến, BTH, Agaricus Hình 7: Giống cấp mơi trường thạch Hình 8: Hình ảnh kháng khuẩn Escherichia coli dịch chiết sợi nấm vân chi Hình 9: Hình dạng sợi nấm vân chi Hình 10: Kết tủa PS chiết tách từ nuôi cấy lắc 120 vòng / phút sau sợi nấm vân chi 15 ngày Hình 11: Kết tủa PSP thu từ dịch chiết sợi nấm vân chi Hình 12: Sinh khối khơ sợi nấm vân chi Hình 13: Kết tủa polysaccharide ngoại bào thu từ dịch nuôi cấy sợi nấm vân chi BẢNG THÀNH PHẦN MƠI TRƯỜNG Mơi trường PG cải tiến BTH Czapek Agaricus Raper Thành phần Hàm lượng (g/l) Khoai tây Glucoes Peptone CNM MgSO4 KH2PO4 Khoai tây Saccharose KH2PO4 MgSO4 Saccharose NaNO3 KH2PO4 MgSO4 KCl FeSO4 Khoai tây Glucose Peptone MgSO4 Na2HPO4 Peptone 200 20 2 0,5 200 20 1,5 30 0,5 0,5 0,01 200 20 0,5 CNM MgSO4 0,5 KH2PO4 0,46 K2HPO4 ... trồng môi trường rắn, thực đề tài ? ?Nghiên cứu ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy đến sinh khối sợi nấm vân chi Trametes versicolor (L.:Fr) môi trường dịch thể bước đầu đánh giá chất lượng sợi nấm? ?? 4... cho sinh trưởng sợi nấm Khối Kh lượng Hình 3.2 Lượng sinh khối nấm vân chi môi trường dinh khô dưỡng ốI (g) khác lư ợn Như môi trường PG cải tiến môi trường tốt để nuôi sợi nấm vân gchi môi trường. .. điều kiện tĩnh lắc Như q trình ni cấy lắc sợi nấm vân chi mang lại hiệu cao so với nuôi cấy tĩnh 3.6 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy lắc đến sinh trưởng sợi nấm vân chi Sợi nấm vân chi ni cấy lắc