Nghiên cứu sự sinh trưởng của hệ sợi nấm linh chi ganoderma lucidum trên môi trường nuôi cấy dịch thể

ĈҤI HӐ&Ĉ¬1 ҸNG 75Ѭ Ӡ1*Ĉ ҤI HӐ&6Ѭ3+ ҤM KHOA SINH ±0Ð,75Ѭ ӠNG PHҤM HUǣ1++ѬѪ1* NGHIÊN CӬU SӴ 6,1+75Ѭ ӢNG CӪA HӊSӦI NҨM LINH CHI GANODERMA LUCIDUM 75Ç10Ð,75Ѭ ӠNG NI CҨY Dӎ CH THӆ KHÓA LUҰN TӔT NGHIӊP Ĉj1 ҹng ±1ăP ĈҤI HӐ&Ĉ¬ NҸNG 75Ѭ Ӡ1*Ĉ ҤI HӐ&6Ѭ3+ ҤM KHOA SINH ±0Ð,75Ѭ ӠNG PHҤM HUǣ1++ѬѪ1* NGHIÊN CӬU SӴ 6,1+75Ѭ ӢNG CӪA HӊSӦI NҨM LINH CHI GANODERMA LUCIDUM 75Ç10Ð,75Ѭ ӠNG NI CҨY Dӎ CH THӆ Ngành: Công nghӋsinh hӑ c GVHD Th.S NguyӉ n ThӏBích Hҵ ng Ĉj1 ҹng ±NăP LӠ,&$0Ĉ2$1 7{LFDPÿRDQÿk\OjF{QJWUuQKQJKLrQ &iF V͙ OL͏Xkhóa N͇W OX̵Q TX̫ Oj QrX WUXQJ WURQJ WK͹F Yj F{QJE͙WURQJḘWNǤF{QJWUuQKQjRNKi Ĉj1ҹQJQJj\ 10 WKiQJQăP 3KҥP+XǤQK +ѭѫQJ LӠI CҦ0Ѫ1 ĈӇhồn thành khóa luұ n tӕt nghiӋ SQj\W{LÿmQK ұ Qÿѭ ӧc rҩ t nhiӅ u sӵJL~Sÿ ӥ cӫa cá nhân tұ p thӇ 7Uѭ ӟc hӃ t xin bày tӓlòng cҧ PѫQ sâu sҳ c tӟi Th.S NguyӉ n ThӏBích Hҵ ng ÿmW ҥ o mӑLÿL Ӆ u kiӋ n tӕt nhҩ t cho thӵc hiӋ n hồn thành khóa luұ n tӕt nghiӋ p Tôi xin chân thành cҧ PѫQ%&1NKRDFQJFiFWK ҫ y cô giáo khoa Sinh ±Môi WUѭ ӡQJWUѭ ӡQJĈ ҥ i hӑ F6ѭ3K ҥ PĈ ҥ i hӑFĈj1 ҹ QJÿmJL~Sÿ ӥtôi trình hӑc tұ p nghiên cӭXÿ Ӈhồn thành khóa luұ n Tôi xin chân thành cҧ PѫQFiFE ҥ n lӟS&16+ÿmOX{Qÿ ӝng viên giúp ÿ ӥtôi suӕ t q trình thӵc hiӋ Qÿ Ӆtài Và cuӕi tơi xin cҧ PѫQ%D0 ҽYjJLDÿuQKÿmORO ҳ QJFKăPVyF ҥ o mӑLÿL Ӆ u kiӋ n suӕ t thӡi gian hӑc tұ p hồn thành khóa luұ n tӕt nghiӋ p Ĉj1 ҹ ng, ngày 10 WKiQJQăP Sinh viên thӵc tұ p Phҥ m HuǤ QK+ѭѫQJ MӨC LӨC MӢĈҪU 1 Tính cҩ p thiӃ t cӫDÿ Ӆtài Mө FWLrXÿ Ӆtài 3.éQJKƭDNKRDK ӑ c thӵc tiӉ n cӫDÿ Ӆtài éQJKƭDNKRDK ӑc éQJKƭDWK ӵc tiӃ n &+ѬѪ1*,7 ӘNG QUAN TÀI LIӊU 1.1.Nҩ m linh chi 1.1.1 Phân loҥ i 1.1.2 Giӟi thiӋ u vӅnҩ m linh chi 1.1.3 Ĉһ FÿL Ӈ m hình thái ±cҩ u trúc ±sinh thái 1.1.4 ĈL Ӆ u kiӋ QVLQKWUѭ ӣng phát triӇ n cӫ a nҩ m Linh chi 1.1.5 Tác dөng trӏliӋ u cӫ a nҩ m linh chi 1.1.6 Hoҥ t chҩ t sinh hӑ c cӫ a nҩ m linh chi 10 1.2 Quy trình nhân giӕng nuôi trӗ ng nҩ m linh chi 15 1.3 Tình hình nghiên cӭXWURQJQѭ ӟFYjQJRjLQѭ ӟc 18 1.3.1 Tình hình nghiên cӭu ngồi Qѭ ӟc 18 1.3.2 Tình hình nghiên cӭXWURQJQѭ ӟc 20 &+ѬѪ1* ĈӔ,7Ѭ ӦNG, NӜI DUNG, 3+ѬѪ1*3+È31*+,Ç1& ӬU 22 Ĉ ӕ LWѭ ӧng nghiên cӭu 22 2.2 Nӝ i dung nghiên cӭu 22 3KѭѫQJSKiSQJKLrQF ӭu 22 2.3.1 Quan sát hình thái giҧ i phү u quҧthӇnҩ m linh chi 22 2.3.2 Khҧ o sát ҧ QKKѭ ӣng cӫDP{LWUѭ ӡQJÿ Ӄ n trình nhân giӕng cҩ p1 23 2.3.3 Khҧ RViWVLQKWUѭ ӣng sӧi nҩ POLQKFKLWUrQP{LWUѭ ӡng lӓng 25 2.3.4 3KѭѫQJSKiS[iFÿ ӏ nh sinh khӕLWѭѫLYjNK{ 26 2.3.5 ;iFÿ ӏ QKGѭ ӧc chҩ t có nҩ m linh chi 26 2.3.6 KiӇ m tra khҧQăQJWK ӫy phân CMC cӫa nҩ m linh chi 28 2.3.7 ;iFÿ ӏ nh khҧQăQJNKiQJNKX ҭ n cӫa nҩ m linh chi 28 2.3.8 ;iFÿ ӏ nh khҧQăQJNKiQJR[LKyDF ӫa nҩ m linh chi 28 2.3.9 Xӱlý sӕliӋ u 29 &+ѬѪ1* ӂT QUҦVÀ BÀN LUҰN 30 3.1 Quan sát hình thái giҧ i phү u quҧthӇlinh chi thu hái tҥ i khoa SMT 30 3.2 Khҧ o sát ҧ QKKѭ ӣng cӫDP{LWUѭ ӡQJÿ Ӄ n trình nhân giӕng cҩ pI 31 3.3 Khҧ o sát sӵVLQKWUѭ ӣng sӧi nҩ POLQKFKLWUrQP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ 34 3.3.1 Khҧ o sát ҧ QKKѭ ӣng cӫDP{LWUѭ ӣQJGLQKGѭ ӥQJÿ Ӄ QVLQKWUѭ ӣng hӋsӧi nҩ m OLQKFKLWURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ 34 3.3.2 Khҧ o sát ҧ QKKѭ ӣng cӫDS+ÿ Ӄ n sinh khӕi hӋsӧi nҩ m linh chi môi WUѭ ӡng dӏ ch thӇ 36 3.3.3 ĈѭӡQJFRQJVLQKWUѭ ӣng cӫ a hӋsӧi nҩ PWURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ 38 3.4 XiFÿ ӏ QKGѭ ӧc chҩ t có linh chi 40 ĈLQKWtQKDONDORLG 40 Ĉ ӏ nh tính hӧp chҩ p saponin 41 ĈLQKWtQKDFLGK ӳXFѫ 43 3.4.4 KhҧQăQJNKiQJNKX ҭ n cӫa linh chi 44 3.4.5 KhҧQăQJNKiQJR[\KyDF ӫ a linh chi 45 3.4.6 KiӇ m tra khҧQăQJWK ӫy phân CMC cӫa nҩ m linh chi 46 KӂT LUҰN VÀ KIӂN NGHӎ 48 TÀI LIӊU THAM KHҦO 49 PHӨLӨC 54 DANH MӨC VIӂT TҲT ACE: Chҩ t ӭc chӃenzyme chuyӇ Qÿ ә i angiotensin AZT: Azidothimidine CMC: Carboxymetyl cellulose DDL: Didanosin GLPs: Ganoderma polysaccharide MDA: 3,4-Methylenedioxyamphetamine DANH MӨC BҦNG BIӆU SӕhiӋ u bҧng Tên bҧng Sӕ trang 1.1 Lө c bҧ o linh chi tác dөng trӏliӋ u (Lý Thӡi Trân, 1590) 1.2 Thành phҫ n hoҥ t chҩ t có hoҥ t tính sinh hӑ c linh chi 11 3.1 ҦQKKѭ ӣng cӫDP{LWUѭ ӡng nuôi cҩ \ÿ Ӄ n tӕ Fÿ ӝWăQJWUѭ ӣng 31 hӋsӧi giӕng cҩ p1 3.2 ҦQKKѭ ӣng cӫDP{LWUѭ ӡng dLQKGѭ ӥng ÿӃ n sӵWăQJWUѭ ӣng hӋ 34 sӧi nҩ POLQKFKLWURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ 3.3 3.4 ҦQKKѭ ӣng cӫDS+ÿ Ӄ n tӕFÿ ӝWăQJWUѭ ӣng hӋsӧi nҩ m linh chi WURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ ҦQKKѭ ӣng cӫa thӡLJLDQÿ Ӄ n tӕFÿ ӝVLQKWUѭ ӣng cӫa hӋsӧi nҩ POLQKFKLWURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ 37 38 3.5 KhҧQăQJNKiQJNKX ҭ n cӫa hӋsӧi quҧthӇlinh chi 44 3.6 Mұ Wÿ ӝquang chӍsӕchӕng oxy hóa cӫa dӏ ch chiӃ t hӋsӧi 45 3.7 Mұ Wÿ ӝquang chӍsӕchӕng oxy hóa cӫa dӏ ch chiӃ t quҧthӇ 46 DANH MӨC HÌNH Ҧ1+Ĉ Ӗ THӎ SӕhiӋ u hình ҧnh Tên hình Sӕ trang 1.1 Chu trình phát triӇ n nҩ m linh chi 1.2 6ѫÿ ӗquy trình nhân giӕng nuôi trӗng nҩ m linh chi 15 3.1 Hình thái quҧthӇnҩ m linh chi 30 3.2 HӋsӧi nҩ POLQKFKLWURQJFiFP{LWUѭ ӡng nghiӋ m thӭc sau 12 32 ngày nuôi sӧi 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 BiӇ Xÿ ӗthӇhiӋ n sӵҧ QKKѭ ӣng cӫDP{LWUѭ ӡng nuôi cҩ \ÿ Ӄ n ÿ Ӄ n tӕ Fÿ ӝWăQJWUѭ ӣng hӋsӧi giӕng cҩ p1 BiӇ Xÿ ӗҧ QKKѭ ӣng cӫa môi tUѭ ӡng dLQKGѭ ӥng ÿ Ӄ n tӕFÿ ӝ WăQJWUѭ ӣng hӋsӧi nҩ m linh chi WURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ 33 34 HӋsӧi nҩ POLQKFKLWURQJFiFP{LWUѭ ӡng nuôi cҩ y sau 35 ngày BiӅ Xÿ ӗҧ QKKѭ ӣng cӫDS+ÿ Ӄ n tӕFÿ ӝWăQJWUѭ ӣng cӫa hӋsӧi nҩ POLQKFKLWURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ BiӇ Xÿ ӗthӇhiӋ Qÿѭ ӡQJFRQJVLQKWUѭ ӣng cӫa hӋsӧi linh chi WURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇ 37 39 3.8 HӋsӧi nҩ POLQKFKLWURQJP{LWUѭ ӡng dӏ ch thӇsau 12 ngày 40 ni cҩ y 3.9 Ĉӏ nh tính alkaloid bҵ ng thuӕc thӱMayer 40 3.10 Ĉӏ nh tính saponin bҵ ng thӱnghiӋ m tҥ o bӑt 41 3.11 ThӱnghiӋ m Foutan ±Kaudel 42 3.12 Ĉӏ nh tính acid hӳXFѫ 43 3.13 KhҧQăQJNKiQJNKX ҭ n cӫa hӋsӧi quҧthӇlinh chi 45 3.14 Dung dӏ FKÿiQKJLiNK ҧQăQJNKiQJR[\KyDF ӫa linh chi 46 3.15 Vòng thӫy phân CMC cӫa linh chi 47 MӢĈҪU Tính cҩ p thiӃ t cӫDÿ Ӆtài Nҩ m linh chi (Ganoderma lucidum) mӝWӧ Gѭ c thҧ o quý y hӑ c cә truyӅ n SӕOѭ ӧng loҥ i nҩ P OLQK ӧc sӱ FKL dө ng ÿѭcông nghӋGѭ ӧc liӋ u QJj\FjQJWăQJÿ һ c biӋ t tҥ i quӕFJLDÈĈ{QJ> @/LQKFKLÿmÿѭ ӧc sӱdө QJÿ Ӈ ÿL Ӆ u trӏnhiӅ u loҥ i bӋ nh khác ӣQJѭ ӡLQKѭE Ӌ nh viên gan mãn tính, cao huyӃ t áp, cholesteron hóa mҥ ch máu, tiӇ Xÿѭ ӡng, tҳ c nghӁ Qÿ ӝng mҥ ch vành, hen xuyӇ n, viêm loét dҥGj\« WURQJP{LWUѭ ӡng tәng hӧp cho thҩ y sinh khӕi linh chi tӕLѭXWKXÿѭ ӧc lҥ i pH bҵ ng 4,5 5,0 Mӝ t nghiên cӭu khác cӫa NguyӉ Q%iWѭ cӝ ng sӵ(2012) WURQJP{LWUѭ ӡng PDA, pH tӕLѭXÿ Ӈthu sinh khӕi linh chi ӣ 25oC - 30oC vӟi pH lҫ Qӧ Oѭ t 5,0 sau ngày 4,0 sau 14 ngày nuôi cҩ y [25] ĈL Ӆ u cho thҩ y pH tӕ LѭXFKRYL Ӌ c thu sinh khӕ i hӋsӧi nҩ m linh chi phөthuӝc vào thành phҫ n P{LWUѭ ӡng nuôi cҩ y, nhiӋ Wÿ ӝvà thӡi gian nuôi cҩ y 3.3.3 Ĉ˱ ͥng FRQJVLQKWU˱ ͧng cͯa h͏sͫi ṋm WURQJP{LWU˱ ͥng d͓ ch th͋ Quá trình sinh WUѭ ӣng cӫDWѫQ ҩ m trҧ LTXDJLDLÿR ҥ QJLDLÿR ҥ n thích nghi, JLDLÿR ҥ n phát triӇ QJLDLÿR ҥ n cân bҵ QJYjJLDLÿR ҥ n già cӛ i Trong thí nghiӋ m này, sӧi nҩ POLQKFKLÿѭ ӧc nuôi cҩ y chai thӫy tinh, mӛ i chai chӭa 30ml môi WUѭ ӡng HDQVHQÿL Ӆ u chӍ nh pH bҵ ng 5,5 rӗLVDXÿyK ҩ p khӱtrùng Khoҧ ng lҩ y mү u cách ngày Mү Xÿѭ ӧc sҩ y ӣ50o&ÿ Ӄ n khӕLOѭ ӧng NK{QJÿ әi, cân trӑ QJOѭ ӧng ghi nhұ n sӕliӋ u KӃ t quҧthí nghiӋ Pÿѭ ӧc ghi ӣbҧ ng 3.4 6B̫ ng 3.4 ̪QKK˱ ͧng cͯ a thͥLJLDQÿ ͇ n t͙Fÿ ͡VLQKWU˱ ͧng cͯa h͏sͫi ṋ m linh chi WURQJP{LWU˱ ͥng d͓ ch th͋ Ngày 2,80 4,33 Khӕ LOѭ ӧQJWѭѫL 12 15 18 21 6,24 8,65 9,33 9,72 11,10 0,44 0,69 0,74 0,79 0,81 (g/30ml) Khӕ LOѭ ӧng khô (g/30ml) 0,11 0,26 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 12 10 KӕLOѭӧQJVLQKNKӕL KӕLOѭӧQJVLQKNKӕL 39 12 15 18 21 7KӡLJLDQQX{LFҩ\ KӕLOѭӧQJWѭѫLJPO KӕLOѭӧQJNK{JPO 9Hình 3.7 Bi͋ Xÿ ͛th͋hi͏ Qÿ˱ ͥQJFRQJVLQKWU˱ ͧng cͯa h͏sͫi linh chi P{LWU˱ ͥng d͓ ch th͋ Ĉѭ ӡQJFRQJVLQKWUѭ ӣng rҩ t quan trӑng q trình ni cҩ y sinh khӕ i sӧi nҩ m linh chi DӵDYjRÿyV Ӂ[iFÿ ӏ QKÿѭ ӧc thӡi gian sinh khӕi phát triӇ n mҥ nh nhҩ t, ә Qÿ ӏ QKYjJLjÿL cӫa hӋsӧi Theo kӃ t quҧthӵc nghiӋ m nhұ n thҩ y 7URQJQJj\ÿ ҫ u, sinh khӕ LWăQJFK ұ m sӧi nҩ PÿDQJWURQJTXiW vӟLP{LWUѭ ӡng Tӯngày thӭ9 ÿӃ n ngày 15, sinh khӕ i phát triӇ n mҥ nh, lúc hӋ sӧLÿm thích nghi vӟLP{LWUѭ ӡng nên tӕFÿ ӝphát triӇ n sinh khӕLWăQJÿ ҫ n, nhiên hӋsӧi bҳ Wÿ ҫ u xuҩ t hiӋ n màu vàng hӋsӧi bҳ Wÿ ҫ u bӏlão hóa Tӯngày thӭ15 trӣÿL sӧi nҩ PWăQJFK ұ m, lúc Qj\P{LWUѭ ӡQJGLQKGѭ ӥng cҥ n dҫ n sӧi nҩ m tӯmàu vàng nhҥ t chuyӇ QVDQJYjQJÿ ұ m ĈL Ӆ u phù hӧp vӟi kӃ t quҧnghiên cӭu cӫa NguyӉ Q1Kѭ4X Ǥ nh (2006), WKHRÿyK Ӌsӧi nҩ POLQKFKLFNJQJSKiWWUL Ӈ QWKHRJLDLÿR ҥ n thích nghi, phát triӇ n, cân bҵ ng già cә i Tuy nhiên khoҧ ng thӡi gian lҩ y mү u ngày cách nên thӡLÿL Ӈ P[iFÿ ӏ nh hӋsӧi linh chi phát triӇ n mҥ nh nhҩ t 15 ngày, lúc hӋsӧLÿm xuҩ t hiӋ QPjXYjQJÿ ұ m biӇ u hiӋ n cӫa hӋsӧLÿmOmRKyD [20] Nên thӡi gian tӕt nhҩ t ÿ Ӈcho sinh khӕ i phát triӇ n 12 ngày 40 3.4 Xác ÿӏ QKGѭ ӧc chҩt có linh chi 11Hình 3.8 H͏sͫi ṋPOLQKFKLWURQJP{LW ͥng d͓ ch th͋sau 12 ngày nuôi c̭ y 3.4Ĉ inh tính alkaloid Cho dӏ ch chiӃ t bӝ W Wѫ ҩ m quҧ Q thӇnҩ m linh cho tác dөng vӟi thuӕc thӱ Mayer KӃ t quҧÿѭ ӧc thӇhiӋ n qua hình 3.10 a b 10Hình 3.9Ĉ ͓ nh tính alkaloid b̹ ng thu͙c th͵Mayer a ͘ng 1: D͓ ch chi͇ t h͏sͫi b ͘ng 2: D͓ ch chi͇ t qu̫th͋ 41 Ӕng 1: Dӏ ch chiӃ WWѫQ ҩ m linh chi vӟi thuӕ c thӱMayer Ӕng 2: Dӏ ch chiӃ t quҧthӇlinh chi vӟi thuӕ c thӱMayer Dӵa vào kӃ t quҧthӱnghiӋ m ta thҩ y cҧ2 ӕng nghiӋ Pÿ Ӆ u xuҩ t hiӋ n kӃ t tӫa màu vàng Dӏ ch chiӃ t sӧi nҩ m quҧthӇOLQK FKL ӱnghiӋ ÿHP m vӟi thuӕ WK c thӱ 0D\HU Ӆ u choÿ kӃ t quҧGѭѫQJWtQK Chӭng tӓtrong quҧthӇvà hӋsӧL Ӆ uÿ có hӧp chҩ t alkaloid 3.4.2 Ĉ͓ nh tính hͫp ch̭ p saponin * ThӱnghiӋ n tҥ o bӑ t +zDWDQOѭ ӧng cҳ QWѭѫQJ ӭng vӟLJGѭ ӧc liӋ XYjRPOQѭ ӟc nóng Lӑc vào ӕ ng nghiӋ PYjÿ Ӈnguӝ LWKrPQѭ ӟFÿ ӫ10ml, lҳ c mҥ nh doc theo chiӅ u ӕng nghiӋ m phút Ӕng 1: ӕng nghiӋ m quҧthӇ Ӕng 2: ӕng nghiӋ m hӋsӧi Ӕng 3: ông nghiӋ m chӭDQѭ ӟc ĈӇyên ӕng nghiӋ m, quan sát kӃ t quҧFyÿѭ ӧc a b c 12Hình 3.10Ĉ ͓ nh tính saponin b̹ng th͵nghi͏ m t̩ o b͕t a D͓ ch chi͇ t qu̫th͋ b D͓ ch chi͇ t h͏sͫi F1˱ ͣFÿ ͙i chͱng KӃ t quҧthӱnghiӋ m cho thҩ y ông nghiӋ PQѭ ӟFÿ ӕi chӭng khơng có bӑt cịn ӕ ng nghiӋ m quҧthӇvà hӋsӧi ÿ Ӆ u tҥ o bӑt bӅ n 1KѭY ұ \Gѭ ӧc liӋ u tӯhӋsӧi quҧ thӇÿ Ӆ u có chӭa hoҥ t chҩ t saponin 42 *ThӱnghiӋ m Foutan ±Kaudel Ӕng 1: Dӏ ch chiӃ t hӋsӧi sau cho acid vào Ӕng 2: Dӏ ch chiӃ t hӋsӧLVDXNKLFKRED]ѫ vài Ӕng 3: Dӏ ch chiӃ t quҧthӇsau cho acid vào Әng 4: Dӏ ch chiӃ t quҧthӇVDXNKLFKRED]ѫ vào ĈӇyên ӕng nghiêm, quan sát kӃ t quҧ KӃ t quҧcho thҩ y cҧ4 ӕng nghiӋ Sÿ Ӆ u tҥ o bӑt, nhiên bên ӕng nghiӋ m chӭa bazѫFyWK Ӈthҩ y cӝt bӑWFDRKѫQVRY ӟi ӕ ng nghiӋ m chӭa aicd Nên có thӇEѭ ӟFÿ ҫ u [iFÿ ӏ nh saponin có quҧthӇvà hӋsӧi nҩ m linh chi saponin steroid a 13Hình b c d 3.11 Th͵nghi͏ m Foutan ±Kaudel a D͓ ch h͏sͫi sau cho acid vào b D͓ ch h͏sͫLVDXNKLFKRED] c D͓ ch qu̫th͋sau cho acid vào d D͓ ch qu̫th͋VDXNKLFKRED]˯ 43 3.4.3 Ĉinh tính acid hͷXF˯ Tinh thӇNa2CO3 ÿѭ ӧc cho vào ӕ ng nghiӋ P VDX ÿy ҽtrênÿXQ ngӑn lӱaQK ÿqQF ӗn Ӕng 1: ӕng nghiӋ m chӭDQѭ ӟc cҩ t Ӕng 2: ӕng nghiӋ m chӭa dӏ ch thӇquҧthӇ Ӕng 3: ӕng nghiӋ m chӭa dӏ ch thӇhӋsӧi KӃ t quҧÿѭ ӧc thӇhiӋ n qua hình 3.13 Sau cho dӏ ch chiӃ t tác dөng vӟi tinh thӇNa2CO3 YjÿXQ nóng nhҽthì nhұ n thҩ y có bӑt khí xuҩ t hiӋ Q1KѭY ұ y dӏ ch chiӃ t tӯquҧthӇvà hӋsӧLÿ Ӆ u có chӭa acid hӳXFѫ b b a a c c 14Hình 3.12Ĉ ͓ nh tính acid hͷXF˯ a ͘ng nghi͏ m chͱDQ˱ ͣc c̭ t b ͘ng nghi͏ m chͱa d͓ ch qu̫th͋ c ͘ng nghi͏ m chͱa d͓ ch h͏sͫi *Nhұ n xét: Sau tiӃ QKjQKÿ ӏ nh tính mӝt sӕhoҥ t chҩ t có hoҥ t tính sinh hӑc (alkaloid, saponin acid hӳXFѫ WURQJF ҧquҧthӇvà hӋsӧi Có thӇnhұ n thҩ y ӣhӋ sӧi nҩ m linh chi, thӡi gian phát triӇ n ngҳ QQKѭQJY ү n chӭa nhӳng hoҥ t chҩ t có hoҥ t tính sinh hӑc mà quҧthӇFNJQJFy Ĉk\OjP ӝWѭXÿL Ӈ Pÿ Ӈcó thӇsӱdө ng hӋsӧi nҩ POLQKFKLÿ Ӈsҧ n xuҩ t sҧ n phҭ PGѭ ӧc hӑ c mà không cҫ n tӕn nhiӅ u thӡi gian cịn có thӇgiҧ Pÿѭ ӧc chi phí 44 3.4.4 K͇ t qu̫kh̫QăQJNKiQJNKX ̱n cͯa linh chi Tính kháng khuҭ n cӫa dӏ ch chiӃ t tӯcӗ n cӫ a hӋsӧi quҧthӇOLQKFKLÿ ӧc thӱvӟi vi sinh vұ t kiӇ Pÿ ӏ QKWUrQP{LWUѭ ӡng thҥ ch LB, bҵ QJSKѭѫQJSKiS ө c lӛ KӃ t quҧ[iFÿ ӏ QKÿѭ ӧc trình bày ӣbҧ ng 3.5 7B̫ ng Mү u thӱ 3.5 Kh̫QăQJNKiQJNKX ̱n cͯa h͏sͫi qu̫th͋linh chi Vi sinh vұ t Ĉѭ ӡng kính Ĉѭ ӡng kính Ĉѭ ӡng kính vơ kiӇ Pÿ ӏ nh lӛthҥch vịng vơ khuҭn d (mm) khuҭ n D ±d (mm) D (mm) Dӏ ch chiӃ t Bacillus hӋsӧi subtilis Dӏ ch chiӃ t Bacillus quҧthӇ subtilis Dӏ ch chiӃ t Escherichia hӋsӧi coli Dӏ ch chiӃ t Escherichia quҧthӇ coli 10 25,67 15,67 10 20,33 10,33 10 24,33 14,33 10 19,00 9,00 KӃ t quҧcho thҩ y dӏ ch chiӃ t tӯhӋsӧi nҩ m linh chi bҵ ng cӗn có khҧQăQJ ӭc chӃvi khuҭ n mà cөthӇӣÿk\ Bacillus subtilis Escherichia coli KӃ t quҧphù hӧp vӟi nghiên cӭu Sadaf Quereshi cӝng sӵ(2010) Theo báo linh chi có khҧQăQJ ӭc chӃnhiӅ u loҥ i vi khuҭ n, nhiên khҧQăQJNKiQJNKX ҭ n lҥ i phөthuӝc YjROLQKFKLÿѭ ӧc chiӃ t xuҩ t tӯdung môi ĈL Ӆ XQj\ÿmÿѭ ӧc chӭng tӓqua nhiӅ u nghiên cӭu, $USLWD0*XSWH ÿmFKRWK ҩ y khҧQăQJNKiQJNKX ҭ n cӫa linh chi WURQJGXQJP{LDFHWRQFDRKѫQVRY ӟi methanol, WURQJÿL Ӆ u kiӋ n dung mơi aceton vịng vơ khuҭ n cӫ a Bacillus subtilis 16,5 mm, Escherichia coli 15,5 mm NKLÿyY ӟi dung mơi Methanol vịng vô khuҭ n cӫa Bacillus subtilis 10,5 mm, Escherichia coli 10,0 mm [30] 45 2 1 b a 15Hình 3.13 Kh̫QăQJNKiQJNKX ̱ n cͯ a h͏sͫi qu̫th͋ linh chi a Vi khu̱n Bacillus subtilis b Vi khu̱ n Escherichia coli D͓ ch chi͇ t qu̫th͋ D͓ ch chi͇ t h͏sͫi 3.4.5 K͇ t qu̫kh̫QăQJNKiQJR[\KyDF ͯa linh chi Các gӕ c tӵGRWKѭ ӡQJ OLrQTXDQÿ Ӄ n nhiӅ u bӋ QKQKѭW iӇ Xÿѭ ӡng, viêm khӟp, XQJWKѭOmRKyD«7URQJÿL Ӆ u trӏcác bӋ nh này, liӋ u pháp chӕng oxy hóa có tҫ m quan trӑng rҩ t lӟn Trong thӱnghiӋ PQj\FK~QJW{LÿmNK ҧ o sát khҧQăQJFK ӕng oxy hóa cӫa linh chi bҵ QJSKѭѫQJSKiS Reducing power dӵDWKHRFѫFK ӃkhӱFe3+ thành Fe2+ Ӆ uÿL có thӇthҩ y chuҭ n bӏdung dӏ FK ӇÿR ÿ ӝhҩ ÿp thөtrên máy UV Vis Khi nӗ QJÿ ӝcàng cao màu dung dӏ ch chuyӇ n sang màu xanh KӃ t quҧÿѭ ӧc thӇhiӋ n ӣbҧ ng 3.6 bҧ ng 3.7 8B̫ ng 3.6 M̵ Wÿ ͡quang ch͑s͙ch͙ng oxy hóa cͯ a d͓ ch chi͇ t h͏sͫi Dӏ ch chiӃ t 0,2 0,4 0,6 0,8 Mұ Wÿ ӝquang 0,542 0,727 0,749 0,791 0,81 AAI 1,00 1,34 1,38 1,46 1.49 ... nҩ m linh chi 1.1.6 Hoҥ t chҩ t sinh hӑ c cӫ a nҩ m linh chi 10 1.2 Quy trình nhân giӕng nuôi trӗ ng nҩ m linh chi 15 1.3 Tình hình nghiên cӭXWURQJQѭ ӟFYjQJRjLQѭ ӟc 18 1.3.1 Tình hình nghiên. .. hӋsӧi quҧth? ?linh chi 45 3.14 Dung dӏ FKÿiQKJLiNK ҧQăQJNKiQJR[KyDF ӫa linh chi 46 3.15 Vòng thӫy phân CMC cӫa linh chi 47 MӢĈҪU Tính cҩ p thiӃ t cӫDÿ Ӆtài Nҩ m linh chi (Ganoderma lucidum) ... nhà khoa hӑ c nghiên cӭu vӅcác hoҥ t tính sinh hӑc cӫa linh chi ĈӅtài nghiên cӭu tác dөng chӕ ng oxy hóa in vitro in vivo cӫa mӝt sӕloҥ i nҩ m linh chi (Ganoderma lucidum) nҩ m vân chi (Trametes