Khảo sát chất chống oxi hóa từ cây rau ngò ôm

Bài viết này trình bày về rau ngò ôm (Limnophila aromatica) sau khi phơi khô, xay mịn được đem đi tách béo bằng hexan và sau đó trích li chất chống oxi hóa bằng dung môi methanol. Thời gian tách béo và thời gian trích li được thực hiện tại 1giờ, 2 giờ, 3giờ. Các dịch chiết thô được xác định hiệu suất trích li và hàm lượng phenol tổng (TPC) bằng phương pháp Folin Ciocalteu. Mời các bạn cùng tham khảo!

Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, Số 39B, 2019 KHẢO SÁT CHẤT CHỐNG OXI HĨA TỪ CÂY RAU NGỊ ÔM ĐỖ QUÝ DIỄM, NGÔ DUY TÂM Khoa Công Nghệ Hóa Học, Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, doquydiem@iuh.edu.vn Tóm tắt Rau ngị ơm (Limnophila aromatica) sau phơi khô, xay mịn đem tách béo hexan sau trích li chất chống oxi hóa dung mơi methanol Thời gian tách béo thời gian trích li thực 1giờ, giờ, 3giờ Các dịch chiết thô xác định hiệu suất trích li hàm lượng phenol tổng (TPC) phương pháp Folin Ciocalteu Kết cho thấy thời gian tách béo ảnh hưởng lên hiệu suất trích li không ảnh hưởng lên hàm lượng TPC Trong thời gian trích lâu, hiệu suất trích li TPC cao Mẫu M3-3, có thời gian tách béo trích li 3h, cho hiệu suất trích li (8,51%) hàm lượng TPC (44,25 mg GAE/ g rau) cao Hoạt tính chống oxi hóa mẫu M3-3 xác định phương pháp DPPH Giá trị M3-3 49,58 g/mL Từ kết cho thấy rau ngị ơm nguồn gốc cho việc khai thác chất chống oxi hóa từ tự nhiên Từ khóa Chất chống oxi hóa, DPPH, rau ngị ôm, thời gian trích li, thời gian tách béo ANALYSING ANTIOXIDANTS FROM LIMNOPHILA AROMATICA Abstract After drying, Limnophila aromatica was defatted with hexane and then extracted antioxidants with methanol solvent Time for fat removal and extraction were carried out at 1h, 2h, 3h The crude extracts were calculated a yield and were determined total phenolic content (TPC) by Folin Ciocalteu method The results showed that the time of fat removal only affects to yield and no effect to TPC While, the longer extraction time, the higher TPC The M3-3, deffated and extracted for hours, has highest yield (8,51%) and highest TPC (44,25 mg GAE/g sample) Antioxidant activity of M3-3 was determined by DPPH method of M3-3 is 49,58 g/mL These results show that Limnophila aromatica is as a source of natural antioxidants Keywords antioxidants, DPPH, Limnophila aromatic, extraction time, defatted time GIỚI THIỆU Rau ngị ơm trồng nước Đơng Nam Á Rau ngị ơm có tên khoa học Limnophila aromatic (Lamk.) Merr (syn Limnophila grastissima Blume), thuộc họ Scrophulariaceae Rau ngị ơm sử dụng phổ biến thực phẩm làm tăng thêm hương vị cho thức ăn Ngoài dân gian, người ta cịn sử dụng rau ngị ơm dùng để chữa loại bệnh như: sỏi thận, sởi, cảm ho, sổ mũi, lợi tiểu, đau bụng, …[1] Tuy nhiên, thực tế có nghiên cứu loại rau để làm rõ vấn đề Thành phần tinh dầu rau ngị ơm nghiên cứu báo cáo có hoạt tính chống oxy hóa cao [2] Ngồi nghiên cứu khác nhóm dùng rau ngị ơm để trích ly tinh bột Kết cho thấy nguồn nguyên liệu tốt cho tổng hợp polymer phân hủy sinh học [3] Chất chống oxi hóa biết chất có tác dụng ngăn chặn q trình oxy hóa từ ngăn chặn bệnh tim mạch, ung thư, nhiễm trùng,… Hợp chất phenol thực vật xem nguồn chất chống oxi hóa tự nhiên Chất chống oxi hóa nguồn gốc thực vật biết có hoạt tính dược lý cao, biến chứng độc tính thấp Trong chất chống oxi hóa tổng hợp có nhiều khả gây tác dụng phụ sử dụng thuốc [4] Theo khảo sát năm 2010 , nửa thuốc chống oxi hóa thị trường có nguồn gốc từ tự nhiên Với tầm quan trọng chất chống oxi hóa, ngày việc tìm nguồn tự nhiên chứa chất chống oxi hóa lĩnh vực tập chung nghiên cứu Để góp phần vào việc tìm kiếm nguồn chất chống oxi hóa tự nhiên, rau ngị ơm sử dụng để nghiên cứu khả chống oxi hóa Trong nghiên cứu khảo sát ảnh hưởng thời gian tách béo dung môi hexan thời gian trích li tới hiệu suất trích li hàm lượng phenol tổng khảo sát © 2019 Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh KHẢO SÁT CHẤT CHỐNG OXI HÓA TỪ CÂY RAU NGỊ ƠM 51 THỰC NGHIỆM 2.1 Hóa chất thiết bị Rau ngị ơm mua từ chợ địa phương quận Gò Vấp Thuốc thử Folin-Ciocalteu (FC), acid gallic 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) mua từ hãng Aldrich Sigma Na2CO3 khan, NaNO3, NaOH, methanol loại dùng cho phân tích sắc kí lỏng, n-Hexane (95%), ethanol (95%) ete dầu hỏa mua từ cơng ty hóa chất Việt Nam Thiết bị dùng phân tích mẫu máy quang phổ (Thermo scientific genesis 20) Ngồi mẫu cịn phân tích thiết bị sắc kí khí ghép phổ Trace GC Ultra (Thermo), MS (ISQ – single quadrupole MS) 2.2 Chuẩn bị mẫu Rau ngị ơm sau mua từ chợ rửa nhiều lần với nước, loại bỏ phần rễ bị hư, bị sâu Sau rau ngị ơm mang phơi gió có ánh sáng nhẹ (tránh ánh nắng trực tiếp) khoảng tuần Rau khô thu lại xay mịn cối xay sinh tố để bột rau Bột rau ngị ơm trước trích li chất chống oxi hóa tách béo (tách lipid) với dung mơi ete dầu hỏa theo phương pháp lắc Q trình tách béo thực sau, lấy 10 g bột rau 100 mL dung môi ete dầu hỏa cho vào bình tam giác 500 mL Sau hỗn hợp bình tam giác đặt vào máy lắc trình tách béo thực vận tốc 135 vòng/phút, thời gian khảo sát giờ, giờ, Kết thúc trình tách lipid, hỗn hợp mang lọc chân không Phần lỏng sau lọc đem tách dung môi tách máy cô quay chân không chất rắn đem cân để tính hàm lượng lipid tự Trong đó, phần chất rắn sau lọc sấy khô tủ sấy nhiệt độ 50 oC, thời gian thu bột rau ngị ơm tách lipid (M) Bột mẫu M cất giữ nơi mát khơng có ánh sáng để dùng cho q trình thử nghiệm khác Tóm lại, sau tách lipid sấy ta có mẫu bột rau: M1 (1 tách lipid), M2 (2 tách lipid), M3 (3 tách lipid) 2.3 Trích li chất chống oxi hóa Q trình trích li chất chống oxi hóa rau ngị ơm thực hiện: lấy g bột rau tách béo cho vào bình tam giác 250 mL có chứa 100 mL methanol lắc hỗn hợp giờ, giờ, với tốc độ máy lắc 135 vòng/phút, nhiệt độ phịng Sau đó, hỗn hợp đem lọc chân không Chất rắn loại bỏ, dịch chiết đem cô quay chân không để loại bỏ dung môi Sau tách dung môi thu cao chiết chất chống oxi hóa thơ Cao chất chống oxi hóa thơ sấy khơ tủ sấy nhiệt độ 60 , 10 Sau sấy, chất chống oxi hóa cân để tính hiệu suất trích li Cao khơ tiếp tục phân tích để biết hàm lượng phenol tổng (TPC) hoạt tính chống oxi hóa Các cao khô mang khảo sát bao gồm mẫu M1-1, M1-2, M1-3, M2-1, M2-2, M2-3, M3-1, M3-2, M3-3 Kí tự “M” biểu thị cho mẫu rau ngị ơm mịn tách béo, chữ số thứ biểu thị cho thời gian tách béo, chữ số thứ biểu thị cho thời gian trích li chất chống oxi hóa 2.4 Xác định hàm lượng phenol tổng Hàm lượng phenol tổng (TPC) dịch chiết xác định phương pháp Folin Ciocalteu tham khảo từ Do cộng [5] Phương pháp thực sau: Cao chiết khơ (0,2g) hịa tan 20 mL methanol Sau lấy 0,5 mL dịch chiết cho vào bình định mức 10 mL dùng nước để định mức lên 10 mL Folin-Ciocalteu pha loãng với nước cất theo tỉ lệ 1:2 Mẫu tiến hành đo sau: Cho 0,1mL FC loãng vào 1ml dịch chiết lỗng, sau để hỗn hợp ổn định 20 phút nhiệt độ phòng Thêm vào hỗn hợp 1ml dd Na 2CO3 3,9ml H2O cho hỗn hợp dung dịch đủ 6ml Hỗn hợp sau ổn định 20 phút nhiệt độ phòng hỗn hợp có màu xanh dương Hỗn hợp đo độ hấp thu quang máy quang phổ UV bước song 760 nm Đường chuẩn xây dựng chất chuẩn acid gallic có nồng độ 10, 20, 30, 40, 50 µg/mL Hàm lượng TPC biễu diễn mg acid Gallic có gam rau tách béo (mg GAE/g rau) 2.5 Xác định hoạt tính chống oxi hóa phương pháp DPPH Hoạt tính chống oxi hóa dịch chiết xác định phương pháp DPPH Do cộng [5] Phương pháp thực sau: Dung dịch DPPH chuẩn bị lần đo cách hòa tan mg DPPH 50 mL methanol (khoảng 0,3 mM) Cao chiết hịa tan pha lỗng methanol phương pháp xác định hàm lượng phenol tổng bên thành dung dịch có nồng độ 50, © 2019 Trường Đại học Công nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh 52 KHẢO SÁT CHẤT CHỐNG OXI HĨA TỪ CÂY RAU NGỊ ƠM 100, 150, 200, 250 g/mL Sau lấy 2,5 mL dịch chiết trộn lẫn với 2,5 mL dung dịch DPPH Hỗn hợp ổn định bóng tối nhiệt độ phịng 20 phút Hỗn hợp sau ổn định đem đo độ hấp thu quang bước sóng 517 nm Phần trăm ức chế gốc tự tính theo cơng thức sau: (*) Trong A1: độ hấp thu dung dịch DPPH khơng có dịch chiết; A2: độ hấp thu dịch chiết trộn với dung dịch DPPH solution Giá trị IC50 định nghĩa lượng chất chống oxi hóa cần để ức chế 50% DPPH 2.6 Xác định thành phần hóa học phương pháp sắc kí khí khối phổ (GC/MS) Để xác định thành phần hóa học rau ngị ơm Cao chiết thơ rau ngị ơm phân tách thành hai phân đoạn theo phương pháp phân tách cột sắc kí rắn - lỏng Q trình phân tách tiến hành sau: 0,05 g cao chiết thơ đưa vào cột sắc kí có đường kính 0,5 mm, chiều cao 10 mm chứa g silica gel Sau cho mL hexane qua cột, mL methanol Tương ứng ta thu phân đoạn mL hexane mL methanol Các phân đoạn đem phân tích TPC hoạt tính chống oxi hóa Phân đoạn methanol dùng để xác định thành phần hóa học máy sắc kí khí khối phổ Trace GC Ultra (Thermo), MS (ISQ – single quadrupole MS) Chương trình sau: nhiệt độ injector cài đặt 280oC, tỉ lệ dòng (split ratio) 50:1 nhiệt độ transfer line 280 oC; nhiệt độ ion source: 200 oC; nhiệt độ oven cao 350 oC, vận tốc gia nhiệt 10oC/phút; mass range: 29-450 amu, dwell or scan times: 0.2s, EI; vận tốc khí He 1.2ml/min KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Khảo sát hiệu suất trích li (HSTL) chất chống oxi hóa theo thời gian tách béo thời gian trích li ng Kết qu hàm lượng phenol tổng (TPC) mẫu rau ngị ơm Tên mẫu M 1-1 M 1-2 M 1-3 M 2-1 M 2-2 M 2-3 M 3-1 M 3-2 M 3-3 Thời gian tách béo, h 1 2 3 Thời gian trích li chất phenol, h 3 Hiệu suất trích li, % 6.60 7.20 7.67 6.67 7.84 8.44 7.07 7.75 8.51 TPC (mg GAE/g rau) 40.41 41.98 44.20 40.12 42.97 44.25 40.25 42.98 44.25 Theo Stalikas cộng [6] hiệu trích li phụ thuộc vào chất mẫu, phương pháp trích li, kích thước mẫu, dung mơi sử dụng trích li có mặt chất cản trở trích li có mẫu Dung môi Ethanol methanol biết hai dung mơi trích li hợp chất phenol hiệu độc hại Cho nên nghiên cứu này, ethanol sử dụng để trích li chất chống oxi hóa có rau ngị ơm Hiệu suất trích li (HSTL) chất chống oxi hóa rau ngị ôm khảo sát nhiệt độ phòng, pH không đổi thay đổi thời gian tách béo thời gian trích li chất chống oxi hóa Rau ngị ơm khơ tách chất béo trước tiến hành trích li chất chống oxi hóa Thời gian tách chất béo thực giờ, giờ, Ứng với mẫu rau ngị ơm tách béo lại khảo sát thời gian trích li chất chống oxi hóa thời gian 1giờ, giờ, Cao chiết thơ xác định hiệu suất trích li hàm lượng phenol tổng Hình 1, hình bảng biểu diễn hiệu suất trích li chất phenolic hàm lượng phenol tổng (TPC) © 2019 Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh Hiệu suất trích li, % KHẢO SÁT CHẤT CHỐNG OXI HĨA TỪ CÂY RAU NGỊ ƠM 9.00 8.00 7.00 6.00 5.00 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 6.60 7.20 7.84 7.67 6.67 8.44 7.07 7.75 53 8.51 M 1-1 M 1-2 M 1-3 M 2-1 M 2-2 M 2-3 M 3-1 M 3-2 M 3-3 Tên mẫu nh Thời gian tách béo thời gian trích li nh hưởng đến hiệu suất trích li chất chống oxi hóa Theo hình 1.1, thời gian tách béo thời gian trích li chất chống oxi hóa có ảnh hưởng nhẹ tới hiệu suất trích li Kết cho thấy trích li, HSTL tăng thời gian tách béo tăng (M1-1>M21>M3-1) Hiệu suất trích li mẫu M1-1 (6.6 %) có thời gian tách béo nhỏ mẫu M2-1 (6.67 %) có thời gian tách béo giờ, HSTL mẫu M2-1 nhỏ mẫu M3-1 (7.07 %) có thời gian tách béo Tương tự, HSTL mẫu có thời gian trích li tăng dần theo thời gian tách béo Số liệu bảng hình cịn cho thấy tăng thời gian trích li với methanol từ đến hiệu suất trích li tăng nhẹ Cụ thể ứng với mẫu có thời gian tách béo mẫu có thời gian trích li M1-3 có hiệu suất trích li cao (7.07 %) Ứng với mẫu có thời gian tách béo mẫu có thời gian trích li M2-3 (8.44 %) cao Trong mẫu có thời gian tách béo cho thấy M3-3 (8.51 %) có thời gian trích li cao Tóm lại khảo sát thời gian tách béo thời gian trích li cho kết tăng thời gian tách béo thời gian trích li từ đến HSTL tăng Kết thấy tương tự trích li chất chống oxi hóa polyphenol từ móng tay (henna) tác giả Tan cộng [7] Điều giải thích ứng với thời gian tách béo cao, tế bào rau phá vỡ nhiều rau tiếp tục trích li với methanol chất rau dễ dàng tan vào dung môi methanol Ứng với kết khảo sát nghiên cứu cho thấy mẫu M3-3 có HSTL cao ứng với thời gian trích li tách béo giờ, thời gian trích li 3.2 Khảo sát hàm lượng phenol tổng (TPC) theo thời gian tách béo thời gian trích li Khảo sát ảnh hưởng thời gian tách béo thời gian trích li đến hàm lượng TPC thực khoảng thời gian tách béo thay đổi từ đến thời gian trích li thay đổi từ đến Hàm lượng TPC xác định phương pháp McDonald có chỉnh sửa trình bày phần 2.4 Đường chuẩn cho phương pháp xác định TPC dùng chất chuẩn acid Gallic có phương trình đường chuẩn y = 80.72x – 5.88 tương ứng với bình phương cực tiểu R2 = 0.9834 Trong x độ hấp thụ quang phổ, y nồng độ gallic acid (g/mL) Hàm lượng TPC biểu diễn tương đương miligam acid Gallic gam rau ngị ơm khơ (mg GAE/g rau) Kết TPC hình cho thấy thời gian tách béo gần khơng ảnh hưởng đến hàm lượng TPC Các mẫu có thời gian trích li 1giờ, thời gian tách béo khác có hàm lượng TPC gần giống Ví dụ, hàm lượng TPC M1-1 40.10 mg GAE/g rau, TPC M2-1 40,12 mg GAE/g rau M3-1 40,25 mg GAE/g rau Trong đó, hàm lượng TPC tăng đáng kể tăng thời gian trích li hợp chất chống oxi hóa Ứng với thời gian tách béo giờ, hàm lượng TPC tăng dần theo thời gian trích li M1-1 (40.10 mg GAE/g rau) > M1-2 (41.98 mg GAE/g rau) > M1-3 (44.20 mg GAE/g rau) Quy luật thấy với mẫu có thời gian tách béo Tăng thời gian trích li dẫn tới hàm lượng TPC tăng cịn gặp khảo sát thời gian trích li ảnh hưởng tới hàm lượng TPC Chew cộng [8] Tóm lại, sử dụng hexane tách béo dùng methanol trích li chất chống oxi hóa rau ngị ơm, ta thấy tăng thời gian tách béo thời gian trích li HSTL tăng Trong đó, hàm lượng TPC tăng thời gian trích li tăng gần khơng phụ thuộc vào thời gian tách béo Điều giải thích rằng: © 2019 Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh 54 KHẢO SÁT CHẤT CHỐNG OXI HĨA TỪ CÂY RAU NGỊ ƠM chất chất phenolic (chẳng hạn protein) tan vào dung môi methanol làm cho HSTL tăng Điều giải thích giống với Zieliński & Kozłowska [9] TPC, mg GAE/g rau 45 44.25 44.2 44 41.98 42 40 42.98 42.97 43 41 44.25 40.25 40.12 40.1 39 38 M1-1 M1-2 M1-3 M2-1 M2-2 M2-3 M3-1 M3-2 M3-3 Tên mẫu nh Thời gian tách béo thời gian trích li nh hưởng đến hàm lượng TPC cao chiết thơ % ức chế 3.3 Xác định hoạt tính chống oxi hóa phương pháp DPPH 100 90 80 70 60 50 40 30 50 100 150 200 250 300 Nồng độ mẫu, µg/mL Hình Kh qt gốc tự dịch chiết rau ngị ơm Gốc gốc tự hữu bền có hấp thu quang phổ bước sóng 410 nm Khi gốc tự nhận điện tử gốc tự khác tạo đổi màu trực quan đáng ý từ màu tím sang màu vàng (hấp thu quang phổ bước sóng 517 nm) Hoạt tính chống oxi hóa M3-3 xác định phương pháp DPPH Hình kết hoạt tính chống oxi hóa rau ngị ơm khảo sát theo số nồng độ mẫu (50, 100, 150, 200, 250 g/mL) Khả quét gốc tự dịch chiết rau ngị ơm tăng nồng độ rau tăng Nhưng khoảng nồng độ nhỏ (50 - 150 g/mL) khả quét gốc tự tăng mạnh, nồng độ cao (150 - 250 g/mL) hoạt tính chống oxi hóa tăng chậm Kết giống kết khảo sát hoạt tính chống oxi hóa vài Asadujjaman [10] Giá trị IC50 chất biểu diễn lượng chất chống oxi hóa để quét 50 % gốc tự nội suy từ phân tích tuyến tính khảo sát % ức chế với nồng độ mẫu rau phương pháp DPPH Theo Liu [11], giá trị thấp, hoạt tính chống oxi hóa cao Giá trị rau ngị ơm 49,58 g/mL Giá trị biểu thị rau ngị ơm có hoạt tính chống oxi hóa cao © 2019 Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh KHẢO SÁT CHẤT CHỐNG OXI HĨA TỪ CÂY RAU NGỊ ƠM 55 3.4 Xác định thành phần hóa học sắc kí khí khối phổ (GC/MS) ng Kết qu GC phân tích thành phần hóa học dịch chiết rau ngị ơm STT 7 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 Tên 4- isopropenyl cyclohexanone Borneol (2,7,7-Trimethyl bicyclo[2.2.1] heptan-2-ol) 2-(4-methyl-3-xyclohexene-1-yl)-2-propanol Trans-capan, 4,5-epoxi Tricyclo[4.2.1.1(2,5)] decan-9-ol, stereoisomer (S)-(-)-(4- isopropenyl-1-cyclohexenyl)methanol trans-shisool (4- isopropenyl cyclohexenyl)methanol p-Menth-1(7)-en-9-ol{2-(4-methylenecyclohexyl)-1-propanol} 5-isopropenyl-2-methylcyclohexyl acetate Cyclopentane, 1-acetoxymethyl-3-isopropenyl-2-methyl Caryophyllene {Bicyclo[7.2.0]undec-4-ene,4,11,11-trimethyl-8-methylene} 1-cyclohexene-1-methanol,4-(1-methylethenyl)-,acetate α-Caryophyllene {1,4,8-Cycloundecatriene 2,6,6,7-tetramethyl} 2,4-ditert-butylphenol 1,6,10-Dodecatrien-3-ol,3,7,11-trimethyl 2(4H)-benzofuranonne, 5,6,7,7α-tetrahydro-4,4,7α-trimethyl 3-Cyclohexen-1-carboxaldehyde,3,4-dimethyl τ-cadinol Caryophyllene oxide Humulene oxide 2-cyclohenen-1-one, 4-(3-hydroxy-1-butenyl)-3,5,5-trimethyl 6-(3-hydroxy-but-1-enyl)-1,5,5-trimethyl-7-oxabicyclo[4.1.0]heptan-2-ol 3-buten-2-one, 4-(4-hydroxy-2,2,6-trimethyl-7-oxabicyclo[4.1.0]hept-1-yl Octadecane Eicosane neophytadiene {2,6,10-trimethyl, 14-ethylene-14-pentadecne} 3,7,11,115-tetramethyl-2-hexadecen-1-ol Benzenepropanoic acid, 3,5-bis(1,1-dimethylethyl)-4-hydroxy-methyl ester Phytol Heptadecanoic acid, 16-methyl, methylester 3(3-hydroxy-cyclo[2,2,1]-hept-2-ylIdene)-2-methyl-propIonic acid methyl ester 4,14-dimethyl-11-isopropyltricyclo[7.5.0.0(10,14)]tetradec-4-en-8-one Phenol, 2-(3,7-dimethylocta-2.6-dienyl) 2-[(2E)-3,7-dimethyl-2,6octadienyl]phenol 1,2-benzendicarboxylic acid, diisooctyl ester Campesterol Stigmasterol τ-sitosterol Urs-12-en-28-onic acid, 3β-hdroxy, methylester CTPT C9H14O C10H18O C10H18O C10H16O C10H16O C10H16O C10H18O C10H18O C12H20O2 C12H20O2 C15H24 C12H18O2 C15H24 C14H22O C15H26O C11H16O2 C9H14O C15H26O C15H24O C15H24O C13H20O2 C13H22O3 C13H22O3 C18H38 C20H42 C20H38 C20H40O C18H28O3 C20H40O C18H38O2 C12H18O3 C19H30O C16H22O C24H38O4 C28H48O C29H48O C29H50O C31H50O3 Cao chiết thô M3-3 sau xử lý sơ cột sắc kí (0.5x10mm, 1g silica gel) để loại bỏ bớt thành phần béo không phân cực, phân đoạn methanol đem phân tích sắc kí khí khối phổ Hình sắc kí khí đồ cao chiết Bảng thành phần dịch chiết rau ngị ôm Kết có so sánh kết GC/MS với thư viện sắc kí đồ Từ kết bảng cho thấy rằng, mặc dùng dịch chiết thơ phân tách cột sắc kí để loại bỏ bớt chất béo kết GC/MS cho thấy cịn có chất béo như: Octadecane; Eicosane; neophytadiene (2,6,10-trimethyl, 14-ethylene-14-pentadecane); 3,7,11,115-tetramethyl-2-hexadecen-1-ol; … © 2019 Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh 56 KHẢO SÁT CHẤT CHỐNG OXI HĨA TỪ CÂY RAU NGỊ ƠM Đồng thời bảng khơng có flavonoid, hợp chất phenol có dịch chiết chủ yếu phenol đơn giản Điều giải thích phân tích dịch chiết thơ gồm nhiều chất, chất dịch chiết chưa hoàn toàn phân tách riêng biệt Chính mà sắc kí đồ chưa rõ Để có kết rõ hơn, cần có nghiên cứu sâu dùng sắc kí cột để phân tách chất chống oxi hóa RT: 3.51 - 19.11 SM: 3B NL: 4.52E8 TIC F: {0,0} + c EI Full ms [29.00-450.00] MS NGO_OM_meth anol 6.45 100 95 90 85 80 75 70 4.26 65 60 55 11.03 5.12 50 45 40 35 7.06 30 4.19 25 11.56 6.72 8.92 4.97 20 7.52 3.78 4.64 15 8.10 5.31 5.48 8.60 9.51 9.73 10 10.61 12.26 11 Time (min) 14.64 12.37 12 17.36 12.44 13.06 13.93 14.52 13 14 14.86 15.11 15.39 16.30 15 16 17.19 17 18.29 18.45 18.17 18 19 Hình Sắc kí khí đồ phân đoạn methanol KẾT LUẬN Quá trình nghiên cứu bước đầu để xác định sơ nguồn chứa chất chống oxi hóa tự nhiên Trong nghiên cứu khảo sát sơ ảnh hưởng thời gian tách béo thời gian trích li chất chống oxi hóa Q trình tách béo thực trước q trình trích li chất chống oxi hóa Thời gian tách béo trích li khảo sát 1giờ, 2giờ, Kết cho thấy hai thời gian tách béo trích li ảnh hưởng đến hiệu suất trích li: thời gian lâu, hiệu suất trích li cao Mẫu M3-3 có thời gian tách béo trích li 3h, có hiệu suất trích li cao Khi xác định hàm lượng phenol tổng, kết cho thấy thời gian tách béo gần không ảnh hưởng Trong đó, hàm lượng phenol tổng dịch chiết tăng theo thời gian trích li Mẫu M3-3 lại lần có kết TPC cao Phương pháp DPPH sử dụng cho mẫu M3-3 nhằm khẳng định hoạt tính chống oxi hóa dịch chiết rau ngị ôm Tại nồng độ dịch chiết thấp (50-150 , hoạt tính chống oxi hóa thể qua khả quét gốc tự tăng nhanh Nhưng nồng độ cao (150-250 , hoạt tính chống oxi hóa tăng chậm Giá trị 49,58 g/mL Từ kết cho thấy rau ngị ơm nguồn tự nhiên chứa chất chống oxi hóa Hứa hẹn cho việc nghiên cứu sâu để ứng dụng thực phẩm, mỹ phẩm dược phẩm Việc xác định sơ chất hóa học rau ngị ơm tiến hành sắc kí khí khối phổ Kết cho thấy chất phenol có rau chủ yếu chất phenol đơn giản Để có kết tốt nghiên cứu thành phần chất hóa học có rau ngị ơm cần có nghiên sâu © 2019 Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh KHẢO SÁT CHẤT CHỐNG OXI HÓA TỪ CÂY RAU NGỊ ƠM 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO T.L Do, Cây thuốc Việt Nam Vietnam: Medicine Publishing House, 1999 Mahidol., Antioxidant activity of Limnophila aromatica Merr., 2004 C Wijaya, Q.D Do, Y.H Ju, S.P Santoso, J.N Putro, L Laysandra, F.E Soetaredjo, and S Ismadji, Isolation and characterization of starch from Limnophila aromatica Heliyon 5(5): p e01622, 2019 B.M Naveena, A.R Sen, S Vaithiyanathan, Y Babji, and N Kondaiah, Comparative efficacy of pomegranate juice, pomegranate rind powder extract and BHT as antioxidants in cooked chicken patties Meat Science 80(4): p 1304-1308, 2008 Q.D Do, A.E Angkawijaya, P.L Tran-Nguyen, L.H Huynh, F.E Soetaredjo, S Ismadji, and Y.-H Ju, Effect of extraction solvent on total phenol content, total flavonoid content, and antioxidant activity of Limnophila aromatica Journal of Food and Drug Analysis 22(3): p 296-302, 2014 C.D Stalikas, Extraction, separation, and detection methods for phenolic acids and flavonoids Journal of Separation Science 30(18): p 3268-3295, 2007 M.C Tan, Tan, C P., Ho, C W., Effects of extraction solvent system, time and temperature on total phenolic content of henna (Lawsonia inermis) stems International Food Research Journal 20(6): p 3117-3123, 2013 K.K Chew, M Z Khoo, S Y Ng, Y Y Thoo, W M Wan Aida, and C W Ho., Effect of ethanol concentration, extraction time and extraction temperature on the recovery of phenolic compounds and antioxidant capacity of Orthosiphon stamineus extracts International Food Research Journal p 1427-1435, 2011 H Zieliński and H Kozłowska, Antioxidant Activity and Total Phenolics in Selected Cereal Grains and Their Different Morphological Fractions Journal of Agricultural and Food Chemistry 48(6): p 2008-2016, 2000 10 M Asadujjaman, Aslam Hossain, Md., and Utpal Kumar Karmakar., Assessment of DPPH free radical scavenging activity of some medicinal plants PharmacologyOnline p 161 - 165, 2013 11 S.-C Liu, J-T Lin, C-K Wang, and H-Y and Yang, D-J Chen., Antioxidant properties of various solvent extracts from lychee (Litchi chinenesis Sonn.) flowers Food Chemistry p 577-581, 2009 Ngày nhận bài: 30/04/2019 Ngày chấp nhận đăng: 10/06/2019 © 2019 Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh ... li chất chống oxi hóa có rau ngị ơm Hiệu suất trích li (HSTL) chất chống oxi hóa rau ngị ơm khảo sát nhiệt độ phịng, pH khơng đổi thay đổi thời gian tách béo thời gian trích li chất chống oxi hóa. .. chứa chất chống oxi hóa tự nhiên Trong nghiên cứu khảo sát sơ ảnh hưởng thời gian tách béo thời gian trích li chất chống oxi hóa Q trình tách béo thực trước q trình trích li chất chống oxi hóa. .. hóa Rau ngị ơm khơ tách chất béo trước tiến hành trích li chất chống oxi hóa Thời gian tách chất béo thực giờ, giờ, Ứng với mẫu rau ngị ơm tách béo lại khảo sát thời gian trích li chất chống oxi