Thực trạng chăn nuôi và một số đặc điểm dịch tễ, khả năng đáp ứng miễn dịch của vacxin H5N1 phòng bệnh cúm gia cầm tại Thái Nguyên

Thực trạng chăn nuôi và một số đặc điểm dịch tễ, khả năng đáp ứng miễn dịch của vacxin H5N1 phòng bệnh cúm gia cầm tại Thái Nguyên

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM

- -

NGUYỄN THẾ TĨNH

THỰC TRẠNG CHĂN NUÔI VÀ MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA VACCIN H5N1 PHÕNG

BỆNH CÖM GIA CẦM TẠI THÁI NGUYÊN

LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP

Thái Nguyên, năm 2008

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM

LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP

Hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN VĂN QUANG TS HOÀNG VĂN DŨNG

Thái Nguyên, năm 2008

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan rằng đây là công trình nghiên cứu do tôi trực tiếp làm dưới sự hướng dẫn của Tiến sỹ Nguyễn Văn Quang và Tiến sỹ Hoàn Văn Dũng Các số liệu và kết quả trình bầy trong luận văn này là hoàn toàn trung thực, được rút ra từ tình hình thực tế hiện nay tại tỉnh Thái Nguyên và chưa hề được sử dụng để bảo vệ một học vị nào Mọi sự giúp đỡ cho việc hoàn thành luận văn này đều đã được cảm ơn Các thông tin và tài liệu trình bầy trong luận văn này đều được chỉ rõ nguồn gốc

Tác giả

Nguyễn Thế Tĩnh

LỜI CẢM ƠN

Sau thời gian dài học tập và nghiên cứu, với sự nỗ lực của bản thân cùng với sự hướng dẫn và giúp đỡ quý báu của các Thầy cô giáo, các bạn bè đồng nghiệp, đến nay đề tài nghiên cứu của tôi đã hoàn thành Nhân dịp này, tôi xin bày tỏ lòng kính trọng sâu sắc và vô cùng biết ơn tới hai người Thầy hướng dẫn khoa học:

TS Nguyễn Văn Quang - Trưởng khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên

TS Hoàng Văn Dũng - Chi cục trưởng Chi cục Thú y tỉnh Thái Nguyên

Những người Thầy uyên bác, mẫu mực, tận tình và chu đáo đã luôn cổ vũ, động viên, hướng dẫn và chỉ bảo giúp tôi trong suốt quá trình nghiên cứu và hoàn thành luận văn này

Tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn tới tập thể Cán bộ Công chức của Chi cục Thú y tỉnh Thái Nguyên và Trạm Thú y huyện Định Hoá, Trạm Thú y Thành phố Thái Nguyên, Trạm Thú y huyện Phú Bình đã luôn cộng tác và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài nghiên cứu của mình

Xin trân trọng cảm ơn tập thể Cán bộ Công chức của Viện Thú y Quốc Gia và Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung Ương nơi tôi phân tích mẫu đã cộng tác giúp đỡ tôi trong quá trình nghiên cứu đề tài này

Xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới tập thể Cán bộ Công chức Khoa Chăn nuôi Thú y, Khoa Sau Đại Học - Trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên đã giúp đỡ tôi trong suốt thời gian học tập và nghiên cứu của mình

Tôi xin trân thành cảm ơn các bạn bè đồng nghiệp gần xa và những người thân trong gia đình đã cùng chung lo và luôn cổ vũ động viên tôi hoàn thành tốt công trình nghiên cứu khoa học này

Với những kiến thức ít ỏi của bản thân cùng với những yêu cầu rất lớn của đề tài, đặc biệt là nội dung nghiên cứu còn khá mới mẻ ở nước ta hiện nay nên trong quá trình nghiên cứu và những kết quả thu được của đề tài ắt hẳn còn nhiều thiếu sót Kính mong các Thầy cô giáo, các Nhà khoa học và các bạn bè đồng nghiệp tham gia đóng góp ý kiến để đề tài của tôi được hoàn chỉnh hơn

Tôi xin trân trọng cảm ơn !

Tác giả

Nguyễn Thế Tĩnh

CÁC CHỮ VIẾT TẮT

HPAI Hight Pathogenic Avian Influenza LPAI Low Pathogenic Avian Influenza n Số mẫu

< Nhỏ hơn > Lớn hơn

≥ Lớn hơn hoặc bằng ≤ Nhỏ hơn hoặc bằng (+) Dương tính

(%) Tỷ lệ phần trăm

cầm chưa tiêm phòng theo đàn và theo cá thể 72 Bảng 3.15 Tỷ lệ phát hiện kháng thể cúm H5 ở cá thể gia cầm theo

Bảng 3.16 Tỷ lệ phát hiện kháng thể cúm H5 ở đàn gia cầm chưa tiêm phòng theo phương thức chăn nuôi 75 Bảng 3.17 Tỷ lệ phát hiện virus cúm H5 trong mẫu swab của gia cầm

Bảng 3.18 Tỷ lệ phát hiện virus cúm H5 trong mẫu swab của gia cầm

Bảng 3.19 Tỷ lệ phát hiện kháng thể ở gà sau khi tiêm vaccin H5N1

Bảng 3.20 Hiệu giá kháng thể ở gà sau tiêm vaccin H5N1 21 ngày 83

Bảng 3.21 Khả năng bảo hộ đàn gà chống cúm của vaccin H5N1 84 Bảng 3.22 Tỷ lệ phát hiện kháng thể ở vịt sau khi tiêm vaccin H5N1

Bảng 3.23 Hiệu giá kháng thể ở vịt sau khi tiêm vaccin H5N1 21 ngày

87

Bảng 3.24 Khả năng bảo hộ đàn vịt chống cúm của vaccin H5N1 89

DANH MỤC CÁC ẢNH

CÔNG TRÌNH KHOA HỌC ĐƢỢC CÔNG BỐ CỦA ĐỀ TÀI

Tên công trình: “Lưu hành virus cúm và đáp ứng miễn dịch vacxin phòng cúm của gia cầm tỉnh Thái Nguyên”

Tên tác giả: Nguyễn Thế Tĩnh, Nguyễn Văn Quang, Hoàng Văn Dũng

Công trình đã được duyệt và sẽ đăng trên Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y số 4/2008 (có giấy xác nhận của Ban biên tập kèm theo)

MỞ ĐẦU

1 Tính cấp thiết của đề tài

Bệnh cúm gia cầm (Avian Influenza) là bệnh truyền nhiễm cực kỳ nguy hiểm do virus cúm type A, thuộc họ Orthomyxoviridae gây ra cho các loài lông vũ như gà, vịt, ngan, ngỗng, đà điểu, các loài chim, một số động vật có vú và con người Bệnh có khả năng lây lan rất nhanh và mạnh Thời gian ủ bệnh trung bình từ vài giờ đến 3 ngày Triệu chứng lâm sàng biểu hiện ở nhiều dạng khác nhau, có dạng tỷ lệ chết rất cao, có dạng không biểu hiện triệu chứng và tỷ lệ chết có thể lên đến 100% số gia cầm mắc bệnh (Horimoto, 2001) [43]

Những năm gần đây, bệnh liên tục bùng phát ở nhiều địa phương trong cả nước với nhiều quy mô khác nhau, trong đó có tỉnh Thái Nguyên, đã làm chết và tiêu hủy hàng triệu con gia cầm các loại, gây thiệt hại rất lớn về kinh tế và ảnh hưởng đến sự phát triển của ngành chăn nuôi gia cầm Đồng thời gây lo lắng cho cộng đồng về nguy cơ lây nhiễm dịch cúm A – H5N1 ở người Nhiều tác giả cho rằng, sự xuất hiện của bệnh có liên quan và ảnh hưởng rất lớn từ phương thức chăn nuôi và công tác vệ sinh thú y trong giết mổ và lưu thông gia cầm Để tìm hiểu tình hình thực tế ở địa phương nhằm góp phần nâng cao hiệu quả cho công tác phòng chống dịch cúm gia cầm,

chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu đề tài: “Thực trạng chăn nuôi và một số đặc điểm dịch tễ, khả năng đáp ứng miễn dịch của vacxin H5N1 phòng bệnh cúm gia cầm tại Thái Nguyên”

2 Mục tiêu của đề tài

- Đánh giá về thực trạng chăn nuôi, lưu thông giết mổ gia cầm ở một số huyện thành của tỉnh Thái Nguyên

- Tình hình dịch cúm gia cầm ở Thái Nguyên từ năm 2004 đến nay - Sự lưu hành virus cúm trên đàn gia cầm tại tỉnh Thái Nguyên

- Xác định hiệu giá kháng thể ở gà và vịt sau tiêm phòng vaccin H5N1 (Trung Quốc)

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài

- Đánh giá về thực trạng chăn nuôi, lưu thông và giết mổ gia cầm và ảnh hưởng của nó đến công tác phòng chống dịch cúm tại Thái Nguyên

- Bổ sung một số đặc điểm dịch tễ của bệnh cúm gia cầm

- Xác định tỷ lệ lưu hành virus cúm trên đàn gia cầm ở Thái Nguyên - Đánh giá đáp ứng miễn dịch sau khi tiêm vaccin phòng cúm H5N1 của gia cầm ở tỉnh Thái Nguyên

- Đề xuất những giải pháp thực tế nhằm hạn chế sự tái bùng phát và lây lan dịch bệnh cúm trên đàn gia cầm của tỉnh Thái Nguyên nói riêng cũng như các tỉnh miền núi phía Bắc nói chung

4 Địa điểm nghiên cứu

- Các cơ sở và hộ chăn nuôi gia cầm của tỉnh Thái Nguyên - Chi cục Thú y Thái Nguyên

- Viện Thú y Quốc gia

- Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung Ương

5 Thời gian nghiên cứu đề tài

- Từ tháng 1 năm 2007 đến ngày 15 tháng 2 năm 2008

Chương 1

TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 Tình hình chăn nuôi gia cầm ở Thái Nguyên và định hướng phát triển trong thời gian tới

1.1.1 Tình hình chăn nuôi gia cầm những năm qua

Theo niên giám của Cục thống kê Thái Nguyên thì năm 2005, toàn tỉnh có 180 xã, phường, thị trấn, 2.370 thôn xóm, khoảng 231.392 hộ và trên 80% số hộ có chăn nuôi gia cầm Tổng đàn gia cầm là 4.669.374 con, trong đó có 3.858.317 con gà, 811.057 con vịt, ngan và ngỗng Có khoảng 86 trang trại chăn nuôi gia cầm tập trung với quy mô từ 500 con gia cầm trở lên bằng 3,7%, trong đó có 20 trang trại chăn nuôi với quy mô từ 6.000 – 8.000 con gia cầm một lứa, còn lại hầu hết là chăn nuôi nhỏ lẻ, thủ công thuộc các nông hộ

Tại thời điểm ngày 1 tháng 8 năm 2007, tổng đàn gia cầm của tỉnh Thái Nguyên là 5.070.959 con, trong đó có 4.196.808 con gà chiếm 82,8%, 874.151 con vịt và ngan bằng 17,2% Có khoảng 231.403 hộ trong đó có khoảng 80% số hộ có chăn nuôi gia cầm và có khoảng trên 200 hộ và trang trại chăn nuôi với quy mô trên 500 con bằng khoảng 8,6%, chủ yếu ở Thành phố Thái Nguyên và các huyện phía Nam như Phổ Yên, Sông Công, Phú Bình và một số huyện khác như Phú Lương, Đồng Hỷ … Tổng đàn gia cầm lớn nhất là ở huyện Phú Bình với 1.099.022 con, tiếp theo là huyện Phổ Yên với 747.093 con và thấp nhất là ở Thị xã Sông Công với 268.670 con Riêng Thành phố Thái Nguyên có 538.218 con và huyện Định Hoá có 691.528 con Trong khi ở nước ta, tổng đàn gia cầm trước dịch cúm gia cầm cuối năm 2003 là 254,06 triệu con nhưng sang năm 2004, sau khi dịch cúm gia cầm xảy ra thì tổng đàn gia cầm đã giảm đi 14,23% và chỉ còn 218,15 triệu con Trong đó miền Nam giảm 25,69% và miền Bắc giảm 6,43% Trong khoảng 80% hộ

nông dân chăn nuôi gia cầm thì có 15% nuôi theo phương thức nuôi nhốt, 20% nuôi theo phương thức bán chăn thả và 65% nuôi theo phương thức chăn thả tự do (Hoàng Kim Giao và Nguyễn Thanh Sơn, 2005) [13]

1.1.2 Định hướng phát triển trong thời gian tới

Những năm qua, do ảnh hưởng của dịch cúm nên ngành chăn nuôi gia cầm ở Thái Nguyên được quan tâm hơn từ các ban ngành chức năng và chính quyền các cấp cũng như người chăn nuôi Những năm trước dịch cúm, ngành chăn nuôi gia cầm vẫn chủ yếu là nhỏ lẻ, thủ công và chăn thả tự do trong các nông hộ thì từ năm 2005 đến nay ngành chăn nuôi gia cầm đang chuyển dần sang chăn nuôi theo quy mô nuôi nhốt, mặc dù còn chậm nhưng cũng rất đáng khích lệ Theo kế hoạch phát triển chăn nuôi gia cầm năm 2004 – 2005 của tỉnh Thái Nguyên là chuyển dịch cơ cấu và quy mô chăn nuôi theo hướng tập trung, giảm tỷ lệ chăn nuôi nhỏ lẻ và thủ công, xây dựng vùng và cơ sở chăn nuôi an toàn sinh học nhằm kiểm soát và khống chế được dịch cúm gia cầm Phấn đấu đến năm 2005 khôi phục lại sự phát triển của ngành chăn nuôi gia cầm đặc biệt là chăn nuôi gà

Mục tiêu phát triển giai đoạn 2006 - 2010 là phấn đấu đạt tỷ trọng sản xuất chăn nuôi gia cầm hàng hoá theo quy mô trang trại, gia trại chiếm khoảng trên 30% Phấn đấu đạt tốc độ tăng trưởng số đầu con từ 7 – 7,5%, trong đó đối với gà là khoảng từ 9,5 – 10% và vịt ngan từ 4,5 – 5% Tổng số đàn gia cầm đến năm 2010 là khoảng 6.980.000 con, trong đó gà là 5.780.000 con và vịt ngan là 1.200.000 con Phấn đấu kiểm soát được dịch cúm gia cầm Quy hoạch và kiểm soát các cơ sở giống gia cầm, chăn nuôi gia cầm tập trung như trang trại công nghiệp và bán công nghiệp cho các địa phương mang tính hàng hoá theo hướng an toàn sinh học

Quy hoạch và xây dựng các cơ sở giết mổ và chế biến gia cầm tập trung cũng như chợ đầu mối cho các huyện, thành, thị Kiểm soát chặt chẽ việc kinh

doanh, lưu thông và giết mổ Động viên và khuyến khích người chăn nuôi và các cơ sở chăn nuôi gia cầm đăng ký sản xuất giống, đăng ký tiêu chuẩn chất lượng và thương hiệu giống của cơ sở mình sản xuất và kinh doanh Tổ chức lại thị trường tiêu thụ gia cầm và nâng cao ý thức của người dân trong việc sử dụng thực phẩm an toàn dịch bệnh

Nâng cao tỷ lệ tiêm phòng một số bệnh cho đàn gia cầm, đối với bệnh cúm gia cầm phải tiêm phòng triệt để số gia cầm trong diện tiêm Tăng cường và thực hiện nghiêm ngặt công tác vệ sinh sát trùng tiêu độc Thường xuyên kiểm tra phát hiện dịch bệnh, bao vây, khống chế và dập tắt dịch bệnh ngay khi dịch xảy ra …

1.1.3 Một số giống gia cầm và phương thức chăn nuôi phổ biến ở Thái Nguyên

Qua quá trình điều tra và thực hiện đề tài, chúng tôi nhận thấy, đàn gia cầm ở Thái Nguyên hiện nay là rất phong phú về giống loài gia cầm Trong số các loài gia cầm phổ biến hiện nay thì gà chiếm đa số với nhiều giống khác nhau, chủ yếu và phổ biến nhất vẫn là các giống gà địa phương như gà ri, gà chọi, gà hồ … Các giống gà nhập nội như gà sao, gà lương phượng, gà ai cập và một số giống gà khác nhưng số lượng không nhiều Một số giống vịt phổ biến hiện nay như vịt cỏ, vịt siêu trứng, vịt khoang tầu, vịt bơ … trong đó vịt khoang tầu và vịt bơ chiếm đa số do có trọng lượng lớn và khả năng tăng trưởng nhanh, còn các giống vịt khác như vịt bầu bến, vịt bầu quỳ gần như không còn Đối với đàn ngan thì hiện nay chủ yếu và khá phổ biến là giống ngan pháp, các giống như ngan sen, ngan trâu, ngan ré mặc dù có khả năng chống chịu bệnh tật tốt hơn nhưng khả năng tăng trưởng chậm và trọng lượng thấp nên hiện nay hầu như không còn phổ biến

Cũng giống như nhiều địa phương khác trong cả nước, ở Thái Nguyên hiện nay ngành chăn nuôi gia cầm phổ biến ở 3 phương thức chăn nuôi chính

là nuôi nhốt, nuôi bán chăn thả và nuôi chăn thả Trong đó ở chăn nuôi gà thì vẫn phổ biến ở cả 3 phương thức chăn nuôi nói trên và chủ yếu là chăn thả tự do với khoảng 50%, ít nhất là ở phương thức nuôi nhốt tập trung công nghiệp và bán công nghiệp với chỉ khoảng 18 – 34% Còn ở vịt và ngan hiện nay chỉ còn phổ biến ở ở phương thức nuôi nhốt và nuôi bán chăn thả nhưng chủ yếu là nuôi nhốt với khoảng trên 80% ở ngan và 60% ở vịt

Đối với quy mô đàn nuôi hiện nay thì đã tăng dần cả về số đầu con và quy mô nuôi nhốt so với những năm trước đây khi chưa xảy ra dịch cúm gia cầm Ở quy mô chăn nuôi từ 200 con trở lên đã chiếm khoảng 17 – 20% ở gà và từ 7 – 9% ở vịt và ngan Những quy mô chăn nuôi này chủ yếu tập trung ở Thành phố Thái Nguyên, Đồng Hỷ, Phú Lương và các huyện phía Nam như Phổ Yên, Sông Công và Phú Bình Còn lại vẫn chủ yếu là chăn nuôi nhỏ lẻ và thủ công tại các nông hộ dải rác khắp các thôn xóm trong tỉnh

1.2 Những hiểu biết chung về bệnh cúm gia cầm

1.2.1 Sơ lược về lịch sử phát triển của bệnh

Bệnh cúm gia cầm (Avian Influenza) trong lịch sử còn có tên gọi là Fowl Plague, đã được Porroncito mô tả lần đầu tiên ở Italia vào năm 1878 và Ông nhận định một cách sáng suốt rằng tương lai nó sẽ là một bệnh quan trọng và nguy hiểm Nhưng sau đó 23 năm, năm 1901 Centai và Savunozzi mới xác định được căn nguyên siêu nhỏ (Filterable agent) là yếu tố gây bệnh Từ đó, mãi đến năm 1955 virus gây bệnh mới được Achafer xác định virus thuộc type A thông qua kháng nguyên bề mặt H7N1 và H7N7

Bệnh được Beard.C.W mô tả khá kỹ ở Mỹ vào năm 1971 qua đợt dịch trên gà tây Những năm tiếp theo, bệnh được phát hiện ở Nam Mỹ, Bắc Mỹ, Nam Phi, Trung cận Đông, Châu Âu, Vương Quốc Anh và Liên Xô cũ

Các công trình nghiên cứu có hệ thống và chi tiết về bệnh này cũng lần lượt được công bố ở nhiều nơi trên Thế giới như Úc năm 1975, Anh năm 1979, Mỹ năm 1983 – 1984, AiLen năm 1983 – 1984 và nhiều Quốc gia khác Việc các vụ dịch liên tục bùng nổ ở khắp các Châu lục trên Thế giới đã thôi thúc Hiệp hội các nhà chăn nuôi gia cầm tổ chức Hội thảo lần đầu tiên

vào năm 1981 về chuyên đề Bệnh Cúm Gà Hội thảo tiếp tục được tổ chức lần

hai tại Ailen năm 1987 và lần ba cũng tại Ailen năm 1992 Từ đó đến nay bệnh ngày càng xảy ra với quy mô lớn hơn và nguy hiểm hơn nên luôn được coi là một trong những nội dung đặc biệt quan trọng trong các Hội nghị về dịch tễ ở khắp nơi trên Thế giới

Bệnh được tổ chức Dịch tễ Thế giới (OIE) liệt vào danh sách một trong bốn bệnh đỏ đặc biệt nguy hiểm đối với ngành chăn nuôi trên toàn Thế giới do bệnh ngày càng trở nên phổ biến và gây thiệt hại lớn về kinh tế cho người chăn nuôi đồng thời làm chết nhiều gia cầm và hạn chế thương mại giữa các nước Đặc biệt nguy hiểm là bệnh có khả năng lây nhiễm sang con người và cả một số loài động vật có vú khác như lợn, hải cẩu, cầy hương

Tại Pakistan tháng 10/1994, Newe.C.W và cộng sự đã công bố dịch

cúm do virus H7 gây ra ở gà từ 7-66 tuần tuổi, làm chết 63% gà trong ổ dịch

Năm 1997, dịch cúm gia cầm xảy ra tại Hồng Kông – Trung Quốc có thể coi là một đại dịch trong chăn nuôi gia cầm và gây thiệt hại to lớn về mọi mặt cho đặc khu này với hàng chục người bị tử vong do dịch cúm gà Cũng như vậy, tại Italia năm 2001 đã có gần 400 cơ sở chăn nuôi gia cầm bị dịch,

làm chết và tiêu huỷ 14 triệu con gia cầm các loại 1.2.2 Tình hình bệnh cúm gia cầm

* Tình hình trong nước

Tại Việt Nam, dịch cúm gia cầm xuất hiện lần đầu tiên vào cuối tháng 12 năm 2003 tại tỉnh Hà Tây, Tiền Giang, Long An sau đó nhanh chóng phát

tán và lây lan ra các tỉnh thành khác với diễn biến hết sức phức tạp Ngay trong đợt dịch này (từ tháng 12/2003 đến ngày 27/02/2004), bình quân mỗi ngày có khoảng 150 – 230 xã của 15 – 20 huyện phát sinh ổ dịch mới thuộc 57 tỉnh thành trong cả Nước, làm chết và tiêu huỷ hàng ngày từ 2 – 3 triệu con gia cầm các loại, có ngày lên tới 4 triệu con (Cục Thú y, 2004) [6] Tổng số xã, phường có dịch là 2.574 (chiếm 24,6% số xã phường trong cả nước) thuộc 381 quận, huyện, thị xã (chiếm 60%), số gia cầm chết và tiêu huỷ là 43,9 triệu con, chiếm 16,79% tổng đàn, trong đó gà chiếm 30,4 triệu con, thuỷ cầm chiếm 13,5 triệu con, ngoài ra còn có 14,76 triệu con chim cút và các loại chim khác bị chết và tiêu huỷ (Phạm Sỹ Lăng, 2005) [16] Thiệt hại ước tính khoảng 1.300 tỷ đồng (Nguyễn Tiến Dũng, 2006) [12]

Dịch tái phát đợt hai từ tháng 4 – 11 năm 2004 ở 46 xã, phường tại 32 quận, huyện, thị xã thuộc 17 tỉnh thành, làm chết và tiêu huỷ 84.078 con, trong đó 55.999 con gà, 8.132 con vịt và 19.947 con chim cút (Phạm Sỹ Lăng, 2005) [16] Đợt ba dịch tái phát từ tháng 12 năm 2004 đến tháng 6 năm 2005 ở 15 tỉnh phía Bắc và 21 tỉnh phía Nam với 670 xã, 182 huyện, tiêu huỷ 1.847.213 con (Trần Công Xuân và cộng sự, 2005) [30]

Từ đầu tháng 10 năm 2005 đến ngày 25 tháng 12 năm 2005 dịch đã tái phát và xuất hiện ở 285 xã phường của 100 huyện thuộc 24 tỉnh thành Tổng số gia cầm chết và tiêu huỷ là 3.735.620 con gia cầm các loại Đến ngày 08 tháng 01 năm 2006 tất cả các tỉnh thành trong cả Nước đã tạm thời khống chế được dịch (Tô Long Thành, 2006) [27]

Sau gần một năm Việt Nam không có dịch thì ngày 6 tháng 12 năm 2006 dịch cúm gia cầm lại tái phát trở lại ở các địa phương thuộc hai tỉnh là Bạc Liêu và Cà Mau, đưa Việt Nam trở thành nước lần thứ tư xuất hiện dịch (Lê Văn Năm, 2007) [21] Sau đó phát tán và lây lan ra 9 tỉnh thành khác, đã có 83 xã phường của 33 quận huyện thuộc 11 tỉnh thành Tổng số gia cầm

mắc bệnh, chết và tiêu huỷ là 103.094 con, trong đó có 13.622 con gà và 89.472 con vịt ngan Dịch xảy ra ở quy mô nhỏ lẻ, chủ yếu ở vịt dưới 3 tháng tuổi do ấp nở gia cầm trái phép chưa được tiêm vaccin, ngoài Cà Mau và Bạc Liêu thì hầu hết các tỉnh chỉ xảy ra ổ dịch ở quy mô rất nhỏ (1 hoặc 2 hộ) nên đã ngay lập tức được dập tắt Đợt 2, dịch xảy ra vào tháng 5 năm 2007 tại Nghệ An rồi lây lan ra 167 xã phường của 70 quận huyện, thuộc 23 tỉnh thành, làm chết và tiêu huỷ 294.849 con gia cầm, trong đó có 21.525 con gà bằng 7,31%, 264.549 con vịt bằng 89,71% và 8.775 con ngan bằng 2,98% Nặng nhất là Nam Định với 26 xã phường thuộc 6 huyện thành và Nghệ An 26 xã phường thuộc 5 huyện thành Riêng tỉnh Đồng Tháp, dịch đã 3 lần xuất hiện trên đàn gia cầm (Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn, 2007) [3]

Năm 2008, chỉ tính đến tháng 2 đã có 17 tỉnh thành trong cả nước xuất hiện dịch, làm chết hàng triệu con gia cầm

* Tình hình dịch cúm tại Thái Nguyên

Riêng tỉnh Thái Nguyên, đến nay dịch cúm gia cầm đã 4 lần xuất hiện và ở những quy mô khác nhau Lần đầu tiên vào ngày 27 tháng 01 năm 2004 tại xã Kha Sơn, huyện Phú Bình sau đó lây lan rất nhanh ra 8/9 huyện thành thị trong tỉnh, với tổng số 1.258 hộ có dịch, thuộc 163 xóm ở 48 xã Làm chết và tiêu huỷ 172.288 con gia cầm các loại chiếm 3,58% so với tổng đàn và 13.760 quả trứng Ngày 08/4/2004 tỉnh Thái Nguyên đã công bố hết dịch cúm gia cầm trên địa bàn toàn tỉnh Năm 2005 dịch đã tái phát trở lại ở tỉnh Thái Nguyên với 5 điểm có dịch thuộc 5 xóm ở 5 xã tại hai huyện là Phú Lương và Thị xã Sông Công Làm chết và tiêu huỷ 12.513 con gia cầm các loại Đến ngày 17/12/2005 dịch cúm đã được khống chế trên địa bàn toàn tỉnh Từ đó đến tháng 7 năm 2007, do làm tốt công tác phòng chống và tiêm phòng vaccin nên dịch cúm gia cầm đã tạm thời được khống chế, đặc biệt là năm 2006 dịch đã không xuất hiện trở lại trên địa bàn tỉnh Thái Nguyên

Năm 2007, dịch xuất hiện trở lại ở Thái Nguyên vào ngày 23 tháng 8 tại gia đình Bà Nguyễn Thị Nga – xóm Phú Thịnh – Xã Thuận Thành - huyện Phổ Yên với tổng đàn có gia cầm mắc bệnh, ốm, chết và tiêu huỷ là 185 con, trong đó gồm 150 con vịt và 35 con gà

Những ngày đầu năm 2008 (từ 1/1 đến 15/2) dịch đã xảy ra tại 5 hộ và 1 trại gà tại Thành phố Thái Nguyên và Thị xã Sông Công với 5 ổ dịch thuộc 4 xã phường, tổng số gia cầm chết và tiêu huỷ là 5.789 con, trong đó có 4.228 con gà, 834 con vịt, 725 con ngan và 2 con gia cầm khác

1.2.3 Căn nguyên gây bệnh

* Đặc điểm về hình thái, cấu tạo và kích thước

Virus gây bệnh cúm gia cầm có tên khoa học là Influenza virus, thuộc họ Orthomyxovirus, là họ virus đa hình thái, có vỏ ngoài, genom là ARN sợi đơn, âm, phân đoạn (Swayne D.E, Suarez D.L, 2000) [48] Trước đây, các virus Orthomyxo và Paramyxo đều được xếp chung vào một họ là Myxoviridae do chúng có cấu trúc và khả năng gây bệnh giống nhau, nhưng

về sau được tách thành hai họ riêng là Orthomyxoviridae và Paramyxoviridae

do phát hiện thấy chúng có nhiều đặc điểm cơ bản không giống nhau Chữ “myxo” có nghĩa là chất nhầy, nguồn gốc của phần này là do phần ngoài của protein của virus có mang các loại đường và phần ngọn của các mạch nối đường chính là một loại acid: Acid Sialic hay còn gọi là acid neuraminidic Chữ “ortho” có nghĩa là chính thống, nói lên loại myxovirus được phát hiện và đặt tên trước

Có ba type virus cúm được ký hiệu là A, B và C được phân biệt với nhau qua bản chất kháng nguyên NP (Nucleoprotein) và M (Matric antigen) Type A gây cúm ở tất cả các loài gia cầm, type B và C gây cúm điển hình ở người và động vật (Lê Văn Năm, 2004) [18] Tuy nhiên các nhà nghiên cứu cũng đã tìm thấy virus cúm type A ở người, lợn, ngựa và một số động vật có

vú khác Theo Nguyễn Tiến Dũng (2006) [12] thì virus cúm thuộc họ

Orthomyxoviridae được chia làm 5 giống khác nhau dựa trên cấu trúc kháng nguyên của hai loại protein NP và M, đó là Influenza A, Influenza B, Influenza C, Thogotovirus và Isavirus

Virus cúm có kích thước trung bình, đường kính 80-120nm, dài 300nm, trọng lượng phân tử 4,6 – 6,4dal, trên kính hiển vi điện tử tương phản âm có dạng gần như hình cầu hoặc hạt mỏng, một số ít virus có dạng hình sợi có thể dài một vài naromet (nm), vỏ bọc là Glycoprotein gồm protein gây ngưng kết hồng cầu (kháng nguyên bề mặt) - Haemagglutinin (viết tắt là H) và protein enzim có thụ thể - Neuraminidae (viết tắt là N) Đây là kháng nguyên có vai trò quan trọng trong miễn dịch bảo hộ và có tính đa dạng cao

200-Hình thái vi cấu trúc của căn nguyên bệnh được Kawaoka (1988) và Murphy mô tả khá chi tiết và nhấn mạnh rằng ARN của virus là một sợi đơn, âm và chia thành 8 đoạn kế tiếp nhau mang 10 mật mã cho 10 loại virion protein khác nhau là HA, NA, NP, NS1, NS2, M1, M2, PB1, PB2 và PA Đoạn NS1 và NS2 dễ dàng tách được ở tế bào bị nhiễm Tất cả 8 đoạn của sợi ARN có thể tách và phân biệt rõ ràng thông qua biện pháp điện di polyacrilamid gel Các protein có vỏ bọc nhân nối 8 đoạn này với nhau, được bọc bên ngoài bằng các protein và có màng lipid ở ngoài cùng Thành phần chính protein của virus chủ yếu là glycoprotein Lipid tập trung ở màng virus và chủ yếu là lipid có gốc phospho, số còn lại là cholesterol, glucolipid và một số ít hydrocacbon gồm các loại men như galactose, mannose, ribose, fructose, glucosamin

Người ta lấy hai loại protein bề mặt là H (Haemagglutinin) và N (Neuraminidae) để phân loại virus cúm type A Theo các tác giả Tô Long Thành (2004) [24], Ilaria Capua và Stefano Marangon (2004) [31], Nguyễn Tiến Dũng và cộng sự (2005) [10], Hoàng Thuỷ Long và Nguyễn Thị Hồng

Hạnh (2005) [17], Bùi Quý Huy (2004) [15], Phạm Sỹ Lăng (2005) [16] có 15 loại protein H khác nhau về tính kháng nguyên được ký hiệu từ H1 đến H15 và có 9 loại protein N cũng khác nhau về tính kháng nguyên được ký hiệu từ

N1 đến N9 Theo Lê Văn Năm (2007) [21], Lisa F.P Ng và cộng sự (2007)

[44] có 16 loại protein H và 9 loại protein N Năm 2005, Fouchier và cộng sự [42] đã phân lập được protein H16 từ Hải Âu đen ở Hà Lan và Thuỵ Điển do đó có tổng là 16 subtype HA (Nguyễn Tiến Dũng, 2006) [12] Như vậy, từ 9 protein N và 16 protein H có thể tạo ra 144 loại virus cúm type A khác nhau

Protein Haemagglutinin hay HA là một glucoprotein dưới dạng Trimer

Mỗi monomer gồm hai phần là HA1 và HA2 Hai phần của protein này được

nối với nhau bằng một chuỗi các acid amine trong đó có arginin Tại vị trí này các men cắt protein có sẵn trong cơ thể (trên các màng niêm mạc) của ký chủ sẽ cắt HA ra làm đôi, tạo điều kiện cho virus bám vào thụ thể của tế bào ký chủ Do vậy đoạn này được gọi là cleavage site của HA Do các enzym protease chỉ cắt protein tại các acid amine basic nên nếu vị trí này càng nhiều

acid amine basic thì khả năng bị cắt đôi của HA lại càng cao dẫn đến khả

năng để virus bám vào thụ thể tế bào và bắt đầu quá trình xâm nhập vào tế bào càng lớn Dựa trên cơ sở này người ta đã phân loại virus có độc lực cao là loại virus có nhiều acid amine basic tại vị trí cleavage site và ngược lại

Protein NA chính là một loại enzym có tên là Neuraminidae Khi virus xâm nhập vào cơ thể, các mạch đường của protein HA và thụ thể của tế bào sẽ liên kết với nhau, gắn virus vào bề mặt tế bào Sau đó nhờ NA cắt mối liên kết này đi làm cho virus có thể vào bên trong, tiếp theo HA được cắt đôi hoặc nếu không như vậy thì virus sẽ bị rời ra khỏi tế bào

Thành phần hoá học của virus gồm: ARN chiếm từ 0,8-1,1%, protein chiếm 70-75%, lipid 20-24% và 5-8% là hydrocacbon Lipid tập trung ở màng virus và chủ yếu là lipid có gốc phospho Số còn lại là cholesterol, glucolipid

và một ít hydrocacbon gồm các men như galactose, mannose, ribose, fructose và glucosamin Thành phần chính protein của virus chủ yếu là glycoprotein

Acid nhân của virus gồm 8 đoạn gen có cấu tạo là RNA chuỗi đơn âm Chính vì bản chất các đoạn gen của virus cúm là RNA do đó không có cơ chế tự sửa chữa khi sao chép sai lệch nên chúng rất rễ bị biến đổi Đây là điểm đặc biệt nguy hiểm cho chăn nuôi gia cầm và đe dọa sức khoẻ con người

Theo Voyles (2002) 50 thì có 8 đoạn ARN sợi đơn, có chiều âm, đặc tính này cho phép sự tổ hợp di truyền trong một tế bào bị nhiễm hai hay nhiều virus và tạo ra nhiều loại virus mới khác với virus ban đầu

1.3 Đặc tính sinh học của virus cúm gia cầm

1.3.1 Đặc tính về nuôi cấy và lưu giữ virus

Virus cúm gia cầm phát triển tốt trong xoang niệu nang của phôi trứng gà ấp 9 - 11 ngày tuổi Tiêm 0,1 - 0,3ml huyễn dịch bệnh phẩm như não, phổi, ruột, khí quản vào xoang niệu mô của phôi gà 9 - 11 ngày tuổi, hàn kín lại rồi tiếp tục cho ấp ở 37o

C trong 2 - 3 ngày Một số ít chủng virus có độc lực cao có thể làm chết phôi trong vòng 18 - 24 giờ, nước trứng thu hoạch để ở 4o

C qua một đêm, virus nhân lên trong nước trứng có hiện tượng ngưng kết hồng cầu gà Nếu không gây ngưng kết thì cần lấy nước trứng nói trên tiêm lần sau cho phôi trứng gà 9 - 11 ngày tuổi Khả năng gây bệnh của virus rất cao nếu bảo quản nước phôi đó ở nhiệt độ âm 70o

C (-70oC) hoặc khi cho đông khô Virus cúm phát triển tốt trong tế bào xơ phôi gà CEF (Chicken Embryo Fibrolast) và tế bào dòng có nguồn gốc thận chó MDCK (Madin - Darby - Canine - Kidney cells) với điều kiện môi trường nuôi cấy không có trypsin

1.3.2 Sức đề kháng của virus

Virus cúm gia cầm tương đối nhạy cảm với các chất hoá học như formalin, ete, sodium desoxycholat, hydroxylamone

Virus không bền vững với nhiệt độ: Ở 50 - 60oC chỉ trong vài phút là virus mất hết độc tính, ở 70o

C virus nhanh chóng bị tiêu diệt Ở nhiệt độ thấp, virus có thể tồn tại trong phân ít nhất là 3 tháng Trong nước, virus có thể sống tới 4 ngày ở nhiệt độ 30oC và trên 30 ngày ở nhiệt độ 0oC Đặc biệt là virus có thể tồn tại không hạn định ở nơi nguyên liệu bị đông lạnh Trong điều kiện lạnh ở 4oC virus vẫn giữ được khả năng gây bệnh trong phân tới 30 – 35 ngày và 7 ngày ở nhiệt độ 20oC Virus giữ tính gây bệnh lâu nhất trong vòng 48 giờ trên bề mặt các vật thể (Bean và cộng sự, 1982) [34]

Trong phủ tạng gia cầm, virus tồn tại 24-29 ngày, dưới ánh sáng mặt trời chiếu trực tiếp sống được 40 giờ, trong điều kiện chiếu ở mức bình thường sống được 15 ngày Theo WHO (2004) [52] nghiên cứu gần đây nhất thấy rằng virus H5N1 phân lập từ vịt có thể sống sót được 6 ngày ở 37o

C Do virus cúm gia cầm có vỏ bọc ngoài là lipid nên chúng rất mẫn cảm với các chất tẩy rửa như formaldehyde, - propiolacton, ethanol Sau khi tẩy vỏ bằng các chất như phenolic, NH4+

, natri hydrochlorit, acid loãng và hydroxylamine có thể phá huỷ virus cúm gia cầm Người ta thường dùng các chất này như là các chất sát trùng hữu hiệu để tổng vệ sinh tẩy uế chuồng trại, dụng cụ và các thiết bị dùng trong chăn nuôi khi cơ sở chăn nuôi có dịch hoặc có nguy cơ bị đe doạ bởi các loại dịch bênh, đặc biệt là dịch cúm gia cầm

1.3.3 Độc lực và phân loại virus cúm gia cầm

Độc lực hay còn gọi là khả năng gây bệnh của virus hay của một sinh vật Tuy nhiên, cần chú ý phân biệt độc lực với khả năng gây nhiễm và tính dễ lây ở chỗ độc lực là khả năng gây ra vết thương, các triệu chứng và khả năng gây nguy hiểm đến tính mạng sống của ký chủ Virus cúm H5N1 có tính lây nhiễm cho người thấp nhưng khi ở người đã bị nhiễm thì phát bệnh rất nặng và có tỷ lệ tử vong cao, tức là nó có độc lực cao đối với con người Độc lực của virus được xác định bằng hai phương pháp:

- Độc lực của virus cúm thường được xác định thông qua trình tự các nucleotide của cleavage site Do các enzym proteasa chỉ cắt protein tại các acid amine basic nên nếu vị trí này càng nhiều acid amine basic thì khả năng bị cắt đôi của HA càng lớn, dẫn đến khả năng để virus bám vào thụ thể tế bào và bắt đầu quá trình xâm nhập vào tế bào càng lớn Dựa vào đó người ta phân loại virus cúm có độc lực cao là loại virus cúm có nhiều acid amine basic tại vị trí cleavage site và ngược lại là loại virus có độc lực thấp là loại virus có ít acid amin basic tại vị trí cleavage site

- Phương pháp thứ hai thực tế là các xét nghiệm trong phòng thí nghiệm nhưng được tiến hành trên động vật Trong phương pháp này, để xác định độc lực của virus cúm trên gia cầm người ta dùng phương pháp xác định hệ số độc lực khi tiêm tĩnh mạch – IVPI (Intra Venous Pathogenicity Index) Tức là tiêm virus cúm vào tĩnh mạch cho gà 6 tuần tuổi Quan sát triệu chứng lâm sàng số gà chết vào từng ngày và tính điểm theo phương pháp tính của Reed & M (cao nhất là 3 điểm) Sau 10 ngày nếu kết quả tính toán cho thấy chỉ số này từ 1,2 trở lên thì virus được coi là có độc lực cao – HPAI (Hight Pathogenic Avian Influenza) Ngược lại, nếu kết quả này là nhỏ hơn 1,2 thì virus được coi là có độc lực thấp - LPAI (Low Pathogenic Avian Influenza)

Ngoài ra, trên thực tế, trong nhiều trường hợp bệnh lý, một số virus cúm được coi là có độc lực trung bình

* Nhóm virus có độc lực cao (HPAI): Tại Hội thảo Thế giới đầu tiên

về bệnh cúm gà năm 1981, Bankowski và cộng sự đã thông báo rằng virus cúm gà có kháng nguyên bề mặt H7 thuộc loại virus có độc lực cao Nhưng ở Pensylvania (Mỹ) người ta đã chứng kiến trận dịch cúm gà đã gây chết 75% số đầu con, nhưng khi phân lập virus gây bệnh là H5N2 lại không có kháng nguyên bề mặt H7 Điều này đã gây nhiều tranh cãi giữa các Nhà khoa học Để giải quyết một cách khoa học, các Nhà khoa học đã thống nhất dựa vào

các chỉ số sau đây để khẳng định virus cúm gà có độc lực cao - HPAIV (Hight Pathogenic Avian Influenza Virus): Sau 10 ngày tiêm tĩnh mạch 0,2ml nước trứng gà đã gây nhiễm virus được pha loãng với tỷ lệ 1/10 cho gà mẫn cảm từ 4 – 66 tuần tuổi phải làm chết từ 75 – 100% số gà thực nghiệm Đồng thời virus gây bệnh cúm (có thể là type phụ) phải làm chết từ 20% số gà mẫn cảm thực nghiệm và phát triển tốt trên tế bào xơ phôi trong môi trường nuôi cấy không có trypsin (Lê Văn Năm, 2004) [19]

Virus độc lực cao gây bệnh nhanh, thời gian ủ bệnh ngắn, tỷ lệ gia cầm mắc bệnh chết cao, diễn biến phức tạp và có su hướng lây lan nhanh ở tất cả các loại gia cầm từ 4 tuần tuổi trở lên trên vùng địa lý rộng lớn với biểu hiện tiêu chảy, hô hấp, thần kinh và giảm đẻ rất nặng

* Nhóm virus có độc lực trung bình: Là những chủng virus có thể gây

ra dịch cúm cho gia cầm với các triệu chứng lâm sàng khá rõ rệt nhưng gây chết gia cầm không quá 15% tổng số gia cầm nhiễm bệnh Tuy nhiên, trong thực tế loại virus này rất ít gặp

* Nhóm virus có độc lực thấp (LPAI): Là những virus phát triển tốt

trong cơ thể gà nhưng không gây ra dịch cúm với các triệu chứng lâm sàng và không tạo ra bệnh tích đại thể, tốc độ lây lan chậm, tỷ lệ ốm và chết không đáng kể gọi là virus cúm thể độc lực thấp LPAIV (Low Pathogenic Avian Influenza Virus), (Lê Văn Năm, 2005) [20] Tuy nhiên, đây chính là mối nguy hiểm rất lớn cho ngành chăn nuôi gia cầm và đe doạ tính mạng con người do chúng có khả năng biến chủng để tạo thành một loại virus mới có độc lực cao hơn và nguy hiểm hơn

1.3.4 Sự thay đổi cấu trúc kháng nguyên của virus cúm gia cầm

Đặc điểm của virus cúm gia cầm là rất dễ thay đổi cấu trúc kháng nguyên và khả năng biến chủng để thích nghi và tồn tại Virus cúm có tần số thay đổi kháng nguyên cao do đặc điểm phân đoạn trong các tổ hợp gen của

virus với việc xâm nhiễm bởi các virus khác nhau vào cùng một tế bào cơ thể sẽ cho phép sinh ra một loại virus cúm type A mới với độc lực mới và có thể gây ra một dạng bệnh mới Sự thay đổi này có thể do đột biến ngẫu nhiên hoặc do sức ép miễn dịch và thường xảy ra theo hai cách:

* Biến đổi đoạn kháng nguyên (thay đổi lớn)

Hiện tượng hoán vị kháng nguyên hay di chuyển kháng nguyên (antigenic shift) là một sự thay đổi chủ yếu, bất ngờ, đột ngột trong các virus cúm type A, tạo ra haemagglutinin mới hoặc cả haemagglutinin và neuraminidae mới (Hoàng Thuỷ Long và Nguyễn Thị Hồng Hạnh) (2005) [17] Hiện tượng này xảy ra khi có hai hay nhiều chủng virus, với nhiều đoạn ARN khác biệt nhau về mặt di truyền cùng lúc xâm nhiễm vào cùng một tế bào Mỗi loại virus cùng sinh ra 8 đoạn gen có thể lẫn lộn đoạn ARN của virus khác miễn là đủ 8 đoạn Trên cơ sở đó hình thành một virus cúm mới thay thế các virus cũ trước đó đã nhiễm vào trong vật chủ (Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn, 2007) [4] Hiện tượng này gọi là shift Ví dụ như khi thay đoạn mã hoá cho haemagglutinin của người bằng đoạn của động vật, kết quả là tạo ra chủng virus mới với kháng nguyên H thay đổi, làm cho virus kháng lại kháng thể đã được hình thành trong đáp ứng miễn dịch lần trước Vì vậy, do kiểu gen của virus cúm A gồm 8 đoạn nên về lý thuyết thì từ hai virus bố mẹ sẽ có thể xuất hiện 28

= 258 kiểu kết hợp khác nhau của thế hệ sau Trong thực tế sự kết hợp này đã phân lập được từ gia cầm 117 trường hợp

Biến chủng virus có thể lây nhiễm vào vật chủ mới mà bố mẹ chúng không có khả năng lây nhiễm Khi hoán vị kháng nguyên xảy ra thì phần lớn con người, kể cả các loài gia cầm không có hoặc rất ít miễn dịch kháng lại virus mới này Vì vậy nó được coi là nguyên nhân gây ra các vụ đại dịch ở người và gia cầm

Ký chủ mà tại đó hiện tượng shift xảy ra được gọi là bình trộn virus (mixing vessel) Trước đây, lợn được coi là bình trộn virus

Nghiên cứu đợt dịch cúm gia cầm tại Hồng Kông năm 1997 đã cho phép xác định được có 3 loại virus khác nhau là H5N1, H9N2 và H6N1 cùng nhiễm vào chim cút và đã tạo ra chủng virus H5N1 Nói cách khác là chim cút đã bình trộn virus và tạo ra chủng virus H5N1 Có thể mô tả theo sơ đồ sau:

MA, NS, PB1, PB2, PA

Chim cút

H5N1 mới Rất độc cho người

H5N1 mới Rất độc cho gà

* Biến đổi điểm kháng nguyên (thay đổi nhỏ)

Một cách khác liên quan đến sự thay đổi kháng nguyên nhưng ở mức độ thấp được gọi là di nhập hoặc trôi dạt hay biến thể kháng nguyên (antigenic drift) Những thay đổi này xảy ra liên tục theo thời gian Do đột biến ngẫu nhiên xảy ra ở gen mã hoá cho haemagglutinin dẫn đến sự thay đổi acid amine trong protein haemagglutinin, mặc dù về cơ bản thì haemagglutinin vẫn là protein cũ Chủng virus biến thể kháng nguyên trở thành chủng được chọn lọc trong quần thể do chúng có khả năng xâm nhiễm vào ký chủ chưa miễn dịch và có thể không được hệ miễn dịch của cơ thể nhận biết Đặc biệt là chúng hoàn toàn không bị tác động bởi hệ thống miễn dịch thu được của vật chủ, không bị trung hoà bởi các kháng thể được sinh ra do vật chủ được tiêm vaccin phòng bệnh (Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn, 2007) [4]

Hiện tượng biến thể kháng nguyên tăng lên từ mùa này sang mùa khác nên đã gây rất nhiều khó khăn trong công tác phòng chống và thanh toán dịch bệnh, đặc biệt là trong việc sản xuất vaccin phòng bệnh cho gia cầm

Theo Hoàng Thuỷ Long và Nguyễn Thị Hồng Hạnh (2005) [17] thì hiện tượng hoán vị kháng nguyên xảy ra đôi lúc, còn biến thể kháng nguyên gặp thường xuyên hơn Cúm type A trải qua cả hai kiểu thay đổi nói trên, còn cúm type B chỉ thay đổi bằng quá trình biến thể kháng nguyên dần dần

Có thể mô tả cơ chế dịch chuyển kháng nguyên theo sơ đồ sau:

1.3.5 Quá trình xâm nhập và nhân lên của virus

Khi cơ thể động vật hoặc con người hít phải hay ăn phải các chất có chứa virus, ngay lập tức các virus đời bố mẹ sẽ bám và niêm mạc đường hô hấp và đường tiêu hoá nhờ chúng có kháng nguyên H và N Kháng nguyên H giúp cho virus bám vào lớp màng nhầy Sau đó virus bám vào màng tế bào để rồi “chui” qua màng và đi vào trong tế bào chủ Tại đây bộ gen của virus được “cởi vỏ” và thoát ra khỏi vỏ bọc rồi trở nên tự do để hoạt động Khi virus cúm di chuyển được qua màng tế bào, ở đó chúng lợi dụng hệ thống tổng hợp protein của tế bào chủ để tổng hợp lên bộ gen của chúng

Sự sao chép của virus cúm đã được nhiều nhà khoa học nghiên cứu và mô tả khá chi tiết Kingsbury (1985), Fenner và cộng sự đã mô tả tóm tắt virus hấp thụ đối với các cảm thụ quan glycoprotein có acid sialic trên bề mặt tế bào, sau đó virus xâm nhâp vào tế bào qua receptor mediate endocytoci, nó bao gồm các exposure với nồng độ pH thấp trong endosom, dẫn đến sự thay đổi trong HA là sự kết hợp màng trung gian Vì vậy nucleocapxit đi vào bên trong nguyên sinh chất và di chuyển vào trong nhân

Virus cúm dùng cơ chế đơn nhất để sao chép trong đó một loại men nội nhân (viral endonuclease) tách từ đầu 5’ của mARNs tế bào và dùng nó như một cái mồi để sao chép nhờ sự vận chuyển virus sau monocistronic mARNs được tạo ra và dịch chuyển thành HA, NA, NP và ba men polymerases là PB1, PB2 và PA Các mARN đối với các gen NS và M được nối với sản lượng hai mARNs, được dịch chuyển trong các khung đọc khác nhau và tạo ra các protein NS1, NS2, M1, M2, HA và NA được đường hoá trong mạng lưới võng mạc nội mô và được điều chỉnh trong tiểu thể golgi, rồi được chuyển tới bề mặt tế bào và bắt đầu hình thành virion

Một yếu tố quan trọng đối với HA là được phân ra nhờ men protease của tế bào chủ thành HA1 và HA2, mà chúng vẫn gắn kết được nhờ mối liên

kết disulfis, việc cắt ra là yêu cầu đối với việc sản xuất các virus sau khi bị nhiễm các virus và ghép các protein virus và ARN, virus tồn tại trong tế bào là nhờ sự nảy chồi từ màng plasma Mặc dù chưa rõ virus diệt tế bào như thế nào nhưng những nghiên cứu gần đây cho thấy mô tế bào nuôi cấy bị nhiễm

virus trải qua apotosis (quá trình chết theo sinh lý bình thường của tế bào cơ

thể) đã bị đảo lộn, bị phá vỡ lập trình, apotosis trong cúm cũng được xác định Theo Lê Văn Năm (2004) [18] sau khi vào nguyên sinh chất và nhân tế bào, virus trưởng thành nhanh và phát triển theo phương thức tự nhân đôi

Tuy nhiên, theo Bùi Quang Anh và Văn Đăng Kỳ (2004) [1] thì virus cúm được nhân lên trong đường hô hấp và đường tiêu hoá

Như vậy, quá trình nhân lên của virus kết thúc với kết quả từ một hạt virus (bố mẹ) sẽ có hàng ngàn virus mới được tạo ra Tuy nhiên, người ta đã tính được rằng, trong quá trình lắp ráp virus không cần nhiều năng lượng mà chỉ khoảng 30%, nghĩa là chỉ 30% số virus đời con là những hạt virion không hoàn chỉnh có khả năng gây nhiễm, còn lại là các virus ở dạng khiếm khuyết

1.4 Dịch tễ của bệnh

Bệnh cúm gia cầm xảy ra với tất cả các dòng, giống gia cầm như gà, vịt, ngan, ngỗng, gà tây, đà điểu, chim cút, chim cảnh cũng như các loài chim hoang dã, nhưng ở gà công nghiệp và gia cầm nuôi tập trung thường có biểu hiện bệnh nặng hơn Gia cầm ở mọi lứa tuổi đều có nguy cơ mắc bệnh cúm nhưng chủ yếu ở gia cầm từ 4 – 66 tuần tuổi Ở nước ta, Lê Văn Năm (2004) [19] đã phát hiện bệnh cúm gia cầm xảy ra sớm nhất ở gà là 26 ngày tuổi, vịt là 28 ngày tuổi, ngan Pháp là 24 ngày tuổi, tuổi mắc bệnh muộn nhất ở gà là 10 tháng, vịt là 18 tháng và ngan là 14 tháng Gia cầm dễ bị bệnh và có tỷ lệ chết cao nhất ở những nơi bệnh phát ra lần đầu và ở tuổi sắp đẻ hoặc đang trong thời kỳ đẻ cao nhất

Bệnh xảy ra quanh năm, không phụ thuộc vào mùa vụ nhưng chủ yếu và dễ phát hơn vào lúc giao thời từ mùa thu sang mùa đông hoặc có các yếu tố stress gây hại làm giảm sức đề kháng của gia cầm, thường vào các tháng 11, 12, 1, 2 và 3 hàng năm, đặc biệt vào cuối tháng 1 đầu tháng 2, tỷ lệ mắc bệnh cao nhất ở đàn có từ 100 – 5000 con (25,6% đợt 2 và 33,21% đợt 3) và giảm dần ở những trại chăn nuôi có số lượng lớn hơn (Phạm Sỹ Lăng, 2005) [16], cũng như sự thay đổi đột ngột về thức ăn, nước uống, thời tiết

Bệnh lây lan do truyền ngang, chủ yếu do tiếp xúc trực tiếp giữa gia cầm khoẻ mạnh với gia cầm mắc bệnh, qua thức ăn, nước uống, các dụng cụ chăn nuôi, các phương tiện vận chuyển, qua phân rác có chứa virus cúm Ở trứng nhiễm virus bị vỡ trong tủ ấp sẽ gây nhiễm cho gà mới nở (OIE, 2002) [45] Đặc biệt người ta đã tính được rằng trong 1 gam phân gà mắc bệnh cúm có đủ lượng virus để gây bệnh cho 1 triệu gà khác (APHIS, 2002) [33]

Chỉ 1 – 2 ngày sau khi xâm nhiễm vào cơ thể, virus cúm gia cầm được đào thải ra ngoài môi trường qua phân, nước mũi và miệng Virus tồn tại khá lâu trong vật chất hữu cơ như trong phân 30 – 35 ngày ở 4oC và 7 ngày ở 20oC Trong các nguồn thức ăn, nước uống bị ô nhiễm, virus có khả năng tồn tại hàng tuần mà vẫn có độc lực và khả năng gây bệnh cho gia cầm Trong điều kiện bảo quản đông lạnh, virus tồn tại không hạn định Đây là những nguồn bệnh chính, nguy hiểm và tiềm tàng để không chỉ gia cầm mà các động vật có vú khác cũng rất rễ bị phơi nhiễm, đặc biệt là con người

Ở gia cầm bị phơi nhiễm, thời kỳ ủ bệnh trung bình từ vài giờ đến 3 ngày, phổ biến nhất là từ 1 - 3 ngày, đôi khi có trường hợp kéo dài từ 14 – 20 ngày Tỷ lệ chết dao động từ 15 – 100% số gia cầm mắc bệnh

1.4.1 Ký chủ của virus

Ký chủ là từ dùng để chỉ những sinh vật mà trên hoặc bên trong nó có sinh vật khác sinh sống (ký sinh) gây ảnh hưởng tới cuộc sống của bản thân

Virus cúm gia cầm (ký sinh tuyệt đôi) có khả năng xâm nhập, gây nhiễm và gây bệnh cho tất cả các loài gia súc và gia cầm, thậm trí cả động vật dưới nước như cá voi và hải cẩu Tuy nhiên, về sinh thái bệnh, bệnh cúm gia cầm có sinh thái bệnh vô cùng phức tạp Mỗi loại ký chủ khác nhau lại có vai trò khác nhau trong việc lưu giữ, phát tán và lây lan dịch bệnh Do vậy, để chủ động trong việc phòng chống dịch cúm, người ta đã chia ký chủ của virus cúm ra làm ba loại:

* Ký chủ lưu giữ hay mang mầm bệnh

Đây là loại ký chủ thường nhiễm nhưng không phát thành bệnh hoặc chỉ phát bệnh rất nhẹ hoặc chỉ những con non mới mắc bệnh còn các con vật trưởng thành khi nhiễm virus thì chỉ tạo ra miễn dịch Trong trường hợp bệnh cúm, các loài chim hoang dã và thuỷ cầm được coi là ký chủ lưu giữ hay mang mầm bệnh Tuy nhiên còn phụ thuộc vào độc lực của virus vì đối với virus cúm H5N1 trong thực tế đã gây bệnh với tỷ lệ chết rất cao ở thuỷ cầm

Virus cúm đã phân lập được ở hầu hết các loài chim hoang dã như vịt trời, thiên nga, hải âu, mòng biển, vẹt các loại, chim thuộc họ sẻ, diều hâu Tần xuất và số lượng virus phân lập được ở loài thuỷ cầm đều cao hơn ở các loài khác Vịt từ khi bị nhiễm đến khi bắt đầu thải virus trong vòng 30 ngày (Bùi Quang Anh và Văn Đăng Kỳ, 2004) [1]

Thuỷ cầm, đặc biệt là vịt, chim bờ biển, hải âu được coi là ký chủ mang mầm bệnh tự nhiên của virus cúm gia cầm (Wedster và cộng sự, 1992) [51]

Tất cả các loài virus cúm type A được biết cho đến nay đều phát hiện thấy ở loài lông vũ và thuỷ cầm hoang dại được coi là ký chủ mang trùng quan trọng nhất của virus cúm (Fouchier và cộng sự, 2004) [41]

Do đặc điểm cấu tạo gen của virus cúm gia cầm trong các loài dã cầm khiến cho các loài này khi mang virus là nguồn reo rắc virus cho các loài khác, đặc biệt là gia cầm

* Ký chủ hứng chịu (Bị tràn ngập, bị đổ lên đầu-Spillover host)

Đây là loại ký chủ mẫn cảm với virus cúm và thải virus ra môi trường xung quanh làm lây nhiễm cho các cá thể khác Loại ký chủ này thường phát bệnh rất nặng khi bị nhiễm nhưng lại không thể lưu giữ lâu dài mầm bệnh trong cùng một loài vì khi bị nhiễm virus thì chúng sẽ bị tiêu diệt Nói cách khác là nếu loài động vật này không tiếp xúc với ký chủ lưu giữ thì mầm bệnh (virus) tự nhiên sẽ tự tiêu vong trong loài ký chủ lưu giữ

Các loài gia cầm cạn như gà, gà tây, gà lôi, trĩ, đà điểu… thường được coi là ký chủ hứng chịu của virus cúm và bệnh thường phát ra rất nặng ở loài này, đồng thời lượng virus sinh ra cũng rất lớn

Virus gây bệnh cho phổ ký chủ rộng hơn Thông thường ở vịt (ký chủ lưu giữ), virus cúm chỉ gây bệnh ở một phạm trù nào đó (vịt non chẳng hạn) và tập trung vào đường ruột, thì ở loài ký chủ hứng chịu (gia cầm cạn) virus gây bệnh ở mọi lứa tuổi và nhân lên ở mọi cơ quan nội tạng của gia cầm cạn

Tuy vậy, ở gia cầm như đã nói ở trên còn có các loại virus gọi là độc lực thấp (LPAI) không gây bệnh lâm sàng Nhưng các loại virus này khi nhiễm chuyển tiếp qua nhiều đời ở gia cầm sẽ trở thành loại virus có độc lực cao (HPAI) Trong khi đó ở ký chủ lưu giữ mầm bệnh, virus hầu như ổn định về mặt di truyền Vì vậy, người ta đưa ra thuyết về sự ngưng trệ tiến hoá (Evolutionary stosis) của virus cúm ở loài thuỷ cầm, nhưng trên ký chủ hứng chịu chúng tiến hoá (đột biến) rất mạnh Đây là lý do giải thích tại sao các nhà khoa học cho rằng cần phải diệt hết gia cầm mắc bệnh cúm bất kể là bị nhiễm subtype nào vì sợ rằng chúng sẽ sinh ra những chủng virus mới, trong khi sự lưu hành virus cúm trong đàn vịt không đáng lo ngại như trong đàn gà

* Ký chủ lệch

Là loài động vật hiếm khi bị nhiễm virus nhưng khi bị nhiễm sẽ phát bệnh rất nặng và không hoặc bài thải rất ít virus để lây nhiễm cho các cá thể

xung quanh Hiện nay con người và một số động vật có vú khác được coi là ký chủ lệch của virus cúm H5N1 Sự phân chia này không mang tính tuyệt đối vì một khi virus cúm H5N1 có khả năng lây từ người sang người thì con người lại trở thành ký chủ hứng chịu Mặt khác, với cúm H3N2 hiện đang lưu hành gây ra bệnh cúm thông thường ở người thì con người lại trở thành ký chủ lưu trữ H3N2 hoặc năm giữa ký chủ lưu trữ và ký chủ hứng chịu Tuy vậy, sự phân chia này chỉ có tác dụng phân biệt, diễn tả và quản lý bệnh theo từng giai đoạn tiến triển của dịch Nhưng với dịch cúm do H5N1 gây ra hiện nay, vịt không phải là ký chủ lưu trữ vì khi bị nhiễm chúng cũng phát bệnh và có tỷ lệ chết rất cao Đây là điều đặc biệt mới đối với bệnh cúm gia cầm

1.4.2 Sự lưu hành virus cúm trên đàn gia cầm

Trong công tác chẩn đoán và phòng chồng dịch cúm gia cầm, việc giám sát sự lưu hành virus là một nhiệm vụ quan trọng bắt buộc với mục tiêu phát hiện sớm và kịp thời những đàn gia cầm mang trùng để có những biện pháp hiệu quả nhằm tiêu diệt mầm bệnh

Trên Thế giới, đã nhiều Quốc gia xuất hiện dịch cúm gia cầm, có nước áp dụng chiến lược tiêm phòng vaccin, có nước tiến hành tiêu huỷ toàn bộ gia cầm theo bán kính rộng khi có gia cầm mắc bệnh hoặc có sự lưu hành virus nhưng việc giám sát sự lưu hành virus thường được thực hiện một cách rất thường xuyên

Tại Việt Nam, ngay từ lần đầu tiên xuất hiện dịch (2003 – 2004), virus gây bệnh được xác định thuộc type A H5N1 nhưng trước đó chúng ta không có số liệu về loại virus và sự lưu hành trong đàn gia cầm ở Việt Nam (Nguyễn Tiến Dũng, 2005) [11] Sau khi đợt dịch này kết thúc, tháng 3 và 4/2004, Nguyễn Tiến Dũng và cộng sự (2005) [10] đã tiến hành lấy 1.002 mẫu huyết thanh và ổ nhớp của 130 hộ chăn nuôi gia cầm thuộc 13 xã của tỉnh Thái Bình để nghiên cứu về sự lưu hành virus cúm Kết quả cho thấy xét nghiệm huyết

thanh tìm kháng thể kháng virus cúm gia cầm H5 bằng phương pháp HI đã có 60,8% ở vịt, 23,6% ở ngan và 4,8% ở gà dương tính với huyết thanh và ông khẳng định rằng mặc dù dịch lâm sàng đã hết nhưng tỷ lệ nhiễm virus H5N1 còn rất cao sau đợt dịch đầu năm 2004, điều này nói lên virus vẫn tiếp tục tồn tại và lưu hành trong đàn gia cầm Cũng theo ông khi nghiên cứu ở miền Bắc nước ta thấy tỷ lệ nhiễm virus ở các hộ nuôi vịt hoặc vịt lẫn với gà có nguy cơ nhiễm virus 69,5% cao gấp 8 lần so với ở các hộ chỉ chăn nuôi gà với 8,4%

Vịt thường tạo ra kháng thể kháng virus cúm sau khi bị nhiễm từ 5 – 6 ngày Như vậy, tỷ lệ vịt có kháng thể là gián tiếp thể hiện tỷ lệ nhiễm virus trong đàn vịt Tỷ lệ này thường tăng dần bắt đầu vào tháng 11 và đạt đỉnh cao vào tháng 3 hàng năm Như vậy mùa đông là mùa vịt bị mắc virus cúm (Nguyễn Tiến Dũng, 2006) [12] Cũng theo ông, nhiều chủng virus cúm H5N1 gây bệnh và gây chết cho vịt nên số liệu về huyết thanh có thể không phản ánh đúng thực tế nhiễm virus

Năm 2005, Trương Văn Dung và cộng sự [9] đã lấy 60 mẫu huyết thanh và 60 mẫu ổ nhớp để kiểm tra sự lưu hành virus cúm trước khi tiêm thử nghiệm vaccin phòng cúm gia cầm ở 3 đàn vịt tại Bắc Ninh Kết quả cho thấy, tất cả các mẫu ổ nhớp đều cho kết quả âm tính còn mẫu huyết thanh có 19/60 mẫu dương tính với kháng thể bằng 31,7% thuộc 1 trong 3 đàn bằng 33,3% Kiểm tra 100 mẫu huyết thanh và 100 mẫu ổ nhớp của 2 đàn gà tại Hà Tây trước tiêm thử nghiệm và đều cho kết quả âm tính

Năm 2007, theo báo cáo của Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn [3] đã kiểm tra 8.278 mẫu được lấy tại 78 cơ sở, điểm giết mổ và chợ buôn bán gia cầm sống trên cả nước, kết quả cho thấy tỷ lệ lưu hành virus là 7,96% Cũng theo Bộ Nông nghiệp thì virus vẫn lưu hành trên đàn gia cầm và dịch sẽ bùng phát bất cứ lúc nào khi có đủ điều kiện Có thể thấy rằng vịt có tỷ lệ mang trùng cao hơn rất nhiều so với đàn ngan, đặc biệt là so với gà

1.5 Triệu chứng lâm sàng

Mặc dù bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao (HPAI) là thể cực kỳ nguy hiểm nhưng các biểu hiện lâm sàng và diễn biến của bệnh thường không đồng nhất mà rất đa dạng và phức tạp Không có triệu chứng lâm sàng đặc trưng cho bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao nhưng phải chú ý ngay lập tức đến nó khi thấy tỷ lệ chết cao (Cục Thú y, VSF-CICDA, 2007) [7] Bệnh cúm gia cầm khi xảy ra phụ thuộc vào rất nhiều yếu tố như độc lực của virus, tuổi gia cầm mắc bệnh, phương thức chăn nuôi và các yếu tố môi trường khác thúc đẩy, số lượng virus hay giới tính của gia cầm Các gia cầm non thường có biểu hiện bệnh nặng hơn Các loài thuỷ cầm, đà điểu và các loài chim hoang dã có thể có độ mẫn cảm thấp hơn nhưng lại có thể trở thành vật mang trùng rất nguy hiểm cho các loài động vật mẫn cảm khác

Sau khi xâm nhiễm vào cơ thể, virus cúm vào máu và nhân lên rất nhanh về số lượng Một số trường hợp dịch cúm nổ ra nhưng vẫn không có dấu hiệu lâm sàng, xong đa số những trường hợp như vậy thường gây nên hiện tượng nhiễm trùng huyết, viêm não tuỷ, viêm đường hô hấp cấp, viêm đường tiêu hoá cấp và xuất huyết tràn lan ở các phủ tạng

Gia cầm bệnh thể hiện tăng nhiệt độ đột ngột, có thể lên đến 44 – 45oC Các triệu chứng hô hấp thường xuất hiện đầu tiên và khá điển hình như khẹc, lắc đầu, vẩy mỏ, chảy nước mắt, nước mũi, chảy dãi và khó thở Mí mắt bị viêm và sưng mọng, đầu sưng và mặt bị phù nề Mào và tích dày lên do thuỷ thũng, có nhiều điểm và đám xuất huyết Nhiều trường hợp thấy hoại tử ở mào và tích (Beard, 1998) [35] Xuất huyết dưới da vùng ngực và chân là biểu hiện lâm sàng rất đặc trưng của bệnh, xác gà bệnh thâm xám

Gia cầm bệnh có biểu hiện thần kinh rất đặc trưng như đi lại loạng choạng, mất thăng bằng, đi siêu vẹo, run rẩy và mệt mỏi, nằm lì tụm đống với nhau Gia cầm tiêu chảy mạnh, phân loãng mầu trắng hoặc trắng xanh Kết

mạc mắt sưng thuỷ thũng và xuất huyết (CDC) [37] Bệnh lây lan rất nhanh, gia cầm ủ rũ, xơ xác, giảm năng xuất trứng rõ rệt Ở vịt và ngỗng còn có hiện tượng mắt màu khói đục (Capua và Mutinelli, 2001) [36], (Aceillo, 1998) [32] Tỷ lệ chết ở đàn nhiễm bệnh có thể lên đến 100%

1.6 Giải phẫu bệnh lý

1.6.1 Bệnh lý đại thể: Phụ thuộc rất nhiều vào số lượng, độc lực của

virus và quá trình diễn biến của bệnh mà có thể chia ra các trường hợp sau:

* Trường hợp bệnh nhẹ: Chỉ thấy viêm mũi từ thể cata, serofibrin đến

nhầy mủ và bị casein hoá gây tịt mũi, thối mi mắt Khi mổ khám thấy khí quản phù nề, đọng nhiều dịch rỉ viêm, viêm sero đến casein, nhiều đờm Túi khí bị dày lên và có nhiều fibrin bám dính Phúc mạc bị viêm nặng từ cata đến fibrin do trứng non bị dập vỡ nên có thể gọi là “viêm phúc mạc lòng đỏ trứng” (Egg yolk peritonitis) Buồng trứng viêm xuất huyết, trứng non dập vỡ, ống dẫn trứng bị viêm dịch rỉ đến casein Ruột bị viêm xuất huyết từ cata đến fibrin, nặng nhất là vùng ruột non, ruột thừa và hậu môn

* Trường hợp bệnh nặng: Nhiều trường hợp trong ổ dịch cúm, gia

cầm chết quá nhanh không để lại bệnh tích điển hình, nhưng đại bộ phận

những gia cầm khác thì các biến đổi đại thể lại thể hiện khá rõ như mũi bị viêm tịt, mào tích thâm tím, sưng dày lên, xuất huyết điểm và hoại tử Cắt đôi mào hoặc tích thấy có mầu vàng xám, óng ánh như gelatin Mí mắt và mặt bị phù nề, đầu sưng to Xuất huyết dưới da ở chân và một số vùng khác như lưng và đùi Xác gà vẫn béo nhưng thâm và khô Viêm teo, xuất huyết và gây hoại tử ở gan, lách, thận Tuỵ sưng to có vạch vàng và đỏ xen kẽ Gia cầm chết thường ở tư thế cổ và chân duỗi dài, trong miệng có nhiều dãi nhầy và đặc

Viêm xuất huyết toàn bộ phủ tạng như mề, dạ dày tuyến, ruột non, ruột già, manh tràng, hậu môn, túi fabricius

Ở gà, dạ dày tuyến, van hồi manh tràng và niêm mạc hậu môn viêm xuất huyết từ cata đến fibrin rất nặng Tim bơi trong bao dịch thẩm xuất mầu vàng và xuất huyết điểm Viêm dính phúc mạc và túi khí Xuất huyết dưới da và cơ vùng đùi, xuất huyết bên trong lồng ngực, xuất huyết mỡ bụng, mỡ bao tim, mỡ màng treo ruột Niêm mạc khí quản xuất huyết, chứa nhiều đờm dãi

Ở ngan, vịt một trong hai lá phổi luôn bị viêm xuất huyết nặng và bị gan hoá, khi bỏ vào nước thì phổi bị chìm (khoảng trên 2/3 phổi bị chìm dưới mặt nước), tim bơi trong bao dịch thẩm xuất mầu vàng và bị xuất huyết điểm Xuất huyết bên trong lồng ngực Đường ruột ngan vịt chứa rất ít thức ăn

1.6.2 Bệnh lý vi thể:

Các biến đổi đặc trưng về tổ chức học bao gồm phù nề, xung huyết, xuất huyết và thâm nhập lympho đơn nhân ở cơ vân, cơ tim, lách, phổi, mào, tích, gan, thận, mắt và thần kinh Ngoài tế bào lympho đơn nhân hình thái ra còn có tế bào đặc trưng cho phản ứng viêm hoại tử

1.7.2 Chẩn đoán lâm sàng

Căn cứ vào các triệu chứng lâm sàng như thở khó và thở dốc Viêm tịt mũi, phù nề đầu và mặt Phù thũng, xuất huyết và hoại tử ở mào và tích Xuất huyết dưới da chân là một trong những biểu hiện lâm sang rất đặc trưng của

bệnh cúm gia cầm Gia cầm bệnh có biểu hiện thần kinh, tiêu chảy nặng, chảy nước mắt, nước mũi Khi chết, gia cầm thường nằm ở tư thế duỗi cổ và chân

1.7.3 Chẩn đoán thông qua giải phẫu bệnh lý

Bệnh tích tập trung rất điển hình ở vùng đầu và mặt như phù đầu và mặt, mào tích thâm tím, sưng phù nề và xuất huyết Mổ khám thấy các cơ quan nội tạng bị viêm, xuất huyết và hoại tử ở tim, gan, lách, phổi, thận, tuỵ sưng có vạch đỏ và vàng xen kẽ Viêm dính phúc mạc và buồng trứng, viêm ống dẫn trứng, trứng non bị dập vỡ Xuất huyết mỡ bụng, mỡ tim, mỡ màng treo ruột, xuất huyết niêm mạc tiêu hoá và hậu môn Thịt thâm xám, xuất huyết lồng ngực, cơ ngực và cơ đùi Đặc biệt điển hình là xuất huyết da chân.

1.7.4 Chẩn đoán virus học

Trong chẩn đoán bệnh cúm gia cầm, việc phân lập và xác định virus là

điều bắt buộc và cực kỳ quan trọng Bệnh phẩm đầu tiên được lấy là dịch thẩm xuất khí quản hoặc hậu môn của gà bệnh được nuôi cấy trong môi trường có hàm lượng kháng sinh cao Phương pháp đơn giản nhất là phân lập virus qua phôi gà, cụ thể như sau:

Lấy 0,2-0,3ml nước bệnh phẩm tiêm vào túi khí của phôi gà 10-11 ngày tuổi, hàn lại và tiếp tục cho ấp Các phôi bị tạp khuẩn sẽ chết sau 24 giờ

và phải được bỏ đi Số ít phôi sống còn lại sau 24 giờ được tiếp tục theo dõi đến 72 giờ Có thể lấy nước phôi từ những phôi chết trong khoảng 48 giờ và

sau 48 giờ hoặc từ phôi chưa chết đến khoảng 72 giờ vào việc xác định virus Đây là thời gian mà số lượng virus cúm (nếu có) đã đạt đến mức cao cần thiết Để xác định virus phân lập được có phải là virus cúm gia cầm hay không ta dùng phương pháp ngưng kết hồng cầu (HA) Nếu phản ứng HA không cho kết quả dương tính thì tiếp tục lấy nước phôi đó tiêm truyền lần hai vào phôi gà 10 – 11 ngày tuổi và sau đó lại dùng phản ứng HA để kiểm định lại Nếu kết quả vẫn là âm tính thì tiến hành nuôi cấy trên tế bào một lớp xơ