Nghiên cứu xác định ảnh hưởng của ba môi trường dinh dưỡng và bốn giá trị độ mặn đến sinh trưởng của vi tảo Nannochloropsis oculata. Mật độ cực đại và thời gian đạt mật độ cực đại là khác nhau ở các môi trường. Mật độ cực đại cao nhất là (316,55 ± 1,19) × 104 và thấp nhất là (223,22 ± 1,48) × 104 tế bào/mL. Ở độ mặn 30‰, mật độ cực đại cao nhất và sớm nhất ((294,29 ± 1,01) × 104 tế bào/mL ở ngày nuôi thứ 9).
Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn pISSN: 2588-1191; eISSN: 2615-9708 Tập 130, Số 3A, 2021, Tr 13–23; DOI: 10.26459/hueunijard.v130i3A.5846 ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG DINH DƯỠNG VÀ ĐỘ MẶN ĐẾN SINH TRƯỞNG CỦA VI TẢO Nannochloropsis oculata Nguyễn Thị Thanh Thủy*, Mạc Như Bình, Trần Ngun Ngọc Trường Đại học Nơng Lâm, Đại học Huế, 102 Phùng Hưng, Huế, Việt Nam Tóm tắt Nghiên cứu xác định ảnh hưởng ba môi trường dinh dưỡng bốn giá trị độ mặn đến sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis oculata Mật độ cực đại thời gian đạt mật độ cực đại khác môi trường Mật độ cực đại cao (316,55 ± 1,19) × 104 thấp (223,22 ± 1,48) × 104 tế bào/mL Ở độ mặn 30‰, mật độ cực đại cao sớm ((294,29 ± 1,01) × 104 tế bào/mL ngày ni thứ 9) Từ khóa: Nannochloropsis oculata, vi tảo, môi trường dinh dưỡng, độ mặn Influence of nutrient media and salinity on growth of microalgae Nannochloropsis oculata Nguyen Thi Thanh Thuy*, Mac Nhu Binh, Tran Nguyen Ngoc University of Agriculture and Forestry, Hue University, 102 Phung Hung St., Hue, Vietnam Abstract The study determines the influence of three nutrient media and four salinity values on the growth of microalgae Nannochloropsis oculate The maximum density and the time to achieve maximum density are different among the media The highest and lowest maximum density is (316.55 ± 1.19) × 104 and (223.22 ± 1.48) × 104 cells/mL, respectively The salinity at 30‰ provides a maximum density of (294.29 ± 1.01) × 104 cells/mL on the 9th day of culture Keywords: Nannochloropsis oculata, microalgae, nutrient medium, salinity Đặt vấn đề Vi tảo mắt xích chuỗi thức ăn nước Chúng nguồn thức ăn sống thiếu công nghệ sản xuất giống nuôi thương phẩm đối tượng thủy sản Đặc biệt, vi tảo thức ăn cho tất giai đoạn sinh trưởng động vật thân mềm hai mảnh vỏ số loài giáp xác cá giai đoạn ấu trùng [10] Nannochloropsis oculata lồi tảo có kích thước nhỏ (2–4 µm) có hàm lượng dinh dưỡng tương đối cao Tảo Nannochlopsis oculata có hàm lượng acid eicosapentaenoic cao (3,2% khối lượng khơ); acid ascorbic chiếm 0,8% khối lương khô; hàm lượng vitamin B12 đáp ứng nhu cầu động vật * Liên hệ: ntthuy.dhnl@hueuni.edu.vn Nhận bài: 4-6-2020; Hoàn thành phản biện: 6-9-2020; Ngày nhận đăng: 7-9-2020 Nguyễn Thị Thanh Thủy CS Tập 130, Số 3A, 2021 thủy sản giai đoạn đầu trình phát triển Nannochloropsis oculata xem nguồn thức ăn quan trọng cho luân trùng số ấu trùng cá giáp xác khác [1, 9] Có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển vi tảo, có mơi trường dinh dưỡng độ mặn Trong báo này, nghiên cứu ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng độ mặn đến sinh trưởng tảo Nannochloropsis oculata nhằm so sánh tìm điều kiện thích hợp cho sinh trưởng vi tảo, góp phần hồn thiện quy trình ni lồi tảo Vật liệu phương pháp 2.1 Vật liệu Vi tảo Nannochloropsis oculata (Hình 1) nhập từ Phân viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản Bắc Trung Bộ (Nghệ An) lưu giữ Bộ môn Công nghệ tế bào thực vật – Viện Công nghệ Sinh học – Đại học Huế Tảo giống nhân vào chai 500 mL với nước biển xử lý clo nồng độ 30 ppm nuôi mơi trường F/2 với điều kiện sục khí liên tục, độ mặn 33‰, pH 7,5 mật độ tảo tăng nhân nuôi tiếp để tạo bình giống sơ cấp 2.2 Phương pháp Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng mơi trường dinh dưỡng Thí nghiệm tiến hành với môi trường F/2 (Bảng 1), nghiệm thức (NT1); môi trường Walne (Bảng 2), nghiệm thức (NT2) môi trường TT3 (Bảng 3), nghiệm thức (NT3) (Hình 2) Ba mơi trường bố trí ngẫu nhiên hồn tồn vào can nhựa thể tích 20 L; nghiệm thức lặp Hình Tảo Nannochloropsis oculata 14 Jos.hueuni.edu.vn Tập 130, Số 3A, 2021 Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng lên sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis oculata NT1 (môi trường F/2) A2 A1 NT2 (môi trường Walne) A3 B2 B1 NT3 (môi trường TT3) B3 C1 C2 C3 Hình Sơ đồ bố trí thí nghiệm ảnh hưởng mơi trường dinh dưỡng lên sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis oculata lại ba lần; tổng số can thí nghiệm chín Điều kiện môi trường: nhiệt độ 25–27 °C, pH 8, mật độ ban đầu 8,5 vạn tb/mL, cường độ ánh sáng 2000 lux, chiếu sáng liên tục Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng độ mặn Thí nghiệm tiến hành với bốn độ mặn: 20, 25, 30, 35‰ tương ứng với NT1, NT2, NT3 NT4 (Hình 3) Điều kiện thí nghiệm giống Thí nghiệm Mơi trường dinh dưỡng kết từ Thí nghiệm Xác định tiêu theo dõi Nhiệt độ pH đo bút đo pH (Hanna HI98127) Cường độ chiếu sáng đo máy đo cường độ ánh sáng Extech Mật độ tế bào xác định buồng đếm Sedgewick Rafter (dung tích mL với 1000 đếm) kính hiển vi có độ phóng đại 10 lần Ảnh hưởng độ mặn lên sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis oculata NT1 (độ mặn 20‰) A1 A2 NT2 (độ mặn 25‰) A3 B1 B2 NT3 (độ mặn 30‰) B3 C1 C2 NT4 (độ mặn 35‰) C3 D1 D2 D3 Hình Sơ đồ bố trí thí nghiệm ảnh hưởng độ mặn lên sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis oculata 15 Nguyễn Thị Thanh Thủy CS Tập 130, Số 3A, 2021 Bảng Thành phần môi trường F/2 Guillard (Smith, 1993) Chất dinh dưỡng Nồng độ (mg/L) Chất dinh dưỡng Nồng độ (mg/L) NaNO3 75 MnCl2.4H2O 0,18 NaH2PO4.H2O Na2MoO4.2H2O 0,006 Na2SiO3.9H2O 30 ZnSO4.7H2O 0,022 Na2EDTA 4,36 HCL Thiamin 0,1 CoCl2.6H2O 0,01 Biotin 0,0005 CuSO4.5H2O 0,01 B12 0,0005 FeCl3.6H2O 3,15 Bảng Thành phần môi trường Walne (Laing, 1991) Chất dinh dưỡng Khối lượng (g) Chất dinh dưỡng Khối lượng (g) FeCl3 0,8 (NH4)6Mo7O24.4H2O 0,9 MnCl2.4H2O 0,4 CuSO4.5H2O 2,0 H3BO3 33,6 HCL đậm đặc 10,0 EDTA 45,0 Vitamin B1 0,2 NaH2PO4.2H2O 20,0 Dung dịch E 25,0 mL NaNO3 100,0 Na2SiO3.5H2O 40,0 ZnCl2 2,1 Vitamin B12 0,1 CoCl2.6H2O 2,0 Bảng Thành phần môi trường TT3 Chất dinh dưỡng Nồng độ (mg/L) Chất dinh dưỡng Nồng độ (mg/L) KNO3 70 EDTA KH2PO4 C6H8O7.H2O Na2SiO3 FeCl3.6H2O Lấy mẫu tảo: Mẫu tảo lấy lần/ngày vào 8–8 30 phút sáng lần lấy mL Mẫu tảo đựng ống Ependorf cố dịnh dung dịch Neutral Lugol’s 2% [2] Xác định mật độ tảo buồng đếm: Lắc mẫu tảo, dùng pipet paster hút mẫu tảo xịt vào buồng đếm đậy sẵn lamen; để lắng lúc đưa vào thị trường kính để đếm Đếm số lượng tế bào năm góc (bốn góc ngồi góc giữa), góc 10 Tiến hành đếm số lượng tế bào độ phóng đại 10 lần; mẫu tảo đếm lần [5, 6, 8] 16 Jos.hueuni.edu.vn Tập 130, Số 3A, 2021 Mật độ tế bào (tế bào/mL) = 𝐶 × 1000 𝐴×𝐷×𝐹 C số lượng tế bào đếm được; A diện tích ô (1 mm2); D chiều cao ô (1 mm); F số lượng ô đếm 2.3 Xử lý số liệu Số liệu nghiên cứu thu thập tính tốn giá trị trung bình độ lệch chuẩn phần mềm Microsoft Excel 2013 Xử lý số liệu phần mềm SPSS 20 Trong đó, sử dụng phân tích phương sai yếu tố kiểm định Duncan để tìm sai khác nghiệm thức mức ý nghĩa p < 0,05 Kết thảo luận 3.1 Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng Hiện giới có nhiều môi trường dinh dưỡng khác sử dụng cho ni tảo Tùy theo loại tảo tính chất nước, người ta chọn mơi trường thích hợp nhằm đạt sinh khối cao với giá thành thấp Trong q trình thí nghiệm, chúng tơi bố trí ba mơi trường dinh dưỡng khác Sau ngày thí nghiệm, phát triển tảo có sai khác môi trường Mật độ tảo (vạn tb/m) (p < 0,05) (Bảng 4) Mật độ tảo tăng dần chậm giai đoạn tảo cịn thích 350.00 300.00 250.00 200.00 NT1 150.00 NT2 100.00 NT3 50.00 0.00 10 11 12 13 14 15 16 17 Ngày nuôi (NT1: môi trường F/2; NT2: môi trường Walne; NT3: mơi trường TT3) Hình Đồ thị thể mật độ tảo môi trường dinh dưỡng khác 17 Nguyễn Thị Thanh Thủy CS Tập 130, Số 3A, 2021 Bảng Mật độ tảo môi trường dinh dưỡng khác Ngày Mật độ (× 104 tb/mL ) NT1 (mơi trường F/2) NT2 (môi trường Walne) NT3 (môi trường TT3) 8,50 ± 0,02a 8,50 ± 0,00a 8,50 ± 0,01a 12,52 ± 0,02c 12,36 ± 0,02b 11,92 ± 0,15a 20,39 ± 0,01b 20,52 ± 0,01c 19,78 ± 0,02a 45,34 ± 0,06c 36,78 ± 0,08b 33,90 ± 0,02a 76,02 ± 0,01c 58,12 ± 0,02b 47,58 ± 0,01a 130,36 ± 0,01c 98,36 ± 0,90b 71,56 ± 0,65a 174,17 ± 0,02c 127,42 ± 0,85b 95,21 ± 0,02a 224,71 ± 0,27c 155,92 ± 0,67b 121,56 ± 1,13a 286,17 ± 1,13c 188,28 ± 0,38b 146,03 ± 1,62a 10 316,55 ± 1,19c 205,46 ± 0,74b 165,44 ± 1,26a 11 310,49 ± 0,45c 226,35 ± 0,83b 175,63 ± 1,29a 12 304,89 ± 0,10c 248,79 ± 1,19b 195,86 ± 0,46a 13 287,03 ± 1,70c 239,65 ± 0,97b 223,22 ± 1,48a 14 259,12 ± 0,79c 202,32 ± 0,80b 214,98 ± 0,88a 15 230,55 ± 0,06c 197,91 ± 0,71b 183,93 ± 1,09a 16 192,46 ± 0,08c 146,28 ± 0,37b 145,63 ± 0,96a 17 150,12 ± 0,03c 109,82 ± 0,78b 110,65 ± 0,48a Ghi chú: Các ký tự a, b, c theo sau hàng giống khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05), độ lệch chuẩn đặt sau dấu ± ứng với môi trường nuôi Từ ngày nuôi thứ trở đi, ba nghiệm thức, tế bào tảo bắt đầu sinh trưởng nhanh mật độ tảo có sai khác đáng kể có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Ở thời điểm, nghiệm thức với môi trường TT3 cho mật độ tảo thấp hai nghiệm thức ni mơi trường Walne F/2 (Hình 4) Điều khác biệt thành phần dinh dưỡng môi trường, ba mơi trường chứa thành phần đạm lân Tuy nhiên, mơi trường TT3 có nguồn đạm muối KNO3, cịn hai mơi trường F/2 Walne có nguồn đạm muối NaNO3 Ở ba môi trường, nguồn lân muối (H2PO4)- Na K Mơi trường TT3 khơng có ngun tố vi lượng khác vitamin cần thiết cho sinh trưởng phát triển vi tảo Đây lý mà Nannochloropsis oculata môi trường TT3 có mật độ thấp 18 Jos.hueuni.edu.vn Tập 130, Số 3A, 2021 Ở NT1, mật độ tảo đạt cực đại sớm vào ngày thứ 10 (316,55 ± 1,19 vạn tb/mL) Ở NT2 NT3, tảo tiếp tục phát triển đạt mật độ cực đại ngày thứ 12 (248,79 ± 1,19 vạn tb/mL) ngày thứ 13 (223,22 ± 1,48 vạn tb/mL) Như vậy, tảo ni mơi trường F/2 có mật độ cực đại cao nhất, tiếp đến môi trường Walne thấp môi trường TT3 Các kết cho thấy, ba mơi trường thí nghiệm, tảo Nannochloropsis oculata sinh trưởng mạnh môi trường F/2 Nguyên nhân thành phần dinh dưỡng mơi trường khơng giống Mơi trường TT3 có thành phần dinh dưỡng đơn giản, thiếu nguyên tố vi lượng Mn, Zn, Cu Co vitamin B1 B12 Các nguyên tố vi lượng có tác dụng đến q trình trao đổi chất tảo, cần thiết cho phản ứng enzim vitamin dù với lượng nhỏ thúc đẩy gia tăng sinh khối tảo Do đó, tảo ni mơi trường TT3 sinh trưởng phát triển không tốt hai môi trường cịn lại Mơi trường F/2 Walne chứa thành phần giống NaNO3, NaH2PO4, EDTA, FeCl3, nguyên tố vi lượng Cu, Zn, Mn, Co,… Đây thành phần cấu tạo nên chất dinh dưỡng cần thiết cho phát triển tảo Tuy mơi trường Walne có hàm lượng đạm lân cao môi trường F/2, môi trường F/2 có nhiều loại vitamin Đồng thời, mơi trường Walne thí nghiệm khơng có nguồn silic từ muối Na2SiO3, mơi trường F/2 có hàm lượng Na2SiO3 30 mg/L Silic cần thiết cho tăng trưởng tảo tham gia vào cấu tạo màng tế bào Do đó, F/2 môi trường tối ưu cho sinh trưởng phát triển tảo Nannochloropsis oculata Trong suốt trình thí nghiệm với mật độ ban đầu, môi trường F/2, tảo Nannochloropsis oculata đạt mật độ cao ngày nuôi, mật độ cực đại lớn, thời gian giữ pha cân dài tượng tàn lụi diễn chậm so với môi trường Walne TT3 Kết hoàn toàn tương đồng với kết Nguyễn Thế Giang [3] ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy lên khả sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis phân lập từ rừng ngập mặn Xuân Thủy, Nam Định Theo Nguyễn Thế Giang [3], môi trường thích hợp để ni cấy N oculata F/2 với pha cân kéo dài, pha suy tàn diễn chậm so với môi trường khác, thuận tiện cho việc nuôi cấy, nghiên cứu Nghiên cứu Tôn Nữ Mỹ Nga cs cho thấy môi trường dinh dưỡng F/2 Walne cho khả tăng trưởng tốt tảo Chaetoceros gracilis [7] Từ kết trên, chọn F/2 làm môi trường nuôi cấy vi tảo Nannochloropsis oculata để tiến hành thí nghiệm ảnh hưởng độ mặn đến sinh trưởng vi tảo 19 Nguyễn Thị Thanh Thủy CS 3.2 Tập 130, Số 3A, 2021 Ảnh hưởng độ mặn Độ mặn yếu tố quan trọng định đến phân bố sinh trưởng phát triển tảo, định đến kết nuôi sinh khối tảo Các lồi tảo khác có khả thích nghi với khoảng dao động độ mặn khác Do thí nghiệm bố trí bốn độ mặn khác nên phát triển tảo khác có biến động nghiệm thức Sau hai ngày, mật độ tảo bắt đầu tăng lên bốn nghiệm thức Sự sai khác có ý nghĩa thống kê (p < 0,05), mật độ tảo tăng cịn chậm (Bảng 5) Từ ngày ni thứ ngày thứ 8, tảo bắt đầu sinh trưởng nhanh mật độ tảo bốn nghiệm thức có sai khác đáng kể có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Ở NT3, mật độ tảo đạt Bảng Mật độ tảo Nannochloropsis oculata độ mặn khác Mật độ (× 104 tb/mL) Ngày NT1 (độ mặn 20‰) NT2 (độ mặn 25‰) NT3 (độ mặn 30‰) NT4 (độ mặn 35‰) 8,50 ± 0,01a 8,50 ± 0,03a 8,50 ± 0,06a 8,50 ± 0,01a 12,32 ± 0,30a 12,79 ± 0,30b 14,47 ± 0,18d 14,03 ± 0,03c 22,91 ± 0,32a 23,66 ± 0,37b 27,64 ± 0,15d 26,97 ± 0,02c 41,24 ± 0,73a 43,33 ± 0,50b 62,98 ± 0,33d 60,41 ± 0,58c 60,23 ± 0,05a 61,74 ± 0,09b 102,98 ± 0,10d 78,32 ± 0,36c 77,48 ± 0,54a 83,15 ± 0,26b 149,16 ± 0,08d 102,08 ± 0,03c 90,11 ± 0,57a 111,96 ± 0,63b 199,23 ± 0,77d 149,71 ± 0,77c 116,05 ± 1,18a 137,42 ± 0,83b 256,09 ± 0,41d 178,69 ± 0,95c 129,21 ± 1,47a 154,09 ± 0,73b 294,29 ± 1,01d 247,51 ± 0,55c 10 144,77 ± 0,26a 171,34 ± 0,94b 293,80 ± 1,00d 275,14 ± 0,32c 11 157,77 ± 0,77a 184,85 ± 0,74b 289,39 ± 0,22d 270,20 ± 0,70c 12 171,38 ± 0,93a 207,73 ± 0,64b 268,65 ± 0,35d 255,62 ± 0,70c 13 197,57 ± 0,64a 214,35 ± 0,55b 241,53 ± 0,37d 228,31 ± 0,83c 14 189,08 ± 1,15a 204,79 ± 0,86bc 215,90 ± 0,07d 204,52 ± 0,01bc 15 174,87 ± 0,73a 184,67 ± 0,82c 186,72 ± 0,30d 175,25 ± 0,13b 16 147,59 ± 0,26a 152,90 ± 0,01b 160,12 ± 0,01d 154,26 ± 0,21c Ghi chú: Các ký hiệu a, b, c theo sau hàng giống khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05), độ lệch chuẩn đặt sau dấu ± 20 Mật độ tảo (vạn tb/l) Jos.hueuni.edu.vn Tập 130, Số 3A, 2021 350.00 300.00 250.00 200.00 NT1 150.00 NT2 100.00 NT3 NT4 50.00 0.00 10 11 12 13 14 15 16 Ngày nuôi (NT1: độ mặn 20‰; NT2: độ mặn 25‰; NT3: độ mặn 30‰; NT4: độ mặn 35‰) Hình Đồ thị thể mật độ tảo mức độ mặn khác cực đại sớm vào ngày thứ (294,29 ± 1,01 vạn tb/mL) Ở ngày thứ 10 11, tảo giai đoạn cân Từ ngày thứ 12, mật độ tảo giảm mạnh chuyển sang giai đoạn tàn lụi NT4 đạt cực đại chậm ngày thứ 10 với mật độ cực đại 275,14 ± 0,32 vạn tb/mL giảm mạnh từ ngày 12 chuyển sang giai đoạn tàn lụi Đối với NT1 NT2, mật độ tảo tiếp tục tăng ngày 13 đạt cực đại mức tương ứng 197,57 ± 0,64 vạn tb/mL 214,35 ± 0,55 vạn tb/mL Khi tảo chuyển qua giai đoạn tàn lụi, mật độ tảo nhanh chóng giảm mạnh NT1 Kết từ Hình cho thấy, NT3, tảo sinh trưởng nhanh đạt mật độ cực đại 294,29 ± 1,01 vạn tb/mL ngày thứ Ở NT4, tảo đạt mật độ cực đại ngày thứ 10 với giá trị 275,14 ± 0,32 vạn tb/mL Tảo đạt mật độ cực đại chậm NT1 NT2, ngày nuôi thứ 13 với giá trị 197,57 ± 0,64 vạn tb/mL 214,35 ± 0,55 vạn tb/mL Như vậy, tảo N oculata NT3 cho mật độ cực đại lớn nhất, tiếp đến NT4 cuối thấp NT2 NT1 Như vậy, tảo Nannochloropsis oculata có xu hướng ưa độ mặn cao (30–35‰) Trong suốt q trình thí nghiệm, NT3, tảo Nannochloropsis oculata đạt mật độ cao ngày nuôi; mật độ cực đại lớn hơn; thời gian pha cân dài pha tàn diễn chậm so với ba nghiệm thức 1, Do đó, nên ni tảo Nannochloropsis oculata độ mặn 30‰ Kết hoàn toàn tương đồng với kết Phạm Thị Lam Hồng [4] nghiên cứu ảnh 21 Nguyễn Thị Thanh Thủy CS Tập 130, Số 3A, 2021 hưởng độ mặn, ánh sáng tỷ lệ thu hoạch lên số đặc điểm sinh học thành phần sinh hóa hai loài tảo N oculata Chaetoceros mulleri điều kiện phịng thí nghiệm Kết cho thấy N oculata phát triển tốt độ mặn 30–35‰ cho sản lượng chất lượng dinh dưỡng cao Theo Nguyễn Thế Giang [3], điều kiện ni cấy có ảnh hưởng lên khả sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis phân lập từ rừng ngập mặn Xuân Thủy, Nam Định Độ mặn thích hợp để vi tảo N oculata phát triển 30–40‰ Kết luận Trong môi trường F/2, Walne TT3 sử dụng nuôi vi tảo, tảo Nannochloropsis oculata sinh trưởng phát triển tốt môi trường F/2 Mật độ tảo đạt cực đại sớm vào ngày thứ 10 môi trường TT3 đạt mật độ cực đại ngày thứ 13 Tảo Nannochloropsis oculata phát triển tốt độ mặn 30‰ với mật độ cực đại cao nhất, sớm pha tàn lụi diễn chậm Thông tin tài trợ Nghiên cứu Đại học Huế tài trợ thông qua đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng, độ mặn, cường độ, chu kỳ chiếu sáng đến sinh trưởng hàm lượng lipid vi tảo Nannochloropsis oculata”, mã số DHH 2019-02-120 Tài liệu tham khảo Mạc Như Bình, Nguyễn Thị Thanh Thủy (2018), Giáo trình kỹ thuật ni thức ăn tự nhiên nuôi trồng thủy sản, Nxb Đại học Huế Nguyễn Văn Công Nguyễn Kim Đường (2014), Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng AGP, mật độ ban đầu, độ mặn cường độ ánh sáng lên phát triển vi tảo Thalassiosira weissflogii thủ nghiệm ni thu sinh khối, Tạp chí khoa học Trường Đại học Cần Thơ, 1, 209– 217 Nguyễn Thế Giang (2010), Nghiên cứu ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy lên khả sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis phân lập từ rừng ngập mặn Xuân Thủy, Nam Định, Khoa công nghệ sinh học, Viện Đại học Mở Hà Nội Phạm Thị Lam Hồng (1999), Nghiên cứu ảnh hưởng độ mặn, ánh sáng tỷ lệ thu hoạch lên số đặc điểm sinh học, thành phần sinh hố hai lồi vi tảo Nannochloropsis oculata (Droop) Hibberd, 1981 Chaetoceros muelleri Lemmerman, 1898 điều kiện phịng thí nghiệm, Luận văn thạc sĩ, Trường Đại học Thuỷ Sản Nha Trang 22 Jos.hueuni.edu.vn Tập 130, Số 3A, 2021 Nguyễn Thị Thu Liên, Nguyễn Hồng Sơn, Hoàng Tấn Quảng Lê Thị Tuyết Nhân (2018), Phân lập tuyển chọn số chủng tảo silic Skeletonena costatum từ vùng biển Thừa Thiên Huế làm thức ăn ni trồng thuỷ sản, Tạp chí Khoa học Đại học Huế : Nông nghiệp Phát triển Nông thôn, 127(3B), 97–108 Nguyễn Thanh Mai, Trịnh Hoàng Khải, Đào Văn Trí, Nguyễn Văn Hùng (2009), Nghiên cứu phân lập, ni cấy in vitro tảo silic nước mặn Chaetoceros calcitrans Paulsen, 1905 ứng dụng nuôi sinh khối tảo làm thức ăn cho tôm he chân trắng (Penaeus vannamei), Science and Technology Development, 12(13) Tôn Nữ Mỹ Nga (2007), Lựa chọn mơi trường ni thích hợp cho phát triển tảo Chaetoceros gracilis Pantocsek 1892 (Schutt), Tạp chí Khoa học công nghệ thủy sản, Trần Vinh Phương, Lê Thị Tuyết Nhân, Nguyễn Văn Khanh, Phạm Thị Hải Yến, Nguyễn Văn Huy (2018), Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng mật độ đến sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis oculata thử nghiệm nuôi sinh khối điều kiện ánh sáng tự nhiên Thừa Thiên Huế, Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên, 127(1C), 211–220 Patrick Lavens and Patrick Sorgeloos (1996), Manual on the production and use of live food for aquaculture, FAO fisheries technical paper, 361, 11–12 10 Wikfors G.H., Ohno M (2001), Impact of algal research in aquaculture, Journal of Phycology, 37, 968–974 23 ... làm môi trường nuôi cấy vi tảo Nannochloropsis oculata để tiến hành thí nghiệm ảnh hưởng độ mặn đến sinh trưởng vi tảo 19 Nguyễn Thị Thanh Thủy CS 3.2 Tập 130, Số 3A, 2021 Ảnh hưởng độ mặn Độ mặn. .. có độ phóng đại 10 lần Ảnh hưởng độ mặn lên sinh trưởng vi tảo Nannochloropsis oculata NT1 (độ mặn 20‰) A1 A2 NT2 (độ mặn 25‰) A3 B1 B2 NT3 (độ mặn 30‰) B3 C1 C2 NT4 (độ mặn 35‰) C3 D1 D2 D3 Hình... dinh dưỡng độ mặn Trong báo này, nghiên cứu ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng độ mặn đến sinh trưởng tảo Nannochloropsis oculata nhằm so sánh tìm điều kiện thích hợp cho sinh trưởng vi tảo, góp phần