Ảnh hưởng của dinh dưỡng đến sinh trưởng quần thể, chất lượng của ba loài vi tảo Nannochloropsis oculata, Isochrysis galbana và Tetraselmis chui) và luân trùng (Brachionus plicatilis)
B GIÁO DC VÀ ÀO TO TRNG I HC NHA TRANG CÁI NGC BO ANH NH HNG CA DINH DNG N SINH TRNG QUN TH, CHT LNG CA BA LOÀI VI TO (Nannochloropsis oculata, Isochrysis galbana và Tetraselmis chui) VÀ LUÂN TRÙNG (Brachionus plicatilis) LUN ÁN TIN S NÔNG NGHIP Nha Trang – 2010 B GIÁO DC VÀ ÀO TO TRNG I HC NHA TRANG Cái Ngc Bo Anh NH HNG CA DINH DNG N SINH TRNG QUN TH, CHT LNG CA BA LOÀI VI TO (Nannochloropsis oculata, Isochrysis galbana và Tetraselmis chui) VÀ LUÂN TRÙNG (Brachionus plicatilis) Chuyên ngành: Nuôi thy sn nc mn, l Mã s: 62 62 70 05 LUN ÁN TIN S NÔNG NGHIP NGI HNG DN KHOA HC: GS Helge Reinertsen TS Nguyn Hu Dng i LI CAM OAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cu ca chính bn thân. Các s liu, kt qu nghiên cu trình bày trong lun án là trung thc và cha tng đc ai công b trong bt c công trình nào. Tác gi Cái Ngc Bo Anh ii LI CM N Tôi xin cm n Ban Giám hiu Trng i hc Nha Trang, Ban Ch nhim Khoa Nuôi trng Thy sn, Phòng ào to i hc và Sau i hc đã to điu kin cho tôi hoàn thành đ tài nghiên cu sinh. Tôi mun gi li cm n đn Quý Thy, Cô và các bn đng nghip Khoa Nuôi trng Thy sn, Vin Công ngh Sinh hc và các Phòng, Ban thuc Trng i hc Nha Trang đã h tr tôi trong lúc tin hành nghiên cu. tài nghiên cu nà y nm trong khuôn kh D án NUFU Pro.37/2002. Tôi xin chân thành cm n Ban iu hành D án: c Giáo s Nguyn Trng Nho, Giáo s Helge Reinertsen, Phó Giáo s Nguyn ình Mão, Phó Giáo s Li Vn Hùng, Tin s Nguyn Hu Dng, các thy cô giáo đã ging dy và truyn đt nhiu kin thc chuyên ngành quý báu: Giáo s Maria Teresa Dinis, Tin s Kjell Inge Reitan, Tin s Trine Galloway, Tin s Luis C onceicao. Tôi rt cm n s giúp đ k thut ca Thc s Randi Røsbak trong thi gian tp hun phân tích sc ký khí. Tôi xin trân trng cm n các thy giáo hng dn: Giáo s Helge Reinertsen đã tn tình hng dn, đc bit dành nhiu giúp đ trong các khóa tp hun ti Trung tâm Sinh hc Thc nghim Bratt Øra, Trondheim, Na Uy và Tin s Nguyn Hu Dng, ngi đã trc tip khuyên bo và giúp đ gii quyt khó khn trong sut quá trình nghiên cu ti Trung tâm Nghiên cu Ging và Dch bnh Thy sn, i hc Nha Trang. Li nói không đ đ th hin ht lòng bit n ca tôi đi vi gia đình – ba m, các anh ch và v, nhng ngi đã nâng đ tôi v mt vt cht và tinh thn t bao lâu nay, đc bit trong thi gian thc hin đ tài nghiên cu. iii CÁC CH VIT TT VÀ KÝ HIU ARA: Axít Arachidonic (C20:4n-6). B NN và PTNT: B Nông nghip và Phát trin Nông thôn ct: cá th ct/mL: cá th/mL ctv: cng tác viên DHA: Axít Docosahexaenoic (C22:6n-3) DO: Dissolved oxygen, hàm lng ôxy hòa tan. EPA: Axít Eicosapentaenoic (C20:5n-3). FAO: Food and Agriculture Organization, T chc Lng thc và Nông Nghip Liên Hip Quc HUFA: Highly Unsaturated Fatty Acid, các axít béo PUFA có mch cacbon dài hn hoc bng C20 và có nhiu hn hoc bng 3 ni đôi. KLK: khi lng khô MUFA Monounsaturated Fatty Acid, axít béo không no mt ni đôi. n-3 HUFA hàm lng các axít béo HUFA có ni đôi bt đu t v trí th ba tính t gc m ethyl. PUFA: Polyunsaturated Fatty Acid, axít béo có mch cacbon C16 (vi 2 – 4 ni đôi); C18 (vi 2 – 5 ni đôi); C20 (vi 2 – 5 ni đôi) hoc C22 (vi 2 – 6 ni đôi). SFA: Saturated Fatty Acid, axít béo no (mch cacbon không có ni đôi) tb/mL: t bào/mL tb/ngày: t bào/ngày TFA Total Fatty Acid, tng hàm lng axít béo (mg/g KLK) TL: Total lipid, hàm lng lipít tng s (mg/g KLK) iv MC LC M U 1 Chng I. TNG QUAN 4 1.1. Xu hng phát trin nuôi trng thy sn trên th gii và Vit Nam. 4 1.2. Vai trò ca vi to đi vi nuôi hi sn 8 1.2.1. Vi to đi vi nuôi đng vt thân mm. 9 1.2.2. Vi to đi vi nuôi tôm he 10 1.2.3. Vi to đi vi nuôi cá bin. 11 1.2.3.1. Vi to làm “môi trng nc xanh” 11 1.2.3.2. Vi to là thc n cho các loài làm thc n sng cho u trùng cá bin 11 1.3. Tình hình nghiên cu vi to phc v nuô i hi sn 17 1.3.1. Các loài vi to đang đc nuôi ph bin phc v sn xut ging nhân to các loài sinh vt bin. 17 1.3.2. Các yu t nh hng đn sinh trng qun th và cht lng dinh dng vi to 21 1.3.2.1. Nhit đ 22 1.3.2.2. mn 23 1.3.2.3. pH 23 1.3.2.4. Ch đ khuy đo 23 1.3.2.5. Ánh sáng 24 1.3.2.6. Mui dinh dng 24 1.3.3. Nghiên cu v vi to phc v nuô i hi sn Vit Nam. 27 1.4. Tình hình nghiên cu nuôi luân trùng Brachionus plicatilis 28 1.4.1. Các yu t nh hng đn sinh trng qun th và cht lng dinh dng ca luân trùng 28 1.4.1.1. Các yu t hu sinh 29 1.4.1.2. Các yu t vô sinh 31 v 1.4.2. Nghiên cu v nuôi luân trùng Vit Nam 35 CHNG 2. PHNG PHÁP NGHIÊN CU 37 2.1. Thi gian, đa đim và đi tng nghiên cu 37 2.1.1. Thi gian nghiên cu 37 2.1.2. a đim nghiên cu 37 2.1.3. i tng nghiên cu 37 2.1.3.1. Loài to Nannochloropsis oculata (Droop) D.J. Hibberd 1981 38 2.1.3.2. Loài to Isochrysis galbana Parke 194 39 2.1.3.3. Loài to Tetraselmis chui Butcher 1959 40 2.1.3.4. Loài luân trùng Brachionus plicatilis O.F. Muller 1786 41 2.2. B trí thí nghim 42 2.3. Phng pháp xác đnh các thông s môi trng, sinh trng qun th, hàm lng lipít và axít béo 53 2.3.1. Phng pháp đo các yu t môi trng 53 2.3.2. Phng pháp xác đnh mt đ t bào to và tc đ sinh trng qun th 53 2.3.3. Phng pháp xác đnh mt đ luân trùng và t l trng 54 2.3.4. Phng pháp thu mu vi to và luân trùng cho phân tích hàm lng lipít và axít béo 55 2.3.5. Phng pháp phân tích hàm lng lipít. 56 2.3.6. Phng pháp phân tích hàm lng các axít béo. 56 2.4. Phân tích và x lý s liu 58 Chng 3. KT QU NGHIÊN CU VÀ THO LUN 60 3.1. nh hng ca dinh dng đn sinh trng qun th và cht lng ca to Nannochloropsis oculata 60 3.1.1. nh hng ca nng đ và dng mui ni t đn sinh trng qun th to Nannochloropsis oculata 60 3.1.2. nh hng ca vic b sung CO 2 đn sinh trng qun th to Nannochloropsis oculata 64 vi 3.1.3. nh hng ca cht lng phân bón đn sinh trng qun th và giá tr dinh dng ca to Nannochloropsis oculata 68 3.2. nh hng ca dinh dng đn sinh trng qun th và cht lng ca to Isochrysis galbana 73 3.2.1. nh hng ca nng đ và dng mui ni t đn sinh trng qun th to Isochrysis galbana 73 3.2.2. nh hng ca vic b sung CO 2 đn sinh trng qun th to Isochrysis galbana 78 3.2.3. nh hng ca cht lng phân bón đn sinh trng qun th và giá tr dinh dng ca to Isochrysis galbana 80 3.3. nh hng ca dinh dng đn sinh trng qun th và cht lng ca to Tetraselmis chui 84 3.3.1. nh hng ca nng đ và dng mui ni t đn sinh trng qun th to Tetraselmis chui 84 3.3.2. nh hng ca vic b sung CO 2 đn sinh trng qun th to Tetraselmis chui 89 3.3.3. nh hng ca cht lng phân bón đn sinh trng qun th và giá tr dinh dng ca to Tetraselmis chui 92 3.4. nh hng ca thc n đn sinh trng qun th và cht lng dinh dng ca luân trùng Brachionus plicatilis. 98 3.4.1. nh hng ca mt đ thc n đn sinh trng qun th luân trùng 98 3.4.1.1. nh hng ca mt đ to N annochloropsis oculata làm thc n đn sinh trng qun th luân trùng 98 3.4.1.2. nh hng ca mt đ to Isochrysis galbana làm thc n đn sinh trng qun th luân trùng 102 3.4.1.3. nh hng ca mt đ to Tetraselmis chui làm thc n đn sinh trng qun th luân trùng 105 vii 3.4.1.4. nh hng ca mt đ men bánh mì Saccharomyces verevisiae làm thc n đn sinh trng qun th luân trùng 108 3.4.1.5. nh hng ca thc n là to Nannochloropsis oculata có b sung men bánh mì đn sinh trng qun th luân trùng 114 3.4.2. nh hng ca các loi thc n đn hàm lng lipít và axít béo ca luân trùng 124 KT LUN 131 DANH MC CÁC CÔNG TRÌNH TÁC GI Ã CÔNG B LIÊN QUAN N LUN ÁN 134 TÀI LIU THAM KHO 135 PH LC viii DANH MC BNG Bng 1.1. Mt đ (tb/mL) to cho n đi vi u trùng tôm he 10 Bng 1.2. Mc đ s dng ph bin ca các loài to trong sn xut ging đng vt thân mm. 18 Bng 1.3. Mt s loài to đã th nghim làm thc n cho u trùng tôm he 19 Bng 1.4. Kh nng chu đng nhit đ ca mt s loài to nuôi 22 Bng 1.5. Công thc môi trng Walne và f/2 Guillard 25 Bng 1.6. Mt s công thc phân bón kt hp đ nuôi sinh khi vi to bin 26 Bng 3.1. Tc đ sinh trng qun th ca to N. oculata khi bón phân vi ngun ni t dng nitrat NO 3 - và amôn NH 4 + . 61 Bng 3.2. Mt đ t bào (10 4 tb/mL) to N. oculata khi bón phân vi ngun ni t dng nitrat NO 3 - và amôn NH 4 + 62 Bng 3.3. Giá tr pH và sinh trng qun th to N. oculata trong điu kin sc khí bình thng và có b sung CO 2 . 66 Bng 3.4. Giá tr pH và sinh trng ca qun th to N. oculata khi nuôi bng môi trng f/2 di dng hóa cht tinh khit và công nghip 70 Bng 3.5. Hàm lng lipít và axít béo ca to N. oculata khi nuôi b 2 m 3 bón phân dng tinh khit và dng công nghip. 71 Bng 3.6. Tc đ sinh trng qun th ca to I. galbana khi bón phân vi ngun ni t dng nitrat NO 3 - và amôn NH 4 + 76 Bng 3.7. Mt đ t bào (10 4 tb/mL) to I. galbana khi bón phân vi ngun ni t dng nitrat NO 3 - và amôn NH 4 + 77 Bng 3.8. Giá tr pH và sinh trng qun th to I. galbana trong điu kin sc khí bình thng và có b sung CO 2 79 Bng 3.9. Giá tr pH và sinh trng ca qun th to I. galbana khi nuôi bng môi trng f/2 di dng hóa cht tinh khit và công nghip. 81 Bng 3.10. Hàm lng lipít và axít béo ca to I. galbana khi nuôi b 2 m 3 bón phân dng tinh khit và dng công nghip. 83 [...]... ng và d ng mu i ni t n sinh tr ng qu n th c a ba loài vi t o N oculata, I galbana và T chui 2 nh h ng c a vi c b sung CO2 n sinh tr ng qu n th c a ba loài vi t o N oculata, I galbana và T chui 3 nh h dinh d 2 m 3 ng c a ch t l ng phân bón n sinh tr ng qu n th và ch t l ng c a ba loài vi t o N oculata, I galbana và T chui nuôi ng th tích 3 4 nh h ng c a ba loài vi t o N oculata, I galbana và T chui và. .. Tetraselmis chui) và luân trùng (Brachionus plicatilis) M c tiêu c a - Xác CO2 tài: nh nh h n sinh tr ng c a n ng , d ng mu i ni t c ng nh vi c b sung ng qu n th và ch t l ng dinh d ng c a ba loài vi t o N oculata, I galbana và T chui - Xác làm th c n nh nh h n sinh tr ng c a ba loài vi t o N oculata, I galbana và T chui dùng ng qu n th và ch t l ng dinh d ng c a luân trùng B plicatilis t m c tiêu trên, 1... nuôi sinh 2 kh i và b o n m ch t l nh môi tr ng dinh d ng trong b b nh, duy trì ch t l ng dinh d ng c a luân trùng, t o “môi tr ng n c xanh” ng nuôi u trùng cá bi n, c ch vi khu n gây ng th c n s ng sau khi a vào b trùng Tuy nhiên, không ph i loài vi t o nào c ng th c hi n ng nuôi u c cùng lúc t t c các vai trò Ba loài vi t o Nannochloropsis oculata (N oculata), Isochrysis galbana (I galbana) và Tetraselmis. .. khoa h c cho vi c gi i quy t v n c s s n xu t gi ng h i s n có nhu c u và T chui và v n cung c p vi t o cho các i v i ba loài N oculata, I galbana cung c p luân trùng B plicatilis cho các c s s n xu t gi ng cá bi n t i Vi t Nam Nh ng i m m i c a lu n án: - Lu n án là m t trong nh ng công trình l ng dinh d quan - u tiên ng c a ba loài vi t o N oculata, I galbana và T chui liên n y u t dinh d ng nuôi... n lên ho c gi c nh m t y nuôi luân trùng và n ng su t nuôi có t o Vi c nuôi luân trùng b ng t o nh th tích b nuôi t o m t c th c luân trùng t ng luân trùng b ng cách thêm t o vào theo s t ng d n 12 m t luân trùng Có nhi u loài t o n bào khác nhau có th dùng làm th c n cho luân trùng nh ng t t nh t là loài Nannochloropsis oculata Bên c nh vi c s d ng t o t i nuôi luân trùng, các d ng t o khô ( n bào)... Saccharomyces cerevisiae (d i ây g i t t là men bánh mì) qu n th và ch t l ng luân trùng Brachionus plicatilis ng dinh d n sinh tr ng Ý ngh a khoa h c và th c ti n c a lu n án: - Làm phong phú thêm các d n li u v c i m sinh tr ng qu n th , thành ph n hóa sinh c a ba loài vi t o N oculata, I galbana và T chui - B sung d n li u khoa h c v sinh tr ng qu n th , thành ph n hóa sinh c a luân trùng B plicatilis... c a n ng và d ng ng c a vi c s c khí có b sung có b sung CO2 n ba loài t o nghiên c u Hình 2.9 S nh h b trí thí nghi m v n sinh tr th tích 50L 44 nh h ng c a vi c s c khí có b sung ng qu n th c a ba loài t o N oculata, I galbana và T chui 45 Hình 2.10 S b trí thí nghi m v nuôi ba loài t o N oculata, I galbana và T chui b 2 m3 và s d ng phân bón d i d ng hóa ch t tinh khi t và công nghi... chui (T chui) c xem là “b ba ph i h p th c hi n t t các ch c n ng trên Nh m góp ph n gi i quy t khó kh n k thu t trong khâu cung c p th c n s ng cho giai o n quan tr ng khi u trùng cá bi n b t chúng tôi th c hi n th , ch t l tài “ nh h ng c a dinh d u s d ng th c n ngoài, ng n sinh tr ng qu n ng c a ba loài vi t o (Nannochloropsis oculata, Isochrysis galbana và Tetraselmis chui) và luân trùng (Brachionus. .. nuôi thu sinh kh i 38 Hình 2.3 T bào t o Nannochloropsis oculata 39 Hình 2.4 T bào t o Isochrysis galbana .40 Hình 2.5 T bào t o Tetraselmis chui 41 Hình 2.6 Hình d ng luân trùng phân l p c t th y v c thu c t nh Khánh Hòa 42 Hình 2.7 S b trí thí nghi m v nit n sinh tr nh h ng c a n ng và d ng mu i ng qu n th ba loài vi t o: N oculata, I galbana và T chui... th luân trùng sinh tr cao DHA Do ó, chi n l ng không n c l i, t o I galbana tuy nh nh ng l i ch a hàm l ng i v i các c s s n xu t gi ng cá bi n là s c chung d ng các loài t o nh N oculata hay T chui nuôi sinh kh i luân trùng, sau ó thu ho ch luân trùng và cho n t o giàu DHA nh I galbana tr cho u trùng cá Bên c nh ó, m t s loài t o c khi làm th c n c phát hi n còn có kh n ng c ch s phát tri n c a vi . qun th và cht lng dinh dng ca ba loài vi to N. oculata, I. galbana và T. chui. - Xác đnh nh hng ca ba loài vi to N. oculata, I. galbana và T. chui dùng làm thc n đn sinh trng. đn sinh trng qun th và cht lng dinh dng ca ba loài vi to N. oculata, I. galbana và T. chui nuôi th tích 2 m 3 . 3 4. nh hng ca ba loài vi to N. oculata, I. galbana và. trng qun th ca ba loài vi to N. ocul ata, I. galbana và T. chui. 2. nh hng ca vi c b sung CO 2 đn sinh trng qun th ca ba loài vi to N. oculata, I. galbana và T. chui. 3. nh