Bệnh học thủy sản phần 2 bệnh truyền nhiễm của động vật thủy sản

88 Bùi Quang Tề Viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản I Bệnh học thủy sản Phần Bệnh truyền nhiễm động vật thủy sản Biên soạn: TS Bùi Quang Tề Năm 2006 Bệnh học thủy sản- phần 89 Chơng Bệnh virus Đặc tính chung virus: - Kích thớc virus vô nhỏ bé, từ hàng chục đến hàng trăm nm, virus có dạng hình cầu, hình khối có nhiều cạnh gây bệnh chủ yếu ngời động vật: Cúm, quai bị, bạch cầu, đậu mùa, Reovirus (cá trắm cỏ), kích thớc 15-350 nm Virus dạng hình que gây bệnh thực vật (đốm thuốc lá, đốm khoai tây), cá gây bệnh viêm bóng cá chép, đốm đỏ cá chép châu Âu, nhiễm khuẩn huyết cá hồi kích thứoc 15-250 nm Cuối dạng tinh trùng dạng đặc trng cho virus ký sinh tế bào vi khuẩn đợc gọi trùc khn thĨ (Bacterphage vµ phage) kÝch th−íc 10-225 nm Không có cấu tạo tế bào Virus cấu tạo đơn giản vỏ protein nhân acid nucleic Vỏ có nhiều capsomer (mỗi capsomer gồm nhiều phân tử protein) nhiều capsomer liên kết gọi capside Capside cấu trúc xoắn, cấu trúc phức tạp Thành phần hoá học đơn giản, tất virus Nucleoproteit có cấu tạo chủ yếu protein acid nucleic Virus đợc chia làm loại: Virus chứa ADN virus chứa ARN Virus gây bệnh cho thực vật chứa ARN virus gây bệnh cho ngời động vật chứa ADN chứa ARN Virus khả sinh sản môi trờng dinh dỡng tổng hợp, phải nuôi cấy chúng tổ chức tế bào sống Virus ký sinh nội bào bắt buộc Một số virus động vật thực vật có khả tạo thành tinh thể Tinh thể trạng thái không thay đổi virus điều kiện định Chỉ có virus nằm trạng thái tĩnh (gọi virion) có khả tạo thành tinh thể Virus thời kỳ phát triển, sinh trởng không tạo thành tinh thể Phân loại virus gây bệnh cho ngời động vật thuỷ sản Hiện ngời ta vào số khoá phân loại, vào liên quan hoá học lớp, dựa trªn tÝnh chÊt cđa acid nucleic cã acid Dezoxiribonucleic (ADN) acid Ribonucleic (ARN) nhân Ngời ta đà chia virus thµnh nhãm lín: mét nhãm virus chøa ADN gọi tắt virus - ADN nhóm chứa ARN gọi tắt virus - ARN Gây bệnh ®éng vËt thủ s¶n cã c¶ nhãm virus ADN nhóm virus ARN Theo Ken Wolf, 1988 đà tổng kết nghiên cứu 59 virus bệnh virus cá giới, đó: nuôi cấy thành công virus từ 23 bệnh cá Theo D.Lightner tổng kết đến năm 1996 giới đà nghiên cứu 15 bệnh virus tôm he Penaeus Ngoài nhiều công trình nghiên cứu bệnh virus cua, nhuyễn thể Bảng 11: tỉng hỵp sè bƯnh virus chđ u cđa ®éng vËt thủ s¶n Nhãm virus ADN cã hä: Herpesviridae, Iridpviridae, Parvoviridae, Baculoviridae, Nimaviridae gåm 17 bÖnh virus Nhãm virus ARN cã hä: Reoviridae, Birnaviridae, Rhabdoviridae, Picornaviridae, Togaviridae, Nodaviridae, Coronaviridae gåm 14 bƯnh 90 Bïi Quang TỊ Bảng 11: Danh mục bệnh virus chủ yếu ®éng vËt thủ s¶n S T T (1) 10 11 12 13 14 15 16 17 Tên bệnh Virus gây bệnh Tên giống loài Acid kích thớc nhân (nm) (3) (4) (5) (2) 1.Họ Herpesviridae Bệnh virus cá trê sông Herpesvirus (CCVD-Chamel catfish virus Disease) ictaluris BƯnh Herpesvirus c¸ håi Herpesvirus salmonis BƯnh Herpesvirus c¸ håi (OMV Herpesvirus Oncorhynchus masou virus) oncorhynchus Bệnh Herpesvirus cá chép Herpesvirus cyprini Bệnh virus dạng Herpes cđa cua xanh Virus d¹ng Herpes (Herpes like virus Disease-HLV) Họ Iridoviridae Bệnh tế bào Lympho cá vợc Iridovirus Bệnh Iridovirus cá song Iridovirus Bệnh Iridovirus tôm: Iridovirus IRDO-Shrimp Iridovirus Bệnh virus diềm hầu Thái Bình D−¬ng (Oyster verlar virus Disease- Iridovirus OVVD) Hä Parviviridae Bệnh hoại tử quan tạo máu dới vỏ cđa t«m Parvovirus (IHHN-Infectious Hypodermal and Hematopoietic necrosis) BƯnh Parvovirus gan tuỵ tôm Parvovirus (HPV-Hepatopancreatic Parvovirus) Bệnh virus hệ bạch huyết tôm Virus dạng Parvo (LPV-Lymphoidal parvo like virus) Hä Baculoviridae BƯnh Baculovirus ë t«m he Baculovirus penaei cã thĨ Èn (Occlusion (BP-Baculovirus penaei) body) BƯnh ho¹i tư tuyến ruột tôm (BMN-Baculoviral Midgut gland Baculovirus type C necrosis) kh«ng cã thĨ Èn BƯnh Baculovirus ë t«m só Baculovirus type A cã thĨ Èn (MBV- Monodon Baculovirus) Bệnh hồng cầu nhiễm Baculovirus (PHRV-Hemocyte-infecting non Virus dạng Baculo occluded Baculovirus) Họ Nimaviridae Bệnh virus đốm trắng giáp xác Whispovirus (WSSV-White spot syndrome Virus) không Èn 175-200 ADN ADN 150 ADN 220-240 ADN ADN ADN ADN ADN 130-330 150-170 136 ADN ADN 22 ADN 22-24 ADN 25-30 55-75x300 ADN ADN 75x300 ADN 75 x 300 ADN 90 x 640 ADN 120 x 275 91 BÖnh học thủy sản- phần Tiếp theo bảng (1) 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 (2) Hä Reoviridae BÖnh xuÊt huyết Reovirus cá trắm cỏ (GCRV-Grass carp Reovirus) Bệnh virus dạng REO tôm he (REO-RLV Reo-like-virus) Họ Birnaviridae Bệnh hoại tử gan cá (IPN-Infectiuos pancreatic necrosis) Họ Rhabdoviridae Bệnh hoại tử quan tạo m¸u cđa c¸ (IHNInfectious Hematopoietic Necrosis) BƯnh xt hut virus ë c¸ chÐp (Spring viremia of carp-SVC) BƯnh xt hut virus ë c¸ (Viral hemorrhagic septicemia-VHS) BƯnh Rhabdovirus tôm he (Rhabdovirus of penaeid shrimp-RPS) Bệnh virus dạng Rhabdovirus ë cua xanh Héi chøng dÞch bƯnh lë lt cá (Epizootic Ulcerative Syndrome-EUS) Họ Coronaviridae Bệnh đầu vàng tôm sú (Yellow head virus-YHV) 10 Họ Picornaviridae Héi chøng bÖnh Virus Taura (Taura Syndrone Virus TSV) BÖnh virus d¹ng Picorna ë cua xanh (Picorna like virus disease) 11 Họ Togaviridae Bệnh tạo không bào hệ bạch huyết cđa t«m (Lymphoid organ vacuolization virus- LOVV) 12 Hä Nodaviridae Gây bệnh hoại tử thần kinh (Viral Nervous Necrosis- VNN) cá song nuôi lồng biển (3) (4) (5) Reovirus Virus dạng Reo REO III REO IV ARN 60 - 70 ARN 50 - 70 Birnavirus ARN 55 - 75 Rhabdovirus ARN Rhabdovirus carpio ARN 70 x 170 60 - 90 x 90-180 Novirhabdovirus ARN 60 x 177 Rhabdovirus Virus dạng Rhabdo Virus dạng Reo Rhabdovirus Birnavirrus ARN ARN 70-125 ARN ARN 80 x 120 Gièng thuéc Coronaviridae ARN 44 x 173 Picornavirus ARN 30 - 32 Virus d¹ng Picorna ARN Virus d¹ng Tago ARN 30 – 50 Betanodavirus ARN 26-32 hä BÖnh xuÊt huyÕt virus cá chép Bệnh có nhiều tên gọi: bệnh phù bệnh cá chép, bệnh đốm đỏ cá chép, bệnh viêm bóng cá chép (Swim bladder inflammiation SBI), bệnh virus mùa xuân (Spring virus disease) Theo Fijan CTV, 1971 gọi bệnh virus mùa xuân họ cá chép (Spring Veremia of carpSVC) họ đà phân lập đợc loại virus: Rhabodovirus từ cá chép bị bệnh đốm ®á (Infectious dropsy of carp-IDC) 92 Bïi Quang TÒ 1.1 Tác nhân gây bệnh: Bệnh xuất huyết virus cá chép, từ lâu ao nuôi cá chép Châu Âu đà bị bệnh Hofer (1904) đà mô tả đặt tên bệnh xuất huyết vi khuẩn Bauer Fakto-novich 1969 đồng ý quan điểm bệnh xuất huyết cá chép vi khuẩn, bệnh đốm đỏ (xuất huyết) lần đợc quan tâm Liên Xô cũ từ năm 1915; Otte, 1963 nhiều nhà khoa học khác đồng ý với quan điểm Schaperclaus lần mô tả bệnh xuất huyết năm 1930 Đức Schaperclaus, 1979 thừa nhận bệnh đốm đỏ mô tả từ năm 1927 Bệnh xuất huyết cá chép bệnh vi khuẩn đà đợc điều tra ứng dụng phòng trị bệnh vùng Tây Âu Vi khuẩn đợc phát nhóm Gram âm từ đợt dịch bệnh, nhng phòng trị kháng sinh không đạt kết cao Do tác nhân gây bệnh vi khuẩn loại vi khuẩn đặc biệt luôn có mặt đợt dịch bệnh xuất huyết (đốm đỏ) Từ quan điểm số nhà khoa học Đông Âu Nga đà điều tra nghiên cứu cho bệnh xuất huyết (đốm đỏ) có tác nhân gây bệnh virus điều tra biến đổi môi trờng kết hợp tác nhân virus vi khuẩn Từ dạng bệnh xuất huyết cấp tính điển hình dạng bệnh mÃn tính lở loét Fijan CTV, 1971 đà phân lập đợc tác nhân gây bệnh virus Rhabdovirus carpio Tiếp theo hàng loạt nhà khoa học Châu Âu, Mỹ, Nhật sâu nghiên cứu tác nhân gây bệnh xuất huyết (bệnh virus mùa xuân) cá chép nhiều loài cá họ cá chép; cá mè trắng Hình 13: Rhabdovirus carpio (ảnh KHVĐT) R carpio, cấu trúc acid nhân ARN lớp vỏ protein (Gupta vµ Roy, 1980, 1981; Kiuchi vµ Roy, 1984; Roy, 1981; Roy CTV, 1984) hình que đầu tròn nh viên đạn, chiều dài 90-180nm, rộng 6090nm, có 450 lớp màng, trạng thái xốp kích thớc 200nm nhng thờng giữ lớp màng 100nm (hình 13) Việc chẩn đoán kháng huyết đà xác định đợc Rhabodovirus nhiều cá khác Thei Hill CTV, 1975 đà thừa nhận virus gây bệnh viêm bóng cá chép virus gây bệnh xuất huyết cá chép 1.2 Dấu hiệu bệnh lý: - Trạng thái: Dấu hiệu cá ngạt thở, bơi tầng mặt, cá chết chìm tầng đáy, cá thăng bơi không định hớng (bệnh viêm bóng hơi) - Dấu hiệu bên ngoài: mang da xuất huyết mắt Da có màu tối, chỗ viêm có nhiều chất nhầy, mắt lồi nhẹ, mang nhợt nhạt, tơ mang dính kết lại Máu loÃng chảy từ hậu môn - Nội tạng; Bụng chớng to (hình 14A), xoang bơng xt hut cã dÊu hiƯu tÝch nớc (phù), bóng xuất huyết teo dần ngăn (xem hình 14 B,C,D), lách sng to, tim, gan, thËn, rt xt hut, xoang bơng cã chøa nhiỊu dịch nhờn 1.3 Phân bố lan truyền bệnh: Bệnh chủ yếu gặp cá chép, chúng gây bệnh từ cá giống đến cá thịt Năm 1978-1979 xuất bệnh viêm bóng cá chép Hung bố mẹ Viện Nghiên cứu nuôi trồng thuỷ sản I gây chết nhiều Ngoài đà phân lập đợc virus R carpio từ cá mè trắng, mè hoa, cá diếc (Shchelkunov CTV, 1984), cá nheo hơng (Silurus glanis) đà nhiều bệnh tỷ lệ chết 90% (Fijan CTV, 1984) Bệnh xuất Châu Âu, Liên Xô cũ, Bắc Mü, Trung Qc, ViƯt nam 93 BƯnh häc thđy sản- phần A C ể B D Hình 14: A- cá chép bị bệnh viêm bóng hơi, thể chuyển màu đen (mẫu thu Viện NCNTTS I, 4/2006- theo Bùi Quang Tề); B- thịt cá chép xuất huyết (cá chép A bóc da), ngăn sau bóng có tợng teo lại (ẻ); C, D- bóng cá bị teo ngăn (mẫu thu Bắc Ninh, 1996) 1.4 Chẩn đoán: Dựa vào dấu hiệu bệnh lý bệnh thờng xuất vào mùa xuân mùa thu BƯnh ph¸t rÊt nhanh (bƯnh cÊp tÝnh), tû lƯ chÕt cao Khi phân lập vi khuẩn có dấu hiệu bệnh bên xác định dễ dàng virus Nếu có điều kiện chẩn đoán kháng huyết thanh, nuôi cấy virus 1.5 Phòng bệnh: Có vài biện pháp phòng bệnh xuất huyết virus cá chép (SVC), biện pháp có giới hạn, nhng phổ biến hiểu biết cha đầy đủ nguồn gốc virus đặc điểm quản lý nuôi cá Những phơng pháp virus học cha đợc nghiên cứu sâu bệnh xuất hut virus ë c¸ chÐp Dï kh¸ng thĨ trung tính đợc xác định huyết cá bố mẹ điểm đáng ý kháng thể trung tính đặc trng cá cha nhiễm virus nhiễm bệnh chậm Khi nuôi cá chép sông, suối nơi có nhiều cá tự nhiên (hoang d¹i) cã thĨ bƯnh virus dƠ xt hiƯn Mét biện pháp sinh học để phòng bệnh nhiệt độ cách nuôi cá nhiệt độ cao 200C Vì dấu hiệu thay đổi mùa vụ đặc trng giới hạn bệnh phát triển (bệnh virus mùa xuân) Do phòng bệnh cho cá, nuôi cá vùng nớc ấm tác nhân gây bệnh xuất Biện pháp phòng bệnh cách chọn giống cá có sức đề kháng với bệnh xuất huyết virus áp dụng đựoc, nhng thực biện pháp không đại trà đợc Từ năm 1962 Liên Xô cũ đà có chơng trình chọn giống cá chép có sức ®Ị kh¸ng víi bƯnh xt hut virus ®· x¸c nhận tỷ lệ sống nuôi cá chép cá có sức đề kháng với bệnh cá dễ mắc bệnh chênh khoảng 30% (Kirpichnikov Faktorovich, 1972; Kirpichnikov CTV, 1972) Vơng quốc Anh đà tìm đợc dòng cá chép nuôi nội địa có 94 Bùi Quang Tề sức đề kháng cá chép hoang dại Tỷ lệ chết cá chép hoang dại 60-90% cá chép nuôi (nhà) tỷ lệ chết không đáng kể (Hill, 1977) Qua thực tế việc chữa phòng bệnh bệnh virus cá biện pháp phòng hoá chất không cho kết cao (gần nh tác dụng) Biện pháp phòng bệnh miễn dịch cho kết tốt đà thực cho bệnh xt hut virus ë c¸ chÐp Sù ph¸t triĨn ngày mạnh biện pháp phòng bệnh miễn dịch cho ngời động vật nhng cá bị giới hạn nh khả miễn dịch theo tuổi cá nhiệt độ (cao 200C) thuận lợi cho phản ứng miễn dịch cá Nhng vacxin xét mặt kinh tế cha đáp ứng cho nghề nuôi cá nh giá thành cao Trong ao nuôi cá giống khó thực đợc phòng bệnh vacxin áp dụng theo phơng pháp phòng chung Bnh herpesvirus cá chép- Koi herpesvirus Disease- KHV Herpesvirus koi mộ bệnh virus truyền nhiễm cao cho cá, nguyên nhân gây bệnh tỷ chết ác liệt cá chép (Cyprinus carpio) (Hedrick et al., 2000; OATA, 2001) Cá chép nuôi làm thực phẩm số cá chép nuôi làm cảnh đề nhiễm bệnh KHV Báo cáo bệnh xuất Israel, năm 1998 Từ đến bệnh xảy Mỹ, châu Âu châu Á (Hedrick et al., 2000; OATA, 2001; Anonymous, 2003) 2.1 Tác nhân gây bệnh Virus có nhân axit nucleic AND thuộc họ Herpesviridae, giống Herpesvirus (Ronen et al., 2003), (Waltzek et al., 2004) Những loài cá thuộc họ cá chép cá vàng (Carassius auratus) cá trắm cỏ (Ctenopharyngodon idella) dường không bị ảnh hưởng bệnh KHV (OATA, 2001) 2.2 Dấu hiệu bệnh lý: Đầu tiên vài tổn thường mang tỷ lệ chết cao Một số trường hợp vi khuẩn KST tác nhân thứ hai làm cho virus nhiễm nguy hiểm Trạng thái cá nhiễm bệnh thường gần tầng mặt, bơi lờ đờ bị sốc ngạt thở bơi không định hướng Dấu hiệu bệnh ngồi bệnh KHV thấy mang có vết chấm lốm đốm màu đỏ màu trắng (hình 15, 16) (giống bệnh vi khuẩn dạng sợi), mang chảy máu, mắt trũng, da có đám bạc màu phồng rộp Lấy nhớt mang kiểm tra kính hiển vi thường gặp số lượng lớn vi khuẩn KST khác (Hedrick et al., 2000; OATA, 2001; Goodwin, 2003) Dấu hiệu bên bệnh KHV khơng có đặc biệt, chúng quan bắm chặt vào xoang thể xuất chấm lốm đốm (Hedrick et al., 2000; Goodwin, 2003) Tỷ lệ chết mãnh liệt xảy nhanh quần đàn nhiễm bệnh, cá chết bắt đầu vòng 24-48 sau xuất dấu hiệu bệnh Thí nghiệm nhiễm bệnh virus nhiệt độ 220C, 82% cá chết vòng 15 ngày (Ronen et al., 2003) 2.3 Phân bố lan truyền bệnh: Bệnh KHV nguyên nhân gây chết từ 80-100% quần đàn cá, nhiệt độ 22-270C (OATA, 2001) Bệnh KHV nhiễm khác với tuổi cá, nhốt chung cho thấy cá hương nhiễm mạnh cá trưởng thành (Perelberg et al., 2003) 95 Bệnh học thủy sản- phần Gây nhiễm cho tiếp xúc trực tiếp với cá bệnh, với dịch từ cá bệnh nước từ hệ thống cá bệnh, bệnh nhiễm gây chết cá phụ thuộc nhiệt độ nước tăng (OATA, 2001) Cá vàng loài cá khác họ cá chép không nhiễm bệnh KHV (Perelberg et al., 2003; Ronen et al., 2003) Virus xuất sau nhiễm 14 ngày cho cá, nhiên bệnh phụ thuộc vào nhiệt độ yếu tố thứ hai cần thiết cho bệnh bùng phát Tỷ lệ chết liên quan đến bệnh KHV xảy nhiệt độ 18-270C, hầu hết tỷ chết không xảy nhiệt độ < 180C > 300C (OATA, 2001; Goodwin, 2003) A B Hình 15: A- Cá chép bị bệnh KHV thường thấy mang có vết chấm lốm đốm màu đỏ màu trắng Những vết chấm xuất dạng bệnh vi khuẩn hình sợi mang cá; B- mang bị sơ rách có màu trắng;Theo Andy Goodwin B Hình 16: cá chép bị bệnh KHV: mang bị hoại tử (mẫu thu Viện NCNTTS 1, 4/2006) 2.4 Chẩn đốn bệnh: Ni cấy virus dùng tế bào vây cá chép; kỹ thuật PCR; kỹ thuật ELISA 2.5 Phòng bệnh: Áp dụng biện pháp phòng bệnh tổng hợp 96 Bïi Quang TÒ Bảng 12: So sánh bệnh KHV, bệnh xuất huyết virus (SVC) bệnh đậu cá chép (CHV1) Tên khác Tác nhân gây bệnh Loài cá nhiễm Nhiệt độ nước Lan truyền bệnh Tuổi mắc bệnh Dấu hiệu bệnh lý- trạng thái Bên Bên Chẩn đoán bệnh Tẩy trùng KHV Bệnh hoại tử mang Herpesvirus (virus AND) Cá chép 18-270C Tiếp xúc Sản phẩm trao đổi chất Cá nhỏ nhiễm cá trưởng thành Bơi lờ đờ tầng mặt, gây chết Hoại tử mang, mắt trũng Ít dấu hiệu Ni cấy virus CPE PCR; ELISA Chlorin 200ppm 1h SVC Bệnh viêm bóng Rhabdovirus carpio (virus ARN) Cá chép, cá diếc 5-180C Tiếp xúc Sản phẩm trao đổi chất Cá nhỏ nhiễm cá trưởng thành Nằm đáy bể, gây chết Xuất huyết thân vây Viêm bóng Nuôi cấ virus CPE PCR Chlorin 500ppm 10 phút CHV-1 Herpesvirus cyprinus (virus AND) Cá chép ... kh«ng cã thĨ Èn 175 -20 0 ADN ADN 150 ADN 22 0 -24 0 ADN ADN ADN ADN ADN 130-330 150-170 136 ADN ADN 22 ADN 22 -24 ADN 25 -30 55-75x300 ADN ADN 75x300 ADN 75 x 300 ADN 90 x 640 ADN 120 x 27 5 91 Bệnh học... ADN 90 x 640 ADN 120 x 27 5 91 Bệnh học thủy sản- phần TiÕp theo b¶ng (1) 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 (2) Hä Reoviridae BƯnh xt hut Reovirus ë c¸ trắm cỏ (GCRV-Grass carp Reovirus)... (RV-PJ -2) Virus bệnh đốm trắng Thái lan (SEMBV) Virus bệnh đốm trắng (WSBV) Kích thớc virus 120 x 360 nm 84 x 22 6 nm 83 x 27 5 nm 121 x 27 6 nm 70-150x350-380nm KÝch th−íc nh©n 54 x 21 6 nm 89 x 20 1