Nghiên cứu quy trình chế biến cao từ nấm vân chi ( trametes versicolor)

LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập trường đại học Cơng Ngiệp Thành Phố Hồ Chí Minh chúng em có kinh nghiệm kiến thức cịn hạn chế nên nhóm gặp phải nhiều khó khăn thực đề tài nghiên cứu Nhưng nhờ hướng dẫn đầy tâm huyết Thầy Cô Viện Công nghệ Sinh học Thực phẩm, hỗ trợ nhiệt tình từ bạn bè giúp nhóm chúng em lấp đầy khoảng trống kiến thức lẫn kinh nghiệm tảng ln bên cạnh chúng em suốt trình học tập, làm việc nghiên cứu sau Nay nhóm chúng em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến: Ban Giám Hiệu trường Đại học Công nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, Ban lãnh đạo Viện Cơng nghệ Sinh học tạo điều kiện sở vật chất – kỹ thuật tốt cho nhóm chúng em suốt trình học tập rèn luyện trường Đồng thời làm đề tài nghiên cứu nhóm Bộ mơn Công nghệ Thực Phẩm trường Đại học Công nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, q thầy cơ, tập thể cán quản lý phịng thí nghiệm mơn tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện cho nhóm chúng em tiếp xúc với trang thiết bị thí nghiệm đại Đặc biệt, chúng em xin gửi lời cảm ơn đến thầy Nguyễn Ngọc Thuần hướng dẫn truyền đạt kiến thức quý báu giúp nhóm chúng em thực đề tài từ bước kết cuối nghiên cứu Chúng em ln muốn cảm ơn thầy ln sát cánh, tận tình bảo, hướng dẫn truyền đạt hết kinh nghiệm q báu Ngồi ra, thầy cịn người giúp chúng em tìm hiểu có thái độ nghiên cứu, làm việc khoa học, nghiêm túc hiệu Chắc chắn điều bổ ích cần thiết cho q trình học tập, nghiên cứu làm việc sau chúng em Cảm ơn tất bạn giúp đỡ, đóng góp ý kiến chia sẻ kiến thức, kinh nghiệm suốt thời gian thực đề tài Nhóm chúng em xin chân thành cảm ơn! LỜI MỞ ĐẦU Nấm Vân chi có tên khoa học Trametes versicolor/ Coriolus versicolor Thành phần Nấm Vân chi chứa hai loại Polysaccharides giúp tăng cường hệ thống miễn dịch nuôi vi khuẩn tốt ruột để ngăn ngừa bệnh tật đặc biệt bệnh ung thư tăng mức lượng, hỗ trợ tiêu hoá Nấm Vân chi chứa enzym chữa bệnh, protein, khoáng chất, Vitamin B, Vitamin D, chứa hợp chất kháng virus kháng khuẩn Nó chứa thành phần chống oxy hố giúp làm chậm q trình oxy hoỏ, trung ho cỏc gc t (Aksu, Klỗ et al 2007) Ngồi Nấm Vân chi cịn có tác dụng giảm lượng đường máu, giảm huyết áp cho người huyết áp cao Tuy nhiên thành phần chiếm tỉ lệ lớn Nấm Vân chi PSP PSK Đây thành phần tăng cường hệ thống miễn dịch tốt cho thể (Collins, Kotterman et al 1996) Hiện nay, xu hướng sử dụng nguồn thực phẩm có chứa hoạt tính sinh học ngày nhiều Đặc biệt thực phẩm bổ sung chất có lợi cho sức khỏe theo định hướng chống oxy hóa… (Nguyen, Hai et al 2014) Ở Việt Nam, năm gần xuất sản phẩm từ Nấm Vân chi chủ yếu dạng dược liệu sản phẩm đóng gói bán trực tiếp thị trường Nhưng chưa có sản phẩm dạng cao để tiện lợi cho người sử dụng nhiều đối tượng sử dụng Hiện người trở nên lười hoạt động làm gia tăng bệnh giảm sức đề kháng yếu tố công việc,mơi trường, khí hậu, thói quen ăn uống, Thấy rõ vấn đề nhóm chúng tơi đề xuất dự án Xuất phát từ vấn đề nên nhóm chúng tơi định chọn đề tài: ―Nghiên cứu điều kiện trích ly polysaccharides từ nấm Vân chi (Trametes versicolor) ứng dụng tạo sản phẩm cao‖ Với mục đích khai thác triệt để hàm lượng polysaccharides cao Việc nghiên cứu có ý nghĩa nhiều mặt: Về mặt khoa học, đề tài giúp đánh giá thành phần có nguyên liệu Nấm Vân chi, điều kiện chiết tách tối ưu hàm lượng polysaccharides có hiệu suất cao nhất, đồng thời giúp cho nhà nghiên cứu hiểu thêm thành phần bào tử điều kiện tối ưu; Về mặt công nghệ, cung cấp thông số công đọan quy trình cơng nghệ chế biến cao từ Nấm Vân chi; Về mặt đào tạo, nghiên cứu tài liệu tham khảo cho số sinh viên muốn nghiên cứu thành phần, điều kiện tối ưu chất, biết điều kiện tối ưu polysaccharides có nấm, tạo tiền đề để nhà sản xuất biết thành phần hàm lượng có ngun liệu; Về mặt sách, tạo tiền đề để nhà sản xuất biết thành phần hàm lượng có ngun liệu; Về mặt sách phát triển kinh tế xã hội, đề tài góp phần tạo sản phẩm thị trường, đáp ứng nhu cầu phát triển xã hội nguồn nhân công, tạo việc làm cho người lao động, phát triển kinh tế xã hội, đề tài góp phần tạo sản phẩm thị trường, đáp ứng nhu cầu phát triển xã hội nguồn nhân công, tạo việc làm cho người lao động TĨM TẮT Mục đích báo cáo nghiên cứu tạo sản phẩm dạng cao, sản phẩm chứa chất PSP PSK giúp ngăn ngừa ung thư, chống lão hoá, giúp bệnh nhân mắc phải bệnh nhanh chóng hồi phục, tăng cường sức đề kháng, miễn dịch, hỗ trợ trình tái tạo tế bào bệnh nhân sử dụng phương pháp xạ trị Thông qua việc xác định hàm lượng phương pháp Follin - Ciocalteu’s (đối với hàm lượng polyphenols) phương pháp tạo màu với thuốc thử nhôm clorua AlClз (đối với hàm lượng flavonoids) PHẦN I: THÔNG TIN CHUNG I Thông tin chung đề tài 1.1 Tên đề tài: Nghiên cứu quy trình chế biến cao từ vân chi (Trametes versicolor) 1.2 Mã số: 194 TP026 1.3 Danh sách chủ trì, thành viên tham gia thực đề tài: STT Họ tên Đơn vị công Vai trò thực đề tác tài Võ Cao Thanh Nhã Trường ĐHCN Nghiên cứu đề tài Trần Xuân Thành Trường ĐHCN Nghiên cứu đề tài Nguyễn Thị Thuý Vy Trường ĐHCN Nghiên cứu đề tài Th.S Nguyễn Ngọc Thuần Trường ĐHCN Cố vấn 1.4 Đơn vị chủ trì: Viện Cơng Nghệ Sinh học Thực phẩm 1.5 Thời gian thực hiện: 1.5.1 Theo hợp đồng: từ tháng 01 năm 2019 đến tháng 07 năm 2019 1.5.2 Gia hạn hợp đồng: đến tháng 01 năm 2020 1.5.3 Trên thực tế: từ tháng 01 năm 2019 đến tháng 12 năm 2019 1.6 Những thay đổi so với thuyết minh ban đầu(Nếu có): Khơng có 1.7 Tổng kinh phí đƣợc phê duyệt đề tài: 5.000.000 VNĐ (số tiền chữ: Năm triệu đồng chẵn) II Kết nghiên cứu 2.1 Đặt vấn đề: Nấm Vân chi có tên khoa học Trametes versicolor/ Coriolus versicolor Thành phần Nấm Vân chi chứa hai loại Polysaccharides giúp tăng cường hệ thống miễn dịch nuôi vi khuẩn tốt ruột để ngăn ngừa bệnh tật đặc biệt bệnh ung thư tăng mức lượng, hỗ trợ tiêu hoá (do Rosario Freixo, Karmali et al 2008) Nấm Vân chi chứa enzym chữa bệnh, protein, khoáng chất, Vitamin B, Vitamin D, chứa hợp chất kháng virus kháng khuẩn Nó chứa thành phần chống oxy hố giúp làm chậm q trình oxy hố, trung hoà gốc tự (Hsu, Hsu et al 2013) Ngồi Nấm Vân chi cịn có tác dụng giảm lượng đường máu, giảm huyết áp cho người huyết áp cao Tuy nhiên thành phần chiếm tỉ lệ lớn Nấm Vân chi PSP PSK Đây phần tăng cường hệ thống miễn dịch tốt cho thể (Hui, Sit et al 2005) Vào năm 1970, người Nhật Bản nghiên cứu chiết xuất thành cơng polysaccaride (PSK) có khả tăng hệ miễn dịch người, chống ung thư thông qua khả miễn dịch qua trung gian tế bào (Ho, Kim et al 2006) PSP phát nhóm chuyên gia Đại học sư phạm Thượng Hải, hợp chất chống ung thư điều chỉnh hệ miễn dịch xác định (Liu, Ng et al 1993, Wang, Ng et al 1996) Quy trình có khả sản xuất nguyên liệu cho việc nghiên cứu PSK PSP sợi nấm Coriolus versicolor Vì lợi ích từ Vân Chi người không ngừng nghiên cứu, thử nghiệm để đưa sản phẩm phục vụ nhu cầu người Trong thử nghiệm ngẫu nhiên, mù đơi, có đối chứng giả dược với 84.496 người lớn từ 65 tuổi trở lên, đánh giá hiệu vắcxin liên hợp polysaccharides 13-valent (PCV13) việc ngăn ngừa chủng loại phế cầu khuẩn cộng đồng viêm phổi, viêm phổi nhiễm khuẩn phế cầu khuẩn không xâm lấn không xâm lấn, bệnh phế cầu khuẩn xâm lấn (Bonten, Huijts et al 2015) Các phương pháp phịng thí nghiệm tiêu chuẩn xét nghiệm phát kháng nguyên tiết niệu đặc hiệu huyết sử dụng để xác định viêm phổi cộng đồng mắc phải bệnh phế cầu khuẩn xâm lấn Vì tính chất có lợi polysaccharides tạo nên tính tiện dụng đa dạng sản phẩm Nấm Vân chi thị trường nên đề tài “Nghiên cứu quy trình chế biến cao từ vân chi (Trametes versicolor)” giúp tạo thêm tính tiện lợi cho bệnh nhân ung thư khách hàng có nhu cầu sử dụng sản phẩm từ Nấm Vân chi 2.2 Mục tiêu 2.2.1 Mục tiêu tổng quát: Xây dựng quy trình chế biến cao từ vân chi (Trametes vesicolor) 2.2.2 Mục tiêu cụ thể:  Xác định số tiêu có Nấm Vân chi (Trametes vesicolor):  Độ ẩm  Hàm lượng polyphenols tổng  Hàm lượng flavonoids tổng  Hàm lượng polysaccharides tổng  Khảo sát công đoạn trích ly ảnh hưởng đến hàm lượng polysaccharides, polyphenols flavonoids có nấm Vân chi (Trametes vesicolor)  Khảo sát nhiệt độ 75⁰C, 85⁰C, 95⁰C thời gian thích hợp 30, 45, 60 tỉ lệ dung môi 30ml, 45ml, 60ml chạy phần mềm JMP  Biểu diễn kết khảo sát nhiệt độ độ thị  Xác định nhiệt độ trích ly thích hợp  Với nhiệt độ khảo sát tiến hành kiểm tra hàm lượng polysaccharides, polyphenols flovonoids tổng  Khảo sát tínhh ảnh hưởng công đoạn cô đặc phương pháp cô quay chân không đuổi nước đến hàm lượng polysaccharides Nấm Vân chi (Trametes versicolor)  Khảo sát công thức phối chế cao vân chi phương pháp cảm quan sản phẩm phép thử thị hiếu 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Xác định yếu tố ảnh hƣởng, trích ly xây dựng quy trình sản xuất cao từ Nấm Vân chi điều kiện phịng thí nghiệm: - Thí nghiệm 1: Xác định số tiêu có Nấm Vân chi: độ ẩm, hàm lượng polyphenols tổng , hàm lượng flavonoids tổng, hfm lượng polysaccharides tổng - Thí nghiệm 2: Khảo sát yếu tố (nhiệt độ, thời gian, tỷ lệ cồn) ảnh hưởng đến hàm lượng polysaccarides cơng đoạn trích ly Phương pháp quy hoạch thực nghiệm với ba yếu tố hàm mục tiêu Lựa chon mơ hình Box – Behnken để thực Sử dụng phương pháp thống kê để tìm mơ hình thích hợp giá trị dự đốn tối ưu - Thí nghiệm 3: Khảo sát số yếu tố (nhiệt độ, áp suất, thời gian) ảnh hưởng đến polysaccarides công đoạn cô đặc phương pháp quy hoạch thực nghiệm với ba yếu tố hàm mục tiêu Lựa chon mơ hình Box – Behnken để thực Sử dụng phương pháp thống kê để tìm mơ hình thích hợp giá trị dự đốn tối ưu - Thí nghiệm 4: Khảo sát số chất phụ gia ảnh hưởng đến chất lượng cảm quan sản phẩm phương pháp cảm quan dựa theo TCVN 11182:2015 ISO 5492:2008 2.3.2 Phƣơng pháp phân tích - Xác định hàm lượng polyphenls, polysaccharides flavonoids phương pháp UV- Vis hai chùm tia - Xác định hàm ẩm phương pháp nhiệt 2.3.3 Phƣơng pháp xử lý số liệu Số liệu thống kê xử lý Microsolf Excel 2016 Mơi trường thí nghiệm thực lập lại lần kết giá trị trung bình Sử dụng phần mềm JMP để phân tích thống kê số liệu thí nghiệm đánh giá khác biệt giữ mẫu phân tích Phân tích phương sai ANOVA yếu tố sử dụng để xác định khác mẫu có ý nghĩa hay không 2.4.Tổng kết kết nghiên cứu 2.4.1 Đồ thị hàm ẩm STT Lần Lần Lần Độ ẩm (%) 14,56 13,73 13,86 Trung bình 14,05 % 15 14.8 14.6 14.4 14.2 14 13.8 13.6 13.4 13.2 13 Lần Lần Lần Hình Đồ thị biểu diễn độ ẩm Nấm Vân chi Myanmar 2.4.2 Xác định yếu tố ảnh hƣởng, trích ly xây dựng quy trình sản xuất cao từ Nấm Vân chi 2.4.2.1 Thí nghiệm 1: Xác định thành phần Nấm Vân chi Hàm lƣợng chất khô Phần trăm Dung môi Thành phần tổng Ethanol Polyphenols 7,91 1,25 0,79 Flavonoids 38,74 2,00 3,87 0,200 Nƣớc cất Polysaccharid 9,63 0,10 0,96 0,125 0,010 4.5 3.5 2.5 1.5 0.5 Polyphenol Flavonoid Polysaccharid Hình Phần trăm chất Nấm Vân chi Myanmar Theo kết thu ta có thành phần chất có 1g chất khơ Nấm Vân chi Myanmar độ ẩm 14.05%, có hàm lượng flavonoids cao (3,87 0,200) (%), cao gấp lần so với hàm lượng polyphenols polysaccharides Polyphenols chiếm (0,79 (%) polysaccharides chiếm (0,96 0,125) 0,010)(%) 2.4.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát yếu tố (nhiệt độ, thời gian, tỷ lệ nƣớc) ảnh hƣởng đến hàm lƣợng polysaccaride cơng đoạn trích ly: 10 3.3.5 Các thông số cô đặc ảnh hƣởng đến hiệu suất cô đặc polysccharides nấm Vân chi Bảng 13 Kết chạy thực nghiệm STT Mã code Xₐ Xb Y 00 20 22,5 32,67 10 20 28,75 +0 30 22,5 39,25 -0 10 22,5 29,74 +- 30 20 34,37 -+ 10 25 29,29 ++ 30 25 35,16 0- 20 20 31,16 00 20 22,5 32,14 10 0+ 20 25 33,32 3.3.6 Các thơng số trích ly có dung mơi nƣớc ảnh hƣởng đến hiệu ứng trích ly polysaccharides Nấm Vân chi Mianmar Kết chạy tối ưu polysaccharides từ Nấm Vân chi Hình 21 Biểu đồ biểu diễn tƣơng quan biến giá trị polysaccharides 58 Xu hướng lựa chọn điều kiện trích ly tối ưu polysaccharides: Hình 22 Biểu đồ biểu diễn xu hƣớng lựa chọn điều kiện trích ly tối ƣu Hình 23 Biểu đồ biểu diễn xu hƣớngpolysaccharides lựa chọn điều kiện trích ly tối ƣu polysaccharides Nhìn vào xu hướng ta thấy rằng: Ở vùng khảo sát nhiệt độ từ 75 – 95⁰ C theo hình 2.3, ta lựa chọn điều kiện tối ưu 90⁰ C Ta thấy rằng, nhiệt độ 90⁰ C điều kiện trích ly thích hợp hàm lượng polysaccharides cao Trong vùng khảo sát thời gian trích ly từ 30 – 60 phút, yếu tố trích ly tối ưu thời gian trích ly gần 45 phút 60 phút hàm lượng polysaccharides cao Tuy nhiên xu hướng lựa chọn tối ưu 45 phút tiết kiệm thời gian trích ly mà hàm lượng polysaccharides cao Nồng độ dung mơi có vùng khảo sát từ 30 – 60 (dung mơi sử dụng nước) xu hướng lựa chọn nồng độ dung mơi 45% cho hàm lượng polysaccharides cao nhất, đồng thời tiết kiệm dung mơi Cuối cùng, yếu tố lựa chọn thích hợp cho việc trích ly hàm lượng polysaccharides cao nhiệt độ 90⁰ C trích ly 45 phút nồng độ dung môi 45% Theo Lundstedt (1998) cho biết giá trị R2 ≥ 0,8 kết có độ tin cậy cao mơ hình lựa chọn thích hợp Kết mà mơ hình Box - Behken phần mềm xử lý số liệu JMP tối ưu hóa q trình trích ly polysaccharides, giá trị R2 = 0,98 > 0,8 nên mơ hình tuơng thích để tối ưu hóa q trình trích ly polyphenols, kết chấp nhận Ngoài ra, giá trị pvalue = 0,0015< 0,05 nên kết q trình tối ưu có ý nghĩa mặt thống kê 59 Theo hình phụ lục ta kết luận yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng polysaccharides nhiệt độ , thời gian, tỉ lệ Ta có phương trình hồi quy sau: Y₂ = 0.638375X₁ + 0.091X₂ + 0.04225X₃ + 0.013875X₁ X₃ + 0.027375X₁ X₃ + 0.017X₂ X₃ + 0,3568125X₁ ² – 0.012167X₂ ²+ 0.0743333X₃ ² Kết chạy chạy thực nghiệm cô đặc polysaccharides Hình 24 Biểu đồ biểu diễn tƣơng quan biến giá trị polysaccharides Hình 25 Biểu đồ biểu diễn xu hƣớng lựa chọn điều kiện trích ly tối ƣu polysaccharides 60 Nhìn vào xu hướng ta thấy rằng: Ở vùng khảo sát thời gian cô đặc từ 10-30 phút lựa chọn tối ưu 20 phút thời gian điều kiện đặc thích hợp để trích ly hàm lượng polysaccharides cao Trong vùng khảo sát áp suất cô đặc từ 20-25inchHg, yếu tố trích ly tối ưu áp suất 22,5inchHg cho hàm lượng polysaccharides cao Cuối cùng, yếu tố lựa chọn thích hợp cho việc cô đặc mẫu để hàm lượng polysaccharides cao thời gian 20 phút cô đặc áp suất 22,5inchHg Theo Lundstedt (1998) cho biết giá trị R2 ≥ 0,8 kết có độ tin cậy cao mơ hình lựa chọn thích hợp (Aida, Shuhaimi et al.) Kết mà mơ hình Box - Behnken phần mềm xử lý số liệu JMP (theo phụ lục F.4 trang F2) tối ưu hóa trình đặc cao flavonoids giá trị R2 = 0,9 > 0,8 nên mơ hình tuơng thích để tối ưu hóa q trình đặc cao flavonoids, kết chấp nhận Ngồi ra, giá trị pvalue = 0,039 < 0,05 nên kết trình tối ưu có ý nghĩa mặt thống kê Theo hình 18 ta có yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất đặc từ ta có phương trình hồi quy: Y₂ = 3.5X₁ + 0.5816667X₂ + 0.0625X₁ X₂ + 0.6971429X₁ ² – 1.557857X₂ ² 3.3.7 Kết phép thử cảm quan Sau thực đánh giá khảo sát 20 người hội đồng cảm quan cho kết xử lí excel cho ta biểu đồ sau: A B C Hình 26 Đồ thị biểu diễn mức độ yêu thích sản phẩm cao Vân chi 61 Dựa vào biểu đồ ta thấy mẫu cao phối 1g pectin (4.8 điểm) có độ u thích cao hai mẫu A (4.25 điểm) C (4.45 điểm) Xét độ lệch chuẩn mức độ đánh giá 20 thành viên hội đồng cảm quan ta thấy mẫu cao A có độ lệch chuẩn cao cho thấy có chênh lệch lớn việc đánh giá mức độ yêu thích cho thấy cảm nhận thành viên hội đồng khác biệt mẫu cao Về mẫu cao B C có độ lệch chuẩn tương đồng với thấp A cho thấy độ tin cậy cao mức độ đánh giá Dựa vào yếu tố cho ta thu nhận kết mẫu cao Vân chi phối 1g pectin sử dụng làm công thức phối chế Ta thu công thức phối chế sau: Dịch cao bào tử Nấm Vân chi 76% Syrup 23% Pectin 1% Sản phẩm cao Vân chi dựa vào kết đánh giá cảm quan cho thấy chấp nhận sản phẩm thị trường 3.4 Kết luận Qua trình nghiên cứu thực đề tài, chúng tơi tìm hàm lượng chất có nguyên liệu Nấm Vân chi Trametes versicolor trích ly hai dung mơi ethanol nước Qua khảo sát ta thấy rằng, trích ly dung mơi ethanol có hiệu methanol hàm lượng polyphenols flavonoids, đồng thời có ý nghĩa với sản xuất thực phẩm Ta có kết sau: Với hàm lượng polysaccharides đạt 11,6 dung môi nước) flavonoids 2,965 0,200và polyphenols 0,91 0,10 (trích ly 0,125 ( tính theo phần trăm) Sau tiến hành khảo sát q trình trích ly hàm lượng polýaccharide mơ hình Box – Behnken với ba yếu tố ảnh hưởng nhiệt độ siêu âm (75-95⁰ C), thời gian trích ly (30-60 phút) nồng độ dung môi nước (30-60) Kết thu là: Đối với hàm lượng polysaccharides vân chi mianma Thời gian trích ly 90 phút, nhiệt độ siêu âm 45⁰ C với nồng độ dung môi 45% (cho hàm lượng 2,13%) Kết thu là: Đối với hàm lượng polysaccharides vân chi Việt Nam Thời gian trích ly 90 phút, nhiệt độ siêu âm 45⁰ C với nồng độ dung môi 45% (cho hàm lượng 1,19%) 62 Sau tìm thơng số tối ưu trích ly hàm lượng polysccharide ta tiến hành chạy mơ hình JMP nhằm tìm thơng số tối ưu cho q trình đặc sản phẩm nâm vân chi với hai yếu tố áp suất với thời gian cô đặc 3.5 Kiến nghị Đề tài nghiên cứu tiến hành thực phịng thí nghiệm có quy mơ nhỏ nên đưa kiến nghị sau: Các kết chưa nằm khoảng tối ưu khoảng sát khoảng chưa đủ để đạt kết tối ưu Vì sản phẩm tạo thành chưa phải sản phẩm có chất lượng, hiệu cao Kiến nghị cần có thêm thời gian để khảo sát khoảng yếu tố ảnh hưởng để có kết tối ưu sát đưa sản phẩm có hiệu cao Phịng thí nghiệm với quy mô nhỏ dụng cụ thiết bị chưa có độ xác cao nên kết có sai xót nhỏ Đồng thời nhóm thực gặp vài trục trặc với việc sử dụng thiết bị đo màu UV-Vis làm chậm trễ trình nghiên cứu Hy vọng thiết bị cải tiến tốt thời gian tới 63 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO "TCVN 4327:2007 (ISO 5984:2002), Xác định tro thô." Aida, F M N A., M Shuhaimi, M Yazid and A G Maaruf (2009) "Mushroom as a potential source of prebiotics: a review." Trends in Food Science & Technology 20(11): 567575 Aksu, Z., N K Klỗ, S Erturul and G Dönmez (2007) "Inhibitory effects of chromium (VI) and Remazol Black B on chromium (VI) and dyestuff removals by Trametes versicolor." Enzyme and Microbial Technology 40(5): 1167-1174 Bonten, M J., S M Huijts, M Bolkenbaas, C Webber, S Patterson, S Gault, C H van Werkhoven, A M van Deursen, E A Sanders and T J Verheij (2015) "Polysaccharides conjugate vaccine against pneumococcal pneumonia in adults." New England Journal of Medicine 372(12): 1114-1125 Collins, P J., M Kotterman, J A Field and A Dobson (1996) "Oxidation of Anthracene and Benzo [a] pyrene by Laccases from Trametes versicolor." Applied and environmental microbiology 62(12): 4563-4567 Rosario Freixo, M., A Karmali, C Frazão and J M Arteiro (2008) "Production of laccase and xylanase from Coriolus versicolor grown on tomato pomace and their chromatographic behaviour on immobilized metal chelates." Process Biochemistry 43(11): 1265-1274 Ho, C.-Y., C.-F Kim, K.-N Leung, K.-P Fung, T.-F Tse, H Chan and C B.-S Lau (2006) "Coriolus versicolor (Yunzhi) extract attenuates growth of human leukemia xenografts and induces apoptosis through the mitochondrial pathway." Oncology reports 16(3): 609-616 Hsu, W.-k., T.-h Hsu, F.-y Lin, Y.-k Cheng and J P.-w Yang (2013) "Separation, purification, and α-glucosidase inhibition of polysaccharides from Coriolus versicolor LH1 mycelia." Carbohydrate polymers 92(1): 297-306 Hui, K P.-Y., W.-H Sit and J M.-F Wan (2005) "Induction of S phase cell arrest and caspase activation by polysaccharides peptide isolated from Coriolus versicolor enhanced the cell cycle dependent activity and apoptotic cell death of doxorubicin and etoposide, but not cytarabine in HL-60 cells." Oncology reports 14(1): 145-155 64 10 Liu, W., T Ng, S Sze and K Tsui (1993) "Activation of peritoneal macrophages by polysaccharopeptide from the mushroom, Coriolus versicolor." Immunopharmacology 26(2): 139-146 11 Nguyen, L N., F I Hai, S Yang, J Kang, F D Leusch, F Roddick, W E Price and L D Nghiem (2014) "Removal of pharmaceuticals, steroid hormones, phytoestrogens, UV-filters, industrial chemicals and pesticides by Trametes versicolor: role of biosorption and biodegradation." International Biodeterioration & Biodegradation 88: 169-175 12 Wang, H., T.-B Ng, W Liu, V E Ooi and S.-T Chang (1996) "Polysaccharides—peptide complexes from the cultured mycelia of the mushroom coriolus versicolor and their culture medium activate mouse lymphocytes and macrophages." The international journal of biochemistry & cell biology 28(5): 601-607 13 Hoachatcongnghiep.org.vn 14 Agarwood.org.vn 15 Harholt, J., Suttangkakul, A., & Scheller, H V (2010) Biosynthesis of pectin Plant physiology, 153(2), 384-395 16 Cui, J., et al., Characterisation and bioactivity of protein-bound polysaccharides from submerged-culture fermentation of Coriolus versicolor Wr-74 and ATCC-20545 strains Journal of industrial microbiology & biotechnology, 2007 34(5): p 393-402 17 Jönsson, L., et al., Detoxification of wood hydrolysates with laccase and peroxidase from the white-rot fungus Trametes versicolor Applied microbiology and biotechnology, 1998 49(6): p 691-697 18 Collins, P.J., et al., Oxidation of Anthracene and Benzo pyrene by Laccases from Trametes versicolor Applied and environmental microbiology, 1996 62(12): p 4563-4567 19 Nguyen, L.N., et al., Removal of pharmaceuticals, steroid hormones, phytoestrogens, UVfilters, industrial chemicals and pesticides by Trametes versicolor: role of biosorption and biodegradation International Biodeterioration & Biodegradation, 2014 88: p 169-175 20 Kha, T.T., Nghiên cứu số đặc điểm sinh vật học, sinh thái học nấm làm dược liệu mọc gỗ vườn Quốc Gia Ba Vì Hà Nội 2014 21 Hen, Yi, Xie, Mingyong, Zhang, Hui, Wang, Yuanxing, Nie, Shaoping, & Li, Chang (2012) Quantification of total polysaccharides and triterpenoids in Ganoderma lucidum and 65 Ganoderma atrum by near infrared spectroscopy and chemometrics Food Chemistry, 135(1), 268-275 22 Pawar, Harshal A, & D’Mello, Priscilla M (2011) Spectrophotometric estimation of total polysaccharides in Cassia tora gum 23 V K Gupta, S.C Taneja and B.D.Gupta (2010) Comprehensive Bioactive Natural Products: Studium Press LLC 24 Sarker, Satyajit D, & Nahar, Lutfun (2012) An introduction to natural products isolation Natural products isolation, 1-25 25 Raynie, Douglas E (2006) Modern extraction techniques Analytical chemistry, 78(12), 3997-4004 26 DONG, Yan-hong, LI, Shu-jing, ZHENG, Hui-hua, LI, Xue, CHEN, Gui-tang, ZHAO, Liyan, HU, Qiu-hui (2009) Optimization of Ultrasonic-assisted Extraction Technology of Ganoderma lucidum Polysaccharides by Response Surface Methodology [J] Food Science, 16, 018 27 Rodríguez Seoane, Paula, Flórez-Fernández, Noelia, Conde Piđeiro, Enma, & Domínguez González, Herminia (2017) Chapter - Microwave-Assisted Water Extraction Water Extraction of Bioactive Compounds (pp 163-198): Elsevier 28 Vinatoru, M., Mason, T J., & Calinescu, I (2017) Ultrasonically assisted extraction (UAE) and microwave assisted extraction (MAE) of functional compounds from plant materials TrAC Trends in Analytical Chemistry, 97, 159-178 29 Routray, Winny, & Orsat, Valérie (2012) Microwave-assisted extraction of flavonoids: a review Food and Bioprocess Technology, 5(2), 409-424 30 Bastos, Erick L., & Gonỗalves, Letớcia C P (2017) Chapter - Microwave-Assisted Extraction of Betalains A2 - González, Herminia Dominguez In M J G Muñoz (Ed.), Water Extraction of Bioactive Compounds (pp 245-268): Elsevier 31 Chemat, Farid, Rombaut, Natacha, Sicaire, Anne-Gaëlle, Meullemiestre, Alice, FabianoTixier, Anne-Sylvie, & Abert-Vian, Maryline (2017) Ultrasound assisted extraction of food and natural products Mechanisms, techniques, combinations, protocols and applications A review Ultrasonics Sonochemistry, 34, 540-560 66 32 Hielscher, T (2005) Ultrasonic production of nano-size dispersions and emulsions, paper presented at 1st Workshop on Nano Technology Transfer ENS Paris.–14–16 December.– Paris France Phụ lục Bảng 14 xử lý số liệu thành phần chất khô nguyên liệu Dung môi Ethanol Độ ẩm Thành phần tổng 14,56 Polyphenol Hàm lƣợng chất khô Flavonoid 13,73 Polysaccharid Nƣớc cất 13,86 Bảng 2: kết xử lý trích ly polysaccharide Phần trăm 7,91 1,25 0,79 0,125 38,74 9,63 2,00 0,10 3,87 0,96 0,200 0,010 Bảng 15 Kết xử lý trích ly polysaccharide Nghiệm thức Mã code Nhiệt độ Thời gian Tỉ lệ Mianmar −−0 75 30 45 1,807 −+0 75 60 45 1,946 000 85 45 45 1,92 +0− 95 45 30 2,44 0−− 85 30 30 1,911 0+− 85 60 30 2,065 0++ 85 60 60 2,154 000 85 45 45 1,98 67 000 85 45 45 1,96 10 0−+ 85 30 60 1,932 11 +0+ 95 45 60 2,554 12 −0− 75 45 30 1,855 13 −0+ 75 45 60 1,896 14 ++0 95 60 45 2,411 15 +−0 95 30 45 2,235 Bảng 3: kết tối ưu cô đặc polysacchide STT 10 Mã code 00 -+0 -0 +-+ ++ 000 0+ Xa 20 10 30 10 30 10 30 20 20 20 Xb 22,5 20 22,5 22,5 20 25 25 20 22,5 25 Y 32,67 28,75 39,25 29,74 34,37 29,29 35,16 31,16 32,14 33,32 Hình 27 Kết xử lý trích ly polysaccharide 68 69 Hình 28 Kết tối ƣu cô đặc polysaccharide 70 71 PHẦN III: PHỤC LỤC ĐÍNH KÈM Hợp đồng thực đề tài nghiên cứu khoa học Thuyết minh đề tài phê duyệt Quyết định nghiệm thu Hồ sơ nghiệm thu (biên họp, phiếu đánh giá, bảng tổng hợp điểm, giải trình, phiếu phản biện) Sản phẩm nghiên cứu (bài báo, vẽ, mơ hình, ) 72 ... sản phẩm từ Nấm Vân chi 2.2 Mục tiêu 2.2.1 Mục tiêu tổng quát: Xây dựng quy trình chế biến cao từ vân chi (Trametes vesicolor) 2.2.2 Mục tiêu cụ thể:  Xác định số tiêu có Nấm Vân chi (Trametes. .. cong thức phối chế cao vân chi 2.4.2 Đối tƣợng nghiên cứu 2.4.2.1 Đối tƣợng nghiên cứu: Nấm Vân chi (Trametes versicolor) Hình 16 Nguyên liệu Nấm Vân chi 35 2.4.2.2 Phạm vi nghiên cứu: Xác định... Nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh 2.4 Đối tƣợng nghiên cứu 2.4.1 Mục tiêu nghiên cứu  Xây dựng quy trình chế biến cao từ Nấm Vân chi  Xác định số tiêu có Nấm Vân chi  Khảo sát cơng đoạn trích ly  Khảo