Bài viết tiến hành nghiên cứu dựa trên quan sát và phân tích các đặc điểm triệu chứng bệnh trên cây lúa nhiễm bệnh thu tại nhiều ruộng lúa ở các giai đoạn sinh trưởng khác nhau và mức độ nhiễm bệnh khác nhau đã nhận định đó không phải là bệnh vàng lùn và lùn xoắn lá.
MỘT SỐ TRAO ĐỔI VỀ HIỆN TRẠNG BỆNH VI-RÚT LÚA LÙN SỌC ĐEN PHƢƠNG NAM Viện Bảo vệ thực vật Hiện nay, bệnh vi-rút lúa diễn biến phức tạp nghiêm trọng nhiều địa phương địa bàn nước, đặc biệt bệnh lùn sọc đen phương Nam (LSĐ-PN) – bệnh vi-rut hại lúa xuất hiện, bùng phát dịch gây hại nghiêm trọng 34 tỉnh/thành phố năm 2009 Căn kết giám định dương tính với bệnh mẫu lúa thu số tỉnh miền Bắc Viện Bảo vệ thực vật (BVTV) thời gian vừa qua, vào kết nghiên cứu khoa học đề tài “Nghiên cứu nguyên nhân biện pháp phòng chống bệnh lùn lụi hại lúa miền Bắc” vào thông tin trạng bệnh LSĐ-PN tỉnh thuộc nước ta Trung Quốc, Viện BVTV có số trao đổi sau: Về trình xác định tác nhân gây bệnh năm 2009 Viện BVTV Năm 2009, bệnh LSĐ-PN lần xuất bùng phát dội Việt Nam, tỉnh Nghệ An, Thái Bình, Quảng Ninh Nam Định tỉnh ghi nhận thông báo diện bệnh Ngày 21 tháng năm 2009, Hội nghị bàn biện pháp ứng phó bệnh dịch 10 11 12 “mới” xuất hiện, nhà khoa học quan phía Nam nhận định cách chủ quan bệnh “vàng lùn lùn xoắn lá” lây nhiễm gây hại lúa Trong đó, chuyên gia Viện BVTV dựa quan sát phân tích đặc điểm triệu chứng bệnh lúa nhiễm bệnh thu nhiều ruộng lúa giai đoạn sinh trưởng khác mức độ nhiễm bệnh khác nhận định khơng phải bệnh vàng lùn lùn xoắn lá, „tác nhân gì” cần nghiên cứu Các kết giám định RT-PCR Viện BVTV sử dụng cặp mồi đặc hiệu với vi-rút gây bệnh vàng lùn (RGSV)và lùn xoắn (RRSV) Viện BVTV thực âm tính thực lặp lại nhiều lần, nhiều mẫu với triệu chứng đặc trưng điển hình Ý kiến nhà khoa học Viện BVTV lúc khẳng định “tác nhân gây bệnh RGSV RRSV” để trả lời xác cần phải đợi hồn thành có kết xác đáng bước thực “chu trình Koch” – qui trình bắt buộc xác định tác nhân gây bệnh + H M 10 11 12 + H M 2000bp 1600bp 1000bp 1800bp 600bp 500bp RBSDV-S10F2/R2(600bp) RBSDV-S10F1/R1(1800bp) Hình Kết giám định (25/9/2009) 12 mẫu lúa bệnh thu Nghệ An, Quảng Ninh Nam Định sử dụng cặp mồi RBSDV-S10-F1/R1, 600 bp (Trái) RBSDV-S10-F2/R2, 1.800 bp (Phải) Tất mẫu dƣơng tính với cặp mồi, riêng mẫu dƣơng tính rõ với cặp RBSDVS10-F2/R2 nhƣng dƣơng tính yếu với cặp RBSDV-S10-F1/R1 Mẫu đối chứng dƣơng (+) sử dụng RNA lúa lùn xoắn cặp mồi RRSVs3/as3 (885 bp) Mẫu đối chứng âm (H) sử dụng RNA lúa khỏe với cặp mồi tƣơng ứng (RBSDV-S10-F1/R1 RBSDV-S10-F2/R2) M Kb (Invitrogen) Tên gọi bệnh tạm thời lúc ban đầu “lùn lụi” - lúa nhiễm bệnh bị lùn và chết lụi Sau bệnh gọi “vàng lùn lùn xoắn lá” Ngày 25 tháng 10 năm 2009, kết RT-PCR dương tính rõ nét ghi nhận 12/12 mẫu giám định sử dụng cặp mồi RBSDV-S10-F1/R1 RBSDV-S10-F2/R2 thiết kế vùng bảo thủ gene RNA-10 chủng vi-rút lúa lùn sọc đen (SBSDV) thành viên họ Reoviridae gây bệnh lúa ngơ (Hình 1) Ngày 27 tháng năm 2009, 12 mẫu lúa bệnh mẫu rầy lưng trắng thu ruộng bệnh cặp mồi RBSDV-S10-F1/R1 RBSDV-S10F2/R2 mang sang Trung Quốc Các mẫu lúa mẫu rầy (cả rầy nâu rầy lưng trắng) giám định phòng thí nghiệm Vi-rút Viện Khoa học Nơng nghiệp Triết Giang (ZAAS, Hàng Châu, Trung Quốc) sử dụng cặp mồi mang theo cặp mồi RBSDV-2- S3-16/18 nhóm tác giả Hàng Châu đề xuất – cặp mồi đặc hiệu bệnh mới, mà nhóm tác giả lúc gọi lúa lùn sọc đen dòng (RBSDV-2, Zhang et al., 2008), sau thống với nhóm tác giả Đại Học Hoa Nam - gọi tên bệnh lùn sọc đen phương Nam (SRBSDV, Zhou et al., 2008), gọi tên bệnh lùn sọc đen phương Nam (SRBSDV, Wang et al., 2010) Kết giám định cho thấy mẫu lúa mẫu rầy lưng trắng dương tính với cặp mồi Kết chụp ảnh hiển vi điện tử ghi nhận tiểu thể vi-rút hình cầu đa diện - ghi nhận trước nhà khoa học Trung Quốc M H + 529 bp 500bp RBSDV-2S3-16/18 (529 bp) Hình Kết giám định (28/9/2009, Trung Quốc) mẫu lúa bệnh thu Nghệ An, 78 100 35 Thái Bình Nam Định (1,2 3) mẫu rầy lƣng trắng thu ruộng bệnh Nghệ An, sử dụng cặp mồi RBSDV-2S3-16/18, 592 bp Tất mẫu dƣơng tính rõ nét Mẫu đối chứng dƣơng (+) sử dụng RNA lúa nhiễm RBSDV-2 (Trung Quốc) Mẫu đối chứng âm (H) sử dụng RNA lúa khỏe M marker 100bp (Invitrogen) Kết giám định Hàng Châu cho thấy: mẫu lúa mẫu rầy lưng trắng dương tính với cặp mồi Kết chụp ảnh hiển vi điện tử ghi nhận tiểu thể vi-rút hình cầu đa diện - ghi nhận trước nhà khoa học Trung Quốc Sản phẩm PCR giải trình tự phân tích phả hệ mẫu lúa bệnh thu Việt Nam đoạn gene S3 S10 (hình 3) đưa đến nhận định tượng “lùn lụi” lúa Việt Nam vụ hè thu, mùa năm 2009, tác nhân gây gây nên bệnh virút Trung Quốc, gọi lùn sọc đen dòng (RBSDV-2, Zhang et al., 2008) hay lùn sọc đen phương Nam (SRBSDV, Zhou et al., 2008) AF459813 Ch zhjs AY050488 Ch zhjw AY050489 Ch zhjr 32 NC 003733 Ch Zhejiang AF227206 Ch Hubei rice 86 AF227208 Ch Shanxi meize 98 RBSDV-2 Sg3 (Ch) AY039835 Ch Jiangsu 28 AY147041 Ch Henan 81 62 AF227207 Ch Henan RBSDV sg3 Ch (NC 003728) AF367478 Ch Sd m 94 RBSDV-2 sg3 (Vn) RBSDV AF227205 Ch Hubei meize 94 SRBSDV S10 600 QN 29 SRBSDV S10 600 ND 35 100 93 42 41 China isolate Hai Nam RRSV sg3 Ph (AY512585) SRBSDV sg10 (EU523360): RBSDV-2 (Vn+Cn) SRBSDV S10 600 TB 26 SRBSDV S10 600 NA 33 RBSDV sg3 Ch (AF432355) China isolate Quang Chau RBSDV-2 sg10 (EU784840): 0.01 0.1 Hình Kết phân tích phả hệ phần mềm MEGA5 theo phƣơng pháp NeighbourJoining,mơ hình Kimura-2 tham số, sử dụng đoạn trình tự gene RNA-10 (Trái) RNA-3 (Phải) mẫu thu Việt Nam nằm chung nhánh với trình tự bệnh Trung Quốc nhóm tác giả Trung Quốc thực lƣu trữ GenBank Ngày 04 tháng 10 năm 2009, triệu chứng điển hình rõ nét ghi nhận nhà lưới Viện BVTV lúa TN-1 lây nhiễm nhân tạo sử dụng rầy lưng trắng (hình 4) Những lúa biểu triệu chứng rầy tương ứng giám định RT-PCR để kiểm chứng, kết dương tính với cặp mồi đặc hiệu SRBSDV Hình Các triệu chứng điển hình lúa TN-1 sau lây nhiễm nhân tạo 14 ngày rầy lƣng trắng, sử dụng nguồn bệnh thu Nghệ An Các triệu chứng bao gồm: thấp lùn, xanh đậm, xoắn lá, xoắn đầu lá, rách mép đặc biệt xuất u sáp gồ rõ nét mặt sau dọc theo gân TRIỆU CHỨNG ÂM ÂM DƯƠNG S10 ELISA/RT-PCR SEQUENCE ELISA + RT-PCR RT-PCR S3 98 RBSDV-2 sg3 (Vn) RBSDV-2 Sg3 (Ch) RBSDV sg3 Ch (NC 003728) 94 RBSDV sg3 Ch (AF432355) RRSV sg3 Ph (AY512585) RGSV 0.1 RRSV HIỂN ĐIỆN TỬ LÙN LỤI RBSDV SEQUENCE SRBSDV RẦY NÂU NHỎ LÂY BỆNH NHÂN TẠO RT-PCR DƯƠNG TÍNH RT-PCR ÂM TÍNH RẦY LƯNG TRẮNG RẦY NÂU CÂY KHỎE Hình Sơ đồ mơ q trình xác định tác nhân gây tƣợng “lùn lụi” lúa tác tỉnh phía Bắc vụ Hè Thu, Mùa năm 2009 tuân theo chu trình Koch Kết xác định xác tác nhân gây bệnh loại vi-rút mới, đƣợc tạm gọi lùn sọc đen phƣơng nam (Zhou et al., 2008) hay lùn sọc đen dòng (Zhang et al., 2008), rầy lƣng trắng môi giới truyền bệnh Ngày 28 tháng 12 năm 2010, Viện BVTV có báo cáo thức trình Bộ Nông nghiệp PTNT kết xác định tác nhân gây tượng “lùn lụi” lúa tỉnh phía Bắc vụ Hè Thu, Mùa năm 2009, vi-rút có tên Lùn sọc đen phương Nam, tên tiếng Anh Southern rice black-streaed dwarf virus (SRBSDV), thuộc phân nhóm Fijivurus-2, nhóm Fijivirus, họ Reoviridae, rầy lưng trắng môi giới truyền bệnh truyền bệnh theo kiểu bền vững 2 Về tên gọi bệnh Năm 2008 có nhóm tác giả Trung Quốc cơng bố kết xác định tác nhân gây bệnh lúa Trung Quốc Nhóm tác giả Viện KHNN Triết Giang, TS Heingmu Zhang đại diện, gọi tên bệnh lùn sọc đen dòng (Zhang et al., 2008); nhóm tác giả Đại học Hoa Nam (Quảng Đông), TS Guohui Zhou đại diện, gọi tên bệnh lùn sọc đen phương Nam (Zhou et al., 2008) Cả nhóm tác giả xác định rầy lưng trắng môi giới truyền bệnh Năm 2009, Việt Nam tạm gọi bệnh lùn sọc đen phương nam, thống gọi tắt lùn sọc đen, rầy lưng trắng môi giới truyền bệnh Năm 2010, TS Qiang Wang thuộc Đại Học Hoa Nam với kết nghiên cứu mình, so sánh với kết công bố năm 2008 hợp tên gọi lùn sọc đen phương nam lùn sọc đen dòng lùn sọc đen phương nam Lúc này, tên gọi Southern rice black-streaked dwarf virus chưa thức phải viết “đứng” (Wang et al., 2010) Cùng khoảng thời gian này, kết nghiên cứu Viện BVTV ghi nhận Viện khẳng định: rầy lưng trắng môi giới truyền bệnh nhất, chưa ghi nhận khả truyền bệnh rầy nâu nhỏ, đó, số nhà khoa học trung Quốc cho rầy nâu nhỏ có tham gia truyền bệnh LSĐ-PN tỷ lệ truyền bệnh thấp Năm 2012, Pu công nghiên cứu khả truyền bệnh LSD-PN loài rầy: rầy nâu (Nilaparvata lugens), rầy lưng trắng (Sogatella furcifera) rầy nâu nhỏ (Laodelphax striatellus), khẳng định đưa minh chứng khoa học xác đáng có rầy lưng trắng (Sogatella furcifera) môi giới truyền bệnh LSD-PN (Pu et al., 2012) Cũng năm 2012, Hiệp hội phân loại vi-rút Quốc tế (International Commitee on Taxonomy of Viruses, ICTV), sau họp định kỳ thức cơng nhận Southern rice black-streaed dwarf virus (SRBSDV) tên thức bệnh, từ thời điểm tên bệnh tiếng Anh viết nghiêng Để thống với qui ước Quốc tế, Việt Nam nên dùng tên “Lùn sọc đen phương Nam” tên gọi bệnh tên vi-rút gây bệnh Về công tác đạo văn hƣớng dẫn Năm 2010, Bộ Nông ngiệp PTNT Thông tư số 58/2010/TT-BNNPTNT ngày 5/10/2010 qui định biện pháp phòng, trừ bệnh lùn sọc đen hại lúa Thông tư thời điểm ban hành mang tính cấp bách tức thời, đề tài nghiên cứu Viện BVTV giai đoạn bắt đầu, tính xác mặt khoa học chưa đầy đủ Năm 2011, sau nghiệm thu đề tài nghiên cứu bệnh LSĐ-PN, Viện BVTV chủ trì, sản phẩm đề tài qui trình PTTH rầy lưng trắng bệnh lùn sọc đen phương Nam tỉnh phía Bắc Cục BVTV cơng nhận tiến KHKT (năm 2011) Tuy nhiên thời điểm nay, văn hướng dẫn việc phòng, trừ bệnh LSĐ-PN nêu đến Thông tư 58, cịn Qui trình “PTTH rầy lưng trắng bệnh lùn sọc đen phương Nam tỉnh phía Bắc” Viện BVTV lại không đề cập tới Vì vậy, Viện BVTV đề nghi quan quan lý đạo cấp cần phải đưa Quy trình vào văn hướng dẫn phịng trừ bệnh LSĐ-PN để người sản xuất áp dụng Về ý kiến giải đáp cho câu hỏi bệnh LSD-PN vụ Hè Thu, Mùa 2017 Trong nhiều câu hỏi từ nhiều quan, cán nơng dân trực tiếp sản xuất lúa câu hỏi đặt nhiều “Tại bệnh LSD-PN tỏ bị nặng khu vực ven biển?” Lý giải vấn đề này, Viện BVTV có ý kiến chứng khoa học minh chứng kèm theo sau: Theo số liệu thống kê Viện BVTV (Ngô Vĩnh Viễn cs., 2011) Cục BVTV đợt dịch năm 2009-2010 bệnh LSĐ-PN xuất gây hại khu vực đồng miền núi Khi bệnh xuất Nghệ An, Thái Bình Nam Định tỉnh ghi nhận thông báo sớm diện gây hại bệnh Những điều tra sau ghi nhận bệnh xuất gây hại vùng sâu đất liền tỉnh có bờ biển tỉnh thuộc khu vực miền núi phía Bắc Điện Biên, Sơn La, Lai Châu Năm nay, vụ Hè Thu, Mùa 2017, bệnh LSĐ-PN tái bùng phát, sau năm kể từ 2009 Viện BVTV ghi nhận diện bệnh qua số mẫu lúa nhiễm bệnh cán Viện Chi cục Trồng trọt Bảo vệ thực vật tỉnh gửi về, ghi nhận bệnh xuất Nghệ An, Hà Tĩnh, Quảng Bình, Hải Phịng, Ninh Bình, Nam Định, Thái Bình, Vĩnh Phúc Phú Thọ Tỉnh Thái Bình cơng bố dịch, tỉnh Nghệ An chờ định thức để công bố dịch Như vậy, tỉnh đồng bằng, ven biển trung du có mẫu dương tính với bệnh Rất tỉnh miền núi xuất Viện BVTV chưa nhận mẫu để giám định Năm nay, tính riêng tỉnh Nghệ An, huyện Yên Thành huyện nằm sâu đất liền lại bị nặng nhất, nặng diện tích mức độ gây hại so với khu vực ven biển Diễn Châu Ngoài bệnh ghi nhận huyện miền núi tỉnh Con Cuông, Quế Phong (Báo cáo Chi cục TT&BVTV Nghệ An, ngày 30/8/2017) Do đó, nói phân bố bệnh ngẫu nhiên Tuy nhiên, có số yếu tố góp phần vào bùng phát tái bùng phát bệnh, phân tích sau Bệnh khơng truyền qua trứng rầy, rầy trưởng thành mang vi-rút chết bệnh hết, rầy non nở cần có bệnh để chích sau truyền cho khác Bệnh khơng truyền qua hạt, đó, hạt lúa gieo xuống ruộng ban đầu lúa Để bị bệnh lúa phải bị rầy mang vi-rút có khả truyền bệnh (trong quần thể, 100% lấy virút chích vào bệnh Trong số rầy mang vi-rút khơng phải tất truyền bệnh) chích vào truyền bệnh bị bệnh Chính lý nêu trên, nên để bệnh xuất đến ngày hơm chắn tự nhiên (hay nói cách khác ngồi thực tiễn đồng ruộng) q trình truyền bệnh từ vụ sang vụ khác diến với tỷ lệ thấp, thấp đến mức quan sát bình thường “khơng thấy được” Năm nay, gặp điều kiện thuận lợi, rầy môi giới bộc phát số lượng quần thể nên bệnh theo mà nhân lên số lượng Thực tế với bệnh VL&LXL miền Nam năm nay, bệnh vi-rút xuất với tỷ lệ bệnh đáng kể nhiều tỉnh thuộc đồng sông Cửu Long ruộng bị bệnh số lượng quần thể rầy nâu – môi giới truyền bệnh chung cho vi-rút gây bệnh, mức độ thấp, thấp so với đợt dịch năm 2005-2008 Như vậy, bệnh vi-rút bùng phát tái bùng phát dịch quần thể rầy môi giới không thiết phải bộc phát thành dịch, mà phát triển số lượng quần thể đến mức định Do đó, việc đạo áp dụng biện pháp phịng trừ rầy mơi giới để gián tiếp phịng trừ bệnh vi-rút có hiệu cần phải thực cách liệt triệt để trước trạng bệnh vi-rút lúa địa bàn nước Ngoài yếu tố nêu trên, số yếu tố loại trừ nhà khoa học nước giới quan tâm nghiên cứu ghi nhận là: + Do bão - gió bão theo rầy mơi giới, mang theo vi-rút, lan truyền bệnh từ vùng bị bệnh bị bệnh nặng tới vùng khác - lân cận, xa, chí vượt đại dương (Otuka et al., 2008; Hoang et al., 2011; Otuka, 2013) Năm 2009, đảo Hải Nam Trung Quốc, dịch LSĐ-PN bùng phát giữ dội vào vụ Xuân Đến vụ Hè thu, Mùa tỉnh miền Bắc miền Trung Việt Nam bệnh xuất lần bùng phát dịch Khi lúa Hè Thu, Mùa xuống giống có số bão vào Việt Nam Bão nguyên nhân liên quan đến dịch bệnh LSĐ-PN Việt Nam năm 2009 (Ngô Vĩnh Viễn cs., 2011; Hoang et al., 2011) Năm 2009, lúc ban đầu "dường như" khu vực ven biển bị bệnh trước Nhưng ngẫu nhiên, thông báo bệnh Nghệ An mẫu gửi sớm Tuy nhiên, Chi cục nằm TP Vinh, gần biển, nên biết trước khu vực dễ hiểu ngẫu nhiên + Nguồn bệnh sẵn có (như lập luận trên), gặp điều thuận lợi cho rầy môi giới phát triển bệnh nhân lên số lượng bùng phát thành dịch Nhiều chưa phải trước, Phát muộn thời gian ủ bệnh kéo dài (Hội nghị bệnh VL&LXL Tiền Giang, tháng 6/2017, Chi cục TT&BVTV Đồng Tháp ghi nhận vấn đè này) mà lúc đầu vụ bệnh có tỷ lệ thấp, thấp tới mức không thấy, điều tra chưa kỹ lý Năm trước chưa bị chẳng có lý phải điều tra thật kỹ năm – tâm lý bình thường + Giống lúa: giống lúa yếu tố không nên loại bỏ tỉnh có ghi nhận bệnh giống bị, bị hay bị nhiều, khác khơng đáng kể Tại Hội thảo năm 2010 bệnh LSD-PN (tại Viện BVTV , hay Trung Quốc), nhà khoa học Trung Quốc nêu: “ bệnh LSD-PN xuất hiện, phát triển bùng phát dịch theo cách mạng lúa lai Trung Quốc ” Trong sản xuất lúa Việt Nam, giống lúa gieo cấy tỉnh phía Bắc (miền Bắc miền Trung) hầu hết có nguồn gốc từ Trung Quốc lúa lai Trung Quốc Trong đó, tỉnh phía Nam chủ yếu gieo cấy giống lúa có nguồn gốc từ IRRI giống lúa IRRI Vì vậy, lý phân bố đặc hữu bệnh vi-rút lúa Việt Nam: Bệnh VL&LXL diện gây hại chủ yếu tỉnh phía Nam - từ Khánh Hịa trở vào, bệnh LSĐ-PN diện gây hại chủ yếu tỉnh phía Bắc - Từ Phú Yên trở (Ngô Vĩnh Viễn cs., 2011; Hoang et al., 2011) Nhận xét chung Những ghi nhận cho thấy bệnh LSĐ-PN tỏ bị nặng khu vực ven biển khơng xác, mà hoàn toàn ngẫu nhiên Phân bố mức độ gây hại bệnh chủ yếu phát triển gây hại rầy môi giới kéo theo bùng phát bệnh từ nguồn bệnh sẵn có trở nên bùng phát thành dịch gây hại nghiêm trọng Sự lan truyền bệnh có liên quan đến trình phát triển quần thể di trú rầy (Outuka et al., 2008 Otuka, 2013) Bên cạnh đó, phát triển gây hại bệnh có liên quan chặt chẽ đến tính liệc phù hợp biện pháp phòng trừ rầy mơi giới để gián tiếp phịng trừ phất triển gây hại bệnh vi-rút lan truyền chúng ... giới truyền bệnh Năm 2009, Việt Nam tạm gọi bệnh lùn sọc đen phương nam, thống gọi tắt lùn sọc đen, rầy lưng trắng môi giới truyền bệnh Năm 2010, TS Qiang Wang thuộc Đại Học Hoa Nam với kết nghiên... kết nghiên cứu mình, so sánh với kết công bố năm 2008 hợp tên gọi lùn sọc đen phương nam lùn sọc đen dòng lùn sọc đen phương nam Lúc này, tên gọi Southern rice black-streaked dwarf virus chưa... cặp mồi đặc hiệu bệnh mới, mà nhóm tác giả lúc gọi lúa lùn sọc đen dòng (RBSDV-2, Zhang et al., 2008), sau thống với nhóm tác giả Đại Học Hoa Nam - gọi tên bệnh lùn sọc đen phương Nam (SRBSDV, Zhou