Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học trong một số dịch chiết của thân cây mật gấu ở cao bằng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG ĐOÀN THỊ KIM ĐÀO NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CỦA THÂN CÂY MẬT GẤU Ở CAO BẰNG LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Đà Nẵng - Năm 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG ĐOÀN THỊ KIM ĐÀO NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CỦA THÂN CÂY MẬT GẤU Ở CAO BẰNG Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 60 44 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS TRẦN MẠNH LỤC Đà Nẵng - Năm 2016 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận văn Đoàn Thị Kim Đào MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu nghiên cứu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Bố cục uận v n CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CHI MAHONIA 1.2 GIỚI THIỆU VỀ CÂY MẬT GẤU 1.2.1 Tên gọi 1.2.2 Phân bố 1.2.3 Đặc điểm thực vật 1.2.4 Tình hình nghiên cứu nƣớc mật gấu 1.2.5 Giá trị sử dụng mật gấu Việt Nam 1.3 CÁC HỢP CHẤT ANKALOID 1.3.1 Khái niệm định nghĩa 1.3.2 Trạng thái thiên nhiên 11 1.3.3 Phân loại Alkaloid 12 CHƢƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.1 U ỆU, DỤ CỤ, C ẤT 36 2.1.1 gu n iệu 36 2.1.2 Thiết ị, ụng cụ, h a chất 37 2.2 P ƢƠ P ÁP CỨU 38 2.2.1 Các sơ đồ nghiên cứu 38 2.2.2 Đặc tính hóa lý 40 2.2.3 Phƣơng pháp chiết soxhlet 43 2.2.4 Phƣơng pháp ph n ập ph n đoạn từ tổng cao ethanol 46 2.2.5 Xác định thành phần hóa học phƣơng pháp quang phổ hấp thụ phân tử UV – V S phƣơng pháp C/MS 62 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 67 3.1 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU HÓA LÝ 67 3.1.1 Độ ẩm 67 3.1.2 àm ƣợng tro 67 3.1.3 àm ƣợng kim loại 68 3.2 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG CÁC DỊCH CHIẾT SOXHLET 69 3.2.1 Kết xác định khối ƣợng cao chiết 69 3.2.2 Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết soxhlet dung môi hexane 70 3.2.3 Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết soxhlet dung môi dichloromethane 72 3.2.4 Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết soxhlet dung mơi chloroform 75 3.2.5 Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết soxhlet dung môi methanol 78 3.2.6 Tổng kết thành phần hóa học dịch chiết soxhlet 81 3.3 KẾT QUẢ CHIẾT TÁC , XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TỪ TỔNG CAO ETHANOL BẰ P ƢƠ P ÁP C ẾT PHÂN BỐ 83 3.3.1 Kết xác định thành phần hóa học cao chiết hexane từ tổng cao ethanol 84 3.3.2 Kết xác định thành phần hóa học cao chiết dichloromethane từ tổng cao ethanol 88 3.3.3 Kết xác định thành phần hóa học cao chiết chloroform từ tổng cao ethanol 93 3.3.4 Tổng kết thành phần hóa học dịch chiết lỏng - lỏng từ tổng cao ethanol 98 3.4 ẾT QUẢ P ẬP P ĐOẠN CAO DICHLOROMETHANE TỪ TỔNG CAO ETHANOL 101 3.4.1 Sơ đồ phân lập ph n đoạn cao dichloromethane từ tổng cao ethanol 101 3.4.2 Định danh thành phần hóa học ph n đoạn DA13.21 102 3.4.3 Định danh thành phần hóa học ph n đoạn Da2 104 3.4.4 Định danh thành phần hóa học ph n đoạn a1.2 105 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 108 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO QUYẾT ĐỊNH GIAO ĐỀ TÀI (BẢN SẢO) DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS : Phổ hấp thu nguyên tử (Atomic Absorption Spectrophotometric) GC : Sắc ký khí (Gas Chromatography) MS : Phổ khối (Mass Spectrometry) UV/VIS : Phổ hấp thụ phân tử (Ultraviolet-Visible Spectroscopy) DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu bảng Tên bảng Trang 2.1 Hóa chất đƣợc sử dụng q trình làm thí nghiệm 37 2.2 Một số tỉ ệ ung m i chạ sắc k 55 3.1 Kết xác định độ ẩm mẫu thân mật gấu 67 3.2 Kết xác định hàm ƣợng tro thân mật gấu 67 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 ản mỏng àm ƣợng kim loại thân mật gấu Khối ƣợng cao dịch chiết soxhet với dung môi hexane, dichloromethane, chloroform, methanol Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet với dung môi hexane từ thân mật gấu Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet với dung mơi dichloromethane từ thân mật gấu Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet với dung môi chloroform từ thân mật gấu Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet với dung môi methanol từ thân mật gấu Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet từ thân mật gấu Thành phần hóa học cao hexane từ tổng cao ethanol thân mật gấu Thành phần hóa học cao dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu Thành phần hóa học cao chloroform từ tổng cao ethanol thân mật gấu 68 69 70 73 76 79 81 86 90 95 Số hiệu bảng 3.13 Tên bảng Thành phần hóa học dịch chiết lỏng - lỏng từ tổng cao ethanol thân mật gấu Trang 98 3.14 Thành phần h a học ph n đoạn DA13.21 102 3.15 Thành phần h a học ph n đoạn Da2 105 3.16 Thành phần h a học ph n đoạn da1.2 106 DANH MỤC CÁC HÌNH Số hiệu Tên hính hình Trang 1.1 Hoa (a), (b), (c) mật gấu 1.2 Cây mật gấu (Mahonia Nepalensis DC.) 1.3 Berberin `7 1.4 Magnoflorin 1.5 Berbamin 1.6 Oxyacanthin 1.7 Columbamin 1.8 Colchicine 10 1.9 hiamine 10 1.10 Choline 10 1.11 Hordenine 10 1.12 Muscarine 10 1.13 Piperine 11 1.14 Thiamin 11 1.15 Caffeine 11 1.16 Theobromine 11 1.17 Ephedrine 13 1.18 Cathine 14 1.19 Cathinone 14 1.20 Mescaline 14 1.21 Capsaicine 15 1.22 Pyrrolidine 15 1.23 Hygrine 15 99 STT 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 Tên gọi Benzoic acid, 4hydroxy-3,5dimethoxy-, hydrazide Hexadecanoic acid, methyl ester n-Hexadecanoic acid Hexadecanoic acid, ethyl ester 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)-,methyl ester 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)9,17-Octadecadienal, (Z)9,12-Octadecadienoic acid, ethyl ester Octadecanoic acid Octacosanol Campesterol Stigmasterol beta.-Sitosterol Butylated Hydroxytoluene cis-13-Octadecenoic acid Vitamin E Stigmast-4-en-3-one Tetradecanoic acid Pentadecanoic acid Heptadecanoic acid 2-Methoxy-4vinylphenol 9-Octadecenoic acid (Z)-, methyl ester Hexane Diện tích peak (%) Dichloromethane Chloroform - 0.73 0.57 0.08 0.24 0.28 11.99 7.56 8.03 2.44 11.53 11.20 - 0.50 - 17.02 14.44 14.70 16.24 5.28 - - 2.98 10.74 0.77 1.39 0.93 8.98 0.53 0.18 0.85 0.52 6.84 1.42 1.03 9.01 0.07 - - 6.46 3.65 - 0.06 0.37 - 0.18 0.16 0.32 - - - 0.57 - - 0.59 100 Nhận xét: Từ Bảng 3.13 cho thấ phƣơng pháp C/MS định danh đƣợc 34 cấu tử dịch chiết, đ dịch chiết hexane đƣợc 13 cấu tử, dịch chiết dichloromethane đƣợc 25 cấu tử, dịch chiết chloroform đƣợc 21 cấu tử Phần tr m iện tích peak cấu tử đƣợc định danh dịch chiết dichloromethane lớn (67.44%), sau đ đến dịch chiết hexane (66.80%) nhỏ dịch chiết chloroform (66.54%) Điều chứng tỏ dichloromethane có khả n ng hịa tan tốt chiết đƣợc nhiều cấu tử phân cực lẫn không phân cực với hàm ƣợng lớn từ thân mật gấu hƣ vậ , phƣơng pháp chiết lỏng - lỏng với dung môi hexane, dichloromethane chloroform từ tổng cao ethanol thân mật gấu (34 cấu tử) định anh đƣợc nhiều cấu tử so với phƣơng pháp chiết soxhlet dung môi methanol (20 cấu tử) Các cấu tử 4H-Pyran-4-one, 2,3-dihydro3,5-dihydroxy-6-methyl-; 2-Furancarboxaldehyde, 5-(hydroxymethyl)-; Phenol, 2,6-dimethoxy-; Phenol, 3,4,5-trimethoxy-; 4-((1E)-3-Hydroxy-1propenyl)-2-methoxyphenol; Benzoic acid, 4-hydroxy-3,5-dimethoxy- hydrazide; Hexadecanoic acid, methyl ester; n-Hexadecanoic acid; 9,12Octadecadienoic acid (Z,Z)-; Octadecanoic acid; beta.-Sitosterol; 2-Methoxy4-vin pheno xuất dịch chiết Thành phần hóa học dịch chiết lỏng - lỏng từ thân mật gấu chứa số cấu tử có hoạt tính sinh học cao đáng quan t m nhƣ 4H-Pyran-4one, 2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-; 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z)-; octadecanoic acid; hexadecanoic acid; beta-Sitosterol; stigmasterol; campesterol Nhận xét chung: Tổng cấu tử dịch chiết soxh et định danh đƣợc 29 cấu tử, dịch chiết lỏng – lỏng định anh đƣợc đến 34 cấu tử Qua đ ta thấy chiết lỏng - lỏng chiết đƣợc nhiều cấu tử so với chiết soxh et Điều giải thích rằng, chiết lỏng – lỏng q trình lắc àm t ng iện tích tiếp xúc bề mặt chất rắn, dung môi dễ thẩm thấu, o đ việc chiết hiệu 101 3.4 Ế Q Ả PH N P PH N ĐOẠN CAO DICHLOROMETHANE TỪ TỔNG CAO ETHANOL 3.4.1 Sơ đồ phân lập phân đoạn cao dichloromethane từ tổng cao ethanol Tổng cao ethanol (39.038g) Chiết lỏng - lỏng với dichloromethane Cao Dichloromethane (4.344g) Cột sắc ký 50 x 3.5 cm Hệ hexane:ethyl acetate = 9:1→ 7:3 DA1.12 (0.356g) DA13.21 (0.141g) DA22.26 (0.208g) ĐO GC/MS Da1 (0.005g) DA27.81 (0.442g) DB1.8 (0.091g) DB9.29 (0.102g) DB30.87 (0.162g) Cột sắc ký 45 x 1.5 cm Da2 (0.011g) ĐO GC/MS Da3.7 (0.009g) Da8.17 (0.010g) Da18.39 (0.201g) Cột sắc ký 45 x 1.0 cm da1.2 (0.010g) da3.30 (0.019g) ĐO GC/MS Hình 3.14 Sơ đồ phân lập phân đoạn cao dichloromethane da31.37 (0.005g) 102 3.4.2 Định danh thành phần hóa học phân đoạn DA13.21 Ph n đoạn DA13.21 mỏng thấy chấm sáng rõ khối ƣợng cao c n đƣợc 0.141 g nên tiến hành đo C/MS để xác định chất có ph n đoạn Sắc k đồ GC kết định danh thành phần hóa học ph n đoạn DA13.21 đƣợc thể Hình 3.15 Bảng 3.14 ình 3.15 Sắc ký đồ GC phân đoạn DA13.21 ảng 3.14 Thành phần h a học phân đoạn DA13.21 STT Thời Diện gian tích ƣu peak (phút) (%) 23.366 1.45 Tên gọi Tetradecanal (C14H28O) Công thức cấu tạo 103 STT Thời Diện gian tích ƣu peak (phút) (%) 27.016 2.22 Tên gọi 1,2Benzenedicarboxylic acid, bis(2methylpropyl)esther (C16H22O4) 29.370 5.19 Dibutyl phthalate (C16H22O4) Hexadecanoic acid, 30.320 10.15 ethyl ester (C18H36O2) 9,12Octadecadienoic 35.420 10.57 acid, methyl ester, (E,E), (C19H34O2) 35.619 8.50 E-11-Hexadecenoic acid, ethyl este (C18H34O2) 1,27 39.507 15.35 Benzenedicarboxylic acid, diisooctyl ester (C24H38O4) Công thức cấu tạo 104 Nhận x t: Từ kết Bảng 3.14 cho thấ phƣơng pháp C/MS định anh đƣợc cấu tử chiếm 53.43% tổng số cấu tử phát đƣợc Các cấu tử c hàm ƣợng lớn nhƣ 1,2-Benzenedicarboxylic acid, diisooctyl ester (15.35%); 9,12-Octadecadienoic acid, methyl ester, (E,E) (10.57%); Hexadecanoic acid, ethyl ester (10.15%); E-11-Hexadecenoic acid, ethyl este (8.50%); Dibutyl phthalate (5.19%) Trong đ , cấu tử exa ecanoic aci , eth ester xuất ph n đoạn DA13.21 dịch chiết lỏng – lỏng với dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu 3.4.3 Định danh thành phần hóa học phân đoạn Da2 Ph n đoạn Da2 mỏng thấy chấm sáng rõ khối c n đƣợc 0.011 g nên tiến hành đo ƣợng cao C/MS để xác định chất có ph n đoạn Sắc k đồ GC kết định danh thành phần hóa học ph n đoạn Da2 đƣợc thể Hình 3.16 Bảng 3.15 ình 3.16 Sắc ký đồ GC phân đoạn Da2 105 ảng 3.15 Thành phần h a học phân đoạn Da2 STT Thời Diện gian tích ƣu peak (phút) (%) 29.877 25.40 Tên gọi Công thức cấu tạo n-Hexadecanoic acid (C16H32O2) Hexadecenoic acid, 35.202 32.04 Z-11(C16H30O2) Nhận x t: Từ kết Bảng 3.15 cho thấ phƣơng pháp C/MS định anh đƣợc cấu tử chiếm 57.44% tổng số cấu tử phát đƣợc Cả hai cấu tử có hàm ƣợng lớn 25% đ n-Hexadecanoic acid (25.40%); Hexadecenoic acid, Z-11- (32.04%) Trong đ cấu tử có hoạt tính sinh học đƣợc quan tâm n-Hexadecanoic acid có tính kháng khuẩn Cấu tử n- exa ecanoic aci ph n đoạn Da2 (25.40%) đƣợc àm giàu ần so với dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu (7.56%) 3.4.4 Định danh thành phần hóa học phân đoạn da1.2 Ph n đoạn da1.2 mỏng thấy chấm sáng khối ƣợng cao cân đƣợc 0.010 g nên tiến hành đo C/MS để xác định chất có ph n đoạn Sắc k đồ GC kết định danh thành phần hóa học ph n đoạn da1.2 đƣợc thể Hình 3.17 Bảng 3.16 106 ình 3.17 Sắc ký đồ GC phân đoạn da1.2 ảng 3.1 Thành phần h a học phân đoạn da1.2 Thời gian STT ƣu (phút) Diện tích peak (%) Tên gọi Nonadecane (C19H40) 1,2Benzenedicarboxyl icacid,bis(2methylpropyl)ester (C16H22O4) 1,2Benzenedicarboxyl ic acid, butyl 2ethylhexyl ester (C20H30O4) 25.527 2.65 27.022 3.92 29.357 5.43 39.500 Di-n-octyl 31.57 phthalate (C24H38O4) Công thức cấu tạo 107 Nhận xét: Từ Bảng 3.16 cho thấ phƣơng pháp C/MS định danh đƣợc cấu tử chiếm 43.57% tổng số cấu tử phát đƣợc Cấu tử c hàm ƣợng lớn Di-n-octyl phthalate (31.57%), cịn có cấu tử với hàm ƣợng nhỏ 1,2-Benzenedicarboxylic acid, butyl 2-ethylhexyl ester (5.43%); 1,2-Benzenedicarboxylicacid, bis(2-methylpropyl) ester (3.92%); Nonadecane (2.65%) * Nhận xét chung: Kết phân lập ph n đoạn cao dichloromethane (từ tổng cao ethanol) sắc ký cột sắc ký mỏng, cho thấy tổng số cấu tử đƣợc định anh a ph n đoạn DA13.21, Da2, da1.2 (12 cấu tử) nhỏ hai ần so với số cấu tử định danh dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu (25 cấu tử) Trong đ , cấu tử Hexadecanoic acid, ethyl ester cấu tử nexa ecanoic aci xuất phân lập ph n đoạn cao dichloromethane dịch chiết lỏng – lỏng với dung môi dichloromethane (Cấu tử n- exa ecanoic aci ph n đoạn Da2 (25.40%) đƣợc àm giàu ần so với dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol (7.56%)) 108 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ K t luận Sau thực đề tài “Nghiên cứu tt n t n p ần m t s d ch chi t c a thân mật gấu Cao Bằng”, t i thu đƣợc số kết nhƣ sau: Xác định đƣợc thơng số hóa lý ngun liệu thân mật gấu: - Độ ẩm trung bình thân mật gấu khô 8.836% - àm ƣợng tro trung bình thân mật gấu 0.928% - àm ƣợng kim loại Cu, Cd, As, Pb, Hg, Zn nằm khoảng cho phép theo định Bộ Y tế số 46/2007/QĐ-BYT ngày 19 tháng 12 n m 2007 Bộ trƣởng Bộ Y tế việc ban hành “Qu định giới hạn tối đa ô nhiễm sinh học hóa học thực phẩm Từ bột thân mật gấu, dùng phƣơng pháp chiết soxh et định danh GC/MS xác định đƣợc 29 cấu tử, đ đƣợc 11 cấu tử, ịch chiết hexane ịch chiết dichloromethane đƣợc 17 cấu tử, ịch chiết chloroform đƣợc 12 cấu tử ịch chiết methano đƣợc 20 cấu tử Các cấu tử beta-Sitosterol; 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)-; n-Hexadecanoic acid có mặt dịch chiết Cấu tử Stigmasterol; Campesterol có mặt dịch chiết hexane, dichloromethane, chloroform cấu tử Octadecanoic acid có mặt dịch chiết hexane, dichloromethane, methanol Từ tổng cao ethano , ùng phƣơng pháp chiết ph n ố ỏng – ỏng định anh ằng C/MS xác định đƣợc 34 cấu tử, đ ịch chiết hexane đƣợc 13 cấu tử, ịch chiết dichloromethane đƣợc 25 cấu tử ịch chiết chloroform đƣợc 21 cấu tử Các cấu tử 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z); n-Hexadecanoic acid; Campesterol; Stigmasterol; beta-Sitosterol có mặt 109 dịch chiết Cấu tử 4H-Pyran-4-one, 2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6methyl- có mặt hai dịch chiết dichloromethane, chloroform cấu tử Octadecanoic acid có mặt hai dịch chiết hexane, dichloromethane Đã phân lập ph n đoạn cao dichloromethane (từ tổng cao ethanol) sắc ký cột sắc ký mỏng, kết cho thấy tổng số cấu tử đƣợc định anh a ph n đoạn DA13.21, Da2, da1.2 (12 cấu tử) nhỏ hai lần so với số cấu tử định danh dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu (25 cấu tử) Trong đ , cấu tử Hexadecanoic acid, ethyl ester cấu tử n- exa ecanoic aci xuất phân lập ph n đoạn cao dichloromethane dịch chiết lỏng – lỏng với dung môi dichloromethane (Cấu tử n-Hexadecanoic acid ph n đoạn Da2 (25.40%) đƣợc àm giàu ần so với dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol (7.56%)) Ki n nghị Do thời gian nghi n cứu c hạn, th ng qua kết đề tài chúng t i mong muốn đề tài đƣợc phát triển rộng số vấn đề nhƣ sau: - Thân mật gấu có chứa số chất có ứng dụng y học thực phẩm nhƣ Stigmastero ; Stigmast-4-en-3-one; Beta-sitosterol; Campesterol Vitamin E Vì vậy, cần nghiên cứu phƣơng pháp tách cấu tử nhằm đáp ứng nhu cầu sống Đồng thời thử hoạt tính sinh học chất tách đƣợc để có nhìn tổng qt hoạt tính sinh học thân mật gấu, góp phần àm t ng giá trị sử dụng nhƣ chữa bệnh thân mật gấu thuốc dân gian - Nghiên cứu hoạt tính chống ox h a số dịch chiết thân mật gấu DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Ti ng Việt [1] Đái Du Ban (2008), Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phịng chống số bệnh cho người vật nuôi, NXB Khoa học tự nhiên công nghệ, tr 128-132 [2] Bộ Y tế (2007), định số /2007/QĐ-BYT việc an hành “Quy định giới hạn tối đa ô nhiễm sinh học hóa học thực ph m”, Hà Nội [3] Nguyễn kim Cẩn (2001), “Nghiên cứu chứa berberin giới nước”, Tạp ch Dược liệu tập 5, số 5, 2000, tập 6, số [4] Võ V n Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà Nội [5] Vũ V n Chu n (1971), Thực vật học, NXB Y học [6] Vũ V n Chu n (1976), Tóm tắt đặc điểm họ thuốc Việt Nam, NXB Y học [7] Đào ùng Cƣờng (2009), Đại cương h a hữu cơ, NXB Khoa học kỹ thuật [8] Lê Thị Thu Hà, Nghiên cứu thành phần alkaloid hồng liên rơ, Khóa luận tốt nghiệp đại học khóa (2005-2009) [9] Nguyễn Thu Hằng, ước đầu nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng kháng khu n Hoàng liên ô rô mọc Đ o gi , tỉnh cao Bằng, Khóa luận tốt nghiệp ƣợc sĩ khóa (1996-2001) [10] Trần V n m (2006), Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần h a học t c dụng chống oxi h a hồng liên rơ thu h i đ o gió – ao ằng, uận v n thạc sĩ ƣợc học, Đại học Dƣợc ội [11] Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt nam, NXB Y học [12] Nguyễn Đức Minh (1975), Tính kháng khu n thuốc Việt Nam, NXB Y học [13] Nhà xuất Từ điển bách khoa Hà Nội(1999), Từ điển bách khoa Dược học, Hà Nội [14] Phạm Thị Hồng Nhung, Nghiên cứu alcaloid số tác dụng sinh học Hồng liên rơ mọc Đ o Gi - Cao Bằng, Khóa luận tốt nghiệp ƣợc sĩ kh a (1997-2002) [15] Nguyễn Kim Phi Phụng (2006), Phương ph p cô lập hợp chất hữu cơ, Nhà xuất đại học quốc gia TP Hồ Chí Minh [16] Đặng hƣ Tại (2011), Hoá học hữu cơ-tập 2, NXB Giáo dục Việt Nam [17] Nguyễn Thị Phƣơng Thảo, Trịnh V n ẩu, Phạm Thanh Kỳ (2002), “Nghiên cứu định ƣợng berberin palmatin Hoàng liên phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu n ng cao”, Tạp ch Dược liệu, tập 7, số [18] Nguyễn V n Toán (2003), Nguyên cứu saponin số tác dụng saponin thân hồng liên rơ mọc Đ o Gi , ao ằng, Khóa luận tốt nghiệp ƣợc sĩ khóa 1998- 2003 [19] Viện Dƣợc liệu (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội [20] Bùi Xuân Vững (2013), Giáo trình phân tích cơng cụ, Đại học Đà Nẵng Ti ng Anh [21] BezakovaI; Misik V; Malekova I; Svajdlenka E; Kostalova D (1996), Lipoxygenase inhibition and antioxidant properties of bisbenzyl isoquinolin alkaloid isolated from M aquifolium Pharmazie, page 758-761 [22] Fujimoto K (1980), Screening test for marine antioxygenic compounds from marine algal, Bul Jap.Sci Fisheries 9,12 [23] Gieler U; Vonder Weth A; Heger M (1995), Mahonia aquifolium- A new type of topical treatment for psoriasis, Juornal of Dermatological treatment, page 31-34 [24] Hansel R (1992), Mahonia a quifolium - Aplant based antipsoriasis agent [25] Mc Cutcheon- A.R; Ellis- Sm, Hancock- RE; Towers- GH (1994), Antifungal Screening of medicinal plants of British Columbia native people Journal of Ethnopharmacol [26] Mennet-von Eiff M; MeierB (1995), Phytotherapy indermatology 9th Swiss, Cogress of Phytotherapy Zeitschrift fur Phytotherapie [27] Misik V; Bezakova L; Malakova I; Kostalova D (1995), Lipoxygenese inhibition and antioxidant propertise of protoberberine and aporphine alkakoid isolated from M.aquifolium, Planta Medica, page 372-373 [28] Muller- K; Zieris- K (1994), The antipsoriatic M aquifolium and its active constituents, Pro- and antioxidant properties and inhibition of 5- lipoxygenase, Planta Medica [29] Muller K; Ziereis K; Ganlik I (1995), The antipsoriatic Mahonia aquifolium and its active constituents; II Antiproliferative activity against cell growth of human keratinocyte, Planta Medica, page 74- 75 Websites [30] http://baigiang.violet.vn/present/show/entry_id/5167719 (10/04/2016) [31] http://duoclieu.net/Dlieuhoc/Tools/Phuongphap/SKLM.htm (10/04/2016) [32] http://en.wikipedia.org/wiki/Stigmasterol (10/04/2016) [33] http://en.wikipedia.org/wiki/Phytosterol (10/04/2016) [34] http://ods.od.nih.gov/factsheets/VitaminE-HealthProfessional/ (02/05/2016) [35] http://blogcaycanh.vn/cay_canh/d/cay-mat-gau-cay-hoang-lien-o-ro (25/05/2016) [36] http://caythuoc.org/hoang-lien-o-ro-ten-khac-cua-cay-mat-gau.htm (25/05/2016) [37] https://hellobacsi.com/drug/beta-sitosterol/ (08/7/2016) ... chloroform từ thân mật gấu Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet với dung môi methanol từ thân mật gấu Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet từ thân mật gấu Thành phần hóa học cao hexane từ tổng cao ethanol... VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG ĐOÀN THỊ KIM ĐÀO NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CỦA THÂN CÂY MẬT GẤU Ở CAO BẰNG Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 60 44 01 14... Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet với dung môi hexane từ thân mật gấu Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet với dung môi dichloromethane từ thân mật gấu Thành phần hóa học dịch chiết soxhlet