Luận văn
MỞ ðẦU
Thừa Thiên Huế, tỉnh duyên hải miền Trung, sở hữu hệ thống đầm phá ven biển rộng lớn nhất Đông Nam Á (khoảng 22.000 ha), bao gồm đầm phá Tam Giang, Cầu Hai, Lăng Cô trải dài 5 huyện ven biển Điều kiện tự nhiên thuận lợi này thúc đẩy phát triển mạnh mẽ các ngành nông, lâm, ngư nghiệp và nuôi trồng thủy sản.
Cá dầy (Cyprinus centralus), loài cá kinh tế quan trọng ở Thừa Thiên Huế, được người dân ưa chuộng nhờ thịt thơm ngon và giá trị kinh tế cao Việc khai thác giống tự nhiên không ổn định, thúc đẩy nghiên cứu nhân tạo thành công, tạo điều kiện phát triển nuôi trồng cá dầy rộng rãi ở cả môi trường nước lợ và nước ngọt tại địa phương.
Nuôi trồng thủy sản đang phát triển mạnh mẽ, song vấn đề bệnh do ký sinh trùng gây ra là mối đe dọa nghiêm trọng Khí hậu nhiệt đới ẩm của Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của nhiều loài ký sinh trùng, gây ra các bệnh ảnh hưởng đến tăng trưởng, chất lượng sản phẩm, thậm chí gây chết hàng loạt cá, và một số còn gây nguy hiểm cho sức khỏe con người và động vật.
Nhiều nghiên cứu đã xác định và mô tả 373 loài ký sinh trùng trên 110 loài cá kinh tế (trong tổng số 544 loài cá nước ngọt), gây thiệt hại lớn cho ngành nuôi thuỷ sản Những kết quả này có ý nghĩa khoa học, góp phần nghiên cứu hệ ký sinh trùng và thực tiễn phòng trị bệnh.
Nghiên cứu ký sinh trùng trên cỏ dầy là cần thiết để xác định thành phần loài, cường độ nhiễm và tỷ lệ nhiễm, từ đó đề xuất biện pháp phòng trị bệnh, góp phần phát triển nuôi cá dầy bền vững.
Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thuỷ sản I, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội, đã thực hiện đề tài nghiên cứu thành phần loài ký sinh trùng trên cá chép (Cyprinus carpio) tại Thừa Thiên Huế, dựa trên nhu cầu thực tế và sự đồng ý của trường.
Mục tiờu của ủề tài
- Xỏc ủịnh thành phần loài ký sinh trựng trờn cỏ dầy
- Xỏc ủịnh tỷ lệ nhiễm và cường ủộ nhiễm ký sinh trựng trờn cỏ dầy
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 3
ðỐI TƯỢNG, ðỊA ðIỂM, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
ðối tượng, thời gian và ủịa ủiểm nghiờn cứu
Cá dầy Cyprinus centralus Nguyen at Mai, 1994
Các loài ký sinh trùng trên cá dầy
+ Mẫu cỏ hương, cỏ giống và cỏ thịt nuụi trong mụi trường nước ngọt ủược thu tại xã Lộc Bình huyện Phú Lộc tỉnh Thừa Thiên Huế
+ Mẫu cỏ thịt nuụi trong mụi trường nước lợ ủược thu tại xó ðiền Hải huyện Phong ðiền tỉnh Thừa Thiên Huế
- Phân tích mẫu tại phòng thí nghiệm khoa Thuỷ sản và phòng thí nghiệm Trung tâm trường ðại học Nông Lâm Huế.
Nội dung nghiên cứu
- ðiều tra nghiờn cứu ký sinh trựng theo giai ủoạn phỏt triển của cỏ dầy: cỏ hương, cá giống và cá thương phẩm trong môi trường nuôi nước ngọt
- ðiều tra nghiờn cứu ký sinh trựng trờn cỏ dầy giai ủoạn cỏ thịt trong mụi trường nuôi nước lợ
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 15
Phương pháp nghiên cứu
Sử dụng phương pháp nghiên cứu toàn diện ký sinh trùng trên cá của Viện sỹ V.A Dogiel, ủược bổ sung của TS Hà Ký và TS Bựi Quang Tề (2007)
3.3.1 Dụng cụ, húa chất cần thiết ủể giải phẫu và nghiờn cứu ký sinh trựng cỏ
- Kính lúp; kính giải phẫu có thị kính: x7, x10, vật kính: x2, x4, x10; kính hiển vi có thị kính: x7, x10, x15, vật kính: x10, x40, x100
Bộ dụng cụ giải phẫu bao gồm dao liền cán (cạo nhớt), dao cán rời (rạch cơ), pincet, kéo nhọn và kẹp các loại.
- Ống hỳt cỏc loại gồm cả những loại rất bộ ủể hỳt KST kớch thước nhỏ như sỏn lỏ ủơn chủ
- Cỏc loại dụng cụ khỏc như: khay men, ủĩa petri, cốc thuỷ tinh nhỏ, ống thuỷ tinh nhỏ, ủĩa mặt ủồng hồ, chộn thuỷ tinh nhỏ
* Hoá chất: Cồn 50 0 , 70 0 , 90 0 , 96 0 , 100 0 , xylen, nhựa Canada, formol 4%, 10%, hematocylin, fericsulfat amonium 3%, Gelatin - glycerin, ferric sulfat amonium 1,5%, pepsin, HCl, NaCl, NH4OH
3.3.2 Phương pháp thu mẫu và giải phẩu cá
Nghiên cứu thu thập và phân tích 150 mẫu mỗi giai đoạn, tổng cộng 12 giai đoạn với 600 mẫu được kiểm tra ký sinh trùng.
- Phương pháp thu mẫu cá: Cá hương và cá giống thu 150 con/lần, cá thịt thu
30 con/lần Cỏ sau khi thu ủược ủưa về phũng thớ nghiệm và tiến hành phõn tớch ngay
- Cỏ dựng ủể nghiờn cứu là cỏ sống hoặc vừa mới chết, chưa bị khụ nhớt, ớt bị tổn thương do ủỏnh bắt
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 16
Đo chiều dài cỏ (từ đầu đến cuối) bằng thước đo và cân trọng lượng cỏ bằng cân điện tử để đảm bảo cỏ không bị ẩm ướt, giúp quá trình ủ diễn ra hiệu quả.
A- sơ ủồ ủường cắt; B, C - cỏc cơ quan nội tạng 1- bóng hơi; 2- ống khí; 3- tim; 4- lách; 5- gan; 6- ruột; 7- thận; 8- hậu môn ; 9- túi nước tiểu; 10- tuyến sinh dục; 11- mang
Dùng kéo nhọn rạch một đường ngang ở lỗ hậu môn cá, tiếp tục rạch dọc đến dưới mang rồi rạch dọc bụng từ hậu môn lên đến đường cắt ngang đầu tiên, tạo thành một miếng và lấy bỏ.
Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp tại Đại học Nông nghiệp Hà Nội đề cập đến việc mổ động vật cần hết sức cẩn thận khi cắt, tránh làm tổn thương các cơ quan nội tạng.
Cấu tạo cá gồm: bóng hơi nằm dưới xương sống, tiếp đến là các cơ quan tiêu hóa (gan, dạ dày, ruột) với lách nằm ở chỗ cong của ruột Tuyến sinh dục nằm giữa bóng hơi và ruột, gan thường bị dạ dày và tuyến sinh dục che khuất Túi nước tiểu nằm ở phía cuối tuyến sinh dục về phía lưng Tim nằm trước xoang thân, giữa mang và gan Thận nằm dọc cột sống, cần lấy bóng hơi ra để quan sát Cắt nắp mang để thấy toàn bộ mang Để nghiên cứu cơ, cần rạch da, cắt nhiều lớp dọc để lấy cơ, sau đó nghiền nhỏ và cho vào dung dịch tiêu cơ pepsin axit.
3.3.3 Thu mẫu và nghiên cứu ngoại ký sinh trùng
Để làm tiêu bản máu tim cỏ, dùng ống hút Pasteur lấy máu trực tiếp từ tim (vị trí: mũi hẹp thành xoang bụng giữa các nắp mang), phết lên lam kính sạch mỡ, chờ khô, cố định bằng cồn etylic và ete (1:1) trong 5 phút, rồi để khô lại Bảo quản nơi khô ráo, ghi số hiệu cá thể lên mặt sau lam kính.
Sau khi lấy mẫu nhớt cá, làm tiêu bản bằng cách đặt mẫu lên lam kính, nhuộm bằng dung dịch Saudin ấm (15-20°C) và quan sát dưới kính hiển vi để tìm động vật nguyên sinh và tảo đơn bào.
Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp tại Đại học Nông nghiệp Hà Nội mô tả phương pháp quan sát: Sau khi cố định mẫu, rửa sạch bằng cồn 70%, nhuộm bằng dung dịch iốt 15-20 phút để loại bỏ thủy ngân, sau đó rửa lại bằng cồn 70% và quan sát dưới kính hiển vi.
Quan sát kỹ sâu bệnh hại trên cây bằng cách ngâm cây trong nước, kiểm tra lá, thân, rễ Sử dụng kính hiển vi quan sát kỹ các vết bệnh như: giáp xác, rệp, ốc sên, bào tử nấm.
Nghiên cứu ký sinh trùng trên mang cá gồm các bước: cắt nắp mang, cung mang và lấy lá mang Quan sát kỹ các sợi mang dưới kính hiển vi với vài giọt nước Có thể phát hiện bào tử Myxobolus, Thelohanellus, Henneguya, trùng lông Chilodonella, Ichthyophthyrius, Trichodinidae, Apiosoma và ấu trùng metacercaria của Centrocestus formosanus, cùng với loài sán lá đơn chủ Dactylogyrus.
3.3.4 Thu mẫu và nghiên cứu nội ký sinh trùng
Thứ tự tiến hành nghiên cứu thu mẫu KST các cơ quan nội tạng như sau:
Dùng kính hiển vi quan sát tim cỏ sau khi ngâm trong dung dịch nước muối sinh lý Mổ tim cỏ để quan sát cấu tạo bên trong.
Thu mẫu ký sinh trùng từ gan, lách, ruột, thận và cơ, nghiền riêng từng mẫu và tiến hành nghiên cứu theo trình tự đã xác định.
Nghiên cứu gan và lá lách được tiến hành bằng cách quan sát trực tiếp, lấy mẫu nhỏ và ép xem dưới kính lúp.
Để thu mẫu KST trong ruột cú, có thể bắt đầu từ ruột sau đến ruột trước hoặc ngược lại Mổ dọc từng đoạn ruột để kiểm tra Chỉ lấy các KST nhìn thấy bằng mắt thường, dùng pincet hoặc dùi nhọn, cho vào nước lạnh.
Phương pháp xử lý số liệu
Đối với vi khuẩn kích thước nhỏ như đơn bào, tính cường độ nhiễm được xác định bằng số lượng vi khuẩn đếm trên kính hiển vi (10x10), mỗi lamen kiểm tra đếm 15 thị trường.
Tổng số trùng của 15 thị trường kiểm tra Cường ủộ nhiễm trung bỡnh 15
- ðối với sỏn lỏ ủơn chủ Monogenea: Tớnh số lượng trựng trờn lamen kiểm tra, mỗi con cá kiểm tra từ 3 - 5 lamen
Tổng số trùng trên các lamen kiểm tra Cường ủộ nhiễm trung bỡnh Số lamen kiểm tra
- ðối với sán lá Aspidogastrea, ấu trùng metacercaria, giáp xác: ðếm toàn bộ số lượng ký sinh trùng bắt gặp trên cơ thể cá
Tổng số trùng trên các cá thể kiểm tra Cường ủộ nhiễm trung bỡnh Số cá thể kiểm tra
Số cá nhiễm ký sinh trùng
3.4.3 Dựng phần mền Excel và SPSS ủể xử lý số liệu
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 24
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
Số lượng, chiều dài và khối lượng của cá kiểm tra
Nghiên cứu đã kiểm tra ký sinh trùng (KST) trên 600 con cỏ (150 con/giai đoạn) thuộc các giai đoạn cỏ hương, cỏ giống, cỏ thịt nuôi nước ngọt và cỏ thịt nuôi nước lợ Chiều dài và khối lượng cỏ được ghi nhận trong Bảng 4.1.
Bảng 4.1 Số lượng, chiều dài và khối lượng cá kiểm tra
Cá thịt 150 21,962 ± 6,632 153,757 ± 102,085 Nước lợ Cá thịt 150 20,895 ± 6,912 160,527 ± 110,927
Thành phần loài ký sinh trùng trên cá dầy
Kiểm tra KST trờn 600 mẫu cỏ, chỳng tụi ủó xỏc ủịnh ủược 10 loài KST ủú là Ichthyophthyrius multifiliis, Myxobolus koi, Trichodina jadranica, Dactylogyrus minutus, Dactylogyrus magnihamatus, Gyrodactylus ctenopharyngodontis,
Metacercaria của Centrocestus formosanus, Aspidogaster limacoides, Argulus japonicus, Alitropus typus thuộc 4 ngành (Cnidosporidia, Ciliophora,
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 25
Plathelminthes, Arthoropoda ), 7 lớp (Myxosporea, Oligohymenophorea,
Monogenea, Trematoda, Aspidogastrea, Maxillopoda, Malacostraca), 9 bộ
(Bivalvulea, Mobilina, Hymetostomatida, Dactylogyridea, Gyrodactylidea,
This study identified parasitic fauna including Opisthorchiida, Aspidogastrida, Argulidae, and Isopoda (representing four orders), nine families (Myxobolidae, Trichodinidae, Ophryoglenidae, Dactylogyridea, Gyrodactylidae, Heterophyidae, Aspidogastridae, Arguldae, Aegidae), and nine genera (Myxobolus, Trichodina, Ichthyophthyrius, Dactylogyrus, Gyrodactylus, Centrocestus, Aspidogaster, Argulus, Alitropus) A detailed species list is presented in Table 4.2.
Nghiên cứu của Hà Ký và Bùi Quang Tề (2007) cho thấy mật độ ký sinh trùng (KST) trên cá dày thấp hơn nhiều loài cá nước ngọt khác Cá chép ghi nhận 65 loài KST, cao hơn đáng kể so với cá dày, trong khi các loài cá khác như cá mè trắng (39 loài), cá trắm cỏ (29 loài), cá trê vàng (29 loài) cũng có số lượng KST cao hơn Một số loài cá như cá chim trắng chỉ có 3 loài KST.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 26
Bảng 4.2 Thành phần loài ký sinh trùng trên cá dầy
STT Tên KST Cơ quan ký sinh
1 Myxobolus koi Kudo, 1919 Mang 3,33 1,64±0,11 Trùng/TT
2 Lớp Oligohymenophorea de Puytorac et al., 1974
3 Lớp Monogenea (Van Beneden, 1858) Bychowsky, 1937
4 Lớp Aspidogastrea Faust et Tabg, 1936
Diesing, 1835 Ruột 3,83 6,35±1,56 Trùng/cơ thể
8 Metacercaria của Centrocestus formosanus Nishigori, 1924 Mang 11,83 3,28±0,25 Trùng/cơ thể
9 Argulus japonicus Thiele, 1900 Da 11,50 3,90±0,47 Trùng/cơ thể
10 Alitropus typus Edwards, 1840 Da 14,83 1,94±0,12 Trùng/cơ thể
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 27
Vị trớ phõn loại và ủặc ủiểm hỡnh thỏi của cỏc loài KST trờn cỏ dầy
1 Ngành Cnidosporidia Doflein, 1901 emend Schulman et Podlipaev, 1980
Phân bộ Platysporea Kudo, emend Schulman,1959
* Vật chủ: Cỏ dầy giai ủoạn cỏ hương và cỏ giống
* Nơi ký sinh: Mang cá
* Nơi tìm thấy: Phú Lộc - Thừa Thiên Huế
Bào tử *Myxobolus koi* hình quả lê, hai cực nang hình lê đều nhau, chiều dài lớn hơn một nửa chiều dài bào tử (14,0-16,2µm x 6,1-7,5µm; cực nang: 7,2-8,7µm x 2,5-2,8µm) Đặc điểm hình thái này phù hợp với mô tả của Kudo (1919) và Bùi Quang Tề (2007).
Tỷ lệ nhiễm Myxobolus koi trên cá Koi giai đoạn cá hương và cá giống lần lượt là 8,67% và 4,67%, với cường độ nhiễm trung bình 1,68 và 1,65 trùng/cá.
Myxobolus koi cú cường ủộ nhiễm cao nhất trờn cỏ hương và cỏ giống là 4 và thấp nhất là 1 trùng/TT
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 28
Hình 4.1 Hình dạng của Myxobolus koi
Myxobolus koi, theo Bùi Quang Tề (2007), ký sinh trên mang cá chép, cá rô hu, và cá mrigal, gây bệnh trên nhiều loài cá nước ngọt Loài này có tỷ lệ nhiễm cao, lên đến 96% trên cá chép Hungary nhập nội (Bùi Quang Tề, 2007) Nhiễm Myxobolus koi biểu hiện bằng nhiều bào nang trắng đục dày đặc trên mang cá, gây khó khăn trong việc đóng mở nắp mang và có thể dẫn đến chết hàng loạt (Đỗ Thị Hoà, 2004) Hình ảnh mẫu nhuộm AgNO3 trên mang cá dày thể hiện rõ ký sinh trùng (Schulman, 1962).
2 Lớp Oligohymenophorea de Puytorac et al., 1974
* Vật chủ: Cỏ dầy giai ủoạn cỏ thịt nuụi trong mụi trường nước lợ
* Vị trí ký sinh: Mang cá
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 29
* Nơi tìm thấy: Quảng ðiền - Thừa Thiên Huế
* ðặc ủiểm hỡnh thỏi: Loài Trichodina jadranica cú ủường kớnh thõn dao ủộng từ
Móc câu có kích thước đa dạng: chiều dài thân móc 39,2-54,3mm; đường kính vòng ngoài 35-39,5mm; đường kính vòng múc ngoài 31,5-35,4mm; đường kính vòng múc trong 24,29-27,1mm; đường kính vòng sóng trung tâm 7,9-9,8mm; chiều dài ngạnh ngoài 5,1-6,5mm; chiều dài ngạnh trong 4,0-6,0mm; số móc 21-23 chiếc; số sọc giữa hai ngạnh ngoài 7-8 sọc.
Những ủặc ủiểm hỡnh thỏi của loài Trichodina jadranica ủược mụ tả như trờn tương tự với loài Trichodina jadranica Raabe, 1958 mụ tả và ủịnh loại
Hình 4.2 Hình dạng của Trichodina jadranica (mẫu nhuộm AgNO 3 thu trên mang cá dầy)
* Mức ủộ nhiễm: Tỷ lệ nhiễm của Trichodina jadranica trờn cỏ là 11,33% và cường ủộ nhiễm trung bỡnh là 1,52 trựng/TT
Loài Trichodina jadranica ủược tỡm thấy trờn một số loài cỏ nước mặn như cỏ hồng ủỏ, cỏ giũ (theo Hà Ký và Bựi Quang Tề, 2007)
Phân lớp Hymetostomata Delage et Herouard, 1896
3 Bộ Hymetostomatida Delage et Herouard, 1896
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 30
Phân bộ Tetrahymenida Faure - Fremiet, 1956
* Vật chủ: Cỏ dầy giai ủoạn cỏ hương, giống và cỏ thịt NN
* Nơi ký sinh: Da, mang
* Nơi tìm thấy: Phú Lộc - Thừa Thiên Huế
Ichthyophthyrius multifiliis có thân hình tròn hoặc trứng, dài 0,25-0,52mm, phủ đầy lông bơi, nhiều không bào co bóp nhỏ và nhân lớn hình móng ngựa Trùng được bao bọc bởi các sợi lông mảnh dọc từ miệng, di chuyển liên tục.
Hình 4.3 Hình dạng cuả Ichthyophthyrius multifiliis (mẫu tươi, thu trên cá dầy)
Cá hương, cá giống và cá thịt NN nhiễm *Ichthyophthyrius multifiliis* ở da với tỷ lệ lần lượt là 15,33%, 21,33% và 28,67%, cường độ nhiễm trung bình tương ứng là 1,90, 2,42 và 2,39 trùng/cá Tỷ lệ nhiễm trên mang lần lượt là 17,33%, 21,33% và 28,67%, với cường độ nhiễm trung bình là 3,23, 3,87 và 3,78 trùng/cá.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 31
Ichthyophthyrius multifiliis ký sinh trên nhiều loài cá nước ngọt, gây nhiễm cao trên cá trê phi, thậm chí lên đến 100% với cường độ nhiễm trên 50 trứng/cá thể (theo Hà).
Ký và Bùi Quang Tề, 2007)
Hình 4.4 Hình dạng của Ichthyophthyrius multifiliis
(A, D là giai ủoạn trưởng thành; C, B: giai ủoạn ấu trựng (theo Fouquet, 1876)
3 Lớp Monogenea (Van Beneden, 1858) Bychowsky,1937
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 32
Hình 4.5 Hình dạng của Dactylogyrus minutus (thu trên mang cá dầy)
Hình 4.6 minh họa hình dạng móc và gai giao phối của *Dactylogyrus minutus* (theo Bùi Quang Tề, 2007), bao gồm móc rìa (mh), móc giữa (ah), cơ quan giao cấu (co) và màng nối lưng (db).
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 33
* Vật chủ: Cỏ dầy giai ủoạn cỏ thịt nuụi trong nước lợ
* Nơi ký sinh: Mang cá
* Nơi tìm thấy: Quảng ðiền - Thừa Thiên Huế
Dactylogyrus minutus có kích thước nhỏ (0,3-0,5 mm dài, 0,07-0,082 mm rộng), đĩa bám giới hạn rõ với thân, có màng nối thẳng Móc rìa (0,015-0,039 mm), móc giữa (tổng chiều dài 0,048-0,059 mm) có nhánh trong phát triển hơn nhánh ngoài Cơ quan giao phối (0,038-0,052 mm) gồm phần gốc to, ống giao phối (0,031-0,047 mm) và bộ phận phụ.
Tỷ lệ nhiễm *Dactylogyrus minutus* trên cá là 7,33%, với cường độ nhiễm trung bình 2,78 trùng/lamen, dao động từ 1 đến 8 trùng/lamen.
Dactylogyrus minutus ủó ủược tỡm thấy trờn mang của cỏ chộp và cỏ chày mắt ủỏ (theo Hà Ký, 1968 và Bựi Quang Tề, 2007)
* Vật chủ: Cỏ dầy giai ủoạn cỏ giống
* Nơi ký sinh: Mang cá
* Nơi tìm thấy: Phú Lộc - Thừa Thiên Huế
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 34
Hình 4.7 Hình dạng của Dactylogyrus magnihamatus (thu trên mang cá dầy)
Hình 4.8 minh họa hình dạng móc và gai giao phối của *Dactylogyrus magnihamatus* (Yamaguti, 1971), bao gồm móc rìa (mh), móc giữa (ah), cơ quan giao cấu (co) và màng nối lưng (db).
Dactylogyrus magnihamatus có kích thước lớn (1,2-1,5 mm dài, 0,50-0,64 mm rộng), đĩa bám tách biệt thân, màng nối hiện diện, và móc giữa có nhánh trong phát triển.
Sán lá Dactylogyrus magnihamatus có móc giữa với 35 nhánh ngoài, dài 0,10-0,12mm (phần chính 0,05-0,07mm), nhánh ngoài 0,013-0,02mm và nhánh trong 0,043-0,053mm Màng nối bụng dài 0,037-0,043mm, rộng 0,004-0,005mm Cơ quan giao phối dài 0,026-0,033mm, cấu tạo chưa rõ.
Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ nhiễm *Dactylogyrus magnihamatus* trên cá là 4%, với cường độ nhiễm trung bình 1,17 trùng/lamen Cường độ nhiễm dao động từ 1 đến 2 trùng/lamen.
5 Họ Gyrodactylidae Van Benneden et Hesse, 1863
* Vật chủ: Cỏ dầy giai ủoạn cỏ giống
* Vị trí ký sinh: Mang cá
* Nơi tìm thấy: Phú Lộc - Thừa Thiên Huế
* ðặc ủiểm hỡnh thỏi: Gyrodactylus ctenopharyngodontis cú chiều dài cơ thể là
0,55 – 0,57 mm, chiều rộng 0,12 – 0,15 mm, tổng chiều dài móc rìa 0,025 – 0,030 mm, tổng chiều dài móc giữa 0,051 – 0,067 mm
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 36
* Mức ủộ nhiễm: Tỷ lệ nhiễm của Gyrodactylus ctenopharyngodontis trờn cỏ dầy là 5,33% và cường ủộ nhiễm trung bỡnh là 1,33 trựng/lamen Cường ủộ nhiễm
Dactylogyrus magnihamatus cao nhất và thấp nhất trên cá lần lượt là 2 và 1 trùng/lamen
Hình 4.9 Hình dạng của Gyrodactylus ctenopharyngodontis
(A - Hình mẫu tươi thu trên mang cá dầy; B - Hình dạng móc của Gyrodactylus ctenopharyngodontis (theo Ling Mo-en, 1962)
4 Lớp Aspidogastrea Faust et Tabg, 1936
* Vật chủ: Cỏ dầy giai ủoạn cỏ thịt nuụi trong nước lợ
* Nơi ký sinh: Ruột cá
* Nơi tìm thấy: Quảng ðiền - Thừa Thiên Huế
* ðặc ủiểm hỡnh thỏi: Loài Aspidogaster limacoides cú chiều dài cơ thể từ 1,67 –
3,68 mm, chiều rộng 0,67 – 1,3 mm Dọc cơ thể sán có 4 hàng giác hút, mỗi hàng
Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp tại Đại học Nông nghiệp Hà Nội (trang 37) ghi nhận loài này có 10-14 tinh hoàn hình trứng, kích thước 0,42-0,61 x 0,63-0,81 mm và trứng kích thước 0,05-0,07 x 0,02-0,04 mm.
Hình 4.10 Hình dạng của Aspidogaster limacoides thu trong ruột cá dầy
(A,B- mẫu tươi; C- mẫu nhuộm carmine)
Hình 4.11 Hình dạng của Aspidogaster limacoides (theo A donicum Popov,
Tỷ lệ nhiễm và cường ủộ nhiễm ký sinh trựng trờn cỏ dầy
4.4.1 Tỷ lệ nhiễm KST trên cá và trên các cơ quan kiểm tra
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 44
Kết quả kiểm tra KST trên 600 mẫu cá ở các giai đoạn và môi trường nuôi cho thấy tỷ lệ nhiễm chung là 51,83% Cá thịt nuôi nước ngọt (NN) có tỷ lệ nhiễm cao nhất (68,67%), tiếp theo là cá thịt nước lợ (NL) 65,53%, cá giống 38,67% và cá hương 34,67% Như vậy, cá thịt nuôi nước ngọt nhiễm KST cao hơn các giai đoạn phát triển khác.
Tỷ lệ nhiễm KST của số mẫu kiểm tra ủược thể hiện ở bảng 4.3
Bảng 4.3 Tỷ lệ nhiễm KST của số mẫu kiểm tra Giai ủoạn Số cỏ kiểm tra (con) Số cỏ nhiễm (con) Tỷ lệ nhiễm (%)
Nghiên cứu KST trên các cơ quan của cá cho thấy sự hiện diện của ký sinh trùng này trên da, mang và ruột Hình 4.17 minh họa tỷ lệ nhiễm KST trên các cơ quan đã được kiểm tra.
Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ nhiễm KST trên mang cá hương (32,67%) và cá giống (39,33%) cao hơn trên da (cá hương: 15,33%; cá giống: 21,33%) Tuy nhiên, ở giai đoạn cá thịt, tỷ lệ nhiễm KST trên da lại cao hơn (cá thịt NN: 66,67%; cá thịt NL: 56%), đáng chú ý là ở cá thịt NL, KST còn được phát hiện trong ruột (15,33%).
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 45
Cá hương Cá gi ống Cá th ịt NN Cá thịt NL
Số cá nhiễm trên da Số cá nhiễm trên mang Số cá nhiễm trên da và mang Số cá nhiễm trong ruột
Hình 4.17 ðồ thị tỷ lệ nhiễm KST trên các cơ quan của cá dầy 4.4.2 Tỷ lệ nhiễm và cường ủộ nhiễm cỏc loài KST bắt gặp trờn cỏ dầy
4.4.2.1 T ỷ l ệ nhi ễ m KST trờn cỏ d ầ y giai ủ o ạ n cỏ h ươ ng, cỏ gi ố ng và cỏ th ị t NN
Tỷ lệ nhiễm KST trờn cỏ dầy giai ủoạn cỏ hương, cỏ giống và cỏ thịt NN ủược thể hiện trờn hỡnh 4.18
Ichthyophthyrius multifiliis ký sinh trên da và mang cá, tỷ lệ nhiễm cao nhất (28,67%) ở giai đoạn cá thịt Theo Hà Ký và Bùi Quang Tề (2007), ký sinh trùng này có thể gây nhiễm trên nhiều loài cá nước ngọt với tỷ lệ lên đến 100% và cường độ nhiễm cao (trên 20 trùng/cá thể) ở một số loài như cá trê vàng, cá chim trắng.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 46
Cá hương Cá giống Cá thịt NN
Ichthyophthyrius multifiliis-Da Ichthyophthyrius multifiliis-Mang
Gyrodactylus ctenopharyngodontis Metacercaria của Centrocestus formosanus
Hỡnh 4.18 ðồ thị tỷ lệ nhiễm KST trờn cỏ dầy ở giai ủoạn cỏ hương, cỏ giống và cá thịt NN
Metacercaria của *Centrocestus formosanus* ký sinh trên nhiều loài cá nước ngọt, với tỷ lệ nhiễm (TLN) cao nhất (93,33%) trên cá trắm cỏ, tiếp đến là cá chép TLN trên cá thịt NN đạt 17,33%, thấp hơn đáng kể so với cá trắm cỏ Tỷ lệ nhiễm trên cá dầy thấp hơn các loài cá khác.
Trên cá thịt, chúng tôi còn bắt gặp một số loài giáp xác, tỷ lệ nhiễm của
Argulus japonicus (28,67%) và Alitropus typus (20,67%) là hai loài phổ biến ở vùng đầm phá Thừa Thiên Huế, gây thiệt hại đáng kể cho cả nuôi trồng và tự nhiên.
4.4.2.2 T ỷ l ệ nhi ễ m KST trờn cỏ d ầ y giai ủ o ạ n cỏ th ị t NN và cỏ th ị t NL
Tỷ lệ nhiễm KST trờn cỏ dầy giai ủoạn cỏ thịt NN và cỏ thịt NL ủược thể hiện trên hình 4.19
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 47
Cá thị t NN Cá thị t NL
Ichthyophthyrius multifiliis-Da Ichthyophthyrius multifiliis-Mang
Aspidogaster limacoides Metacercaria của Centrocestus formosanus
Hỡnh 4.19 ðồ thị tỷ lệ nhiễm KST trờn cỏ dầy ở giai ủoạn cỏ thịt NN và cỏ thịt NL
Trờn cỏ thịt NN và cỏ thịt NL ủều bắt gặp metacercaria của Centrocestus formosanus, Argulus japonicus và Alitropus typus TLN metacercaria của
Centrocestus formosanus trên cá thịt NN là 17,33% và trên cá thịt NL là 9,33%
TLN của Argulus japonicus trên cá thịt NN là 27,67%, trên cá thịt NL là 17,33%
Loài Alitropus typus có TLN trên cá thịt NN là 20,67% và trên cá thịt NL là
Loài Ichthyophthyrius multifiliis có TLN trên mang và da cá thịt NN là
Tỷ lệ ký sinh trùng trên cá nuôi (NL) đạt 28,67%, cao hơn cá nuôi tự nhiên (NN) Một số loài như *Trichodina jadranica*, *Dactylogyrus minutus*, và *Aspidogaster limacoides* chỉ xuất hiện trên cá NL.
Trichodina jadranica là 11,33%, Dactylogyrus minutus là 7,33% và Aspidogaster limacoides là 15,33%
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 48
4.4.2.3 C ườ ng ủộ nhi ễ m KST ủơ n bào trờn cỏ d ầ y
Trên cỏ dày, ba loài ký sinh trùng đơn bào là *Trichodina jadranica*, *Myxobolus koi*, và *Ichthyophthyrius multifiliis* đã được phát hiện Hình 4.20 minh họa cường độ nhiễm ký sinh trùng đơn bào trên cỏ dày.
Cá hương Cá giống Cá thị t NN Cá thị t NL
Ichthyophthyrius multifiliis - Da Ichthyophthyrius multifiliis - Mang
Hỡnh 4.20 ðồ thị cường ủộ nhiễm KST ủơn bào trờn cỏ dầy
Myxobolus koi gây bệnh trên cá hương và cá giống, với cường độ nhiễm trung bình 1,68 và 1,56 trùng/thân cá Tuy nhiên, loài này gây nhiễm rất cao trên cá chép (trên 40 trùng/thân cá), dẫn đến hiện tượng phồng mang và chết hàng loạt (Bùi Quang Tề, 2007).
Trichodina jadranica chỉ bắt gặp trên cá thịt NL, CðNTB là 1,52 trùng/TT
Loài Ichthyophthyrius multifiliis bắt gặp trên da và trên mang của cá nuôi trong mụi trường nước ngọt Cường ủộ nhiễm trung bỡnh của trựng trờn mang ở giai
Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp tại Đại học Nông nghiệp Hà Nội ghi nhận mật độ trung bình 3,23 trùng/TT đối với cỏ hương, 3,87 trùng/TT đối với cỏ giống và 3,78 trùng/TT đối với cỏ thịt.
4.4.2.4 C ườ ng ủộ nhi ễ m ký sinh trựng ủ a bào trờn cỏ d ầ y
Trờn cỏ dầy, chỳng tụi bắt gặp 3 loài thuộc lớp Monogenea ủú là
Bài báo nghiên cứu cường độ nhiễm ký sinh trùng *Dactylogyrus magnihamatus*, *Dactylogyrus minutus*, và *Gyrodactylus ctenopharyngodontis* trên cá Kết quả cho thấy cường độ nhiễm thấp ở giai đoạn cá giống, với mức trung bình 1,7 trùng/lamen cho *D magnihamatus* và 1,33 trùng/lamen cho *G ctenopharyngodontis* *D minutus* được tìm thấy trên cá thịt, với cường độ nhiễm trung bình 2,78 trùng/lamen.
Aspidogaster limacoides, một loài sán ký sinh, chỉ được tìm thấy trong ruột của cá thịt nước lợ, không xuất hiện ở cá thịt nước ngọt (A Donicum Popov, 1926) Mật độ nhiễm trung bình của A limacoides trên cá dày là 6,35 trùng/cá.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 50
Bảng 4.4 Cường ủộ nhiễm KST ủa bào trờn cỏ dầy
Cường ủộ nhiễm trung bỡnh
KS Cá hương Cá giống Cá thịt
1 Dactylogyrus magnihamatus Mang - 1,17±0,11 - - Trùng/ lamen
4 Aspidogaster limacoides Ruột - - - 6,35±1,56 Trùng/ cơ thể
Mang 2,75±0,32 3,84±0,45 3,92±0,51 1,79±0,24 Ấu trùng/ cơ thể
Nghiên cứu ghi nhận mật độ ấu trùng metacercaria của *Centrocestus formosanus* trên cỏ là 3,84 và 3,92 trùng/cơ thể, tùy thuộc vào giai đoạn phát triển của cỏ Mật độ nhiễm trung bình trên cỏ thịt là 3,92 trùng/cơ thể Kết quả cũng cho thấy sự hiện diện của 7 cá thể *Alitropus typus* với mật độ nhiễm trung bình 1,74±0,15 và 2,05±0,16 trùng/cơ thể.
Mật độ trứng sán lá gan nhỏ *Centrocestus formosanus* trong cơ thể ốc là 1,79 trứng/con Một số loài cỏ nước ngọt, ví dụ cỏ mồ trắng, ghi nhận mật độ nhiễm metacercaria ở giai đoạn ấu trùng khoảng 1,5 trứng/con.
Nghiên cứu của Nguyễn Thị Thanh (2007) cho thấy mật độ nhiễm ấu trùng Centrocestus formosanus trên cá trắm cỏ là 1,9 trùng/cá thể Nguyễn Thị Hà (2007) cũng ghi nhận sự nhiễm ấu trùng này trên các loài cá nước lợ khác, với mật độ 2 trùng/cá thể trên cá bống bớp và 3 trùng/cá thể trên cá song.
Loài Argulus japonicus và Alitropus typus tỡm thấy trờn cỏ ở giai ủoạn cỏ thịt
NN và cỏ thịt NL Cường ủộ nhiễm trung bỡnh của Argulus japonicus trờn cỏ thịt