Đánh giá kết quả nhuộm gram, ziehl neelsen của một số phòng xét nghiệm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN NGỌC QUÍ ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ NHUỘM GRAM, ZIEHL - NEELSEN CỦA MỘT SỐ PHÒNG XÉT NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT Y HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN NGỌC QUÍ ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ NHUỘM GRAM, ZIEHL - NEELSEN CỦA MỘT SỐ PHÒNG XÉT NGHIỆM Ngành: Kỹ thuật xét nghiệm Y học Mã số: 8720601 LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUÂT Y HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS.BS MAI VĂN ĐIỂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – 2018 i LỜI CAM ĐOAN Chúng xin cam đoan đề tài nghiên cứu riêng chúng tơi Các tài liệu trích dẫn, số liệu đề tài hoàn toàn trung thực tuân theo yêu cầu đề tài nghiên cứu Đề tài chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn NGUYỄN NGỌC QUÍ ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ, HÌNH v DANH MỤC CÁC BẢNG vi ĐẶT VẤN ĐỀ C U HỎI NGHI N CỨU MỤC TI U NGHI N CỨU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm vi sinh vật gây bệnh kỹ thuật chẩn đoán 1.2 Kỹ thuật nhuộm soi vi sinh vật 1.3 Quy trình xét nghiệm sai số thường gặp 14 1.4 Ngoại kiểm tra chất lượng xét nghiệm 17 1.5 Phương pháp đánh giá kết chương trình định tính 23 1.6 Các nghiên cứu chất lượng xét nghiệm 25 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHI N CỨU 28 2.1 Thiết kế nghiên cứu 28 2.2 Địa điểm nghiên cứu 28 2.3 Thời gian nghiên cứu 28 2.4 Dân số mục tiêu 28 2.5 Dân số nghiên cứu 28 2.6 Cỡ mẫu nghiên cứu 28 2.7 Tiêu chuẩn chọn mẫu 28 2.8 Kỹ thuật chọn mẫu 29 2.9 Thu thập số liệu 29 2.10 Xử lý phân tích số liệu 33 iii 2.11 Kiểm soát sai lệch 33 2.12 Biến số định nghĩa biến số 33 2.13.Vấn đề y đức 34 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ 35 3.1 Độ ổn định đồng mẫu sản xuất 35 3.2 Đánh giá kết ngoại kiểm mẫu nhuộm Gram 37 3.3 Đánh giá kết ngoại kiểm mẫu nhuộm Ziehl – Neelsen 45 3.4 So sánh kết PXN can thiệp 52 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 56 4.1 Đánh giá kết ngoại kiểm mẫu nhuộm Gram 56 4.2 Đánh giá kết ngoại kiểm mẫu nhuộm Ziehl – Neelsen 61 4.3 So sánh kết PXN can thiệp 63 KẾT LUẬN 66 KIẾN NGHỊ 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC PHỤ LỤC PHỤ LỤC PHỤ LỤC iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tiếng Việt ATSH : An toàn sinh học CLXN : Chất lượng xét nghiệm KQXN : Kết xét nghiệm KTCL : Kiểm tra chất lượng PXN : Phòng xét nghiệm NCV : Nghiên cứu viên TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam TP : Thành phố Tiếng Anh AFB : Acid Fast Bacillus – Trực khuẩn kháng acid EQC : External Quality Control - Ngoại kiểm tra chất lượng xét nghiệm ISO : International Organization for Standardization – Tổ chức tiêu chuẩn hóa quốc tế WHO : World Health Organization – Tổ chức Y tế giới v DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ, HÌNH Hình 1.1: Hình ảnh vi khuẩn Gram dương sau nhuộm 10 Hình 1.2: Hình ảnh vi khuẩn Gram âm sau nhuộm 10 Hình 1.3: Hình ảnh vi khuẩn AFB sau nhuộm 12 Hình 2.1: Sơ đồ phương pháp thực nghiên cứu 32 Biểu đồ 3.1: Đánh giá kết nhuộm Gram năm 2016 37 Biểu đồ 3.2: Đánh giá kết nhuộm Gram năm 2017 38 Biểu đồ 3.3: So sánh z-score nhuộm Gram năm 2016 2017 41 Biểu đồ 3.4: Đánh giá kết nhuộm Gram theo nhóm vi khuẩn 42 Biểu đồ 3.5: Đánh giá kết nhuộm Ziehl – Neelsen năm 2016 46 Biểu đồ 3.6: Đánh giá kết nhuộm Ziehl – Neelsen năm 2017 47 Biểu đồ 3.7: So sánh z-score nhuộm Ziehl - Neelsen năm 2016 2017 50 Biểu đồ 3.8: Đánh giá kết nhuộm Ziehl – Neelsen theo phân loại vi khuẩn 51 vi DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Phân loại kết nhuộm Ziehl – Neelsen 12 Bảng 2.1: Thang điểm tương ứng với yêu cầu đặt 31 Bảng 3.1: Độ ổn định đồng mẫu ngoại kiểm nhuộm Gram 35 Bảng 3.2: Độ ổn định đồng mẫu ngoại kiểm nhuộm Ziehl – Neelsen 36 Bảng 3.3: Kết đánh giá nhuộm Gram qua năm 39 Bảng 3.4: Kết z-score 30 PXN tham gia liên tục hai năm 2016 2017 40 Bảng 3.5: Kết PXN nhóm trực khuẩn Gram (-) 42 Bảng 3.6: Kết PXN nhóm âm tính 43 Bảng 3.7: Kết PXN nhóm cầu khuẩn Gram (+), xếp chùm 43 Bảng 3.8: Kết PXN nhóm cầu khuẩn Gram (+), xếp chuỗi 44 Bảng 3.9: Kết PXN nhóm cầu trực khuẩn Gram (-) 44 Bảng 3.10:Kết PXN nhóm hỗn hợp vi khuẩn 45 Bảng 3.11: Kết nhuộm Zeihl – Neelsen qua năm 48 Bảng 3.12: Kết z-score 30 PXN tham gia liên tục hai năm 2016 2017 49 Bảng 3.13: Kết nhuộm Ziehl – Neelsen PXN 51 Bảng 3.14: Các PXN có z-score cần cải thiện sau đợt năm 2017 52 Bảng 3.15: Các PXN có z-score cần cải thiện sau đợt năm 2017 53 Bảng 3.16: Kết nhuộm Gram PXN trước sau can thiệp 54 Bảng 3.17: Các yếu tố can thiệp 54 ĐẶT VẤN ĐỀ Xét nghiệm yêu cầu cận lậm sàng thường quy bệnh viện, xét nghiệm vi sinh đóng vai trị quan trọng chẩn đốn, định điều trị theo dõi hiệu điều trị bệnh lý nhiễm trùng Một kết vi sinh xác góp phần quan trọng vào việc chẩn đốn sử dụng thuốc kịp thời, giúp bệnh nhân thoát khỏi tình trạng bệnh lý, rút ngắn thời gian nằm viện, hạn chế chi phí điều trị [42] Từ thực tế đòi hỏi phòng xét nghiệm (PXN) cần thường xuyên tăng cường nâng cao chất lượng kết xét nghiệm vi sinh nhằm đáp ứng yêu cầu phục vụ lâm sàng Để giúp PXN thực tốt công tác đảm bảo chất lượng xét nghiệm (CLXN), Bộ Y tế ban hành quy định bắt buộc PXN phải kiểm sốt chất lượng thơng qua hoạt động nội kiểm tra ngoại kiểm tra [7],[13]; hoạt động ngoại kiểm triển khai từ PXN khách quan bên nhằm đánh giá CLXN, phát sai số (sai sót) từ xác định nguyên nhân, khắc phục sai sót, nâng cao CLXN [17],[36] Bên cạnh đó, ngoại kiểm tra CLXN yêu cầu bắt buộc PXN muốn đạt ISO 15189:2007, ngoại kiểm tra mang lại nhiều lợi ích cho PXN, bác sĩ lâm sàng, bệnh nhân quan quản lý [13], … Nó giúp PXN so sánh kết với PXN khác khu vực [17],[37] Thông qua kết ngoại kiểm tra, PXN biết lực tốt hay so với thời điểm trước đó, đánh giá thực trạng PXN so với PXN khác, từ có sở tìm nguyên nhân gây sai sót đề xuất hành động khắc phục kết xét nghiệm không đạt yêu cầu [37] Ngoại kiểm tra cung cấp chứng khách quan lực PXN, sở khoa học cho việc công nhận PXN đạt chất lượng theo quy định chuẩn hóa [8],[13]; bước hướng đến việc liên thông công nhận kết xét nghiệm, từ giúp bệnh nhân giảm thời gian chi phí khám chữa bệnh Một công cụ để đánh giá độ tin cậy xét nghiệm nói chung xét nghiệm vi sinh lâm sàng nói riêng ngoại kiểm tra chất lượng từ trung tâm tin cậy [7] Cùng với đời phát triển ba Trung tâm kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học, CLXN ngày nâng cao [3] Hiện tại, có nhiều PXN từ tuyến Trung ương, tuyến tỉnh, tuyến huyện PXN tư nhân tham gia chương trình ngoại kiểm [10],[11] Số lượng PXN tham gia ngoại kiểm ngày tăng đòi hỏi trung tâm kiểm chuẩn phải kiểm soát tốt đánh giá thường xuyên để đảm bảo CLXN, đồng thời phát khó khăn, sai sót PXN để hỗ trợ khắc phục kịp thời Sau nhiều năm triển khai chương trình ngoại kiểm nói chung ngoại kiểm vi sinh nói riêng Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm Đại học Y Dược Thành phố (TP) Hồ Chí Minh đạt kết đáng kể [11],[20] Để tổng hợp, đánh giá kết ngoại kiểm Vi sinh mẫu nhuộm soi PXN tham gia Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh; bên cạnh đó, tìm nhóm vi khuẩn mà PXN thường nhầm lẫn trả kết quả, phát nguyên nhân sai sót để hỗ trợ PXN khắc phục không phù hợp (nếu có), từ rút kết luận, kiến nghị thực tiễn nhằm góp phần nâng cao CLXN vi sinh trước tiên mẫu nhuộm soi PXN, định thực đề tài “ Đánh giá kết nhuộm Gram, Ziehl – Neelsen số phòng xét nghiệm” carbon fuchsin lên tiêu bản, trì khoảng 30 giây đến phút, đổ dung dịch 17 Rửa vòi nước chảy nhẹ Người thực hiện: Cán xét nghiệm 18 đào tạo có chứng chứng nhận chuyên ngành Vi sinh Đọc kết 19 Quan sát tiêu vật kính x10 x40 20 Lau vật kính 100X trước quan sát 21 Quan sát tiêu vật kính 100X 22 Nhận định kết (*) 23 Người nhận định phê duyệt kết quả: cán xét nghiệm có trình độ đại học sau đại học chuyên ngành Vi sinh Xác nhận PXN Ngƣời đánh giá (*) Kết quả: + Hình thể: cầu khuẩn, trực khuẩn, xoắn khuẩn, cầu trực khuẩn, + Tính chất bắt màu: Gram âm (bắt màu đỏ), Gram dương (bắt màu tím) + Cách xếp: đứng đơn lẻ, xếp thành cặp, xếp thành chuỗi, xếp thành đám,… + Kích thước: to/nhỏ, đồng đều/đa hình thái,… Tn thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Scanned with CamScanner ... BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN NGỌC QUÍ ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ NHUỘM GRAM, ZIEHL - NEELSEN CỦA MỘT SỐ PHÒNG XÉT NGHIỆM Ngành: Kỹ thuật xét nghiệm. .. 42 Biểu đồ 3.5: Đánh giá kết nhuộm Ziehl – Neelsen năm 2016 46 Biểu đồ 3.6: Đánh giá kết nhuộm Ziehl – Neelsen năm 2017 47 Biểu đồ 3.7: So sánh z-score nhuộm Ziehl - Neelsen năm 2016 2017... PXN, định thực đề tài “ Đánh giá kết nhuộm Gram, Ziehl – Neelsen số phòng xét nghiệm? ?? C U HỎI NGHI N CỨU Các phòng xét nghiệm tham gia chương trình ngoại kiểm vi sinh mẫu nhuộm soi Trung tâm Kiểm