Nghiên cứu thu nhận chiết có khả năng kìm hãm α glucosidase từ nấm linh chi

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM MAI XUÂN ĐẠI NGHIÊN CỨU THU NHẬN CHẤT CHIẾT CĨ KHẢ NĂNG KÌM HÃM α-GLUCOSIDASE TỪ NẤM LINH CHI Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm Mã s:ố 8540101 Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Đức Tiến TS Vũ Thị Kim Oanh NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan, giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận văn Mai Xuân Đại i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn, tơi nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến TS Vũ Thị Kim Oanh – Bộ môn Công nghệ sau thu hoạch, Học viện Nông nghiệp Việt Nam TS Nguyễn Đức Tiến – Viện Cơ Điện nghiệp Công nghệ sau thu hoạch Đã tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ mơn Hóa sinh – Cơng nghệ sinh học thực phẩm, Khoa Công Nghệ Thực Phẩm - Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, thực đề tài hồn thành luận văn Đồng thời xin cảm ơn anh, chị Bộ môn Nghiên cứu Phụ phẩm nông nghiệp – Viện Cơ điện nông nghiệp Công nghệ sau thu hoạch tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Cuối tơi xin gửi lời cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ mặt, động viên khuyến khích tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận văn Mai Xuân Đại ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract xii Phần Mở đầu 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu - yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục tiêu 1.2.2 Yêu cầu 1.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp mới, ý nghĩa khoa học tính thực tiễn luận văn Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Giới thiệu chung nấm linh chi 2.1.1 Nguồn gốc, phân loại đặc điểm thực vật nấm Linh chi 2.1.2 Thành phần hóa học 2.1.3 Ứng dụng nấm Linh chi điều trị bệnh 2.2 Chất kìm hãm α-GLUCOSIDASE (α-GLUCOSIDASE INHIBITOR) (AGIs) 10 2.2.1 Enzyme α-glucosidase 10 2.2.2 Thu nhận AGIs 11 2.2.3 Cơ sở khoa học sử dụng AGIs để điều trị bệnh ĐTĐ 15 2.3 Ứng dụng sóng siêu âm chiết xuất 17 2.4 Nghiên cứu, thử nghiệm ứng dụng AGIs giới 22 2.5 Nghiên cứu ứng dụng AGIs Việt Nam 24 Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 26 3.1 Nguyên liệu, thiết bị hóa chất 26 iii 3.1.1 Nguyên liệu 26 3.1.2 Hóa chất thiết bị 26 3.2 Thời gian địa điểm 27 3.2.1 Địa điểm 27 3.2.2 Thời gian 27 3.3 Nội dung nghiên cứu 27 3.3.1 Khảo sát, lựa chọn nấm Linh chi (Ganoderma Lucidium) ngun liệu cho chiết xuất hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (AGIs) 27 3.3.2 Xác định điều kiện chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi 27 3.3.3 Xác định điều kiện làm khô chất chiết từ nấm Linh chi 28 3.4 Phương pháp nghiên cứu 28 3.4.1 Phương pháp nghiên cứu tổng quát 28 3.4.2 Khảo sát, lựa chọn nấm Linh chi (Ganoderma Lucidium) nguyên liệu cho chiết xuất hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (AGIs) 29 3.4.3 Phương pháp chiết xuất 29 3.4.4 Xác định điều kiện làm khô chất chiết từ nấm Linh chi 30 3.4.5 Phương pháp xác định hoạt tính kìm hãm α-glucosidase 33 3.4.6 Phương pháp xác định tiêu hóa sinh 34 3.4.7 Phương pháp phân tích cảm quan 43 3.4.8 Phương pháp xử lý thống kê 44 Phần Kết thảo luận 45 4.1 Khảo sát, lựa chọn nấm linh chi (Ganoderma lucidium) nguyên liệu cho chiết xuất hoạt tính kìm hãm α -Glucosidase (AGIs) 45 4.2 Điều kiện chiết xuất AGIs từ nấm linh chi 46 4.2.1 Ảnh hưởng loại dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi 46 4.2.2 Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi 48 4.2.3 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi Linh chi nguyên liệu đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi 49 4.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi 50 iv 4.2.5 Ảnh hưởng thời gian cường độ sóng siêu âm đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi 52 4.3 Ảnh hưởng nhiệt độ cô, sấy tạo chế phẩm đến chất lượng chế phẩm AGIs từ nấm linh chi 54 4.4 Đánh giá tiêu chất lượng, cảm quan an toàn thực phẩm chế phẩm AGIS từ nấm linh chi 55 4.5 Nghiên cứu ứng dụng chế phẩm chất chiết AGIs từ nấm linh chi cho sản xuất thử nghiệm thực phẩm cho người thừa cân bệnh đái tháo đường 56 Phần Kết luận kiến nghị 59 5.1 Kết luận 59 5.2 Kiến nghị 59 Tài liệu tham khảo 60 Phụ lục 72 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt AGIs alpha-Glucosidase inhibitor (chất kìm hãm α-glucosidase) (chất ức chế α-glucosidase) CFU Colony forming unit (số đơn vị khuẩn lạc) Da Dalton ĐTĐ Đái tháo đường IC50 Nồng độ kìm hãm 50% (Haft maximal inhibitory concentration) p NPG p-nitrophenyl α-D-glucopyranoside RP – HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao pha đảo (Reverse phase-high performance liquid chromatography) TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam TPCN Thực phẩm chức WHO World Health Organization – Tổ chức Y tế giới vi DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Các mẫu nấm Linh chi thu thập dùng cho nghiên cứu 26 Bảng 3.2 Tỷ lệ phối trộn thành phần tạo sản phẩm bột hoà tan dạng 31 Bảng 3.3 Mười trật tự trình bày mẫu tuân theo ngun tắc hình vng Williams tương ứng với mẫu khảo sát 32 Bảng 4.1 Chất lượng dinh dưỡng mẫu nấm Linh chi nguyên liệu 45 Bảng 4.2 Hoạt tính kìm hãm α-glucosidase mẫu nấm Linh chi nguyên liệu 45 Bảng 4.3 So sánh phương pháp chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi sử dụng sóng siêu âm khơng sử dụng sóng siêu âm 54 Bảng 4.4 Ảnh hưởng nhiệt độ cô sấy chân không thời gian cô đến chất lượng cảm quan, hoạt tính kìm hãm α-glucosidase chế phẩm AGIs từ nấm Linh chi 55 Bảng 4.5 Kết phân tích hoạt tính kìm hãm α-glucosidase, dinh dưỡng tiêu lý hóa chế phẩm AGIs từ nấm Linh chi 55 Bảng 4.6 Kết phân tích tiêu vi sinh vật, kim loại nặng chất không mong muốn sản phẩm chế phẩm AGIs 56 Bảng 4.7 Kết điểm đánh giá cảm quan cho tiêu sản phẩm bột AGIs Linh chi hoà tan 57 vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Các loại nấm Linh chi Hình 2.2 Cơng thức đơn vị polysaccharide- proteoglycan chiết xuất từ Ganoderma lucidum Hình 2.3 Cấu trúc hóa học lanosterol ba số nhiều hợp chất phân lập từ Ganoderma lucidum Hình 2.4 Mơ tiêu hóa carbohydrate (tinh bột đường sucrose) thể (CBC Co., Ltd (2008)) 16 Hình 2.5 Quá trình hình thành, phát triển vỡ tung bọt khí 18 Hình 4.1 Ảnh hưởng dung mơi chiết xuất đến chiết xuất hoạt chất AGIs từ nấm Linh chi 47 Hình 4.2 Ảnh hưởng nồng độ dung môi ethanol đến chiết xuất hoạt chất AGIs từ nấm Linh chi 48 Hình 4.3 Ảnh hưởng tỷ lệ dung nguyên liệu: môi ethanol 50% đến chiết xuất hoạt chất AGIs từ nấm Linh chi 49 Hình 4.4 Ảnh hưởng nhiệt độ đến chiết xuất hoạt chất AGIs từ nấm Linh chi 51 Hình 4.5 Ảnh hưởng thời gian cường độ sóng siêu âm đến hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (AGIs) dịch chiết xuât từ nấm Linh chi 53 Hình 4.6 Sơ đồ quy trình chiết xuất hoạt chất AGIs từ nấm Linh chi 58 viii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Mai Xuân Đại Tên luận văn: “Nghiên cứu thu nhận chất chiết có khả kìm hãm α- Glucosidase từ nấm Linh chi” Ngành: Công nghệ thực phẩm Mã số: 8540101 Cơ sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Sử dụng nấm Linh chi để thu nhận hoạt chất kìm hãm α-Glucosidase đạt tiêu an toàn vệ sinh thực phẩm, dùng cho chế biến thực phẩm chức đạt TCVN, góp phần đa dạng hóa sản phẩm thực phẩm bảo vệ sức khỏe thị trường Việt Nam Nội dung nghiên cứu - Xác định chất lượng dinh dưỡng khả kìm hãm α- glucosidase chiết xuất nấm Linh chi - Xác định điều kiện chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi - Xác định điều kiện làm khô chất chiết từ nấm Linh chi Phương pháp nghiên cứu - Phương pháp bố trí thí nghiệm: a) Xác định chất lượng dinh dưỡng khả kháng α- glucosidase chiết xuất nấm Linh chi - Chủng nấm Linh chi: nấm Linh chi thu thập địa phương khác Lào Cai, Hưng Yên, Thanh Hóa, Đà Lạt, Ninh Bình Chỉ tiêu đánh giá: độ ẩm (%), cellulose (%), lipid (%), protein (%), polysaccharide (mg%), β- glucan (mg%), triterpenoid (mg%) hoạt tính kìm hãm α- glucosidase (AGIs) (%) b) Xác định điều kiện chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi - Ảnh hưởng loại dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi: loại dung môi nước cất, ethanol 96%, methanol 96%, isopropy alcohol 96% - Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi: nồng độ dung môi 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 96 % - Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi: nhiệt độ 25, 35, 45, 55, 65 ± 2oC - Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi Linh chi nguyên liệu đến khả chiết ix 84 Sheena N and T.A Ajith (2003) Antiinflammatory and antinociceptive activities of Ganoderma lucidum occurring in South India Pharm Biol 85 Soniamol J (2009) Antioxidative and Antiinflammatory Activities of the Chloroform Extract of Ganoderma lucidum Found in South India Scientia Pharmaceutica pp.111-122 86 Sri F., S Kuniyoshi and K Ryuichiro (2011) Ganoderol B: A ptent α-glucosidase inhibitor isolated from the fruiting body of Ganoderma lucidum Phytomedicine, 18 pp 1053-1055 87 Sulman M.G., N.V Semagina and T.V Ankudinova (2000) Ultrasonic extraction of biologically active compounds from the vegetable raw material Conference Proceedings of X Session of Russian Acoustic Society, Publisher "GEOS", pp 138-141 88 Tomoda, M., Gonda, R., Kasahara, Y., & Hikino, H (1986) Glycan structures of ganoderans B and C, hypoglycemic glycans of Ganoderma lucidum fruit bodies Phytochemistry, 25(12), 2817-2820 89 Tomoyuki O., Toshiro M., Yukata O (1999) Inhibitory effect of α-glucosidase inhibitors varies according to its origin, Journal of Agricultural and Food Chemistry, Vol 47 (2) pp 550-553 90 Truscheit E., W Frommer, B Junge, L Muller, D Schmidt Delf and W Wingender (1981) Chemistry and Biochemistry of Microbial a-Glucosidase Inhibitors, Angewandte Chemie International Edition in English, 20 (9) pp 744-761 91 Ukai S (1983) Polysaccharides in Fungi XIII Antitumor Activity of Various Polysaccharides isolated from Dictyophora indusiata, Ganoderma japonicum, Cordyceps cicadae, Auricularia auricula-judae, and Auricularia Species Chemical and Pharmaceutical Bulletin pp 741-744 92 Verma N., A P Singh, G Amresh and P K Sahu (2010) Different approaches for treatment of type diabetes mellitus with special reference to traditional medicines: a review The Pharma Research, pp 27-50 93 Wenli Hou et al (2008) Triterpene acids isolated from Lagerstroemia speciosa leaves as α‐glucosidase inhibitors Phytotherapy Research pp.614-618 94 World Health Organization – WHO (2006), Definition and diagnosis of diabetes mellitus and intermediate hyperglycemia, Geneva 95 World Health Organization – WHO (2006) Definition and diagnosis of diabetes mellitus and intermediate hyperglycemia, Geneva 67 96 Yang D - L., Y.- M Li, X.- J Huang, M.- X Huang and Y.- G Bi (2012) Ultrasonic-assisted Extraction Process of Compound Yupingfeng, Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae pp 17-19 97 Ye F., Z Shen and M Xie (2002) Alpha – glucosidase inhibition from a chinese medical herb (Ramulus mori) in normal and diabetic rats and mice phytomed Phytomedicine pp 161 – 166 98 Yoshikawa M., T Murakami, H Shimoda, H Matsuda, J Yamahara, G Tanabe, and O Muraoka (1997) Salacinol, potent antidiabetic principle with unique thiosugar sulfonium sulfate structure from the Ayurvedic traditional medicine Salacia reticulata in Sri Lanka and India, Tetrahedron Letters 38 No 48 pp 8367-8370 99 Yu-Wei D., M Jing-zhi and C Ze-hong (2009) Extraction of polysacharide in Ganoderma lucidum by enzymatic method Food Science and Technology, 29 100 Zengtao X., X Chen, Z Zhong, L Chen and Y Wang (2011) Ganoderma lucidum Polysaccharides: Immunomodulation and Potential Anti-Tumor Activities The American Journal of Chinese Medicine pp 15-27 101 Zhang J - H., E Tatsumi, C – H Ding and L - T Li (2006) Angiotensin Iconverting enzyme inhibitory peptides in douchi, a Chinese traditional fermented soybean product Food Chemistry 98, (3) pp 551–557 102 Zhang W B., H R Li, J Tao and B B Dong (2011) Effect of Ultrasonic Wave on Lentinan Extraction Advanced Materials Research, Vols 291-294 pp 1339-1343 103 Zheng L and D - W Sun (2006) Innovative applications of power ultrasound during food freezing processes – a review Trends Food Sci Techn, 17 pp 16-23 104 XiaoPing Chen, WanXiang Wang, ShuiBing Li, JinLing Xue, LiJun Fan, ZhongJi Sheng, YouGuo Chen (2010) “Optimization of ultrasound-assisted extraction of Lingzhi polysaccharides using response surface methodology and its inhibitory effect on cervical cancer cells” – “Cacbonhydrate polymers” Sciencedirect journals, Volume 80, Issue 3, May 2010.pp 944–948 105 Chihara G Hamuro J Meada Y Arai Y Fukuoka F (1970) Fractionation and purification of the polysacharide with marked antitumor activity, especially Lentinan, from Lentinus edodes (Berk.) Sing (an edible mushroom) In: Cancer Res, 30(11).pp 2776-81 68 PHỤ LỤC: Đồ thị xây dựng đường chuẩn Đồ thị đường chuẩn hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (AGIs) Đồ thị đường chuẩn β-glucal 69 Đồ thị đường chuẩn Triterpenoid Đồ thị đường chuẩn hoạt tính chống oxy hóa (DPPH) Đồ thị đường chuẩn Polysaccharide 70 PHỤ LỤC : BẢNG SỐ LIỆU Ảnh hưởng dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi Dung Mơi Hoạt Tính AGIs (%) Nước cất 48.15 ± 1.83 Ethanol 52.93 ± 0.99 Methanol 54.05 ± 1.27 Isopropy alcohol 53.84 ± 0.96 LSD 5% 2,11 CV % 4,9 Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi Nồng Độ Hoạt Tính AGIs (%) 20 56.50 ± 0.83 30 57.10 ± 1.04 40 59.06 ± 0.72 50 63.23 ± 1.01 60 59.37 ± 0.77 70 57.13 ± 1.34 80 55.00 ± 1.22 96 51.87 ± 0.70 LSD 5% 2,36 CV % 4,3 71 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi Tỉ Lệ Nguyên Liệu/Dung Môi Hoạt Tính AGIs (%) 1/6 67.57 ± 0.69 1/8 70.60 ± 1.14 1/10 71.83 ± 1.00 1/12 71.84 ± 0.90 1/14 71.84 ± 1.09 1/16 71.87 ± 1.07 1/18 71.91 ± 0.91 LSD 5% 3,81 CV % 4,6 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi Nhiệt Độ Hoạt Tính AGIs (%) 25 60.87 ± 0.93 35 65.46 ± 0.84 45 72.66 ± 1.60 55 72.69 ± 1.19 65 73.70 ± 0.89 LSD 5% 2,99 CV % 5,1 Ảnh hưởng thời gian cường độ sóng siêu âm đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi Cường Độ Thời Gian 12 16 18 22 Hoạt Tính AGIs (%) 35.17 ± 0.39 36.13 ± 0.54 39.16 ± 0.39 39.83 ± 0.47 43.25 ± 0.38 48.16 ± 0.40 52.74 ± 0.44 72 LSD 5% CV % 12 16 18 22 12 16 18 22 12 16 18 22 12 16 18 22 36.14 ± 0.23 49.16 ± 0.75 57.31 ± 0.47 70.16 ± 0.35 75.68 ± 0.47 77.83 ± 0.30 78.24 ± 0.32 36.18 ± 0.31 49.16 ± 0.34 57.31 ± 0.45 70.16 ± 0.33 75.68 ± 0.32 77.83 ± 0.35 78.24 ± 0.43 36.13 ± 0.17 56.21 ± 0.28 63.12 ± 0.39 82.25 ± 0.35 84.12 ± 0.39 87.26 ± 0.31 91.26 ± 0.31 36.12 ± 0.27 58.23 ± 0.37 64.46 ± 0.57 86.17 ± 0.32 92.21 ± 0.41 96.15 ± 0.27 96.24 ± 0.35 2,18 4,4 73 PHỤ LỤC : KẾT QUẢ XỬ LÝ Ảnh hưởng dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE AGIS (%) FILE XLDAI2 22/ 8/** 13:49 PAGE Anh huong cua dung moi den kha nang chiet xuat AGIs tu nam Linh chi VARIATE V003 AGIS (%) (%) LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= DM$ 69.2432 23.0811 3.52 0.089 NLAI 3.64471 1.82235 0.28 0.768 * RESIDUAL 39.3658 6.56096 * TOTAL (CORRECTED) 11 112.254 10.2049 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XLDAI2 22/ 8/** 13:49 PAGE Anh huong cua dung moi den kha nang chiet xuat AGIs tu nam Linh chi MEANS FOR EFFECT DM$ DM$ NOS AGIS (%) Nuoc cat 48.1500 Ethanol 52.9333 Methanol 54.0600 Isopropy alc 53.8400 SE(N= 3) 1.47885 5%LSD 6DF 2.11557 MEANS FOR EFFECT NLAI NLAI 4 NOS AGIS (%) 51.8725 53.0250 51.8400 SE(N= 4) 1.28072 5%LSD 6DF 4.43021 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XLDAI2 22/ 8/** 13:49 PAGE Anh huong cua dung moi den kha nang chiet xuat AGIs tu nam Linh chi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |DM$ (N= 12) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | AGIS (%) 12 52.246 3.1945 2.5614 4.9 0.0889 0.7684 74 |NLAI | Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE AGIS (%) FILE XLDAI3 22/ 8/** 13:51 PAGE Anh huong cua nong dung moi den kha nang chiet xuat AGIs tu nam Linh chi VARIATE V003 AGIS (%) (%) LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NDO$ 233.798 33.3997 5.38 0.004 NLAI 13.8211 6.91055 1.11 0.357 * RESIDUAL 14 86.9022 6.20730 * TOTAL (CORRECTED) 23 334.521 14.5444 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XLDAI3 22/ 8/** 13:51 PAGE Anh huong cua nong dung moi den kha nang chiet xuat AGIs tu nam Linh chi MEANS FOR EFFECT NDO$ NDO$ 20 30 40 50 60 70 80 96 3 3 3 3 NOS AGIS (%) 56.5033 57.1000 59.0600 63.2300 59.3700 57.1300 55.0000 51.8700 SE(N= 3) 1.43844 5%LSD 14DF 2.36310 MEANS FOR EFFECT NLAI NLAI 8 NOS AGIS (%) 57.3975 58.3425 56.4838 SE(N= 8) 0.880859 5%LSD 14DF 2.67184 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XLDAI3 22/ 8/** 13:51 PAGE Anh huong cua nong dung moi den kha nang chiet xuat AGIs tu nam Linh chi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |NDO$ (N= 24) SD/MEAN | | | 75 |NLAI | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | AGIS (%) 24 57.408 3.8137 2.4914 4.3 0.0038 0.3571 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/dung môi đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE AGIS (%) FILE XLDAI4 22/ 8/** 13:53 PAGE Anh huong cua ty le dung moi va nguyen lieu den kha nang chiet xuat AGIS tu nam VARIATE V003 AGIS (%) (%) LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NLTDM$ 98.9954 16.4992 1.55 0.245 NLAI 19.7721 9.88607 0.93 0.425 * RESIDUAL 12 128.098 10.6749 * TOTAL (CORRECTED) 20 246.866 12.3433 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XLDAI4 22/ 8/** 13:53 PAGE Anh huong cua ty le dung moi va nguyen lieu den kha nang chiet xuat AGIS tu nam MEANS FOR EFFECT NLTDM$ NLTDM$ 1/6 1/8 1/10 1/12 1/14 1/16 1/18 3 3 3 NOS AGIS (%) 65.5700 70.6000 71.8300 71.8400 71.8400 71.8733 71.9100 SE(N= 3) 1.88634 5%LSD 12DF 3.81246 MEANS FOR EFFECT NLAI NLAI 7 NOS AGIS (%) 70.9129 71.8971 69.5314 SE(N= 7) 1.23490 5%LSD 12DF 3.80515 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XLDAI4 22/ 8/** 13:53 PAGE Anh huong cua ty le dung moi va nguyen lieu den kha nang chiet xuat AGIS tu nam F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - 76 VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |NLTDM$ |NLAI | (N= 21) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | AGIS (%) 21 70.780 3.5133 3.2672 4.6 0.2447 0.4251 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE AGIS (%) FILE XLDAI5 22/ 8/** 13:54 PAGE Anh huong cua nhiet den kha nang chiet xuat AGIS tu nam Linh chi VARIATE V003 AGIS (%) (%) LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NHIETDO$ 383.104 95.7760 9.45 0.004 NLAI 28.2043 14.1022 1.39 0.303 * RESIDUAL 81.1017 10.1377 * TOTAL (CORRECTED) 14 492.410 35.1721 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XLDAI5 22/ 8/** 13:54 PAGE Anh huong cua nhiet den kha nang chiet xuat AGIS tu nam Linh chi MEANS FOR EFFECT NHIETDO$ NHIETDO$ 25 35 45 55 65 NOS AGIS (%) 60.8700 65.4600 72.6600 72.6900 73.7000 SE(N= 3) 1.83827 5%LSD 8DF 2.99441 MEANS FOR EFFECT NLAI NLAI 5 NOS AGIS (%) 69.8280 70.2480 67.1520 SE(N= 5) 1.42392 5%LSD 8DF 4.64325 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XLDAI5 22/ 8/** 13:54 PAGE Anh huong cua nhiet den kha nang chiet xuat AGIS tu nam Linh chi 77 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |NHIETDO$|NLAI | (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | AGIS (%) 15 69.076 5.9306 3.1840 5.1 0.0044 0.3035 Ảnh hưởng thời gian cường độ sóng siêu âm đến khả chiết xuất AGIs từ nấm Linh chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE AGIS (%) FILE XLKD6 22/ 8/** 14: PAGE Anh huong cua thoi gian va cuong song sieu am den kha nang chiet xuat AGIS tu nam Linh chi VARIATE V003 AGIS (%) (%) LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= YT$ 34 41703.2 1226.56 155.11 0.000 NLAI 84.2808 42.1404 5.33 0.007 * RESIDUAL 68 537.724 7.90771 * TOTAL (CORRECTED) 104 42325.2 406.973 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XLKD6 22/ 8/** 14: PAGE Anh huong cua thoi gian va cuong song sieu am den kha nang chiet xuat AGIS tu nam Linh chi MEANS FOR EFFECT YT$ YT$ C0T0 C0T4 C0T8 C0T12 C0T16 C0T18 C0T22 C2T0 C2T4 C2T8 C2T12 C2T16 C2T18 C2T22 C4T0 C4T4 C4T8 C4T12 C4T16 C4T18 C4T22 C6T0 C6T4 C6T8 C6T12 C6T16 NOS 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 AGIS (%) 35.1700 36.1300 39.1600 39.8300 43.2500 48.1600 52.7367 35.1600 49.1600 57.2067 70.1633 75.6800 77.8267 78.2367 36.1833 49.1600 57.3100 70.1600 75.6800 77.8300 78.2400 36.1267 56.2100 63.1200 82.2500 84.1200 78 C6T18 C6T22 C8T0 C8T4 C8T8 C8T12 C8T16 C8T18 C8T22 3 3 3 3 87.2600 91.2600 36.1167 58.2300 64.4600 86.1733 92.2100 96.1533 96.2367 SE(N= 3) 1.62355 5%LSD 68DF 2.18126 MEANS FOR EFFECT NLAI NLAI NOS AGIS (%) 35 63.6449 35 64.0237 35 61.9623 SE(N= 35) 0.475326 5%LSD 68DF 1.34126 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XLKD6 22/ 8/** 14: PAGE Anh huong cua thoi gian va cuong song sieu am den kha nang chiet xuat AGIS tu nam Linh chi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |YT$ (N= 105) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | AGIS (%) 105 63.210 20.174 2.8121 4.4 0.0000 0.0072 79 |NLAI | PHỤ LỤC HÌNH ẢNH Hình Nấm Linh chi nguyên liệu Hình Hệ thống thiết bị cô sấy chân không sử dụng cho sản xuất chế phẩm AGIs từ nấm Linh chi chiết xuất 80 Hình Máy siêu âm tần số 20khz bình siêu âm thể tích lít 81 ... tính kìm hãm α-glucosidase AGIs từ nấm Linh chi hỗ trợ sóng siêu âm (từ việc lựa chọn nấm Linh chi nguyên liệu, điều kiện chi? ??t AGIs, làm khô dịch chi? ??t tạo chế phẩm chất chi? ??t AGIs từ nấm Linh chi) ,... chọn nấm Linh chi nguyên liệu Việt Nam cho chi? ??t xuất dịch chi? ??t có hoạt tính kìm hãm α-glucosidase cao; + Bước đầu xác định quy trình chi? ??t xuất, thu nhận chất chi? ??t hoạt tính kìm hãm α-glucosidase. .. α-glucosidase cao ↓ CHI? ??T XUẤT AGIs TỪ NẤM LINH CHI Ảnh hưởng dung môi đến khả chi? ??t xuất AGIs từ nấm Linh chi ↓ Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến khả chi? ??t xuất AGIs từ nấm Linh chi ↓ Ảnh hưởng tỷ