- Nghiên cứu đặc điểm hình thái, giải phẫu của cá Ngạnh; - Nghiên cứu đặc điểm phân bố cá Ngạnh ngoài tự nhiên; - Nghiên cứu đặc điểm dinh dưỡng cá Ngạnh ngoài tự nhiên; - Nghiên cứu [r]
(1)BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
***
NGUYỄN ĐÌNH VINH
NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ KỸ THUẬT SẢN XUẤT GIỐNG CÁ NGẠNH - Cranoglanis bouderius
(Richardson, 1846) TRONG ĐIỀU KIỆN NUÔI TẠI TỈNH NGHỆ AN
Chuyên ngành: Động vật học Mã số: 62 42 01 03
TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC
(2)Cơng trình hồn thành tại: Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam
Người hướng dẫn khoa học 1: PGS.TS Nguyễn Hữu Dực Người hướng dẫn khoa học 2: TS Nguyễn Kiêm Sơn
Phản biện 1: … Phản biện 2: … Phản biện 3: …
Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án tiến sĩ, họp Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học
và Công nghệ Việt Nam vào hồi … ’, ngày … tháng … năm 2017
Có thể tìm hiểu luận án tại:
(3)1
MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết luận án
Cá Ngạnh - Cranoglanis bouderius (Richardson, 1846) loài thuộc cá nheo (Siluriformes), họ cá Ngạnh (Cranoglanididae) Trên giới, cá Ngạnh phân bố Trung Quốc (các khu vực giáp danh với Việt Nam đảo Hải Nam, Quảng Đông, Quảng Tây, Vân Nam) Ở Việt Nam, cá Ngạnh thường bắt gặp tất hệ thống sông từ miền Bắc (sông Hồng, sông Mã, sông Lam) đến miền Nam Trung Bộ Giới hạn thấp phía Nam biết lồi cá sơng Trà Khúc - Quảng Ngãi Cá Ngạnh phân bố tầng đáy kề đáy, thích sống nơi nước chảy vừa chậm, đáy nhiều bùn cát Cá thường sống thành đàn, chủ yếu vùng hạ lưu nhiều trung thượng lưu sơng tỉnh phía Bắc
Thịt cá Ngạnh - Cranoglanis bouderius (Richardson, 1846) loại thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao Zhang cs (2009), tiến hành phân tích thành phần axit béo để đánh giá giá trị dinh dưỡng thịt cá Ngạnh - Cranoglanis bouderius (Richardson, 1846) rằng, có tổng số 11 axit béo thịt cá, gồm axit béo bão hịa axit béo khơng bão hịa Điểm chất lượng axit béo bão hòa 33,9%, axit béo chưa bão hịa 66,03%; đó, axit béo mạch đơn chưa bão hòa 50,49% axit béo chưa bão hòa mạch dài 15,54% Axit béo thịt cá Ngạnh chứa axit C18:1, C16:0 C18:2n-6, có điểm chất lượng 80,44% tổng số Ngoài ra, thành phần axit béo thịt cá Ngạnh có khác biệt rõ ràng so với lồi cá có giá trị kinh tế khác
(4)2
Xuất phát từ yêu cầu khoa học thực tiễn trên, đồng ý Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, chọn thực đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm sinh học kỹ thuật sản xuất giống cá Ngạnh - Cranoglanis bouderius (Richardson,
1846) trong điều kiện ni tỉnh Nghệ An” Qua bước đầu xây dựng sở
khoa học cho việc bảo tồn phát triển nguồn lợi loài cá này, đồng thời làm tiền đề nghiên cứu sản xuất giống phục vụ mục tiêu đa dạng hóa đối tượng ni Nghệ An vùng Bắc Trung
2 Mục tiêu nghiên cứu luận án
Cung cấp dẫn liệu khoa học đặc điểm sinh học, kỹ thuật sinh sản ương nuôi cá Ngạnh điều kiện ni tỉnh Nghệ An Qua góp phần làm sở cho việc xây dựng quy trình sản xuất giống cá Ngạnh, nhằm cung cấp nguồn cá giống cho nuôi thương phẩm bảo tồn nguồn gen quý
3 Nội dung nghiên cứu luận án
3.1 Nghiên cứu đặc điểm sinh học cá Ngạnh tự nhiên Nghệ An
- Nghiên cứu đặc điểm phân loại cá Ngạnh;
- Nghiên cứu đặc điểm hình thái, giải phẫu cá Ngạnh; - Nghiên cứu đặc điểm phân bố cá Ngạnh tự nhiên; - Nghiên cứu đặc điểm dinh dưỡng cá Ngạnh tự nhiên; - Nghiên cứu đặc điểm sinh trưởng cá Ngạnh tự nhiên; - Nghiên cứu đặc điểm sinh sản cá Ngạnh tự nhiên
3.2 Nghiên cứu kỹ thuật sinh sản cá Ngạnh điều kiện nuôi
- Nghiên cứu kỹ thuật sinh sản cá Ngạnh; - Nghiên cứu kỹ thuật ấp nở trứng cá Ngạnh; - Nghiên cứu kỹ thuật ương giống cá Ngạnh
Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số đặc điểm sinh học cá Ngạnh
(5)3 Lớp cá vây tia: Actinopterygii; Bộ cá Nheo: Siluriformes; Họ cá Ngạnh: Cranoglanididae Giống cá Ngạnh:
Cranoglanis; Loài cá Ngạnh: Cranoglanis
bouderius (Richardson, 1846) Hình 1.1. Cá Ngạnh trưởng thành
1.2 Tình hình nghiên cứu cá Ngạnh giới Việt Nam
1.2.1 Tình hình nghiên cứu cá Ngạnh giới
Năm 1846, Richardson dựa tranh sơn dầu Trung Quốc mô tả loài cá Ngạnh - Cranoglanis bouderius
Đến năm 1880, Peter mơ tả giống Cranoglanis cùng với lồi mới,
Cranoglanis sinensis Đến năm 1839, Vaillant mô tả lồi Cranoglanis
henrici, khơng ý nhiều
Jayaram (1955) thống gộp loài C multiradiatus và C sinensis
thành loài C bouderius Gần đây, C bouderius và C multiradiatus đã coi loài riêng biệt
Zhang cs (2009) cho kết hàm lượng thịt thành phần dinh dưỡng thịt cá Ngạnh có 69,92 % thịt, có hàm lượng protein 17,89%, chất béo 5,20 % hàm lượng tro 1,10 %
Zhou cs (2012), thử nghiệm sản xuất giống nhân tạo phát triển phôi cá Ngạnh thơng qua việc sử dụng kích dục tố LHRH-A, DOM não thùy thể cá Chép
1.2.2 Tình hình nghiên cứu cá Ngạnh Việt Nam
Cao Xuân Dũng cs (2010), nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản thử nghiệm sinh sản nhân cá Ngạnh (Cranoglanis henrici)
Nguyễn Đình Vinh cs (2013), tiến hành nghiên cứu số đặc điểm sinh học sinh sản thử nghiệm sinh sản cá Ngạnh (Cranoglanis
(6)4
Chương VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu
Đối tượng nghiên cứu: Cá Ngạnh - Cranoglanis bouderius (Richardson, 1846) thu gom khu vực tỉnh Nghệ An
2.2 Phương pháp nghiên cứu
2.2.1 Cơ sở lý luận
2.2.2 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm sinh học
2.2.2.1 Phương pháp thu thập vật mẫu: Theo tài liệu “Hướng dẫn nghiên cứu
cá” Pravdin (1963);
2.2.2.2 Phương pháp định loại hình thái sinh học phân tử
a Phương pháp đo tiêu hình thái: Theo tài liệu “Hướng dẫn nghiên cứu
cá” Pravdin (1963); Mô tả đặc điểm tra cứu tài liệu Mai Đình Yên (1978); Vaillant (1893), Ng & Kottelat (2000); Nguyễn Văn Hảo (2005)
b Phương pháp chụp X-quangi: Theo Ng Kottelat (2000)
c Phương pháp định danh thị phân tử: Tách chiết DNA tổng số từ mẫu vây, PCR khuếch đại trình tự gen COI, giải trình tự vùng COI gen ty thể, phân tích xếp trình tự, Thiết lập phân lồi, xác định khoảng cách di truyền định danh loài
Cá Ngạnh Cranoglanis bouderius
Nghiên cứu đặc điểm sinh học Nghiên cứu kỹ thuật sinh sản
- Đặc điểm phân loại
- Đặc điểm hình thái giải phẫu - Đặc điểm phân bố
- Đặc điểm dinh dưỡng - Đặc điểm sinh trưởng - Đặc điểm sinh sản
- Kỹ thuật nuôi dưỡng - Kỹ thuật sinh sản
- Kỹ thuật ấp trứng - Kỹ thuật ương giống - Nghiên cứu bệnh cá Ngạnh - Đề xuất giải pháp kỹ thuật
(7)5
2.2.2.3 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm phân bố
2.2.2.4 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dinh dưỡng cá Ngạnh a Xác định quan tiêu hóa
b Chỉ số tương quan chiều dài ruột chiều dài thân RLG: Theo Al-Hussainy (1949 trích Biswas, 1973)
c Phổ dinh dưỡng cá: Theo Nikolsky (1963) Biswas (1973)
d Xác định độ no: Theo Lebedep (1954)
2.2.2.5 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm sinh trưởng: Theo Laurencen
(1951)
2.2.2.6 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm sinh sản
* Xác định giai đoạn tuyến sinh dục: Theo Nikolski (1963)
* Xác định hệ số thành thục; xác định sức sinh sản cá.
* Xác định độ béo: Xác định hệ số độ béo Fullton (1902) (Theo Pravdin,
1973); Xác định hệ số độ béo Clark (1928) (Theo Pravdin, 1973)
2.2.3 Phương pháp nghiên cứu kỹ thuật sinh sản nhân tạo
2.2.3.1 Phương pháp nghiên cứu nuôi dưỡng:
* Lựa chọn cá ni dưỡng: Cá ni dưỡng có ngoại hình cân
đối, không dị tật; không biểu mắc bệnh; khối lượng >0,5 kg
* Xác định hình thức ni dưỡng: Thí nghiệm gồm nghiệm thức
về hệ thống nuôi, nghiệm thức lặp lại lần, lần lặp bố trí 10 con: Nghiệm thức 1: Ni dưỡng giai kích thước x x 1,5m đặt ao đất diện tích 800 m2; độ sâu nước khoảng 1,3 – 1,8 m; Nghiệm thức 2: Nuôi dưỡng cá bể composite tích 30 m3; Nghiệm thức 3: Ni dưỡng cá ao đất diện tích 500 m2; độ sâu nước khoảng 1,3 – 1,8 m
* Lựa chọn thức ăn ni dưỡng: Thí nghiệm gồm nghiệm thức,
(8)6
2.2.3.2 Phương pháp nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống cá Ngạnh a Phương pháp nghiên cứu kỹ thuật nuôi vỗ cá bố mẹ
Thí nghiệm 1: Thử nghiệm nuôi vỗ cá bố mẹ nguồn thức ăn khác
Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm gồm nghiệm thức, nghiệm thức lặp lại lần, tiến hành giai ao, với mật độ 10 cặp cá bố mẹ/giai (đực nuôi chung theo tỷ lệ 1:1): Nghiệm thức (TĂ1): 100% thức ăn cá tạp; Nghiệm thức (TĂ2): 50% cá tạp 50% thức ăn công nghiệp sử dụng cho cá có hàm lượng protein 40%; Nghiệm thức (TĂ3): 100% thức ăn cơng nghiệp sử dụng cho cá có hàm lượng protein 40%
b Phương pháp nghiên cứu kỹ thuật cho đẻ
Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng loại liều lượng kích dục tố đến sinh sản cá Ngạnh
* Tiêu chuẩn cá bố mẹ: cá Ngạnh bố mẹ kích cỡ: 1,02- 1,2 kg
* Phương pháp bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm gồm nghiệm thức cho cá
đực nghiệm thức cho cá cái, nghiệm thức lặp lại lần
Nghiệm thức 1: 30 µg LRHa + mg DOM/kg cá cái; Nghiệm thức 2: 40 µg LRHa + mg DOM/kg cá cái; Nghiệm thức 3: (50 µg LRHa + mg DOM)/kg cá cái; Nghiệm thức 4: 2500 IU HCG/kg cá cái; Nghiệm thức (CT5): 3000 IU HCG/kg cá cái; Nghiệm thức (CT6): 3500 IU HCG/kg cá Liều cá đực 1/3 liều dùng sử dụng cho cá
Thí nghiệm 3: Xác định hình thức thụ tinh phù hợp nhằm đạt tỷ lệ trứng thụ tinh cao
Thí nghiệm gồm nghiệm thức, nghiệm thức lặp lại lần bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hồn tồn: Thử nghiệm phương thức thụ tinh khô (TT1) thử nghiệm phương thức thụ tinh tự nhiên (TT2)
Thí nghiệm Ấp trứng dụng cụ ấp khác
(9)7
c Phương pháp nghiên cứu kỹ thuật ương cá Ngạnh
Thử nghiệm 5: Ương cá bột hình thức ương khác
* Bố trí thí nghiệm
Cá bột nở đưa vào ương hai hình thức đến giai đoạn cá hương nhằm đánh giá hiệu hệ thống: CT1 ương giai kích thước x x 1,2 m đặt ao nước tĩnh; CT2: ương bể composite kích thước 3m3 Thời gian ương nuôi 28 ngày Mật độ ương 500 con/m3 Mỗi công thức lặp lại ngẫu nhiên lần
Thí nghiệm 6: Ảnh hưởng mật độ ương đến tỷ lệ sống tốc độ tăng trưởng cá Ngạnh giai đoạn từ cá hương đến cá giống
Thí nghiệm tiến hành với 04 mật độ (MĐ) khác nhau: MĐ1: 40 con/m2; MĐ2: 50 con/m2; MĐ3: 60 con/m2; MĐ4: 70 con/m2, bố trí ngẫu nhiên 12 giai Mỗi nghiệm thức bố trí lặp lại lần Cá thí nghiệm cho ăn giun quế đến no với tần suất lần/ngày, vào 16 Thí nghiệm tiến hành 60 ngày
Thí nghiệm 7: Ảnh hưởng thức ăn đến tỷ lệ sống tốc độ tăng trưởng của cá Ngạnh giai đoạn từ cá hương đến cá giống
Thí nghiệm tiến hành với 03 loại thức ăn (TA), gồm: TA1: sử dụng 100% cá tạp xay nhuyễn; TA2: sử dụng 100% giun quế; TA3: sử dụng thức ăn tự chế gồm 50% bột cá nhạt 50% bột khô đậu nành Cá thí nghiệm bố trí ngẫu nhiên giai, nghiệm thức lặp lại lần
2.2.3.3 Phương pháp nghiên cứu bệnh cá Ngạnh
* Phương pháp phân lập định danh vi khuẩn: Frerichs Millar (1993)
* Phương pháp cảm nhiễm: Bố trí thí nghiệm: Đối với lồi vi khuẩn
nghiên cứu bố trí nghiệm thức, nghiệm thức gồm cá thể cá khỏe, tiêm 0,5 ml hỗn dịch vi khuẩn với nồng độ từ 104; 105, 106, 107, 108(cfu/ml), nghiệm thức đối chứng tiêm nước muối sinh lý
* Phương pháp thử kháng sinh đồ
(10)1334-8
OXOID) Kháng sinh bao gồm: Ampicillin (10µg), Erythromycin (30µg), Tetracyclin (30µg), dịch ép củ tỏi (Allium sativum L) (150 µl), dịch ép ổi (Psidium guajava L) (150 µl) Kết ghi nhận sử dụng phương pháp khuyếch tán đĩa thạch với đĩa giấy kháng sinh tiêu chuẩn (CODE 1334-OXOID)
2.2.3.4 Các tiêu theo dõi: Các tiêu môi trường; Các tiêu sinh
sản cá; Theo dõi tốc độ tăng trưởng, tỷ lệ sống cá ương
2.2.4 Phương pháp xử lý số liệu
Các số liệu thu thập xử lý theo phương pháp thống kê sinh học có sử dụng phần mềm SPSS 16.0 So sánh nghiệm thức qua phép kiểm định DUNCAN với α = 0,05
2.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu: Địa điểm nghiên cứu: Nghệ An;
Thời gian nghiên cứu: Từ tháng 01/2014 đến tháng 09/2017
Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết nghiên cứu đặc điểm sinh học cá Ngạnh
3.1.1 Định loại hình thái sinh học phân tử
3.1.1.1 Kết phân loại hình thái tiêu đo, đếm
Phân tích 26 mẫu thu điểm Tương Dương, Con Cuông, Thanh Chương, Nam Đàn (Nghệ An), kết cho thấy: xem xét số đếm 26 mẫu dựa kết chụp X – quang (Hình 3.1), khu vực nghiên cứu có diện lồi: C bouderius và C henrici
Hình 3.1 Hình ảnh X-quang mẫu cá nghiên cứu
3.1.1.2 Kết phân loại sinh học phân tử: Kết phân tích DNA: cho